从基因角度研究中医证候实质的思路

通过分析归纳基因多态性与证候的相关性及其在中医“证”研究中的应用，提出以中医理论为指导，将基因芯片技术运用于基因多态性与中医证候相关性的研究，可望从基因水平阐明中医证候的理论实质，为证候实质现代化研究开辟新的思路和方法。     

证候基因组学深入研究的思考

证候是中医药学独有的概念,是中医基础理论和临床学术思想的核心。三十多年来,国内外众多学者运用现代科学技术方法,从生化、生理、超微结构、神经-内分泌-免疫网络多方面探讨证实质,取得了一定的成果。近几年来,中医证实质与基因及其调控产物相关性研究成为中医学术领域研究的热点。本文分析证候基因多态性研究和基本证候基因相关性研究进展和存在问题,并提出深入证候基因组学研究的设想。     

证候与基因组学、蛋白质组学相关研究及其思考

证候是中医独有的概念,证候实质的研究,就是用现代科学理论揭示中医证候理论中蕴藏的科学内涵,阐明证候及其相关疾病的微观机制。基因组学与蛋白质组学的引入有望给证候学研究带来契机。从证候实质研究现状、证候与基因组学、蛋白质组学相关研究和复杂系统研究的方法论问题等方面,探讨了从基因组学和蛋白质组学研究中医证候实质可能的思路与方法。     

证与基因多态性的相关性思考

证是中医学理论中的一个重要概念。由于中医学的临床治疗以辨证为基础,因此,证实质研究一直以来是中医学研究的重点。随着基因组学工作的进展,使得许多人类疾病的遗传基因得以阐明。特定体质的人群对于某些证候的易患性,提示证候也有一定的遗传背景。证的实质研究已发展到基因水平,基因多态性与中医学证的关系成为当前研究的热点。本文是从证与基因多态性二者的内涵、影响因素出发,从理论上探讨其相关性。     

冠心病痰瘀互结证的组学研究进展与思考

借助高通量测序的组学技术探讨冠心病痰瘀互结证的证候实质,主要集中在基因组学、转录组学、蛋白质组学、代谢组学4个方面.通过梳理目前冠心病痰瘀互结证组学研究文献,发现基因组学研究相对成熟,KDR等基因多态性位点、白细胞介素6等功能基因研究成果有利于揭示冠心病痰瘀互结证的内在遗传基础;转录组学研究以miRNA为机制研究的焦点...     

冠心病中医证候的客观辨证研究进展

从冠心病本虚证、标实证和本虚标实证入手综述了冠心病各证候与客观指标的相关性。五来年,研究涉及的客观指标已从宏观的心率变异性深入到炎症因子、肿瘤坏死因子、蛋白表达、基因多态性等微观层面,随着分子生物学技术的发展,延伸至代谢组学、蛋白质组学和基因组学的系统研究,且冠心病证候的内在实质和证候演变存在相应的微观表达。     

中医证候与基因相关性研究的现状与反思

从疾病相关基因的多态性、疾病相关基因表达的改变与中医证候的关系和证候与后基因组学的关系等三个方面,综述了国内中医证候与基因相关性研究的现状.提出中医证候的微观研究应当结合中医证候的客观化、标准化研究;研究中应注意"同病异治"、"异病同治"的结合,检测目标组织的合理选择,检测技术的选择和优化,以及排除盲从,注重锐意创新等.     

对证候基因组学研究的思考

随着基因和基因组学研究的深入,中医证候基因组学研究也在逐步展开,但是在基因和基因组本身还没有研究清楚之前,中医证候是否存在基因或基因组改变还存在争议,展开证候基因组学的研究尚缺乏理论和现实依据.     

中医证候基因组学研究进展

证候是机体在疾病发展过程中的某一阶段的病理概括。众多学者认为中医证候与现代医学疾病必然有其内在的本质联系，尤其体现在基因组学领域。就中医证候基因组学的相关概念、现代医学与传统医学的一致性、中医证候研究存在的问题、建立辨证分析基因谱的必要性与基本策略以及中医证候基因组学研究的可行性做一浅要分析，以求抛砖引王之效。     

当今证候基因组研究的反思以及功能基因模块的运用

证候研究只有必须结合基因组结合当代分子生物学，才能揭示出中医证候的本质，论证中医学的科学性，证候的研究必须在现在证候基因组学研究的基础上采取跨越式的前进方式；从证的单个基因、个别基因、多个基因的孤立基因研究积累中，走向集约化、基因功能模块化的研究，在基因功能模块中去发现证候的内在本质，继而论证证候理论的正确性；“证乃一类功能基因组”，证是一类功能基因组的相互调控的外在表现，是一组基因功能模块的相互调控关系的综合。证候基因组学应该走模块化道路。     

大肠癌中医证型与ERCC1基因多态性的相关研究

目的探讨大肠癌中医证型与核苷酸切除修复交叉互补基因1(excision repair cross-complementing 1,ERCC1)C8092A和C19007T两个位点基因多态性的关系。方法 99例大肠癌患者经中医辨证分为湿热蕴结、气滞血瘀、脾肾阳虚及肝肾阴虚4个证型。应用PCR扩增和直接测序法检测患者外周静脉血ERCC1C8092A和C19007T两个位点基因型及等位基因在大肠癌各证型的分布情况,并进行统计学分析。结果 ERCC1C8092A基因型及等位基因频率在各证型间的分布比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。ERCC1C19007T基因型及等位基因频率在各证型间的分布频率比较,差异有统计学意义(P<0.05),其中湿热蕴结型与气滞血瘀型、脾肾阳虚型与肝肾阴虚型差异无统计学意义(P>0.05),湿热蕴结型与脾肾阳虚型、肝肾阴虚型差异有统计学意义(P<0.05),气滞血瘀型与脾肾阳虚型、肝肾阴虚型差异有统计学意义(P<0.05)。结论 ERCC1C19007T基因多态性可能与大肠癌中医证型有关,需要进一步研究。     

逍遥散对肝郁脾虚证大鼠下丘脑基因表达谱的影响

目的:在全基因组水平上系统探讨逍遥散对慢性束缚应激肝郁脾虚证大鼠下丘脑基因表达谱的影响及其抗应激调节机制。方法:采用Agilent大鼠全基因组表达谱芯片检测慢性束缚应激肝郁脾虚证大鼠模型(每天束缚3 h,连续21 d)正常组、模型组、逍遥散组(大、中、小剂量)下丘脑基因表达的差异,筛选出组间两两比较的差异基因表达谱,并利用生物信息学技术对差异基因表达谱进行GO功能分析、信号通路分析。结果:模型组、逍遥散大、中、小剂量组具有不同的差异基因表达谱,多条生物过程和信号通路的功能被显著上调或下调,其中模型组、逍遥散大、中、小剂量组差异基因参与的显著生物过程分别有909、712、516、1322个功能基因群,参与的显著信号通路分别有60、57、41、90条。结论:肝郁脾虚证具有下丘脑差异表达基因组学背景,逍遥散大、中、小剂量对肝郁脾虚证大鼠下丘脑众多差异表达基因及功能改变的信号通路、生物过程均有一定的干预作用,大剂量和中剂量结果显示优于小剂量。     

冠心病血瘀证基因组学研究进展＊

目的 系统综述冠心病血瘀证基因组学研究的方法和内容。方法 计算机检索Medline、Cochrane Central Register of Controlled Trials、中国知网、万方数据库，查找冠心病血瘀证基因组学的临床研究，按照制定的纳入排除标准，由2名研究人员独立筛选文献，任何分歧通过协商一致或通过第3名研究人员来解决。结果 最终纳入34项研究，其中与冠心病血瘀证密切相关的基因组学研究类型包括基因多态性、差异基因的表达、基因的甲基化修饰，涉及的生物学功能有血管内皮损伤、血液流变学改变、炎症反应与免疫调节、血管平滑肌增殖、血脂水平等，采用的技术方法有聚合酶链式反应（Polymerase chain reaction，PCR）、飞行时间质谱技术（Time-of-flight mass spectrometry，TOF-MS）、基因芯片杂交测序（Gene Chip）等。结论 基因组学研究可阐明冠心病血瘀证的生物学基础，为冠心病血瘀证的病机演变提供更好的依据，更有助于从分子水平实现个体化治疗，从而进一步提高临床疗效。     

右归配方颗粒对肾阳虚型体外受精－胚胎移植患者卵巢颗粒细胞基因表达谱的影响

目的从基因组学角度探讨温肾阳中药对肾阳虚型体外受精-胚胎移植（in vitro fertilizationembryo transfer,IVF-ET）患者卵巢颗粒细胞基因表达谱的影响。方法 72例行IVF治疗的肾阳虚患者按照随机数字表法分为治疗组（36例）和对照组（36例）,治疗组服用右归配方颗粒联合促性腺激素（gonadotropin,Gn）,对照组服用安慰剂联合Gn,两组均在IVF治疗前连续用药3个周期。两组采用超排卵长方案治疗后,行穿刺取卵术。利用基因高通量测序技术对两组患者卵巢颗粒细胞基因表达谱进行分析,研究两组患者基因表达谱的差异,并对差异基因行基因本体（gene ontology,GO）分析和京东基因与基因组百科全书（kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG）通路分析。结果通过对两组患者卵巢颗粒细胞基因表达谱的分析,共筛选到391个差异表达基因,其中上调基因238个,下调基因153个。差异表达基因参与的富集的分子功能是：与细胞增殖、凋亡有关的细胞周期调节蛋白,蛋白质泛素化,微管、微丝等细胞骨架的构建,线粒体及能量相关功能的因子,激素合成调节因子等;参与的通路是能量代谢通路和转化生长因子-β（transforming growth factor-β,TGF-β）信号通路。结论两组患者卵巢颗粒细胞基因表达谱存在明显差异,差异表达基因所涉及的生物学过程与肾阳虚导致的生殖细胞增殖、凋亡紊乱,线粒体产生能量过程受阻等有相关性。     

热药疗寒的基因表达谱研究

目的:探讨温热药治疗虚寒证的分子机制。方法:选择1对虚寒证兄妹,用温热药(麻辛附子汤合金匮肾气丸加减)治疗45 d,采有显效妹妹的外周血进行基因芯片实验,应用倍数分析方法进行数据处理,并对结果进行基因功能分类、通路分析等信息挖掘。结果:初步获得276条差异表达基因,与新陈代谢基因密切相关,涉及18条通路。结论:温热药主要影响了代谢基因的表达,疗效与证候的基因表达谱存在明显差异,温热药可能是通过基因网络发挥治疗作用的。     

冠心病(心绞痛)辨证分型与ACE I/D基因多态性的相关性研究

目的:探讨ACEI/D基因多态性与中国冠心病(心绞痛)辨证分型的关系。方法:检测冠心病气阴两虚、阴虚阳亢、痰瘀交阻各证型组及健康人对照组的ACE基因型(II、DD、ID),进行组间比较。结果:4组的基因型(II、DD、ID)经R×C的χ2检验,差异均有显著性意义(P<0.05)。各基因型比较,CHD气阴两虚证型组II基因型的频率显著高于CHD痰瘀交阻证型组(P<0.05)、CHD阴虚阳亢证型组II基因型的频率亦显著高于CHD痰瘀交阻证型组(P<0.05),但气阴两虚证型与阴虚阳亢证型两组间无显著差异(P>0.05)。结论:ACEI/D基因多态性与中国冠心病(心绞痛)发病相关,且推测其中II基因型可能与其辨证分型中的阴虚证相关。     

慢性乙型肝炎肝郁脾虚证和脾胃湿热证患者的差异表达基因研究初探

目的 探讨慢性乙型肝炎(慢乙肝)肝郁脾虚证与脾胃湿热证患者的差异表达基因。方法 采集正常健康者（26名）及肝郁脾虚证（35例）、脾胃湿热证（34例）患者空腹肘静脉血,按Trizol法提取总RNA。采用Aglient表达谱芯片进行基因芯片检测,利用随机方差模型筛选差异基因,通过GO、Pathway、Genbank、NCBI、Geneontology等数据库对差异基因进行分析。结果 两证型间获得差异基因125个（其中66个为上调基因,59个为下调基因）,主要表现的功能为跨膜运输、硒反应离子、钙离子依赖的胞吐作用等。参与的通路中较为重要的包括影响细胞黏附分子、钙离子信号通路、白细胞穿上皮迁移等。通过动态网络构建,寻找出共表达能力差异最显著的9个基因（即LOC340508、HIST2H2BE、MPL、FLJ22536、TUBA8、NT5M、EGFL7、PTPRF、TSPAN33）,其主要涉及免疫反应、细胞生长、DNA损伤、信号转导、炎症反应等生命过程。结论慢乙肝肝郁脾虚证和脾胃湿热证两个证型间存在差异表达基因,提示中医证候分类学具有基因表达谱依据,基因组学研究方法有望为中医辨证提供客观依据。     

从易感基因多态性探讨原发性高血压病中医证候实质的思考

认为基因背景可能是证候形成的主要原因之一，基因的这种细微差异决定其生物行为出现极大的变化。运用基因组技术寻找不同中医证型中相关基因表达谱的差异表达，对研究中医证型的实质及指导临床用药有重大的意义。     

论寒证科学基础研究的六个时期及前瞻

寒证本质的研究最早由北京医学院梁月华教授1979年提出,随后历经6个时期,28年。寒证动物模型的建立及5-羟色胺等神经递质研究,寒证量表及万人流行病学调查,寒证-基因组学及代谢基因功能模块研究,寒证分子疗效探索期,寒证生物信息及能量代谢通路研究等。近年来,随着功能基因组学的开展,从全基因网络的角度前瞻寒证科学基础研究。     

胃癌中医证型与胃癌转移相关基因E-cadherin的关系研究

目的:从基因蛋白表达上探索胃癌患者中医证的本质.方法:将收集到的术前胃癌患者病例资料按中医辨证分型标准确定其证型归属;用免疫组化EnVision二步法检测术后胃癌肿瘤标本中E-cadherin基因蛋白表达情况.结果:E-cadherin在100例胃癌患者中的阳性表达率为90%,证型间表达差异存在显著性(P<0.01);进一步两两比较示,痰湿凝结型、气血双亏型与脾胃虚寒型之间无明显差异,表达较高;瘀毒内阻型与肝胃不和型无明显差异,表达较低.结论:瘀毒内阻型与肝胃不和型胃癌患者的E-cadherin表达偏低,此两种证型肿瘤转移形成的途径可能与E-cadherin,即与肿瘤细胞间同质性黏附力降低相关.