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1.
建立了用亚乙基封闭的G7-pNP(EPS)作底物并偶联多功能α-葡萄糖苷酶测定α-淀粉酶(Amy)的方法学。EPS的稳定性好,工作试剂贮2~8℃可稳定21天;室温(30℃)稳定7天。由于多功能的α-葡萄糖苷酶对所有的EPS残基(G1~G5)有相同的水解力,使色团pNP100%回收,通过计算pNP的摩尔消光系数容易做到标准化。本法的延滞相较短(<90秒),零级反应时间>10分钟,线性范围达2000U/L,分析总CV<3.0%,本法(Y)与BM公司的试剂(X)比较:r=0.9988,Y=1.054X-6.6。  相似文献   

2.
白细胞α-1,4-葡萄糖苷酶的测定   总被引:1,自引:0,他引:1  
本文以4-甲基伞形花酮-α-D-吡喃葡萄糖苷为底物,建立了测定白细胞α-1,4-葡萄糖苷酶的方法,并在此基础上研究分析了该酶的生化特性。结果表明该酶的最适pH为4.0和6.0,米氏常数k_m=0.44nmol/L,在55℃下2小时酶活力减少一半,酶活力与其稀释度呈良好的线性关系,批内变异系数为4.05%,批间变异系数为8.6%,正常参考值为130.5±86.7nmol/h·mg蛋白。该方法简便、迅速、准确,为Pompe's病的筛选、确诊及产前诊断提供了重要手段。  相似文献   

3.
尿液中α-淀粉酶的提纯及性质研究   总被引:4,自引:1,他引:4  
为了制备淀粉酶测定的参考品,从正常人尿液中提取了α-淀粉酶(Amy)并对其特性进行了研究。该提制品淀粉酶的经活性达84.3kU/g蛋白,几乎不含其它杂酶(测不到ALT、SAT、LD、CK、GGT、ChE、ALP活性浓度)。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电脉显示一条Amy区带。其催化特性和人血清Amy非常相似,用亚乙基封闭的G7-PNP(EPS)作底物,偶联多功能α-葡萄糖苷酶测定其米氏常数为0.189mm  相似文献   

4.
血清α-L-岩藻糖苷酶自动分析法   总被引:1,自引:0,他引:1  
本文报道了血清α-L-岩藻糖苷酶的自动分析法。酶促反应的最适pH5.0~5.1,Km=0.180mmol/L,用柠檬酸-磷酸盐缓冲液可发挥酶的最大催化活性。线性范围为0~50U/L,批内CV1.53%~1.71%,批间CV3.0%~3.2%。137例健康成人血清中酶活力为6.06±1.31U/L(x±s),男女性别间无显著差异(P>0.05)。本法具有简单、快速、灵敏等特点。  相似文献   

5.
目的 探讨超短波对脑血管病患者可溶性白细胞介素2受体(SIL- 2R)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、干扰素α(IFN-α)的影响。方法  40例脑血管病患者随机配对分成治疗组、对照组各20例。两组均接受常规药物治疗,治疗组另外增加胸部超短波治疗作用于胸腺,治疗前后分别测定外周血清SIL-2R、TNF-α、IFN-α含量变化。结果治疗组治疗后SIL-2R、TNF-α均减少(t=2.98、3.92,P<0.01);IFN-α增加(t=3.86,P<0.01)。结论  超短波治疗能提高患者机体的总体免疫平衡状态。  相似文献   

6.
血清α-醋酸萘酯酶同工酶琼脂糖凝胶电泳法及临床应用   总被引:2,自引:0,他引:2  
为简化α-醋酸萘酯酶同工酶检查技术,建立琼脂糖凝胶电泳法。10g/L琼脂糖-PVP和pH7.40.1mol/LTris-HCl缓冲液,泳池pH8.6,μ=0.06巴比妥缓冲液,滤纸刺槽加样,电压150V,电流2mA/cm电泳40min,搭桥填充染色。染色液由α-醋酸萘酯pH6.20.1mol/LPB液和固蓝B盐组成,37℃染色20min,醋酸漂洗比色。结果对照组(n=30)α-ANE同工酶谱带3~4条(E1、E1a、E2、E3)着色强度E3>E1>E1a>E2,xE3占88%,E1~E212%左右,相对电泳位置E1:preAl/Al,E1a:Al/α1,E2:pre-α2,E3:α2/β,Rf分别为0.545、0.527、0.436、0.364。E3区组成复杂,用NANA酶水解和WGA亲加试验证明它富含SA和GlcNAC的一组不均一的糖蛋白。谱形异常的典型病例有Ⅰ型在症糖尿病和部分肝癌患者,它除有正常谱带外,前者多E4和E5,其色度比(%)E40.114,E50.198,相对电泳位置在β和β与Pre-γ之间,Rf=0.254,0.182。肝癌病人谱带也多1~2条(E5和E6)位于A/pre-γ和pre-γ,  相似文献   

7.
酶联免疫吸附试验测定α1-酸性糖蛋白   总被引:1,自引:0,他引:1  
为了建立α1-酸性糖蛋白测定方法。以α1-酸性糖蛋白纯品免疫家兔,得抗α1-酸性糖蛋白抗体,用双抗体夹心酶联免疫吸附技术测定血清及体液α1-酸性糖蛋白。方法线性为0.05~5mg/L,批内变异系数平均为5.6%,批间变异系数平均为9%,平均回收率为103%。该方法操作简便,测定只需50分钟,可用于血清和体液α1-酸性糖蛋白的临床常规测定  相似文献   

8.
目的:观察脾切除大鼠受内毒素攻击后,组织肿瘤坏死因子-α-(TNF-α)蛋白及基因表达的变化规律,探索脾切除对内毒素诱生TNF-α的影响。方法:Wistar大鼠随机分为无脾组(n=36)和有脾组(n=36),动物静脉注射大直菌脂多糖0.1mg/kg制作内毒素血症模型。采用酶联免疫吸附法测定肺、肝组织TNF-α含量,并应用塑转录聚合酶链(PCR)技术检测组织TNF-αmRNA表达改变。结果:内毒素注  相似文献   

9.
连续监测法测定血清α—L—岩藻糖苷酶   总被引:13,自引:0,他引:13  
建立了血清α-L-岩藻糖苷酶单一试剂连续监测法。本法与改良Troost终点法比较,20份血清的测定值经配对t检验,P>0.05,差异无统计意义;同一份混合血清用本法测定,批内CV=5.0%,批间CV=7.4%;一份32U/L的高值血清经稀释后测定,仍呈良好的线性关系(r=0.999);胆红素115μmol/L、血红蛋白32g/L及三酸甘油300μmol/L对测定值无明显干扰。  相似文献   

10.
α—淀粉酶直接测定法   总被引:1,自引:1,他引:1  
该文介绍一种使用2-氯-4-硝基苯-α-麦芽三糖革(CNP-G3)作为底物的直接比色测定α-淀粉酶的和为连续监测法,本法无延迟时间,反应时间仅需1分钟,线性范围可达2000U/L以上,与麦芽七法相比,r=0.999,Y=1.05X-16.19(n=37),批内变异为0.91-1.17%,本文还提出了相应的固定时间法,用于手工操作。  相似文献   

11.
探讨胃癌病人血清TNF-α和IL-6水平的变化及其临床意义。方法:利用ELISA法测定35例胃癌病人血清TNF-α和IL-6水平,并与胃良性肿瘤组和正常对照组相比较。结果:胃癌病人血清TNF-α和IL-6水平明显增高(P<0.01),并与疾病分期有关(P<0.05),病灶切除后血清TNF-α和IL-6水平明显降低(P<0.05)。结论:胃癌病人具有细胞免疫功能紊乱,血清中TNF-α和IL-6水平的增高可能和疾病的发生发展有关,测定血清TNF-α和IL-6可作为胃癌病人病情判断和疗效观察的指标之一。  相似文献   

12.
作者用α-糜蛋白酶分解血清胞浆门冬氨酸氨基转移酶(cAST)比色法[1]测定线粒体门冬氨酸氨基转移酶(mAST)。α-糜蛋白酶浓度在1~1.5g/L(800kU/g)已能使cAST失活,而mAST不受影响。29份标本双份平行测定,P>0.5,电泳法[2]与本法比较,n=21,γ=0.9844,Y(酶解法)=0.3961+1.0356X,健康人107例(男37,女70)中位数1.14卡门单位,2.5%~97.5%范围为0.06~4.2卡门单位。本法简便,特别适合于基层单位和大批标本之分析,亦可用于自动分析。  相似文献   

13.
目的:探讨载脂蛋白(α)〔apo(α)〕表型分布特点及脂蛋白〔Lp(α)〕与老年冠心病的关系。方法:对104例老年冠心病(CHD)患者(陈旧性心肌梗塞31例,稳定型心绞痛38例,冠心病心律失常20例,心力衰竭15例)进行了血清apo(α)异构体多态性表型和血清Lp(α)及血脂水平检测,并与68例健康老年人对照分析。结果:CHD组Lp(α)和血脂水平明显高于对照组(P<0.05和P<0.01),检出11种不同apo(α)表型,其检出率CHD组为82.7%,对照组为75.0%,apo(α)低分子表型CHD组明显高于对照组(31.7%比16.2%,P<0.05)。回归分析显示apo(α)表型分子量与Lp(α)水平呈显著负相关(CHD组r=-0.9091,对照组r=-0.9479,P<0.05)。结论:apo(α)表型是Lp(α)水平的主要决定因素,其低分子量表型在临床上比Lp(α)水平更具有重要参考价值。  相似文献   

14.
研究了成人血清α1-酸性糖蛋白(α1-AGP)的浓度范围及其与年龄的关系。采用免疫比浊法,测定了213例男性健康成人血清α1-AGP浓度。青年组(18岁~23岁,n=172)和非青年组(23~59岁,n=41)男性血清α1-AGP浓度分别为563.9±29.5(mg/L)(范围444.5mg/L~618.0mg/L),564.5±32.7(mg/L)(范围460.9mg/L~647.5mg/L)。  相似文献   

15.
本文以4-甲基伞形花酮-α-D-吡喃葡萄糖苷为底物,建立了测定白细胞α-1,4-葡萄糖苷酶的方法,并在此基础上研究分析了该酶的生化特性。结果表明该酶的最适pH为4.0和6.0,米氏常数km=0.44nmol/L,在55℃下2小时酶活力减少一半,酶活力与其稀释度呈良好的线性关系,批内变异系数为4.05%,批间变异系数为8.6%,正常参考值为130.5±86.7nmol/h·mg蛋白。该方法简便、迅速  相似文献   

16.
α—半乳糖苷酶及其在输血等方面的应用   总被引:5,自引:0,他引:5  
α-半乳糖苷α-galactosidase,α-Gal,E.C.3.2.1.22)是广泛存在于自然界中的一种外切糖苷酶,传统上划分为两类异构酶,即α-半乳糖苷酶A和α-半乳糖苷酶Bo在体内,α-半乳糖苷酶A水解以α-半乳糖残基为末端的糖复合物,而α-半乳糖苷酶B则水解以α-半乳糖苷酶则水解以α-N-乙酰-氨基半乳糖残基为末端的聚糖及糖蛋白、糖脂等复合物,因而它实际上是一种α-N-乙酰-半乳糖胺酶。  相似文献   

17.
目的:为探讨高血压患者血TNFa.SIL-2R水平与肾脏早期损害的关系。方法:采用ELISA法及化学显色终点法,分别检测40例高血压患者血清中肿痛坏死因子(TNFα)、可溶性白细胞介素2受体(sIL-2R)值和尿氨基葡萄糖苷酶(NAG)活力。结果:高血压组TNFα,sTL-2R及尿NAG均明显高于正常对照组,且TNFα、sIL-2R值与NAG活力呈正相关(r=0.84和0.82)。结论:提示高血压患者TNFα与肾脏早期损害可能有关,sIL-2R是否参与尚待研究  相似文献   

18.
目前,动力学法测血糖有葡萄糖氧化酶氧速率法和己糖激酶法,未见葡萄糖氧化酶-过氧化物酶偶联动力学法测血糖的报道。借用意大利Sclavo的葡萄糖氧化酶过氧化物酶偶联终点法试剂,采用动力学法测血糖取得了满意结果。结果表明:在一定时间内有色产物吸光度变化量△A与标本中血糖浓度C近似正比,△A=0.0009+0.0155C,r=0.9999(P〈0.01),故可利用一级反应动力学原理测血糖。GOD-POD偶  相似文献   

19.
血小板GMP—140,vWF,SOD,LPO与高血压病关系的研究   总被引:3,自引:0,他引:3  
为了解高血压病发病机理,采用ELISA法和比色法检测EH患者血小板α-颗粒膜蛋白140(GMP-140),血浆Von Willebrand因子(vWF),超氧化物歧化酶、过氧化脂质的含量。结果显示EH患者血小板GMP-140、vWF和LPO水平均高于正常对照组(P〈0.01 ̄0.001),SOD水平低于正常对照组(P〈0.01),相关分析:GMP-140与vWF、LPO呈正相关(r=0.78、0.  相似文献   

20.
肾综合征出血热患者尿液中TNF,IL—6,IL—8的检测及意义   总被引:1,自引:0,他引:1  
采用双抗体夹以ELISA法对48例HFRS患者156份系列尿液中TNF,IL-6,IL-8进行了动态检测,结果发现:HFRS患者尿液中TNF,IL-6,IL-8含量较对照组明显增高(P〈0.001),且病程前三期平均含量较全病中明显高,TNF与IL-6呈显著正要关(γ=0.5621,P〈0.005),IL-6与IL-8呈显著正相关(γ=0.3845,P〈0.01);TNF含量发热期明显升高,低血压  相似文献   

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