肝炎患者外周血单个核细胞IL-18 mRNA和蛋白水平与HBV感染的关系

检测了慢性乙型病毒性肝炎患者外周血单个核细胞(ＰＢＭＣ )ＩＬ 18基因及蛋白表达水平 ,以探讨ＩＬ 18在乙型肝炎病毒 (ＨＢＶ )感染中的作用。1　材料与方法1 1　病例　慢性乙型肝炎 30例 ,排除合并感染其他病毒性肝炎 ,近 6月无应用影响免疫功能的药物。所有病例均检测血清ＨＢＶＤＮＡ水平 (斑点杂交法 )。1 2　方法　分别以逆转录 聚合酶链反应 (ＲＴ ＰＣＲ )技术 ,流式细胞术检测ＩＬ 18基因的转录及表达水平。方法见文献[1]。ＰＢＭＣ内ＨＢＶＤＮＡ检测 ,抽提细胞内ＤＮＡ后采用ＰＣＲ法扩增。所得实验结果采用ＳＰＳＳ 8 0软件进…     

再生障碍性贫血患者外周单个核细胞诱生IL-3、IL-6的检测及意义

为探讨ＩＬ ３、ＩＬ ６在再生障碍性贫血（ＡＡ）患者中的发病作用,利用生物活性法测定了３０例ＡＡ患者外周单个核细胞（ＰＢＭＣ）诱生ＩＬ ３、ＩＬ ６的水平变化。结果１０例重型ＡＡ（ＳＡＡ）的ＩＬ ３水平比２０例慢性ＡＡ（ＣＡＡ）和２０例正常对照明显降低（Ｐ＜００５,Ｐ＜００１）,ＣＡＡ与正常对照间无显著差别;但是ＳＡＡ和ＣＡＡ的ＩＬ ６水平比正常对照明显升高（Ｐ＜０００１,Ｐ＜０００５）,ＳＡＡ较ＣＡＡ亦明显增加（Ｐ＜００５）。实验证实,ＩＬ ３、ＩＬ ６的分泌紊乱参与ＡＡ的发病。     

IL-1和IL-6对多发性骨髓瘤细胞与骨髓基质细胞粘附作用的影响

多发性骨髓瘤(ＭＭ)患者外周血中存在骨髓瘤细胞前体细胞,而骨髓瘤细胞却很少在外周循环中出现[1]。为了探讨骨髓瘤细胞和骨髓基质细胞(ＢＭＳＣｓ)之间关系及ＭＭ患者ＢＭＳＣｓ的特性和功能,我们建立了人ＢＭＳＣｓ培养方法,研究了骨髓瘤细胞与ＢＭＳＣｓ的粘附效应以及ＩＬ1、ＩＬ6和骨髓瘤细胞与ＢＭＳＣｓ粘附效应的影响。1　材料和方法11　细胞株　人骨髓瘤细胞株ＫＭ3由昆明医学生物学研究所1988年所建。12　主要试剂　重组人ＩＬ1、ＩＬ6购自原平生物技术公司。13　研究对象　确诊ＭＭ患者16例,平均年龄58岁;其中初治7例,难治性ＭＭ…     

慢性肝病患者血清和腹水IL-8的变化和临床意义

采用双抗体夹心ＥＬＩＳＡ法检测了慢性肝病患者血清和腹水中ＩＬ 8水平报道如下。1　材料和方法1 1　研究对象　临床确诊的慢性肝病合并腹水患者 32例 ,合并自发性细菌性腹膜炎 (ＳＢＰ ) 13例 ,另采集 30例健康体检者作正常对照。1 2　检测方法　ＴＮＦ和ＩＬ 8检测采用单克隆双抗体夹心ＥＬＩＳＡ试剂盒 ,由第四军医大学免疫学教研室提供 ,操作方法按说明进行。2　结果2 1　慢性肝病ＳＢＰ组及无ＳＢＰ组的血清和腹水ＩＬ 8水平比较　结果 (表 1)。表 1　慢性肝病患者ＳＢＰ组、无ＳＢＰ组血清和腹水ＩＬ 8水平比较　组别例数 血清　Ｔ…     

病毒性肝炎患者白细胞介素－6的检测及其临床意义

应用夹心ＥＬＩＳＡ检测了５６例乙型病毒性肝炎患者外周血单个核细胞（ＰＢＭＣｓ）白细胞介素－６（ＩＬ－６）的诱生水平。乙型慢性活动性肝炎（ＣＡＨ）、乙型肝炎后肝硬化（ＨＣ）和乙型重型肝炎（ＳＨ）ＰＢＭＣｓ经脂多糖诱导后，ＩＬ－６的诱生水平分别为１２．８４±３．２６ｎｇ／ｍｌ、１１．７９±３．０１ｎｇ／ｍｌ和３８．４２±８．３７ｎｇ／ｍｌ，明显高于正常对照组（Ｐ＜０．０５～０．０１）。ＣＡＨ和ＳＨ患者的ＩＬ－６水平与肝细胞变性坏死，蛋白质合成障碍和患者的预后也有一定的关系。上述结果提示，机体内ＩＬ－６的调节紊乱可能与病毒性肝炎的发病机理有关。     

慢性乙型肝炎患者T_H1/T_H2细胞因子应答状况

ＩＬ 10和ＩＦＮ γ分属于ＴＨ1、ＴＨ2类细胞因子 ,它们在乙型肝炎病毒 (ＨＢＶ)持续感染的发生机理中起重要作用。为了探讨慢性乙型肝炎 (ＣＨＢ)患者ＨＢＶ抗原特异性ＴＨ1 ＴＨ2类细胞因子应答情况 ,我们选择 43名此前未行免疫治疗或抗病毒治疗并经肝脏穿刺活检证实的ＣＨＢ患者 ,并以年龄近似的 10名体健者作为正常对照。常规分离外周血单核细胞 (ＰＢＭＣ) ,以 10 6 ｍｌ的密度接种于 2 4孔板 ,加入终浓度为 1μｇ ｍｌ的ｒＨＢｃＡｇ刺激培养 72ｈ ,用ＥＬＩＳＡ法检测培养上清中ＩＬ 10 (ｐｇ ｍｌ)和ＩＦＮ γ(ｐｇ ｍｌ)的含量。…     

抗核心脂域McAb对LPS体外诱导细胞释放IL-1及其mRNA表达的影响

采用细胞因子活性检测，Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ及ＲＴ－ＰＣＲ等方法，在体外研究了抗细菌核心糖脂域ＭｃＡｂ（ＥＬ１、ＥＬ３和３Ｈ４）对ＬＰＳ诱导人外周血单核细胞（ｈＰＢＭＣ）释放ＩＬ－１及其ｍＲ－ＮＡ表达水平的影响。结果表明，ＥＬ１、ＥＬ３和３Ｈ４在体外有抑制ＬＰＳ诱导细胞释放ＩＬ－１的作用；Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ及ＲＴ－ＰＣＲ结果证实，这３株ＭｃＡｂ能降低ＩＬ－１ｍＲＮＡ表达的水平；提示抗细菌核心糖脂域ＭｃＡｂ可通过与ＬＰＳ的结合而中和ＬＰＳ作用于效应细胞，从而降低或阻碍了效应细胞中ＩＬ－１ｍＲＮＡ的表达，达到抑制细胞释放ＩＬ－１的作用。     

亚急性重型肝炎患者TNF-α和IL-1表达及IL-4对其的调控

目的：分析ＩＬ－４对亚急性重型肝炎（亚重肝）患者外周血单个核细胞（ＰＢＭＣＳ）ＴＮＦ－α和ＩＬ－１的调控作用,评价ＩＬ－４在亚重肝治疗中的潜在价值。方法：应用细胞生物学、免疫组化和ＲＴ－ＰＣＲ等方面测定ＰＢＭＣＳ ＴＮＦ－α、ＩＬ－１的表达。结果：亚重肝患者ＰＢＭＣＳ ＴＮＦ－α、ＩＬ－１表达水平均较正常人显著增高血糖素含量和虽然ＩＬ－４ ＭＲＮＡ及蛋白质的表达与正常人比较一差异无但ＩＬ－４ ＭＲ     

IL-12对慢性乙型肝炎患者TH1/TH2类细胞应答作用与血清HBV DNA含量相关性研究

为观察慢性乙型肝炎患者血清ＨＢＶＤＮＡ含量是否影响ＩＬ 1 2对ＴＨ1 /ＴＨ2类细胞的调节作用 ,我们选择 50例慢性乙型肝炎患者 ,分别与ＰＨＡ ,ＨＢｃＡｇ、ＨＢｅＡｇ单独或联合ＩＬ 1 2培养其外周血单个核细胞 ,ＥＬＩＳＡ法检测培养上清液细胞因子ＩＬ 2、ＩＦＮ γ、ＩＬ 4、ＩＬ 1 0水平 ,结合血清ＨＢＶＤＮＡ含量进行分析比较 ,探讨血清ＨＢＶＤＮＡ含量对ＩＬ 1 2诱导ＴＨ1 /ＴＨ2类细胞应答效应的影响。50例慢性乙型肝炎患者 ,男 2 8例 ,女 2 2例 ,平均年龄 3 4.5岁 ( 1 9～ 4 7岁 )。ＡＬＴ >60ＩＵ/Ｌ。排除ＨＡＶ、ＨＣＶ、…     

系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞IL-17表达的初步观察

目前ＩＬ 17的研究已发现 ,其在一些自身免疫性疾病如移植肾排斥反应、类风湿性关节炎、多发性硬化、支气管哮喘等存在表达、分泌的异常 ,但在系统性红斑狼疮 (ＳＬＥ)患者中 ,其表达、分泌是否存在异常 ,目前国内、外尚未见研究报告〔1〕。本研究通过测定ＳＬＥ患者血清、无刺激或加不同刺激培养外周血单个核细胞 (ＰＢＭＣ)上清液ＩＬ 17蛋白水平和其ＰＢＭＣ内ＩＬ 17ｍＲＮＡ水平的表达量 ,以了解ＳＬＥ患者ＰＢＭＣ表达、分泌ＩＬ 17有无异常及其与ＳＬＥ疾病活动性的关系。材料与方法病例选择 :30例患者 ,全部符合美国风湿病协会1982…     

IL-4对治疗前后亚急性重型病毒性肝炎患者PBMCs TNF-α和IL-1αmRNA表达的影响

目的　了解白介素（ＩＬ）４ 对重型病毒性肝炎患者外周血单个核细胞（ＰＢＭＣｓ） 中肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）α和ＩＬ１αｍＲＮＡ的表达的影响。方法　ＴＮＦα和ＩＬ１αｍＲＮＡ的表达水平采用半定量逆转录聚合酶链反应（ＲＴＰＣＲ） 进行检测。结果　ＩＬ４ 均以剂量依赖的方式抑制治疗前、后亚急性重型肝炎患者ＰＢＭＣｓ ＴＮＦα和ＩＬ１αｍＲＮＡ的表达,在发病初期,ＩＬ４ 于１ ０００Ｕｍｌ 时接近最大抑制效应;而恢复期患者,ＩＬ４ 于１００Ｕｍｌ 时即接近最大抑制效应,剂量－ 反应曲线明显左移。如以１００Ｕｍｌ 的ＩＬ４ 处理ＰＢＭＣｓ,恢复期亚急性重型肝炎患者ＰＢＭＣｓ ＴＮＦα和ＩＬ１αｍＲＮＡ的抑制率接近５０％ 。另外还发现,在发病初期,ＩＬ４ 对内毒素血症和ＨＢｅＡｇ 阳性患者ＰＢＭＣｓＴＮＦα和ＩＬ１αｍＲＮＡ表达的抑制作用低于阴性的患者。结论　ＩＬ４ 对发病初期患者ＰＢＭＣＴＮＦα和ＩＬ１αｍＲＮＡ 表达的抑制作用明显低于恢复期患者,其原因可能与内毒素血症和病毒血症有关     

HBcAg/HBeAg对慢性乙型肝炎患者PBMC中Th1/Th2类细胞应答的影响

目的 探讨ＨＢｃＡｇ／ＨＢｅＡｇ对慢性乙型肝炎患者ＰＢＭＣ中Ｔｈ１／Ｔｈ２类细胞应答的影响。方法 用套式ＰＣＲ法检测６４便慢性ＨＢＶ感染者ＰＢＭＣ中ＨＶＢ ＤＮＡ;分别用ＰＨＡ、ＨＢｃＡｇ和ＨＢｅＡｇ体外培养;ＥＬＩＳＡ法检测ＰＢＭＣ产生Ｔｈ１类细胞因子（ＩＬ－２、ＩＦＮ－γ）和Ｔｈ２类细胞因子（ＩＬ－４、ＩＬ－１０）的含量。结果 表明ＨＢＶ ＤＮＡ阳性组和阴性组相比,无论是在ＰＨＡ还是在ＨＢｃＡ     

乙型肝炎患者IL－2水平的检测及其临床意义

用自制间接夹心法ＥＬＩＳＡ试剂检测２６例乙型肝炎患者外周血的ＩＬ－２水平和多项细胞、体液免疫指标。结果表明，慢性乙型肝炎患者ＩＬ－２水平、淋巴细胞转化和ＣＤ４／ＣＤ８比值均低于正常组（Ｐ＜０．００１和Ｐ＜０．０５），上述三种指标呈直线正相关。提示慢性乙型肝炎呈明显的细胞免疫低下状态。此外用ＥＬＩＳＡ检测人体液中的ＩＬ－２水平可为临床细胞免疫的监测提供一种简便迅速的方法。     

哮喘患者外周血单个核细胞IL-5、IL-3 mRNA表达的研究

嗜酸细胞（ＥＯＳ）是哮喘慢性炎症中的关键效应细胞。ＩＬ５、ＩＬ３能促进ＥＯＳ在骨髓的分化、成熟,使机体的ＥＯＳ产生增多,并促使ＥＯＳ在支气管肺组织的聚集及活化。哮喘患者外周血、支气管粘膜、支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）中ＩＬ５明显升高［１］。ＩＬ３对ＥＯＳ的作用较ＩＬ５弱,它在哮喘发病机理中的作用仍有争议。本文通过对哮喘患者ＰＢＭＣＩＬ５ｍＲＮＡ、ＩＬ３ｍＲＮＡ表达水平的研究,探讨其在哮喘发病中的作用。１　材料与方法１．１　研究对象　哮喘组：哮喘患者１３例,男８例,女５例,平均年龄３…     

IL－2R水平在骨髓增生异常综合征中的意义

为了对ＭＤＳ的发生发展和免疫学异常进一步了解，我们用双抗体夹心ＥＬＩＳＡ法检测２０例ＭＤＳ患者血清中ｓＩＬ－２Ｒ水平；采用ＡＰＡＡＰ桥联酶免疫染色观察９例ＭＤＳ患者ＰＢＭＣ中ｍＩＬ－２Ｒ的表达，发现ＭＤＳ患者血清中ｓＩＬ－２Ｒ较正常人增高。在ＭＤＳ亚型中ＲＡＥＢ，ＲＡＥＢ－ｔ组较ＲＡ组增高显著，Ｐ＜０．０１；校再障组也增高。ｍＩＬ－２Ｒ阳性细胞百分率也较正常人高。血清中ｓＩＬ－２Ｒ释放水平与ＰＢＭＣ中ｍＩＬ－２Ｒ的表达比较，两者无明显相关。研究结果表明，ＭＤＳ除髓系细胞累及外，ＩＬ－２Ｒ水平增高可能是ＭＤＳ淋巴细胞异常，免疫系统功能紊乱的一种表现。     

雷公藤甲素对淋巴细胞表达IL─5mRNA的作用

从健康志愿献血员的外周血中分离出单个核细胞（ＰＢＭＣ），调细胞浓度为５×１０６／ｍｌ，加入终浓度为５μｇ／ｍｌ的ＣｏｎＡ和终浓度为０、１、１０、５０、１００ｎｇ／ｍｌ的雷公藤甲素，体外培养２４ｈ后收集培养的细胞，用异硫氰酸胍法提取总ＲＮＡ。将含小鼠ＩＬ－５ｃＤＮＡ的质粒酶切为约１ｋｂ的片段；用地高辛配基标记探针；用斑点印迹杂交法检测ＰＢＭＣ的ＩＬ－５ｍＲＮＡ表达。结果终浓度为１ｎｇ／ｍｌ和１０ｎｇ／ｍｌ的雷公藤甲素对ＰＢＭＣ表达ＩＬ－５ｍＲＮＡ无明显作用。而终浓度为５０ｎｇ／ｍｌ和１００ｎｇ／ｍｌ的雷公藤甲素能显著地抑制ＣｏｎＡ刺激的ＰＢＭＣ表达ＩＬ－５ｍＲＮＡ     

IL-7与IL-2、PHA或抗CD3联用诱导人外周血LAK细胞的研究

ＰＨＡ ＬＡＫ细胞和ＣＤ3ＡＫ细胞的活性均优于ＩＬ 2培养的常规ＬＡＫ细胞[1,2 ] 。本文分析比较ＩＬ 7对ＰＨＡ ＬＡＫ、ＣＤ3ＡＫ细胞诱导和活性的影响。1　材料与方法1 1　主要试剂　ＩＬ 7(Ｐｅｐｒｏ Ｔｅｃｈ Ｉｎｃ,美国 ) ;余参见文献 [3]。1 2　效应细胞的诱生与培养　常规方法从Ｏ型血分离单个核细胞 ,分别用ＰＨＡ (12 5 μｇ/ｍｌ)预刺激 48ｈ或抗ＣＤ3(1μｇ/ｍｌ)包被 4ｈ ,然后与含ｒＩＬ 2 (2 5 0ｕ/ｍｌ)的ＲＰＭＩ 16 40培基 (含ＡＢ型血清 )共培养 ,诱生ＰＨＡ ＬＡＫ和ＣＤ3ＡＫ细胞 ,与ＩＬ 7(10ｎｇ/ｍｌ)诱生的Ｉ…     

重组干扰素—γ对哮喘患者外周血单个核细胞IL—8和IL—10的作用研究

目的 研究重组干扰素－γ对哮喘患者体外单个核细胞ＩＬ－８和ＩＬ－１０释放的影响以及与血清ＥＣＰ水平的关系。方法 取哮喘患者８例、正常人５例的外周静脉血,分离单个核细胞培养,６６ｈ后将哮喘患者的ＰＢＭＣ上清液分为重组干扰素－γ干预组、氟美松干预组、未加干预物组,７２ｈ收集上清液测定ＩＬ－８和ＩＬ－１０的浓度。同时留取血清测ＥＣＰ。结果 哮喘者血清ＥＣＰ值与ＰＢＭＣ培养细胞上清液中ＩＬ－８值呈现显著正相关（ｒ＝０．７０１）,与ＩＬ－１０值呈显著负相关（ｒ＝０．６３８）。者喘患者血清中ＥＣＰ和ＰＢＭＣ上清液ＩＬ－８和ＩＬ－１０浓度与正常相比有显著性差异（Ｐ〈０．０５）。ｒＩＦＮ－γ干预后ＰＢＭＣ上清中ＩＬ－８较未干预组显著下降（Ｐ〈０．０５）,而ＩＬ－１０显著增高（Ｐ〈０．０５）;氟美松干预组则无明显差异性。结论 ｒ     

乙型肝炎血清诱导人外周血单个核细胞凋亡的检测及意义

本实验选取我院10例健康献血员(男6例,女4例,年龄20～45岁,平均年龄3340±696岁,甲、乙、丙、丁、戊型肝炎病毒标志皆阴性,肝功正常)。ＨＢＶ阳性血清来自本科一慢性乙型肝炎患者,该患者血清病毒标志检测为ＨＢｓＡｇ( )、ＨＢｅＡｇ( )、抗ＨＢｃ( )、抗ＨＢｃＩｇＭ( ),经ＨＢＶ定量ＰＣＲ检测,含ＨＢＶ498×104拷贝/ｍｌ,无菌采集血清后80℃冰箱冻存,用前经56℃30ｍｉｎ灭活补体。抽取健康献血员静脉血8ｍｌ(肝素抗凝),用淋巴细胞分离液按常规分离外周血单个核细胞(ＰＢＭＣ),将ＰＢＭＣ调成1×106/ｍｌ浓度,每孔接种1ｍｌ于12孔培养板上…     

腺病毒、合胞病毒对外周血单个核细胞的IL-2受体表达及TNFα产生的影响

近年来国内外均注意到细胞因子及受体与病毒感染的关系。作者用１００ＴＣＩＤ５０的７型腺病毒（ＡＤＶ）及呼吸道合胞病毒（ＲＳＶ）Ｌｏｎｇ株刺激正常人体外培养的外周血淋巴细胞（ＰＢＭＣ），ＡＰＡＡＰ法检测淋巴细胞ＩＬ－２受体阳性率，酶联免疫法检测淋巴细胞上清液的ＴＮＦａ。初步观察了ＡＤＶ、ＲＳＶ对人ＰＢＭＣ的ＩＬ－２受体表达、ＴＮＦα产生的影响。经２００Ｕｇ／ｍｌ的ＰＨＡ活化的ＰＢＭＣ加入ＡＤＶ、ＲＳＶ后对照组ＩＬ－２＋细胞百分率为３４．３％，ＡＤＶ组为１７．３％，ＲＳＶ组为１７％，较对照组均显著降低…