急性碘过量时FRTL细胞钠碘转运体表达的变化

FRTL细胞分别在含有10^-6～10^-3mol／L碘化钾的培养基中培养24、48和72h，采用RT-PCR和Western印迹，检测钠碘转运体（NIS）mRNA和蛋白水平的变化。FRTL细胞在10^-6～10^-3mol／L高碘培养基中培养24、48h，NIS mRNA水平与对照组相比，差异无统计学意义。而FRTL细胞在10^-6～10^-3mol／L高碘培养基中培养48、72h，NIS蛋白呈逐渐下降趋势，碘浓度越高，NIS蛋白下降越明显。本研究显示急性碘过量不影响NISmRNA的表达，但可下调NIS蛋白，碘过量通过转录后水平调节NIS的基因表达。     

碘对大鼠甲状腺钠碘转运体mRNA表达及甲状腺功能的影响

观察不同碘摄入量对大鼠甲状腺钠碘转运体（NIS）mRNA、血清甲状腺激素、尿碘水平以及甲状腺组织碘含量的影响。低碘组NIS mRNA表达明显增强，而血清甲状腺激素、尿碘、甲状腺组织碘含量显著下降。高碘组NIS mRNA表达受到抑制，甲状腺激素有下降趋势。提示NIS是甲状腺自身调节的重要组成部分。高碘、低碘均可导致甲状腺功能低下。     

不同碘营养水平对哺乳期大鼠甲状腺和乳腺钠碘转运体mRNA表达的影响

目的 观察不同碘营养水平对哺乳期大鼠甲状腺和乳腺钠碘转运体(NIS)mRNA表达水平的影响.方法 Wistar大鼠30只,体质量40～60 g.按体质量将大鼠随机分成3组:低碘组(去离子水),适碘组(含碘150 μg/L的去离子水),高碘组(含碘3000μg/L的去离子水),3组均喂合成饲料.喂养3个月后,与雄鼠合笼交配,待母鼠哺乳5 d后处死,取母鼠乳腺、甲状腺及血清.采用温和酸消化法测定血清碘,放射免疫分析法测定血清T_3、T_4水平,实时荧光定量PCR法检测乳腺和甲状腺NIS mRNA表达.结果 哺乳期大鼠血清碘、T_3、T_4、NIS mRNA表达,组间比较差异有统计学意义(F值分别为499.94、16.67、8.49,H=7.58,P均<0.05).血清碘适碘组[(43.42±692)μg/L]高于低碘组[(17.38±3.27)μg/L,P<0.05],高碘组[(350.10±38.46)μg/L]高于适碘组(P<0.05).血清T_3水平,低碘组、高碘组[(1.11±0.25)、(1.61±0.33)μg/L]低于适碘组[(2.18±0.46)μg/L,P均<0.05].血清T_4水平,低碘组[(33.40±11.11)μg/L]低于高碘组[(56.54±10.38)μg/L,P<0.05].甲状腺NIS mRNA表达水平低碘组(0.280±0.030)高于适碘组(0.240±0.030,P<0.05).高碘组(0.069±0.037)低于适碘组(P<0.05).哺乳期乳腺NIS mRNA表达水平高碘组(0.027±0.007)低于适碘组(0.051±0.019,P<0.05).结论 轻度低碘能够提高甲状腺NIS mRNA表达,保护母体免受低碘的危害,但对下一代的保护作用不明显或没有保护作用;高碘抑制甲状腺和乳腺NIS mRNA表达,保护母体及下一代免受高碘的危害.     

高碘对大鼠甲状腺过氧化物酶和钠碘转运体基因mRNA表达的影响

目的 观察长期碘过量对大鼠甲状腺过氧化物酶(TPO)和钠碘转运体(NIS)mRNA表达的影响.方法 将SD大鼠按体质量随机分为对照(CI)组、高碘Ⅰ(HI Ⅰ)组、高碘Ⅱ(HIⅡ)组,分别饮用含碘5、5000、10000μg/L的自来水.6个月时取大鼠甲状腺,在光、电镜下观察甲状腺形态结构的变化;采用放射免疫法测定血清甲状腺激素水平;RT-PCR法检测甲状腺TPO、NIS mRNA的表达.结果 高碘组与CI组相比.部分甲状腺滤泡明显增大,滤泡腔内充满浓染胶质;血清TT4 、TT3水平,HI Ⅰ组[(73.82±16.48)、(1.34±0.31)nmol/L]和HIⅡ组[(70.65±11.43)、(1.15±0.39)nmol/L]与对照组[(75.68±13.99)、(1.45±0.49)nmol/L]相比呈逐渐下降趋势,但组间差异无统计学意义(F值分别为0.371、1.163,P＞0.05);TPO、NIS mRNA表达水平,组间比较差异有统计学意义(F值分别为30.863、62.675,P＜0.05).HI Ⅰ组(1.28±0.10、0.56±0.17)和HIⅡ组(1.14±0.04、0.39±0.06)均比对照组(1.39±0.08、0.71±0.13)明显降低(P＜0.05).结论 长期碘过量可造成甲状腺组织形态学改变,并且抑制甲状腺TPO、NIS mRNA表达.     

一氧化氮对人甲状腺细胞钠/碘转运体的影响

目的 研究一氧化氮(NO)供体硝普钠(SNP)对体外培养人甲状腺细胞钠／碘转运体(NIS)的作用。方法 采用细胞培养方法，观察不同浓度的SNP对甲状腺细胞摄碘能力和Na^ -K^ -ATP酶的影响，并分析NIS与Na^ -K^ -ATP酶的关系。结果 ①SNP(10^-6-10^-3mol／L)呈剂量依赖性抑制甲状腺细胞碘的摄取，除去SNP继续培养48h，细胞恢复摄碘能力；②SNP(10^-6-10^-mol／L)呈剂量依赖性抑制Na^ -K^ -ATP酶的活力；③NIS与Na^ -K^ -ATP酶呈正相关(r=0．95)。结论 NO能抑制甲状腺细胞NIS的摄碘功能，这可能与NO促进细胞内cGMP水平增加和抑制甲状腺细胞Na^ -K^ -ATP酶有关。     

人钠碘转运体mRNA在良恶性甲状腺疾病中表达的研究

目的探讨人钠碘转运体（hNIS）mRNA在良恶性甲状腺疾病中的表达及其在疾病诊断中的价值.方法24例Graves病,27例桥本氏甲状腺炎,21例亚急性甲状腺炎,24例无功能性甲状腺结节性增生,22例无功能性腺瘤,21例乳头状甲状腺癌及17例滤泡状甲状腺癌（其中4例颈部淋巴转移）,经细针抽吸甲状腺组织,用实时荧光定量PCR法测定hNIS mRNA的表达.结果良性与恶性甲状腺疾病间hNIS mRNA表达量无显著差异（P＞0.05）,各组间亦无显著差异（P＞0.05）.4例颈部淋巴转移病灶其原发癌表达阳性,但只有2例转移灶表达阳性.结论hMSmRNA定量检测不能用于良恶性甲状腺疾病的鉴别.颈部转移淋巴中有部分未表达hNIS mRNA而原发灶有表达,其机理值得探讨.     

碘过量对哺乳期母鼠乳腺钠碘转运体mRNA和蛋白表达的影响

目的 观察碘过量对哺乳期母鼠乳腺钠碘转运体(sodium-iodide symporter,NIS)mRNA及蛋白表达的影响.方法 断乳1个月健康Wistar大鼠60只,雌雄比为2:1.将大鼠按体质量随机分为适碘组(30只)、10倍碘组(15只)、100倍碘组(15只),通过饮食(含碘300μg/ks)和饮水(含碘5、1845、20 295μg/L)摄碘.喂养3个月后交配产仔鼠,在哺乳第10天,采用砷铈催化分光光度法测定母鼠尿碘和乳汁碘.取母鼠乳腺,用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定NIS mRNA表达;用SABC法进行免疫组化染色观察NIS蛋白表达强度.结果 ①母鼠尿碘:适碘组344.7μg/L、10倍碘组3597.5μg/L、100倍碘组25 404.3μg/L,10倍碘组和100倍碘组分别是适碘组的10.4倍和73.7倍.②母鼠乳汁碘:适碘组6.0×103μg/L、10倍碘组27.1×103μg/L、100倍碘组191.0×103μg/L,10倍碘组和100倍碘组分别是适碘组的4.5倍和31.8倍,母鼠乳汁碘增加倍数低于尿碘.③母鼠乳腺NIS表达:NIS raRNA表达组间比较差异有统计学意义(F=24.19,P＜0.01);其中适碘组(1.532±0.044)较10倍碘组(1.250±0.034)、100倍碘组(1.272±0.039)明显增高(P＜0.01),而且哺乳期母鼠乳腺N1S mRNA表达(1.532±0.044)高于非哺乳期母鼠(0.879±0.018),二者比较差异有统计学意义(t=19.09,P＜0.01);母鼠乳腺NIS蛋白表达强度随碘摄入量增加而减弱.结论 过量碘摄入可抑制乳腺NISmRNA和蛋白表达,限制乳汁中的含碘量随碘摄入量增加的幅度,此机制对下一代有着重要的保护作用.     

钠碘转运体与甲状腺疾病

钠碘转运体(NIS)为甲状腺滤泡上皮细胞基底膜上的一类膜蛋白，主要作用是促进甲状腺逆浓度梯度转运无机碘，NIS受促甲状腺激素、碘、多种细胞因子及其他一些激素的调节。NIS与自身免疫性疾病、先天性甲状腺功能低下、甲状腺肿瘤的发生密切相关，对其进行深入研究对甲状腺疾病的治疗具有重要的临床价值。     

钠碘转运体在治疗甲状腺恶性肿瘤中的作用

大多数恶性甲状腺肿瘤摄取碘的能力显著降低。钠碘转运体（NIS）是一种能介导碘向细胞内转运的膜蛋白，可以配合放射性碘来治疗肿瘤，目前已经利用转基因技术使不表达或低表达NIS的甲状腺恶性肿瘤细胞表达NIS蛋白，同时发现甲状腺肿瘤细胞摄碘能力的下降不仅与NIS合成的量有关，而且与NIS是否能正确锚着密切相关。另外，当前研究努力的方向除促进NIS的表达和锚着。还要探索如何使肿瘤细胞摄入的碘能够在细胞内滞留足够长的时间以达到杀伤肿瘤的目的。     

碘对体外培养哺乳期乳腺细胞钠碘转运体表达的作用及肿瘤坏死因子α对其的影响

目的 观察不同碘营养水平时体外培养哺乳期乳腺细胞钠碘转运体(NIS)表达水平,以及肿瘤坏死因子α(TNF-α)对其的影响作用.方法 体外培养小鼠原代哺乳期乳腺细胞,分为低碘1组、低碘2组、适碘组、高碘1组、高碘2组,分别加入含碘0、5、50、3000、10 000μg/L的DEME/F12培养液培养24 h,然后部分换成含对应剂量的碘加TNF-α(10-2 mg/L)的DEME/F12培养液,继续培养24 h.用实时荧光定量PCR方法检测哺乳期乳腺细胞NIS mRNA表达水平,并用In-Cell Western方法检测NIS蛋白表达水平.结果 单纯加碘时低碘1组[(64.66±14.99)×10-4]乳腺细胞NIS mRNA表达水平高于适碘组[(22.76±7.36)×10-4,P＜0.05],高碘1组[(10.18±3.53)×10-4]、高碘2组[(8.59±2.89)×10-4]低于适碘组(P均＜0.05);随着碘剂量升高,乳腺细胞NIS mRNA表达水平呈下降趋势.在碘加TNF-α时,低碘1组、低碘2组、适碘组[(2.72±0.45)、(2.69±0.68)、(1.80±0.67)×10-4]乳腺细胞NIS mRNA表达水平低于单纯加碘时对应各组[(64.66±14.99)、(29.82±4.47)、(22.76±7.36)×10-4,P均＜0.05];高碘1组[(6.58±2.87)×10-4]、高碘2组[(7.04±.1.36)×10-4]高于适碘组(P均＜0.05);随着碘缺乏和碘过量程度加重,乳腺细胞NIS mRNA表达水平呈上升趋势.随着碘剂量升高,单纯加碘时乳腺细胞NIS蛋白表达水平呈下降趋势.碘加TNF-α时各组乳腺细胞NIS蛋白表达水平与单纯加碘时对应各组比较有降低的趋势.碘加TNF-α时,随着碘缺乏和碘过量程度加重,乳腺细胞NIS蛋白表达水平均呈上升趋势.结论 随着碘剂量升高,哺乳期乳腺细胞NIS mRNA和蛋白表达水平均呈下降趋势.TNF-α对不同碘营养水平下哺乳期乳腺细胞NIS mRNA和蛋白表达具有抑制作用.     

不同碘负荷对小鼠甲状腺钠碘转运体基因表达的影响

目的 旨在探讨不同碘负荷状态下钠碘转运体(NIS)基因表达的变化及其在甲状腺自身调节中的作用.方法 取断乳1月龄的Babl/c小鼠按碘摄入量不同分为低碘绀、正常碘组、5倍碘组、10倍碘组和50倍碘组,饲养3个月、6个月后处死动物.采用实时荧光定量PCR和免疫组化检测NIS mRNA和蛋白表达水平,采用过硫酸铵消化砷-铈催化分光光度法测定甲状腺组织碘含量,采用竞争结合放射免疫分析方法检测甲状腺组织激素水平.结果 与正常碘组比较.各月龄低碘组小鼠NIS mRNA和蛋白表达显著上调,NIS主要定位于细胞膜.具有运碘功能,甲状腺摄碘功能增强,但长期严重碘缺乏最终导致甲状腺组织中碘含量和甲状腺组织激素水平明显降低;各高碘组NIS mRNA和蛋白表达有所下降,呈现随碘摄入量增加表达逐渐减低的趋势,且NIS主要分布于胞浆内,不具备跨膜转运碘的能力.甲状腺摄碘能力显著下降,甲状腺组织中碘含量虽有所升高,但小与碘摄人成平行关系.结论 不同碘负荷状态下 NIS基因表达的调控可发生在转录、翻译和翻译后水平,NIS基因表达及其活性的调节是机体适应低碘、耐受高碘的一种重要保护机制,是甲状腺自身调节的关键所在.     

维甲酸对甲状腺癌细胞钠/碘转运体基因的调节作用

以RTPCR法检测维甲酸对甲状腺癌细胞钠/碘转运体(NIS)基因表达的影响,发现在5～50μmol/L的剂量区间,维甲酸能促进NIS基因表达,提示维甲酸在甲状腺癌及其转移灶的治疗中可能起到重要作用。     

TSH和高碘对FRTL细胞甲状腺激素合成相关基因表达的影响

目的观察不同浓度TSH和高碘对FRTL细胞钠/碘转运体(NIS)mRNA、甲状腺过氧化物酶(TPO)和甲状腺球蛋白(Tg)基因表达的影响。方法采用FRTL细胞系,用不含有TSH的培养基培养7d后,用不同水平TSH(0.1、0.5、1、10、50、100U/L)刺激。培养24h后,检测3种基因NIS、TPO、Tg的mRNA水平。高碘组按照10-7、10-6、10-5、10-4、10-3mol/L的碘离子浓度加入培养基,在第24和48小时,收集细胞,检测3种基因NIS、TPO、Tg的mRNA水平。结果TSH刺激24h后,FRTL细胞内NIS、TPO、Tg基因表达都伴随TSH水平的升高而上升。TSH从0.1U/L开始就对NIS基因表达增加有显著性影响(P<0.05),TSH对TPO基因表达的刺激从1U/L开始有显著性影响。TSH对Tg基因表达的作用从0.1U/L开始就有刺激作用(P<0.05)。高碘组对细胞这3种基因的表达没有刺激作用。结论TSH对FRTL细胞系产生甲状腺激素具有明显的刺激上调的作用。但高碘对该细胞3种基因的表达没有上调的作用。     

人钠/碘转运体基因G395R与先天性甲状腺功能减退症相关

先天性甲状腺功能减退症 5 2例和 10 6例健康婴幼儿 ,采用PCR RFLP技术对钠 /碘同向转运体 (hNIS)基因 3 95位点进行基因突变筛查。研究表明hNIS基因G3 95R突变可能不是青岛地区先天性甲状腺功能减退症发病的主要原因。     

碘缺乏和碘过量大鼠碘代谢及相关基因mRNA表达

目的 观察不同水平的碘摄人对大鼠碘代谢及相关基因表达的影响.方法 Wistar大鼠按体质量、性别随机分为低碘组(LI)、适碘组(NI)、5倍碘组(5HI)、10倍碘组(10HI)、50倍碘组(50HI)、100倍碘组(100HI),分别饮用含碘(碘化钾)量不同的水,饲养12个月后处死,采用RT-PCR及酸消化砷铈催化分光光度法检测甲状腺钠碘转运体(NIS)、氯碘转运体(PDS基因编码)mRNA的表达和尿碘、甲状腺组织含碘量.结果 LI组尿碘(0μg/L)、甲状腺组织含碘量[(0.01±0.00)mg/g]显著低于NI组[234.5 μg/L、(1.40±0.35)mg/g],组间比较差异有统计学意义(P＜0.01);5HI、10HI、50HI、100HI组尿碘呈成倍升高,甲状腺组织含碘量呈逐渐升高的趋势,均高于NI组(P＜0.01).LI组甲状腺NIS mRNA表达水平(1.15±0.16)明显高于NI组(1.11±0.21),组间比较差异有统计学意义(P＜0.01);5HI、10HI、50HI、100HI组呈逐渐下降趋势,与NI组比较差异有统计学意义(P＜0.01).PDS mRNA水平,LI组和5HI、10HI、50HI、100HI组均高于NI组,但仅LI组(1.38±0.39)、50HI组(1.10±0.30)和100HI组(1.02±0.50)与NI组(0.79±0.14)比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 大鼠对长期碘过量比碘缺乏有更强的耐受力,NIS mRNA的低表达是机体耐受碘过量的主要机制.碘过量可促进PDS mRNA的表达,这可能与碘过量时甲状腺组织含碘量增加,甲状腺球蛋白(Tg)发生过度碘化,进而诱发自身免疫反应增强的发病机制有关.