XPD基因多态性与慢性苯中毒发病风险的单纯病例研究

目的研究环境暴露因素与着色性干皮病基因D多态性对慢性苯中毒发生危险性的影响。方法以152例慢性苯中毒工人为研究对象,应用单纯病例方法进行分析。结果高接触组慢性苯中毒病人XPDc.312位点Asp/Asn+Asn/Asn基因型的携带率显著高于低接触组(44.7%vs12.2%,ORadj=7.14,95%CI:1.26~40.0,P=0.03);慢性苯中毒病人XPDc.751位点Lys/Gln基因型的携带率在吸烟*低接触组高于非吸烟*低接触组(60%vs12.8%,P<0.05),但在调整性别、工龄后差异无统计学意义。结论 XPDc.312位点的基因多态与高强度苯接触存在交互作用,影响到慢性苯中毒发生的危险性。     

hMTH1c.83及hOGG1c.326和hMYHc.335基因多态性与慢性苯中毒风险性的关系

目的 探讨hMTH1 Val83Met、hOGG1 Ser326Cys和hMYH His335Gln基因多态性与慢性苯中毒发病风险的关系.方法 采用病例对照设计,以152名苯中毒工人为病例组,152名接触苯而没有中毒表现的工人为对照组.应用聚合酶链反应-限制性片断长度多态性分析技术（PCR-RFLP）检测hMTH1c.83、hOGG1c.326和hMYH c.335位点的多态性.结果 携带hMTH1c.83Val/Met＋Met/Met和hOGG1 c.326 Cys/Cys基因型的个体发生慢性苯中毒的风险性分别是携带hMTH1c.83Val/Val和hOGG1c.326Ser/Cys＋Ser/Ser基因型个体的2.51倍（ORadj=2.51,95%CI：1.14～5.49,P=0.02）和2.49倍（ORadj=2.49,95%CI：1.52～4.07,P＜0.01）;相比于同时携带hOGG1c.326Cys/Cys和hMYHc.335His/His基因型的个体,同时携带hOGG1c.326Ser/Cys＋Ser/Ser和hMYHc.335His/Gln＋Gln/Gln两种基因型的个体有较低的慢性苯中毒发病风险（ORadj=0.33,95%CI=0.15～0.72,P=0.01）;在经常吸烟的人群中,携带hMYHc.335His/Gln＋Gln/Gln基因型的个体慢性苯中毒的发病风险较携带hMYHc.335His/His基因型的个体降低（ORadj=0.15,95%CI：0.03～0.68,P=0.01）.结论 hMTH1 Val83Met和hOGG1 Ser326Cys多态可能与个体慢性苯中毒的发病风险改变有关,而hOGG1 Ser326Cys和hMYHHis335Gln基因多态之间可能存在潜在的联合作用.     

GSTO基因多态性与燃煤污染型砷中毒易感性的关系

[目的]探讨GSTO基因多态性与燃煤污染型砷中毒易感性的关系.[方法]应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术检测130名燃煤型砷中毒患者和140名健康个体GSTO1 Ala140Asp和GSTO2Asn142Asp基因两个位点的多态性,并分析不同基因型与砷中毒发病风险的关系.[结果]病例组中携带GSTO2 142Asn/Asp Asp/Asp(杂合型 突变纯合型)基因型个体的比例显著高于对照组,携带该基因型的个体较携带GSTO2 142Asn/Asn(野生纯合型)基因型个体发生砷中毒的风险升高1.18倍(ORadj=1.18,95%CI:1.02～1.37);而病例组中携带GSTO1140Ala/Asp Asp/Asp(杂合型 突变纯合型)基因型个体的比例仅略高于对照组,差异无统计学意义(ORadj=0.98,95%CI:0.51～1.91);但同时携带GSTO1 140Ala/Asp Asp/Asp和GSTO2 142Asn/Asp Asp/Asp基因型的个体砷中毒的发病风险显著增加(ORadj=2.48,95%CI:1.14～5.40).[结论]携带GSTO2Asn142Asp基因型个体有较高的砷中毒发病风险;而同时携带GSTO1 140Ala/Asp Asp/Asp和GSTO2 142Asn/Asp Asp/Asp的个体可能更容易发生砷中毒.     

慢性苯中毒遗传易感与ERCC1基因多态性的病例对照研究

目的研究核苷酸切除修复交叉互补基因1(ERCC1)的SNP基因型和慢性苯中毒遗传易感性的关联,为建立慢性苯中毒易感人群的生物标志及其防治研究提供理论依据。方法采集病例组102名慢性苯中毒患者、对照组204名人员静脉血样,应用PCR法检测ERCC1Asn118Asn(rs11615)、C8092A(rs3212986)SNP位点基因型,分析基因多态位点和慢性苯中毒易感性是否有关,以比值比(odds ratio,OR)及其95%可信限(95%confidence interval,95%CI)表示关联强度。结果 ERCC1 Asn118Asn(rs11615)TT基因型可使慢性苯中毒发生风险增高(ORadj=3.251,95%CI=1.365~7.743,χ2=6.718,P=0.010),未发现ERCC1 C8092A(rs3212986)等位点与慢性苯中毒发生的关联。结论在相同的苯作业暴露环境下,携带ERCC1Asn118Asn(rs11615)TT基因型的个体发生慢性苯中毒的风险增高,ERCC1Asn118Asn(rs11615)多态可能作为慢性苯中毒发病危险性增加的生物学标志之一。     

XRCC1基因多态性与慢性苯中毒易感性关系探讨

目的　探讨X线修复交叉互补基因 1(XRCC1基因 )的多态性与慢性苯中毒易感性的关系。方法　采用病例 -对照设计 ,以 15 2名苯中毒工人为病例组 ,15 2名接触苯而没有中毒表现的工人为对照组 ,应用聚合酶链反应 -限制性片段长度多态性分析技术 (PCR RFLP)检测XRCC1基因c.194、c.2 80和c.399位点的多态。结果　病例组中携带XRCC1c.194Arg Trp +Trp Trp基因型的个体的比例显著低于对照组 ,而携带XRCC1c .2 80Arg His+His His基因型的个体的比例显著高于对照组 ;携带XRCC1c.194Arg Trp +Trp Trp基因型的个体发生苯中毒的危险性较携带XRCC1c .194Arg Arg基因型的个体降低 1 6 7倍 (ORadj=0 6 0 ,95 %CI:0 37～ 0 97,P =0 0 39) ,而携带XRCC1c.2 80Arg His+His His基因型的个体发生苯中毒的危险性是携带XRCC1c.2 80Arg Arg基因型个体的 1 91倍 (ORadj =1 91,95 %CI:1 17～ 3 10 ,P =0 0 0 9)。结论　携带有XRCC1c .194Arg Trp +Trp Trp基因型的个体有较低的慢性苯中毒发病风险 ,而携带有XRCC1c.2 80Arg His+His His基因型的个体发生慢性苯中毒的风险性可能增高     

APE1基因和ADPRT基因多态与慢性苯中毒易感性的关系

目的探讨脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶（APEl）和腺苷酸二磷酸核糖基转移酶（APDRT）的基因多态与慢性苯中毒易感性的关系.方法采用病例对照研究,以152名苯中毒工人为病例组,152名接触苯而无中毒表现的工人为对照组.应用创造酶切位点的限制性片断长度多态检测技术（CRS-RFLP）检测APE1基因Asp148Glu位点和ADPRT基因Val762Ala位点的多态性.结果APE1 Asp148Glu多态与ADPRT Val762Ala多态的各基因型在病例组和对照组的分布差异无统计学意义（P＞0.05）;携带APE1 Asp148Glu Asp/Asp基因型的饮酒个体比携带该基因型的不饮酒个体发生慢性苯中毒的危险性升高（OR=4.13,95% CI：1.07～15.85,P=0.03）;多因素Logistic回归分析提示,吸烟对慢性苯中毒发病风险具有一定的修饰作用（OR=0.33,95% CI：0.14～0.75,P=0.01）.结论APE1 Asp148Glu和ADPRT Val762Ala位点多态与慢性苯中毒的发病风险没有关系.饮酒与APE1 Asp148Glu多态可能存在联合作用,仍需进一步研究确定.     

XPD基因多态性与慢性苯中毒遗传易感性的相关性

目的探讨着色性干皮病基因D（XPD）基因多态性与慢性苯中毒遗传易感性的关系.方法采用病例-对照研究方法,以确诊并已脱离苯作业的80名慢性苯中毒患者为病例组,以同期接苯的62名苯作业工人为对照组,应用PCR-RFLP分析技术,检测XPD基因密码子156、312和751位点的多态性.结果校正性别、工龄、吸烟和饮酒等因素后,携带XPD 751Gln变异等位基因的个体发生慢性苯中毒的危险性升高,ORadj为2.903,95%CI：1.054～7.959,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论在相同苯作业暴露环境下,携带XPD 751Gln变异等位基因个体发生慢性苯中毒的危险性升高.     

细胞色素P450 1A1和2D6基因多态性与慢性苯中毒的危险性

目的 探讨细胞色素P450 1A1和2D6基因多态性与慢性苯中毒易感性的关系.方法 采用病例-对照研究,选择152名苯中毒工人为病例组,152名接触苯而无中毒表现的工人为对照组.采用限制性片段聚合酶链反应（PCR-RFLP）技术检测CYP1A1基因3＇端非编码区MspⅠ和CYP2D6第1外显子c.188位点、g.212位点多态性.结果 携带CYP1A1 MspⅠT/T基因型的个体发生苯中毒的危险性是携带有CYP1A1 Msp Ⅰ T/C或C/C基因型的个体的1.32倍（95%CI：1.05～1.65,P=0.02）;在不吸烟的人群中,携带CYP1A1 MspⅠ T/T基因型的个体发生苯中毒的风险性是携带T/C或C/C基因型的个体的1.56倍（95%CI：1.15～2.12,P=0.003）;携带有CYP2D6 c.188 C/C或C/T基因型个体发生苯中毒的危险性是携带有CYP2D6 c.188 T/T基因型的个体的1.23倍（95%CI：1.05～1.42,P=0.01）,在不吸烟的人群中,携带CYP2D6 c.188 C/C或C/T基因型个体发生苯中毒的危险性是携带有CYP2D6 c.188 T/T基因型的个体的1.23倍（95%CI：1.04～1.47,P=0.01）.未发现研究对象的CYP2D6g.212位点存在多态性.结论 携带CYP1A1 Msp ⅠT/T基因型、CYP2D6 c.188 C/C和C/T基因型个体对苯中毒可能易感.     

环氧化物水解酶基因多态性与慢性苯中毒易感性关系的研究

目的　探讨环氧化物水解酶 (mEH)的基因多态性和慢性苯中毒易感性的关系。方法　采用病例 -对照研究 ,以 15 2名苯中毒工人为病例组 ,15 2名接触苯而没有中毒表现的工人为对照组。应用多聚酶链反应 -限制性长度多态性分析技术 (PCR RFLP)检测mEH基因c .113和c.139位点的多态性。结果　携带mEHc .113C C基因型的个体发生苯中毒的危险性为携带有mEHc .113T T和T C基因型个体的 0 .6 0 (OR =0 .6 0 ,95 %CI:0 .37～ 0 .97,P =0 .0 4 ) ;在不吸烟的人群中 ,携带mEHc .113C C基因型的个体苯中毒的发病风险为携带T T和T C基因型的个体 0 .5 6 (OR =0 .5 6 ,95 %CI:0 .33～ 0 .96 ,P =0 .0 3) ;在不饮酒的人群中 ,携带有mEHc .113C C基因型又不饮酒的个体发生苯中毒的危险性为携带有mEHc .113T T和T C基因型的个体 0 .5 1(OR =0 .5 1,95 %CI:0 .30～ 0 .86 ,P =0 .0 1)。结论　携带有mEHc .113C C基因型 ,同时又不吸烟或不饮酒的个体发生慢性苯中毒危险性较低。     

毒物代谢酶基因多态性与职业性慢性苯中毒危险性的单纯病例研究

目的研究环境暴露因素与毒物代谢酶基因多态性对发生慢性苯中毒危险性的影响.方法以152例慢性苯中毒工人为研究对象,应用单纯病例方法进行分析.结果中等强度接触组慢性苯中毒工人GSTT1基因缺失突变的发生率明显高于低接触组,差异有显著性(68.63%vs38.00%,ORadj=4.32,95%CI1.75～10.66,p=0.002);NQO1 C.609T/T基因在饮酒组的比例明显高于不饮酒组,差异有显著性(61.11%vs20.00%,ORadi=8.03,95%CI 2.28～28.25,P=0.001),在吸烟又同时饮酒组的比例明显高于其他组,差异有显著性(85.71%vs22.76%,ORadj=18.62,95%CI2.01～172.72,P=0.01),在饮酒×接触等级组的比例明显高于非饮酒×接触等级组,差异有显著性(61.11%vs 20.00%,ORadj=3.18,95%CI 1.55～6.52,P=0.002);GSTM1基因缺失突变在饮酒×接触等级组的比例明显高于非饮酒×接触等级组,差异有显著性(66.67%vs47.06%,0Radj=1.99,95%CI 1.05～3.76,P=0.036).结论 GSTT1的基因多态与中等强度苯接触存在交互作用;不同强度的苯接触同饮酒一起与GSTM1基因缺失突变增加了个体发生慢性苯中毒的风险性;NQ01基因C.609位点的多态与饮酒存在交互作用,而吸烟*饮酒与NQO1基因多态的交互作用更是增加了苯中毒的风险性.     

某些同源重组修复基因多态性与慢性苯中毒风险性关系研究

目的 探讨X线修复交叉互补基因2(XRCC2)、X线修复交叉互补基因3(XRCC3)的基因多态性与慢性苯中毒发病风险的关系.方法采用病例对照设计,以152名苯中毒工人为病例组,152名接触苯而没有中毒表现的工人为对照组.应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析技术(PCR-RFLP)检测XRCC2c.188和XRCC3c.241位点的多态性.结果未检测到XRCC2c.188的突变基因型,XRCC3c.241基因各基因型在病例组和对照组间的分布差异无显著性.结论 XRCC2c.188和XRCC3c.241位点的多态性与慢性苯中毒的发病风险没有关系,它们其他位点的多态与慢性苯中毒易感性的关系需进一步研究确证.     

代谢酶基因多态性与慢性苯中毒关联的logistic回归与多因子降维法分析

目的 研究多种代谢酶基因多态性与慢性苯中毒的关联.方法 采用病例-对照研究,以152名苯中毒工人为病例组,152名接触苯而没有中毒表现的工人为对照组.应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)、测序等技术检测CYP2E1等13个基因的30个单核苷酸多态性(SNP).Logistic回归模型分析主效应和2阶交互作用,多因子降维法分析高阶交互作用.结果 logistic回归分析表明,控制了性别、吸烟、饮酒、苯接触强度的影响后,GSTP1 rs947894、CYP1A1rs4646903、CYP2D6 rs1065852、CYP2D6 rs1135840有主效应(P＜0.05).EPHX1 rs1051740可能有主效应(P=0.06).GSTP1 rs947894与饮酒有交互作用;CYP2E1 rs3813867和EPHX1 rs3738047无主效应,但有交互作用;EPHX1 rs3738047与饮酒也有交互作用.未发现其他SNP与慢性苯中毒的关联.多因子降维法模型发现了1个联合作用最强的3阶交互作用,即CYP1A1 rs4646903、CYP2D6 rs1065852、CYP2D6rs1135840的3因子组合.结论 基因-基因、基因-环境交互作用是影响个体慢性苯中毒遗传易感性的重要方式.

Abstract：

Objective To explore the association of polymorphisms of metabolizing enzyme genes with chronic benzene poisoning(CBP) comprehensively by case-control design. Methods 152 CBP patients and 152 workers occupationally exposed to benzene without poisoning manifestations were investigated. 30single nucleotide polymorphisms (SNPs) in 13 genes such as CYP2E1 were tested by PCR-RFLP, sequencing approaches. Logistic regression model was used to detect main effects and 2-order interaction effects of gene and/or environment. Multifactor dimensionality reduction (MDR) was used to detect high-order gene-gene or gene-environment interactions. Results Based on logistic regression, the main effects of G57P7rs947894,EPHX1 rs1051740, CYP1A1 rs4646903, CYP2D6 rs1065852 and rs1135840 were found to be significant (P＜0.05) while the confounding factors of sex, cigarette smoking, alcohol consumption and the intensity of benzene exposure were controlled. EPHX1 rs1051740 might be associated with CBP (P=0.06). There existed 3types of interactions were as followed: interactions of GSTP1 rs947894 with alcohol consumption, CYP2E1rs3813867 with EPHX1 rs3738047, EPHX1 rs3738047 with alcohol consumption(P＜0.05), while the main effects of CYP2E1 rs3813867 and EPHX1 rs3738047 were not significant (P＞0.05). The other SNPs did not show any significant associations with CBP. According to MDR, a 3-order interaction with the strongest combined effect was found, i.e. the 3-factor combination of CYP1A1 rs4646903, CYP2D6 rs1065852 and CYP2D6rs1135840. Conclusion Gene-gene, gene-environment interactions are important mechanism to genetic susceptibility of CBP.     

修复基因XRCC1、XPD和XRCC3多态性与苯致DNA损伤修复能力关系的研究

目的探讨XRCC1、XPD、XRCC3基因多态性与苯致DNA损伤修复能力的关系。方法以确诊并已脱离苯作业的80名慢性苯中毒患者作为病例组,以同期接苯的62名苯作业工人为对照组,应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)分析技术,检测XRCC1 C26304T(Arg194Trp)、G27466A(Arg280His)、G28152A(Arg399Gln)、G36189A(Gln632Gln)和XPD C22541A(Arg156Arg)、C23591T(Asp312Asn)、A35931C(Lys751Gln)以及XRCC3 C18067T(Thr241Met)位点的多态性,采用细胞阻滞微核试验和碱性彗星试验分别从细胞水平和分子水平检测DNA修复能力。结果携带XPD35931 AC+CC变异基因型的个体、携带XPCC318067C/T变异基因型的个体均比携带相应野生基因型个体的苯致DNA损伤修复能力强。结论     

细胞色素CYP1A1基因多态与慢性苯中毒遗传易感性

目的探讨细胞色素CYP1A1酶的基因多态与慢性苯中毒遗传易感性的关系。方法采用病例对照设计,以268名苯中毒工人为病例组,268名接触苯而无中毒表现的工人为对照组。应用TaqManPCR分析技术检测CYP1A1基因rs1048943,rs4646421,rs4646422和rs4646903共4个SNPs位点。结果CYP1A1基因rs1048943,rs4646421,rs4646422和rs46469034的不同基因型在病例组和对照组间的分布差异无统计学意义(P>0.05);单倍型分析显示,病例组中携带CYP1A1基因Hap5(rs4646421-T、rs4646422-G、rs1048943-A和rs4646903-C)单倍型个体的比例显著低于对照组(14.18%vs.19.40%),携带此单倍型的个体慢性苯中毒的发病风险是携带Hap1(rs4646421-C、rs4646422-G、rs1048943-A和rs4646903-T)单倍型个体的0.708倍(OR=0.708,95%CI:0.503~0.998,P=0.048)。多因素Logistic回归分析提示,吸烟对慢性苯中毒发病风险具有一定的修饰作用(OR=0.19,95%CI:0.07~0.57,P=0.003)。结论该研究人群携带CYP1A1基因Hap5单倍型个体可降低慢性苯中毒的发病风险,但CYP1A1基因多态与慢性苯中毒的遗传易感性的相关关系仍需进一步研究。     

NQO1和GSTT1基因多态性与慢性苯中毒的危险性

目的 探讨NQO1和GSTT1的基因多态性和苯中毒易感性的关系。方法 采用病例－对照研究，以152名苯中毒工人为病例组，152名接触苯而没有中毒表现的工人为对照组。采用名聚酶链反应（PCR）、变性高效液相色谱（DHPLC）和测序检测NQO1基因的启动子和全部编码区的单核苷酸多态性（single mucleotide polymorphism,SNP)，以多重PCR检测GSTT1的基因型。结果 在经常吸烟的人群中，携带NQO1c.609T/T基因型的个体接触苯时发生慢性苯中毒的危险性是C／C和C／T基因型的7．73倍（95％CI：1．71－34．97，P＝0．010）。在经常饮酒的人群中，携带NQO1第6外显子T／T突变纯合子的个体在接触苯时发生慢性苯中毒的危险性是C／C和C／T基因型的11．00倍（95％CI：1．89－63．83，P=0．005）。结论 携带NQO1c.609T/T基因型而又同时吸烟或饮酒的个体对苯中毒可能易感。     

氯乙烯致DNA损伤的遗传易感性研究

目的 探讨氯乙烯(VCM)致DNA损伤与DNA修复基因和代谢酶基因多态性的关系.方法 彗星试验检测DNA损伤,并按DNA损伤情况将接触VCM的研究对象分为DNA损伤组(75人),采用病例对照设计方法选择对照组(75人),用聚合酶链反应-限制性酶切片段多态性技术(PCR-RFLP)和PCR测XRCC1(Arg194Trp,Arg280His和Arg399Gln)、XPD(Ile199Met,Asp312Asn和Lys751Gln)和代谢酶(CYP2E1、GSTT1和GSTM1)基因多态性.结果 单因素分析结果表明,CYP2E1c1c2、c2c2和XPD 751 Lys/Gln、Gln/Gln基因犁携带者DNA损伤风险明显增高,而XRCC1 399 Arg/Gln、Gln/Gln基因型携带者DNA损伤风险明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01).logistic回归分析发现,XRCC1 194、XRCC1 399、XPD751和CYP2E1多态与DNA损伤有关.累积接触剂量分析表明,具XRCC1 399Arg/Gln、Gln/Gln基因型个体即使在累积接触剂量高的情况下DNA损伤发生率仍明显降低(OR:0.35,95%CI:0.12～1.01);具CYP2E1 c1/c2、c2/c2基因型个体,无论累积接触剂量高低,其DNA损伤发生率均明显高于对照(OR:2.57,95%CI:1.01～6.59和OR:2.57,95%CI:0.99～6.87).结论 VCM累积接触剂量和CYP2E1、XRCC1 194、XRCC1 399及XPD751基因型与VCM诱导的DNA损伤有关.