2型糖尿病患者外周血单个核细胞过氧化物酶体脂肪酸β氧化活性变化的研究

目的探讨2型糖尿病（T2DM）患者脂代谢紊乱状态下过氧化物酶体脂肪酸β氧化活性的变化。方法分析112例T2DM患者外周血单个核细胞过氧化物酶体脂肪酸β氧化活性、脂肪乙酰辅酶A氧化酶活性及其mRNA表达变化。测定FPG、TC、TG、HDL-C、LDLC。结果T2DM患者过氧化物酶体脂肪酸β氧化代偿性加强，与正常对照组相比，脂肪乙酰辅酶A氧化酶活性、过氧化物酶体脂肪酸β氧化活性增加；并且T2DM组过氧化物酶体脂肪酸β氧化的活性与其血清TG、HDL-C、LDL-C之间有直线相关关系。结论脂肪酸β氧化和脂肪乙酰辅酶A氧化酶的活性增加，导致H2O2浓度的升高，这可能是糖尿病心血管并发症发病的原因之一。     

二十烷酸对大鼠皮质神经元Aβ生成的影响及激活过氧化物酶体增殖剂激活受体α的干预作用

目的 观察二十烷酸(EA)对神经元Aβ生成途径的影响及激活过氧化物酶体增殖剂激活受体α(PPARα)的干预作用.方法 将原代培养的大鼠皮质神经元分为3组:对照组、EA组、EA+ Wy14 643组.EHSA法检测培养液中Aβ含量,Western印迹法检测神经元β-淀粉样前体蛋白(APP)、β-分泌酶(BACE1)蛋白表达,RT-PCR法分析脂酰辅酶A氧化酶(ACOX1)mRNA表达.结果 EA组细胞APP、BACE1蛋白表达及Aβ生成增多(P ＜0.01,P＜0.05),ACOX1 mRNA表达加强(P＜0.05);应用PPARα激活剂Wy14 643干预后,ACOX1 mRNA表达进一步加强(P＜0.05),细胞APP、BACE1蛋白表达及Aβ生成减少(P＜0.01,P＜0.05).结论 饱和脂肪酸可能通过促进Aβ生成在AD发病机制中起重要作用,激活PPARα有效降低了饱和脂肪酸所致的Aβ生成.     

运动对高脂饮食诱导肥胖大鼠过氧化物酶体增长因子活化受体-δ表达和胰岛素抵抗的影响

研究运动对高脂饮食诱导的肥胖大鼠肌肉和脂肪组织中过氧化物酶体增长因子活化受体-δ（PPAR-δ）表达的影响,并探讨其改善胰岛素抵抗的可能机制.方法 取体质量135～150 g的9周龄雄性Wistar大鼠80只,随机数字表法取其中60只6周时间饲以高脂饲料用于制作肥胖大鼠模型,另20只饲以普通饲料.将54只造模成功肥胖大鼠随机分为高脂饮食组（HFD）、高脂饮食同时运动组（E-HFD）、高脂饮食后运动组（HFD-E）,每组18只,同时从普通饲料饲养大鼠中随机选择16只作为正常饮食组（RD）.按文献标准对各组大鼠进行6周运动训练.检测比较各组游泳运动训练后体质量、肿瘤坏死因子（TNF）-α、瘦素、白细胞介素（IL）-1的水平以及空腹血糖、空腹胰岛素并计算胰岛素敏感指数（ISI）,采用实时定量聚合酶链反应（RT-PCR）检测肌肉和脂肪组织中PPAR-δ、葡萄糖转运蛋白（GLUT）-4、磷酸肌醇3激酶（PI3K）mRNA的表达,并采用Western blot法检测肌肉和脂肪组织中PPAR-δ蛋白的表达水平.组间数据比较采用双侧t检验.结果 HFD组ISI为1.13±0.21,相比HFD组,E-HFD组和HFD-E组的IS1分别提高了 71.1%和45.7%（分别为2.09±0.32和1.80±0.34）,而HFD-E组低于E-HFD组,差异均有统计学意义（均P＜0.05）.HFD组TNF-α水平为（101±24）ng/L,相比HFD组,E-HFD组和HFD-E组则分别下降了20.0%和9.2%[分别为（81±16）和（92±19）ng/L],差异均有统计学意义（P＜0.05）.与HFD组相比,E-HFD组和HFD-E组瘦素和IL-I水平均有显著下降（均P＜0.05）.与HFD组相比,E-HFD组和HFD-E组骨骼肌和脂肪中PPAR-δ、GLUT-4、PI3K mRNA的表达均显著升高,差异均有统计学意义（均P＜0.05）,且在E-HFD组变化尤为显著（均P＜0.01）.与HFD组相比,E-HFD组骨骼肌和脂肪组织中PPAR-δ蛋白表达分别升高了388.4%和203.2%（均P＜0.05）;HFD-E组骨骼肌和脂肪组织中PPAR-δ蛋白的表达则分别升高了272.9%和117.9%（均P＜0.05）.结论 运动降低了高脂饮食诱导的肥胖大鼠的血清脂肪因子瘦素、TNF-α和IL-1水平,改善了胰岛素抵抗,可能是通过上调肌肉和脂肪组织中PPAR-δ的表达发挥作用.     

高糖、高饱和脂肪酸及高不饱和脂肪酸饮食对老年大鼠胰岛素抵抗的影响

目的 探讨不同类型高脂肪酸及高糖饮食对老年大鼠胰岛素抵抗（IR）的影响。方法 用高不饱和脂肪酸（HUFA），高饱和脂肪酸（HSFA），高糖（HS）饲料饲养大鼠24w，观察体重（BW）、总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、空腹血糖（FBG）、空腹胰岛素（FINS）、游离脂肪酸（FFA）的变化，并以正常血糖高胰岛素钳夹技术的葡萄糖输注率（GIR）对大鼠IR进行评价。结果 12w和24w GIR在不同实验组间出现显著差异（均P〈0.01），HSFA组GIR最低，24w时HUFA组、HSFA组、HS组及对照组（NC组）GIR与0w相比分别下降51.6％、52.1％、34.2％、26.4％。各实验组BW、TG、TC、FFA、FBG、FINS与NC组相比有不同程度升高，经多元回归分析，GIR与FFA、TG呈显著负相关（均P〈0.01）。结论 HUFA、HSFA和HS饮食长期摄入均可诱导大鼠IR；TG及FFA的升高与IR的形成有明显相关；随月龄增长大鼠的GIR有显著下降趋势，但饮食结构的影响更重要。     

过氧化物酶体增殖物激活受体β在老龄脓毒血症大鼠肺部炎症中的作用

目的探讨激活过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)-β对老龄脓毒血症大鼠模型肺部炎症、炎症指标及死亡率的影响。方法选用24月龄雄性SD大鼠,通过盲肠结扎穿孔(CLP)手术建立脓毒血症模型,予GW501516 0.25、0.75 mg/kg为低、高剂量组。分别液体复苏CLP术后大鼠,与空白对照组、单纯CLP手术组比较24、48 h死亡率,运用HE染色、免疫组化染色及RT-PCR等方法了解肺组织中PPAR-β及Akt-1、核转录因子(NF)-κB、白细胞介素(IL)-6的表达。结果 (1)24 h死亡率:单纯手术组42.1%,低剂量组10%,高剂量组20%;48 h死亡率:单纯手术组27.3%,低剂量组16.7%,高剂量组50%。(2)RT-PCR:CLP术后24 h PPAR-β表达下调,使用GW501516后上调PPAR-β表达。CLP手术打击可上调IL-6、NF-κB炎症因子表达量,使用GW501516后IL-6、NF-κB表达量下调,Akt-1表达量上调。(3)HE染色:CLP手术打击后肺组织中大量炎性细胞浸润、肺间质水肿充血,GW501516处理组肺部炎性细胞浸润、间质水肿减轻。(4)免疫组化:使用GW501516后肺组织中PPAR-β阳性细胞增多。结论低剂量GW501516(0.25 mg/kg)可降低脓毒血症老龄大鼠早期死亡率,其机制与激活Akt-1、下调NF-κB有关。     

老年糖尿病肾病患者血清内转化生长因子-β1和过氧化物酶体增殖物活化受体-γ表达水平

目的通过检测糖尿病肾病(DN)患者血清转化生长因子(TGF)-β1和过氧化物酶体增殖物活化受体(PPAR)-γ的蛋白含量及mRNA变化水平,探讨二者是否参与DN的发病进程。方法 DN患者50例作为DN组,同期体检健康老年人50例作为对照组。两组均清晨空腹取血,采用酶联免疫吸附(ELISA)实验和实时聚合酶链反应(RT-PCR)法检测血清中TGF-β1和PPAR-γ的蛋白及mRNA水平。结果与对照组比较,DN组血清中TGF-β1的蛋白含量及mRNA水平明显升高(P0.01)、PPAR-γ的蛋白含量及mRNA水平明显降低(P0.01),且TGF-β1和PPAR-γ具有负相关性(r=-0.689,P=0.042;r=-0.711,P=0.036)。结论 TGF-β1水平的上调和PPAR-γ水平的下调及二者具有明显负相关性,说明可能参与了DN的发病进程。     

不同脂肪酸饮食导致大鼠肝脏脂代谢紊乱的实验研究

目的探讨不同类型高脂肪酸饮食对大鼠肝脏过氧化物酶体脂肪酸β-氧化的影响。方法用高不饱和和高饱和脂肪酸饮食饲养大鼠24w，观察体重（BW），血清总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、游离脂肪酸（FFA），肝脏过氧化氢酶、脂酰CoA氧化酶和过氧化物酶体脂肪酸β-氧化活性的变化及肝脏超微结构的改变。结果各实验组血清BW、TG、TC、FFA较对照组有不同程度升高（P〈0．01）。各实验组大鼠肝脏过氧化氢酶、过氧化物酶体脂肪酸β-氧化、脂酰CoA氧化酶活性较对照组明显升高（P〈0．05，P〈0．01）。24w后高脂饮食组大鼠肝细胞内有数量不等的脂滴储积。结论高不饱和脂肪酸、高饱和脂肪酸饮食长期摄入可导致大鼠脂质代谢紊乱，肝脏中的过氧化氢酶、脂酰CoA氧化酶和过氧化物酶体脂肪酸β-氧化的活性升高。     

丹芍化纤胶囊抗肝纤维化治疗对大鼠过氧化物酶体增殖物激活受体-γ表达的影响

过氧化物酶体增殖物激活受体-γ（PPAR-γ）是调节脂质代谢的重要因子，越来越多的研究显示，它在肝纤维化进程中也有不可低估的作用。HSC是肝纤维化形成过程中的重要细胞。我们观察了解CCl4中毒性肝纤维化大鼠肝脏组织PPAR-γ和α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达及其在中药复方制剂丹芍化纤胶囊抗肝纤维化治疗后的变化。[第一段]     

过氧化物酶体增殖物激活受体γ激动剂对TGF-β1诱导肾成纤维细胞细胞外基质表达的影响

目的:研究过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)激动剂对转化生长因子β1(TGF-β1)致肾间质纤维化作用的影响,探讨其抗肾间质纤维化的潜在作用.方法:体外培养大鼠肾成纤维细胞株(NRK/49F),利用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)观察PPARγ配体15d-PGJ2及其激动剂曲格列酮和齐格列酮对TGF-β1诱导的α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、结缔组织生长因子(CTGF)、纤维连结蛋白(FN)和Ⅲ型胶原(ColⅢ)mRNA表达的影响,利用Western Blot方法观察PPARγ激动剂对TGF-β1诱导的FN蛋白表达的影响.结果:TGF-β1能显著增加NRK/49F细胞CTGF、FN和ColⅢmRNA表达,并呈剂量依赖和时间依赖效应.与TGF-β1刺激组相比,10 μM 15d-PGJ2、曲格列酮和齐格列酮预处理组α-SMA、CTGF、FN和ColⅢmRNA表达量显著减少,FN蛋白表达量显著下降.结论:PPARγ激动剂可抑制TGF-β1诱导的肾间质成纤维细胞CTGF表达和细胞外基质(ECM)合成.     

非诺贝特对胰岛素抵抗大鼠肝脏脂肪酸氧化的影响

目的观察自发胰岛素抵抗的OLETF大鼠肝脏脂肪酸氧化代谢的异常以及非诺贝特对其的影响。方法以8周龄LETO大鼠为正常对照,将同周龄OLETF大鼠随机分为未治疗组和治疗组[非诺贝特20ms／（kg·d）],于17周龄及30周龄分批处死动物,使用实时定量RT－PCR法测定肝脏组织脂肪酸氧化相关基因过氧化物酶体增生物激活受体－α（PPAR－α）、丙二酰辅酶A脱羧酶（MCD）、脂酰辅酶A氧化酶（AOX）mRNA的表达。结果与唧0大鼠相比,未治疗组8周龄大鼠首先出现糖负荷后2h游离脂肪酸（FFA）水平升高（P〈0．05）,17周龄出现空腹FFA以及血糖、胰岛素水平的升高;30周龄时肝脏组织PPAR-α、MCD、AOXmRNA表达均下调,甘油三酯含量升高（P均〈0．01）。治疗组空腹FFA水平明显降低,肝组织PPAR-α、MCD、AOXmRNA表达上调,肝组织甘油三酯含量下降（P均〈0．05）。结论非诺贝特可使OLETF大鼠肝脏脂肪含量下降,这可能与其降低血清FFA水平及上调肝脏组织与脂肪酸氧化相关酶的基因表达有关。     

过氧化物酶增殖体激活受体β对急性肺损伤大鼠肺组织细胞凋亡的作用机制及影响

目的探讨过氧化物酶增殖体激活受体β(PPARβ)在急性肺损伤(ALI)发生发展中对肺组织细胞凋亡可能的作用机制,以期从新的视角揭示ALI的发病机理,并为ALI的防治提供新的理论基础。方法参照Cainazzo et al.方法复制失血性休克大鼠ALI模型,测定动脉血氧分压(PaO2)、肺泡灌洗液(BALF)及肺组织细胞凋亡率、计算肺组织湿/干重(W/D)值、病理形态学检查。采用PPARβ的激动剂对大鼠ALI模型进行干预,观察其对失血性休克ALI大鼠的BALF细胞和肺组织细胞凋亡的影响。结果应用PPARβ的激动剂后大鼠的PaO2较对照组显著升高(P0.05),BALF及肺组织细胞凋亡率、W/D值、肺组织病理学积分均较对照组显著降低(P0.05)。结论 PPARβ的激动剂对ALI肺组织有一定程度的保护作用,其作用机制是通过抑制炎症反应,减少炎性介质分泌,促进炎症细胞凋亡及减少肺组织细胞凋亡实现的。     

过氧化物酶体增殖物激活受体-γ及其配体在大鼠气道黏液高分泌中的作用

目的 探讨过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(PPAR-γ)及其配体对气道黏液高分泌的作用及其机制.方法 应用随机数字表法将36只SD大鼠随机分为4组,其中生理盐水对照组(6只)雾化吸入生理盐水;罗格列酮对照组(6只)雾化吸入生理盐水,同时给予罗格列酮8 mg/kg灌胃;丙烯醛组(6只)雾化吸入丙烯醛3.0 mg/L,6 h/d,连续12 d;罗格列酮干预组根据不同剂量又分为低、中、高剂最组,每组各6只,在雾化吸入丙烯醛的同时分别给予2、4和8 mg/kg罗格列酮灌胃.采用HE染色及阿辛蓝-过碘酸雪夫染色法观察支气管肺组织的病理改变和气道黏液物质改变,应用实时荧光定量逆转录-PCR及免疫组织化学SP法检测黏蛋白5AC和PPAR-γ的表达水平.组间比较采用方差分析,两组比较采用q检验,相关性分析采用Pearson法.结果 丙烯醛组、生理盐水对照组及低、中、高剂量罗格列酮干预组气道黏液物质的相对着色而积分别为(60.2±9.3)%、(4.9±1.0)%、(53.3±8.5)%、(26.5±7.4)%和(12.5±3.7)%,组间比较差异有统计学意义(F=93.80,P＜0.01).黏蛋白5AC蛋白在丙烯醛组、生理盐水对照组及低、中、高剂量罗格列酮干预组表达的积分吸光度值分别为4339±453、1636±282、3996±346、3048±331和2376±343,组间比较差异有统计学意义(F=67.74,P＜0.01);PPAR-γ蛋白表达的积分吸光度值分别为1159±184、838±151、1272±189、1568±282和1872±270,组间比较差异有统计学意义(F=21.53,P＜0.01).丙烯醛组、生理盐水对照组及低、中、高剂量罗格列酮干预组黏蛋白5AC mRNA表达的相对拷贝数分别为35.3±10.0、2.2±0.7、30.5±10.2、18.6±5.3和10.8±2.6,组问比较差异有统计学意义(F=29.67,P＜0.01);PPAR-γ mRNA的相对拷贝数分别为7.8±1.9、2.0±0.6、9.8±2.8、18.6±5.3和31.6±8.9,组间比较差异有统计学意义(F=39.47,P＜0.01).丙烯醛组PPAR-γ蛋白水平与黏蛋白5AC mRNA表达呈负相关(r=-0.880,P＜0.01).结论 丙烯醛致气道黏液高分泌过程与PPAR-γ表达异常有关;PPAR-γ及其配体罗格列酮可以抑制丙烯醛诱导的气道黏液高分泌,其具体机制可能与下调黏蛋白5AC的表达有关.     

过氧化物酶体增殖物激活受体α的激活可以减轻高糖高脂诱导的心肌细胞凋亡

目的 探讨激活过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα)对高糖高脂诱导的心肌细胞凋亡的影响.方法 将培养的心肌细胞分为:1)正常组(N组);2)高糖高脂组(H组);3)高糖高脂 PPARα特异性激动剂匹尼尼酸(Wy14643)组(S组).TUNEL法检测细胞凋亡,免疫细胞化学法检测各组细胞PPARα蛋白的表达.结果 H组凋亡细胞较N组增多[(71.34±0.01)% vs (2.50±0.01)%,P＜0.01];H组PPARα蛋白表达下降(0.08±0.02),与N组(0.12±0.02)比较,P＜0.01;PPARα激活剂匹尼尼酸可抑制高糖高脂引起的心肌细胞凋亡,同时伴有培养液中 PPARα蛋白的表达增高(0.16±0.0119 vs 0.08±0.02,P＜0.01).结论 胞核PPARα的表达增高可抑制高糖高脂培养的心肌细胞凋亡,有可能参与机体对高糖高脂血症的自我保护过程.     

过氧化物酶体增殖物活化受体γ与糖脂代谢

过氧化物酶体增殖物活化受体(PPAR)属于核受体超家族一员,与其他甾体类激素受体一样,也是配体激活的转录因子.2型糖尿病与肥胖等代谢性疾病严重影响人类的健康,噻唑烷二酮类(TZDs)药物作为PPAR的激动剂,在脂肪细胞分化、糖脂代谢、胰岛素抵抗中起重要作用.PPAR的常见基因多态性与2型糖尿病、肥胖、脂代谢异常等有关,现仅就PPARγ与糖脂代谢的关系综述如下.     

过氧化物酶体增殖物激活受体α的激活可以减轻高糖高脂诱导的心肌细胞凋亡

目的探讨激活过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα)对高糖高脂诱导的心肌细胞凋亡的影响。方法将培养的心肌细胞分为:1)正常组(N组);2)高糖高脂组(H组);3)高糖高脂 PPARα特异性激动剂匹尼尼酸(Wy14643)组(S组)。TUNEL法检测细胞凋亡,免疫细胞化学法检测各组细胞PPARα蛋白的表达。结果H组凋亡细胞较N组增多[(71.34±0.01)%vs(2.50±0.01)%,P<0.01];H组PPARα蛋白表达下降(0.08±0.02),与N组(0.12±0.02)比较,P<0.01;PPARα激活剂匹尼尼酸可抑制高糖高脂引起的心肌细胞凋亡,同时伴有培养液中PPARα蛋白的表达增高(0.16±0.0119vs0.08±0.02,P<0.01)。结论胞核PPARα的表达增高可抑制高糖高脂培养的心肌细胞凋亡,有可能参与机体对高糖高脂血症的自我保护过程。     

过氧化物酶体增殖物激活受体-γ与血管增生

过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)-γ是配体依赖激活核受体超家族中的成员之一,可以在全身包括脂肪、肝脏、肾脏以及肿瘤等多种组织中表达,发挥抗炎症、抗肿瘤和抗增生等多种生物学效应。本文主要就PPAR-γ与血管增生关系进行综述。     

冠状动脉病变与过氧化物酶体增殖体激活受体γ和基质金属蛋白酶-9的关系

目的通过检测冠心病患者核转录因子过氧化物酶体增殖体激活受体γ(PPARγ) mRNA表达和血浆基质金属蛋白酶-9(MMP-9)水平,探讨PPARγ对冠心病的影响。方法经冠状动脉造影确诊的冠心病患者(冠心病组)153例,RT-PCR法测定外周血中PPARγmRNA表达,ELISA法检测血浆中MMP-9含量,并对冠状动脉病变程度进行分型,分析PPARγmRNA表达、MMP-9与冠状动脉病变程度的相关性。结果冠心病组PPARγmRNA表达(0．40±0．12)与对照组(0．62±0．13)比较显著降低；冠心病组MMP-9为(1．27±0．16)μg/L,与对照组[(1．21±0．05)μg/L]比较明显增加(P＜0．01)。冠心病组中急性冠状动脉综合征患者PPARγ为(0．50±0．05),较稳定性心绞痛(0．50±0．11)降低,MMP-9分别为(1．38±0．14)、(1．25±0．07)μg/L,P＜0．01。PPARγmRNA表达分别与冠状动脉病变支数(r=-0．42,P＜0．01)、病变类型(r=-0．56,P＜0．01)呈负相关,MMP-9水平则与病变支数(r=0．30,P＜0．01)、病变类型(r=0．36,P＜0．01)呈正相关；PPARγmRNA表达和MMP-9水平呈负相关。结论MMP-9对急性冠状动脉综合征患者不稳定斑块有促进作用,PPARγ具有抑制MMP-9的作用,提示通过激活PPARγmRNA表达和降低MMP-9水平对冠心病高危人群具有保护作用。     

胰腺癌中过氧化物酶体增生激活受体和泛素-蛋白酶体系统的相关致癌机制

胰腺癌是人类癌症中最致命的种类之一。虽然肿瘤学在很多种癌症中取得了很大成就,但胰腺癌取得的进步很小,而且预后不容乐观。几个经常在胰腺癌中被定义并且变异的分子包括K-RAS、P53、P16和DPC4。过氧化物酶体增生激活受体(PPARy)在许多肿瘤中都起作用,而且在胰腺癌中过度表达,它跟NF-κB类似,具有肿瘤抑制作用和对抗一般蛋白质的致癌作用。调节通路是由泛素-蛋白酶体系统(UPS)完成并参与胰腺癌发生发展。本文将研究PPARy和核受体的UPS在胰腺致癌机制中的关系。     

过氧化物酶体增殖物活化受体-γ与库欣病的治疗

手术切除垂体促肾上腺皮质激素（ACTH）肿瘤是库欣病的最佳治疗手段,但长期的治愈率并不令人满意。过氧化物酶体增殖物活化受体-γ在人垂体ACTH瘤上的大量表达使之成为库欣病药物治疗的新靶点。其激动剂如噻唑烷二酮类药物在离体试验中促进垂体ACTH肿瘤细胞的凋亡,抑制小鼠ACTH肿瘤的生长,降低血ACTH及皮质醇的分泌,同时改善代谢紊乱。但在临床研究中噻唑烷二酮类药物对库欣病患者的疗效尚不肯定,仍需进一步验证。