高效液相色谱法测定盐酸氨溴索及其片剂含量

 目的：建立盐酸氨溴索的HPLC测定方法。方法：色谱柱为迪马公司Diamonsil(tm) C₁₈柱（5 μm，250 mm×4.6 mm）；流动相为乙腈-水-浓氨溶液-磷酸（30∶70∶0.10∶0.08，pH=3.0）；检测波长：244 nm；柱温25℃；流速0.6 mL·min^-1。结果：精密度及稳定性均良好；在5.92～53.3 mg·L^-1 的范围内, 峰面积与浓度呈良好的线性关系，r=0.9999（n=6），平均回收率为100.6%，RSD为0.9%。结论：本方法简便、 快速、准确、重现性好，可用于盐酸氨溴索原料及其制剂的含量测定。     

高效液相色谱法测定丙戊酸钠片剂的含量

 目的：建立高效液相色谱法测定丙戊酸钠片剂含量的方法。方法：采用反相C₁₈色谱柱，以甲醇-缓冲液（5 mmol·L^-1四丁基氢氧化铵，20 mmol·L^-1磷酸二氢钾）（75∶25）为流动相，检测波长为213 nm ，按峰面积计算。结果：丙戊酸钠在25～250 μg·ml^-1浓度范围内线性关系良好（γ=0.9998）。平均回收率为100.2%，RSD为0.54%，日内平均RSD为1.2%；日间平均RSD为1.3%。结论：该法操作简便、快速、重现性好、结果准确的优点，具有一定的实用意义。     

气相色谱法测定扎来普隆中二氯甲烷和N,N-二甲基甲酰胺的残留量

 目的建立毛细管气相色谱法测定扎来普隆中二氯甲烷和N,N-二甲基甲酰胺的残留量。方法采用DB-624熔融石英毛细管柱(30 m×0.32 mm,1.8μm);载气:氮气;分流比:60∶1。二氯甲烷的测定:以N,N-二甲基甲酰胺为溶剂;氯仿为内标;柱温:40℃,保持15 min,以40℃·min^-1的速率升温至180℃,保持10 min;气化室温度:180℃;检测器温度:200℃(FID)。N,N-二甲基甲酰胺的测定:以二氯甲烷为溶剂;甲苯为内标;柱温:85℃;气化室温度:200℃;检测器温度:200℃(FID)。结果二氯甲烷在15.02～150.2 mg·L^-1内线性关系良好,r=0.999 7(n=5),最低检出限为4.5 mg·L^-1,连续进样精密度RSD为1.8%,回收率为99.48%(RSD=0.9%)。N,N-二甲基甲酰胺在22.02～264.2 mg·L^-1内线性关系良好,r=0.999 7(n=5),最低检出限为4.4 mg·L^-1,连续进样精密度RSD为1.2%,回收率为99.55%(RSD=2.7%)。结论本方法可用于测定扎来普隆中二氯甲烷和N,N-二甲基甲酰胺的残留量。     

高效液相色谱法测定能量合剂中辅酶A的含量

 目的：建立能量合剂中辅酶A含量测定的HPLC方法。方法：采用RP-C₁₈(4.6 mm×200 mm,5 μm)色谱柱，以磷酸盐缓冲液（pH6.5）-甲醇（95∶5）为流动相，流速1.0 ml·min^-1，检测波长259 nm，在室温下对能量合剂中的辅酶A进行含量测定。结果：辅酶A在4～20 IU·ml^-1的范围内，峰面积与效价浓度呈良好线性（r=0.9999）。回收率为100.9%，RSD为1.8%(n=9)。结论：该方法简单，快速，结果准确可靠，可作为能量合剂中辅酶A的含量测定方法。     

HPLC法同时测定白鲜皮配方颗粒中白鲜碱、黄柏酮和梣酮的含量

目的：建立同时测定白鲜皮配方颗粒中白鲜碱、黄柏酮和梣酮含量的方法。方法：色谱柱为Agilent Extend C₁₈（250mm×4.6mm,5μm）,流动相为甲醇-水（55:45）,流速为1.0mL?min^-1,检测波长为236nm,柱温为室温,自动进样器进样,进样量10μL。结果：白鲜碱在2.505-40.08μg?mL^-1质量浓度范围内与峰面积具有良好的线性关系（R2=0.999 7,n=5）,平均回收率为99.04%（RSD=1.51%,n=6）;黄柏酮在26.12-418.0μg?mL^-1质量浓度范围内与峰面积具有良好的线性关系（R2=0.999 8,n=5）,平均回收率为99.48%（RSD=2.25%,n=6）;梣酮在7.540-120.6μg?mL^-1质量浓度范围内与峰面积具有良好的线性关系（R2=0.999 8,n=5）,平均回收率为99.54%（RSD=2.09%,n=6）。结论：本法操作方便,结果准确,精密度好,专属性强,可用于白鲜皮配方颗粒的质量控制。     

高效液相色谱法测定高三尖杉酯碱氯化钠注射液含量及其有关物质的限量

 目的：建立新的高效液相色谱法（HPLC）分离测定高三尖杉酯碱及其降解产物。方法：采用HPLC，Agilent Extend?C18色谱柱；甲醇-pH2.5的磷酸盐缓冲液-三乙胺（40∶60∶0.1）为流动相；流速为0.5 ml·min^-1，检测波长：240 nm。结果：在1.04～52.20 μg·ml^-1范围内，溶液的浓度与峰面积呈良好的线性关系。r=0.9999，平均回收率99.5%（n=6），RSD=1.0%，高三尖杉酯碱及其降解产物得到基线分离。结论：本方法简便、快速、准确、灵敏，适用于高三尖杉酯碱注射液的含量测定及其降解产物的检查。     

基于指纹图谱结合多元统计分析的不同贮藏年限对广陈皮成分影响研究＊

目的 建立广陈皮HPLC指纹图谱及多成分含量测定方法，并结合多元统计分析，研究不同贮藏年限对广陈皮成分的影响。方法 色谱条件：采用Syncronis C₁₈色谱柱（4.6 mm×150 mm，5 μm）；流动相为乙腈（A）-0.05%磷酸（B），梯度洗脱；流速1.0 mL·min^-1；柱温30℃；进样量5 μL；检测波长330 nm。采用HPLC法建立10批次不同贮藏年限广陈皮药材的指纹图谱，标定其共有峰，进行相似度评价；运用聚类、主成分分析等多元统计方法，综合评价10批广陈皮药材成分变化差异；进一步对《中国药典》指标成分与差异色谱峰中的橙皮苷、甜橙黄酮、川陈皮素、橘红素与5-去甲川陈皮素等5种成分进行含量测定。结果 10批广陈皮药材指纹图谱相似度均大于0.990，共标定了19个色谱峰，说明不同贮藏年限广陈皮整体质量相对稳定；聚类分析将10批广陈皮分3类，主成分分析提取4个主成分，累积方差贡献率在89.760%，且通过对照品指认确定了其中4个差异色谱峰。含量测定橙皮苷、甜橙黄酮、川陈皮素、橘红素与5-去甲川陈皮素等成分含量范围分别为20.940-34.780 mg·g^-1、0.344-0.517 mg·g^-1、4.667-7.456 mg·g^-1、3.592-5.879 mg·g^-1、0.391-0.710 mg·g^-1。结论 建立的广陈皮指纹图谱和多成分含量测定方法简单、准确，具有良好的稳定性和重复性，可采用聚类分析与主成分分析等多元统计分析方法对不同贮藏年限广陈皮药材的成分变化及质量进行评价，为其质量控制和临床应用提供了参考。     

基于UHPLC-QqQ-MS和网络药理学的二冬汤潜在活性成分含量测定及作用机制分析

目的 建立二冬汤中活性成分含量测定的超高效液相色谱-串联三重四级杆质谱法（UHPLC-QqQ-MS），并对该方进行抗胰岛素抵抗作用靶点和通路的预测。方法 采用ACQUITY UPLC BEH C₁₈色谱柱（2.1 mm×100 mm，1.7 μm），流动相0.1%甲酸水溶液（A）-乙腈（B）梯度洗脱（0~3 min，90%~87%A；3~6 min，87%~86%A；6~9 min，86%~83%A；9~11 min，83%~75%A；11~18 min，75%~70%A；18~19 min，70%~52%A；19~22 min，52%A；22~25 min，52%~5%A；25~27 min，5%~90%A；27~30 min，90%A）；利用电喷雾离子源（ESI），多反应监测（MRM）模式，正、负离子模式检测其含量。在此基础上，运用网络药理学方法预测二冬汤发挥抗胰岛素抵抗作用的靶点和通路。结果 二冬汤中20个活性成分在一定质量浓度范围内线性关系良好，精密度、稳定性、重复性及加样回收率良好。含量测定结果显示，15批样品中高质量浓度的成分为黄芩素（1 259.39~1 635.78 mg·L^-1）、黄芩苷（1 078.37~1 411.52 mg·L^-1）；中质量浓度的成分为知母皂苷BⅡ（245.10~604.89 mg·L^-1）、芒果苷（148.59~217.04 mg·L^-1）、槲皮素-3-O-葡萄糖醛酸苷（89.30~423.26 mg·L^-1）、芦丁（46.91~1 553.61 mg·L^-1）、甘草酸（55.97~391.47 mg·L^-1）、新芒果苷（37.45~127.03 mg·L^-1）、荷叶碱（0.89~63.48 mg·L^-1）、金丝桃苷（6.96~136.78 mg·L^-1）、甘草苷（30.89~122.78 mg·L^-1）、甘草素（26.64~110.67 mg·L^-1）、原薯蓣皂苷（58.57~284.26 mg·L^-1）；低质量浓度的成分为伪原薯蓣皂苷（5.49~22.96 mg·L^-1）、汉黄芩素（7.16~20.74 mg·L^-1）、人参皂苷Rb₁（7.31~23.87 mg·L^-1）、人参皂苷Rg₁（10.78~28.33 mg·L^-1）、甲基麦冬黄烷酮A（0.74~1.67 mg·L^-1）、人参皂苷Re（7.78~24.76 mg·L^-1）、麦冬皂苷D（2.08~4.29 mg·L^-1）。网络药理学结果表明，二冬汤发挥抗胰岛素抵抗作用机制可能与磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B（PI3K/Akt）信号通路有关。结论 建立的UHPLC-QqQ-MS可为二冬汤复方制剂的开发奠定基础。网络药理学研究结果可为二冬汤治疗2型糖尿病的作用机制研究提供参考。     

高效液相色谱法测定瑞巴匹特血浆浓度

 目的：建立测定血浆内瑞巴匹特浓度的高效液相色谱法。方法：Kromasil C₁₈色谱柱，甲醇-0.05 mol·L^-1磷酸二氢钾(55∶45，pH3.0)为流动相，并由序贯单纯形法确定此为最佳配比点，流速1.0 ml·min^-1，检测波长230 nm。结果：瑞巴匹特在15～1200 μg·L^-1范围内,血浆药物浓度C与色谱峰高H呈现良好线性相关，血浆中瑞巴匹特平均相对回收率为（97.5±0.5）%(n＝5),平均绝对回收率为（90.3±1.8）%(n＝5)；平均日内和日间RSD分别为4.68%和5.66%(n＝5)；方法对血浆瑞巴匹特最低检出浓度为2 μg·L^-1。结论：本方法适于血浆中瑞巴匹特的测定。     

反相高效液相色谱法测定血浆中多索茶碱的浓度

 目的：建立测定人血浆中多索茶碱浓度的反相高效液相色谱法。 方法：采用内标法，以μBondapak C₁₈柱为固定相，甲醇-超纯水(38∶62)为流动相，咖啡因为内标，检测波长为275 nm，流速为1.0 ml·min^-1，柱温：室温；血浆样品无需经过提取，直接沉淀蛋白离心后取样进行色谱分析。 结果：样品与内标的峰面积比同样品浓度间线性良好，线性范围在0.5～16.0 μg·ml^-1，回归方程为：C=10.30R-0.18699，r=0.9992(n=6)；平均回收率为99.9%（RSD=0.15%,n=5）。结论：该方法简单方便，快速，准确。     

复方非洛地平缓释片含量测定方法的研究

 目的对复方非洛地平缓释片中酒石酸美托洛尔和非洛地平的含量测定方法进行研究。方法 采用反相高效液相色谱法,Spherisorb C₁₈色谱柱(150mm×4.6mm,5μm),流动相为十二烷基硫酸钠水溶液(取十二烷基硫酸钠2.88g,磷酸1.96g,加水溶解并稀释到1000mL)-乙腈(40:60),流速1.0 mL·min^-1,检测波长254nm,进样量10μL。结果酒石酸美托洛尔和非洛地平的线性范围分别为0.4～2.0 mg·mL^-1和0.04～0.2 mg·mL^-1,回收率分别为99.5％和99.0％,RSD分别为1.7％和1.5％。结论该方法能够简单、快速、准确地同时测定酒石酸关托洛尔和非洛地平的含量。     

高效液相色谱法测定鼻炎灵喷雾剂中马来酸氯苯那敏、盐酸麻黄碱、乳酸环丙沙星的含量

 目的 采用反相高效液相色谱法,对鼻炎灵喷雾剂中马来酸氯苯那敏、盐酸麻黄碱、乳酸环丙沙星等组分进行了分离,建立含量测定方法。方法 用呋喃西林为内标,采用ZorbaxSB-C₁₈柱分离,0.025 mol·L^-1磷酸盐缓冲液-甲醇(65∶35)为流动相,检测波长258 nm。结果 标准曲线范围分别为马来酸氯苯那敏0.15～1.53 mg·mL^-1,r=0.999 8。盐酸麻黄素为0.71～7.15 mg·mL^-1,r=0.999 9乳酸环丙沙星为0.03～0.29 mg·mL^-1,r=0.999 9。最低检测浓度分别为1.04,4.89,0.39 μg·mL^-1。方法的回收率分别为99.68%(n=5),99.88%(n=10),98.72(n=8)。日内RSD分别为0.25%～0.68%,0.79%～1.81%,0.95%～1.84%。日间RSD分别为0.87%～3.81%,1.49%～3.78%,2.28%～3.02%。结论 此方法快速、准确、简便。     

3种剂量9-硝基喜树碱大鼠单次灌胃给药后的药动学研究

 目的建立测定血浆中9-硝基喜树碱的反相高效液相色谱法,研究其在大鼠体内的药动学规律及特点。方法SD大鼠单次灌胃9-硝基喜树碱后于不同时间点自眼眶后静脉丛取血,用HPLC测定其血药浓度,用DAS(1.0)软件计算药动学参数。结果血药达峰浓度c_max随给药剂量的递增而递增(2 mg·kg^-1组为653.02 ng·mL^-1,3 mg·kg^-1组为832.9 ng·mL^-1,5 mg·kg^-1 组为2 731.15 ng·mL^-1),达峰时间t_max不随给药剂量增加而延长(2 mg·kg^-1组为0.32 h,3 mg·kg^-1组为0.45 h,5 mg·kg^-1组为0.3 h),药时曲线下面积AUC_0-∞随剂量递增而增加(2 mg·kg^-1组为856.49μg·h·L^-1,3 mg·kg^-1组为1 485.69μg·h·L^-1, 5 mg·kg^-1组为3 995.39μg·h·L^-1)。结论3种剂量9-硝基喜树碱大鼠单次灌胃后的药动学参数显示其在大鼠体内转化或消除均较快,呈一房室模型,药物的体内过程表现为线性药动学特征。     

马钱苷肠吸收机制的研究

目的:考察药物浓度、肠段、pH及P-gp对马钱苷肠吸收机制的影响规律。方法:将大鼠分为10组:马钱苷高、中、低剂量组(0.1,0.025,0.0125 mg.mL^-1);十二指肠、空肠及回肠组(0.013 mg.mL^-1);pH6,7,8组(0.013 mg.mL^-1);诱导剂利福平组(0.0125 mg.mL^-1)。采用大鼠在体循环灌流法,应用HPLC测定肠吸收循环液中马钱苷的浓度,UV法测定肠吸收循环液中即时酚红浓度。结果:马钱苷在0.0125~0.1 mg.mL^-1,其吸收量与药物浓度呈线性关系,且各浓度吸收速率基本不变;pH对马钱苷吸收没有显著影响;各个肠段的吸收速率及吸收量顺序为回肠>十二指肠>空肠;此外,P-gp诱导剂利福平对马钱苷的吸收有明显的抑制作用。结论:马钱苷在肠道的吸收呈一级动力学过程,吸收机制推断为被动扩散;具有特定的吸收部位,宜制成胃肠道滞留型定位释药系统;马钱苷为P-gp底物,可以通过与P-gp抑制剂合用提高其生物利用度。     

RP-HPLC同时测定独活中蛇床子素和二氢欧山芹醇当归酸酯的含量

 目的 建立同时测定独活中蛇床子素和二氢欧山芹醇当归酸酯含量的反相高效液相色谱法。方法 Shiseido C₁₈ MG（4.6 mm×250 mm,5 μm）色谱柱,流动相乙腈-水(49∶51),检测波长330 nm,流速1.0 mL·min^-1,柱温30 ℃。结果 蛇床子素在0.008 2~0.656 mg·mL^-1内呈良好线性,r=1.000 0,平均回收率99.6%（RSD=2%）;二氢欧山芹醇当归酸酯在0.003 6~1.536 mg·mL^-1内呈良好线性,r=0.999 9,平均回收率99.4%（RSD=2.2%）。结论 通过对22批不同来源独活药材与饮片的含量测定,证明该方法简单,准确可靠,重复性好。在重庆巫山地区以海拔1 600~1 700 m、向阳、黑土的生长条件下,独活中蛇床子素和二氢欧山芹醇当归酸酯的含量均较高。     

凝血酶时间法的改进及对四物汤类方筛选研究

目的:改进凝血酶时间(TT)法,使其更适合体外凝血酶抑制剂筛选。并用此方法测定比较四物汤类方及方中代表性成分的抗凝血酶活性。方法:建立凝血酶浓度对lgTT延长率(%)的标准曲线,对影响凝血酶活性的相关因素进行考察,如血浆的储存条件;药物溶媒的选择;药物与凝血酶预温时间。并且测定比较四物汤(SW)、少腹逐瘀汤(SF)、香附四物汤(XF)、桃红四物汤(TH)、芩连四物汤(QL)的抗凝血酶活性。对方中代表性成分的抗凝血酶活性进行测定。结果:获得改进凝血酶时间法的适宜条件;筛选结果显示四物汤类方均有明显的抗凝血酶活性,抑制性的强弱顺序为QL(IC₅₀=1.30mg·mL^-1)>SF(IC₅₀=1.39mg·mL^-1)>XF(IC₅₀=3.55mg·mL^-1)>SW(IC₅₀=8.14mg·mL^-1)>TH(IC₅₀=10.94mg·mL^-1);活性成分槲皮素也具有显著抗凝血酶活性。结论该研究建立了一种凝血酶抑制剂筛选的便捷方法,证实了四物汤类方及成分具有直接抗凝血酶的活性,为深入解析活血化瘀方中靶向凝血酶的活性物质奠定了基础。     

茅莓总皂苷对黑色素瘤的抗肿瘤作用研究

目的：评价茅莓总皂苷对黑色素瘤的体内、外抗肿瘤药效作用。方法：A375人恶性黑色素瘤细胞体外常规传代培养,随机分5组,分别加入环磷酰胺,茅莓总皂苷高、中、低(0.01,0.001,0.000 1 mg·mL^-1)3个质量浓度,以不加药作阴性对照,MTT法检测茅莓总皂苷的体外抗肿瘤作用；用B16黑色素瘤细胞移植小鼠,随机分阳性药(环磷酰胺)组,茅莓总皂苷高、中、低(100,50,25 mg·kg^-1)剂量组及阴性药(生理盐水)组,观察体内抑瘤效果、荷瘤小鼠生存时间和生命延长率；同时采用TUNEL法检测茅莓总皂苷对B16黑色素瘤细胞凋亡的影响。结果：体外抑瘤试验显示,高、中质量浓度茅莓总皂苷组与阴性对照组比较,P<0.05,有统计学意义；体内抑瘤试验显示,高剂量组平均瘤体积明显低于阴性对照组(P<0.05),抑瘤率37.02%；荷B16黑色素瘤小鼠用茅莓总皂苷治疗后存活时间增加；茅莓总皂苷高、中、低剂量组黑色素瘤细胞凋亡指数分别为32.5%,20.5%和5.5%,与阴性对照组(3.5%)比较差异有统计学意义。结论：茅莓总皂苷对体内、外黑色素瘤细胞有抑制作用,并呈量效依赖关系,能通过促进黑色素瘤细胞凋亡而发挥抗肿瘤活性。     

气相色谱法测定岗松油中芳樟醇和桉油精的含量

 目的 建立岗松油中芳樟醇和桉油精的含量测定方法。方法 采用气相色谱法,FID检测器,以无水乙醇为溶剂,十一烷为内标,在SE-54毛细管色谱柱上,实现了芳樟醇和桉油精与各组分的基线分离。结果 芳樟醇在0.488-2.930 mg·mL^-1内,线性关系良好,回归方程为:Y=0.873 9X-0.0265,r=0.9999,回收率为100.8％(RSD=1.9％,n=5);桉油精在1.395-8.372 mg·mL^-1内,线性关系良好,回归方程为Y=0.931 8X-0.0076,r=0.9998,回收率为100.0％(RSD=1.7％,n=5)。结论 经方法学验证,该方法灵敏、准确、可靠,适用于岗松油中芳樟醇和桉油精的含量测定。     

玄参中4种主要活性成分的HPLC定量分析

 目的建立应用HPLC-UV同时测定玄参中4种主要活性成分——哈巴俄苷、肉桂酸、安格洛苷C和acteoside含量的方法。方法采用Hypersil BDS-C₁₈色谱柱(4.0 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈和1%醋酸水溶液,梯度洗脱,流速1 mL·min^-1,检测波长278 nm,柱温25℃。结果哈巴俄苷、肉桂酸、安格洛苷C和acteoside线性范围分别为15.12～302.4 mg·L^-1,7.72～154.4 mg·L^-1,24.84～496.8 mg·L^-1,6.64～132.8 mg·L^-1;平均回收率(n=5)分别为101.59%(RSD=2.40%),96.75%(1.32%),100.11%(3.95%),99.89%(2.08%)。结论本方法简单、快速、准确可靠,可作为玄参药材的质量控制方法。