葡萄糖转移方法检测脂肪颗粒活性的研究

目的 以高速离心为损伤模型,了解以葡萄糖转移量来体现组织块活性的可能性、可靠性,建立新的脂肪颗粒活性检测方法,为脂肪移植研究提供一基础.方法 将同条件抽取的脂肪颗粒分为5组,分别经1 000、2000、3 000、4 000、5 000 r/min离心纯化后,每组得60 ml样本,每个样本分为12个实验标本（5 ml/标本）置于12个培养皿中（内含10 mlDMEM、1 U正规胰岛素/皿）,每组设一个不含脂肪颗粒的空白标本,所有标本同时进行孵育,1 h后测量每个标本DMEM中葡萄糖的浓度.以5组空白标本的葡萄糖浓度均值为基础浓度,其与每个实验标本的葡萄糖浓度差值代表标本的葡萄糖转移量即活性.t检验分析比较每组标本的活性.将5组样本送病理学检查,比较各组切片完整细胞数,并与上述实验结果进行对比.结果 各组样本经含糖DMEM孵育后,其葡萄糖转移量即活性用SNK方差分析检验得出：1 000 r/min组＞2 000 r/min组＞3 000 r/min组＞4 000 r/min组,5000 r/min组与4 000 r/min组比较,差异无统计学意义,但显著小于前4组（P＜0.05）,即随离心速率增大,脂肪颗粒活性逐渐下降.病理切片显示：5 000 r/min组大部分细胞壁形态不规则或碎裂.完整细胞计数结果用SNK方差分析检验得出：5 000 r/min组明显较其他各组少（P＜0.05）;其他4组完整细胞数差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 葡萄糖转移实验可较准确地检测脂肪颗粒活性的活性状态,病理学检查在反应脂肪颗粒活性方面有局限性.     

抽吸负压对所抽吸脂肪颗粒活性影响的研究

目的:探讨抽吸负压对所抽吸脂肪颗粒活性的影响,明确脂肪移植术中是否可用吸脂机获取脂肪。方法:用 60ml 注射器(26～40kPa)和吸脂机(70～80kPa)连接相同管径不同侧孔的吸管抽取两组脂肪颗粒(Ⅰ、Ⅱ组),同时进行葡萄糖转移实验:即每组取 12 个标本,5ml/ 标本,置于培养皿中,加入 10ml 含糖 DMEM,孵育 1h 后,检测 DMEM 中葡萄糖浓度的变化,以此代表脂肪颗粒葡萄糖转移量即活性,t 检验比较两组活性有无差异。两组样本各取 10ml 送病理学检查,比较两组切片完整细胞数有无差异。用 60ml 注射器和吸脂机(压力同上)连接相同侧孔不同管径的吸管抽取两组脂肪颗粒(Ⅲ、Ⅳ组),同时进行葡萄糖转移实验和病理学检查,方法同前。取Ⅰ、Ⅱ组脂肪颗粒各 5ml 分别注射于两组裸鼠(16 只 / 组)颅顶部皮下,每只注射 0.3ml,15 周后取出,比较二组移植物残留体积和重量及组织学特性有无差异。结果:60ml 注射器(26～40kPa)和吸脂机(70～80kPa)连接相同管径不同侧孔吸管抽取的脂肪颗粒葡萄糖转移量差异显著,前者小于后者(P<0.05),病理切片完整细胞数差异显著,前者大于后者(P<0.05);而连接相同侧孔不同管径吸管抽取的脂肪颗粒葡萄糖转移功能及病理切片完整细胞数均差异不显著(P>0.05)。植入裸鼠颅顶部皮下的Ⅰ、Ⅱ组样本,15 周后,组     

若干理化因素对脂肪颗粒活性影响的研究

目的:以葡萄糖转移实验检测肿胀液灌注压、注射针管内径,利多卡因、肾上腺素、庆大霉素对脂肪颗粒活性的确切影响,为脂肪移植术中如何控制这些因素提供参考。方法:于同一患者下腹部左右侧分别灌注 1∶1 和 1∶3 的肿胀液,同条件抽取,获两组样本进行葡萄糖转移实验,t 检验比较 2 组样本的葡萄糖转移量即活性有无差异。用侧孔为 2.0mm×5mm 的吸管抽取的脂肪颗粒分 3 组,分别经注射器乳头(内径 2mm)、16 号针头(内径 1.5mm)、12 号针头(内径 1.1mm)注射于培养皿中进行葡萄糖转移实验,方差分析检验比较 3 组样本的葡萄糖转移量即活性有无差异。将同条件获取的脂肪颗粒分 4 组,分别置于含0.08%利多卡因、0.0002%(1/50 万)肾上腺素、1kU/ml 庆大霉素及常规 DMEM(对照组)中进行葡萄糖转移实验,方差分析检验比较前 3 组样本的葡萄糖转移量即活性与对照组有无差异。结果:1∶1 和 1∶3 灌注压下获取的 2 组脂肪颗粒葡萄糖转移量差异不显著(P>0.05);脂肪颗粒的葡萄糖转移量随注射时所经注射器乳头或针管的内径变小而依次降低,差异显著(P<0.05);在含 0.08%利多卡因、0.0002%(1/50 万)肾上腺素、1kU/ml 庆大霉素的 DMEM 中进行孵育的脂肪颗粒的葡萄糖转移量均较对照组显著降低(P<0.05)。结论:临床应用范围内的肿胀液     

漂洗对脂肪活性的影响

目的比较不同漂洗液和不同漂洗次数对吸脂术所获得的脂肪组织活性的影响。方法通过肿胀吸脂术获得脂肪组织后,分别用生理盐水、平衡液各漂洗0、1、3、5、10次后,用葡萄糖转移实验检测其活性。结果生理盐水组脂肪组织的葡萄糖转移量大于平衡液组,差异具有统计学意义(P<0.05);两组中,漂洗0和1次时的葡萄糖转移量明显低于漂洗3次(P<0.01);生理盐水组中,漂洗3次和5次时的葡萄糖转移量无明显差异(P>0.05),但漂洗10次时的葡萄糖转移量明显低于漂洗3次和5次(P<0.05);平衡液组中,漂洗3次、5次和10次时的葡萄糖转移量无明显差异(P>0.05)。结论通过漂洗可以提高吸脂术所获得的脂肪组织的活性。本实验中,生理盐水的漂洗效果优于平衡液,以漂洗3次为佳。     

低速离心对面部自体颗粒脂肪移植存活率影响的临床研究

目的：探讨低速离心对面部自体颗粒脂肪移植存活率的影响。方法：供区局部注射肿胀液后,用20ml注射器行抽吸脂肪,抽吸出的脂肪离心组采用2 000r/min的速度离心2min,对照组则采用生理盐水洗涤、静置分层的方法进行处理。处理后的颗粒状脂肪呈扇形注射于面部皮下层,注射完成后针眼用创口贴覆盖。所有患者研究随访期内皆仅注射一次,注射6个月后由患者本人对手术效果进行评价,结果用满意、一般和不满意表示,然后进行统计学处理。结果：离心组和对照组的满意率分别为37.0%和36.0%,评价为一般的分别为48.1%和48.0%,评价为不满意的分别为14.8%和16.0%,iWlcoxon秩和检验无统计学差异（PiWlcoxon〉0.05）。结论：低速离心并不能显著提高面部自体颗粒脂肪移植的存活率。     

脂肪颗粒注射移植的实验研究与临床应用

随着六十年代初脂肪抽吸术的发展，使得利用吸除的脂肪进行软组织填充成为可能，但通过脂肪抽吸器械吸脂团，块过大，易被吸收，引起大量的脂肪分解。我们以猪作为动物模型，利用普通医用注稠顺进行脂肪抽吸脂肪注射，并对植物术后进行了半年的观察与测量及必要的组织切片检查，且将此方法应用于临床，取得较好效果，这种方法具有操作简单，不留瘢痕，可重复进行，移植的脂肪有相当的存活率等优点，是软组织填育的一种较好的方法。     

脂肪颗粒注射移植的实验研究与临床应用

随着六十年代初脂肪抽吸术的发展，使得利用吸除的脂肪进行软组织填充成为可能。但通过脂肪抽吸器械吸脂，团块过大，易被吸收，引起大量的脂肪分解［１］。我们以猪作为动物模型，利用普通医用注射器进行脂肪抽吸、脂肪注射，并对移植物术后进行了半年的观察与测量及必要的组织切片检查，且将此方法应用于临床，取得较好效果。这种方法具有操作简单，不留瘢痕，可重复进行，移植的脂肪有相当的存活率等优点，是软组织填充的一种较好的方法。     

脂肪颗粒注射移植的实验研究与临床应用

随着六十年代初脂肪抽吸术的发展,使得利用吸除的脂肪进行软组织填充成为可能。但通过脂肪抽吸器械吸脂,团块过大,易被吸收,引起大量的脂肪分解。我们以猪作为动物模型,利用普通医用注射器进行脂肪抽吸、脂肪注射,并对移植物术后进行了半年的观察与测量及必要的组织切片检查,且将此方法应用于临床,取得较好效果。这种方法具有操作简单,不留瘢痕,可重复进行,移植的脂肪有相当的存活率等优点,是软组织填充的一种较好的方法。     

影响移植后的脂肪颗粒活性因素

目的观察碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）、血管内皮细胞生长因子（VEGF）、表皮细胞生长因子（EGF）、胰岛素及自体真皮颗粒对培养及移植的脂肪颗粒活性的影响因素。方法通过对培养中的幼鼠脂肪细胞,分别添加bFGF、VEGF、EGF、胰岛素及自体真皮颗粒,四甲基偶氮唑盐（MTT）法测定各组脂肪细胞活性,分析其作用效果;通过对移植体的大体观察、质量测定、HE染色、微血管数量及免疫组织化学染色等,比较各组添加物对脂肪组织活性的影响。结果除真皮颗粒组及对照组外,各实验组在不同时间点的最佳脂肪细胞活性浓度基本一致,且其细胞活性均高于对照组（P〈0．05）。动物实验中对照组可见较大区域坏死灶、囊样脂肪池。实验组脂肪细胞大小不一,存在大量的小体积脂肪细胞;除胰岛素组外,各实验组移植物残余质量及各组微血管密度均明显高于对照组,但随移植时间的延长差异逐渐缩小。结论bFGF、VEGF、EGF及胰岛素均能不同程度提高脂肪细胞活性,bFGF、VEGF、EGF及自体真皮颗粒均能不同程度地提高脂肪颗粒移植后的移植物质量,改善脂肪组织的血运重建。     

The effects of the centrifugation speed on the survival of autogenous fat grafts in a rat model

Purpose The most important problem in fat transplantation is the durability, which is closely associated with the applied technique. This study includes the comparison of different centrifugation speeds on the survival of autogenous fat grafts in rats.

Materials and methods Forty-nine Sprague-Dawley rats were divided into seven groups and the left inguinal fat pad was extracted and re-implanted under the scalp after performing appropriate preparation processes. In the first group the fatty tissue was re-implanted in en-bloc fashion and in the second group it was re-implanted after trimming. After trimming, centrifugation with a G-force of 111.8 (1000?rpm) was performed in the third group, 447.2 (2000?rpm) in the fourth group, 1006.2 (3000?rpm) in the fifth group, 1788.8 (4000?rpm) in the sixth group, and 2795 (5000?rpm) in the seventh group for 4?minutes. The fat grafts were taken after 3 months and histopathological and statistical evaluations were performed.

Results The rate of viable fat grafts was significantly higher in the 4th and 5th groups comparing to the first three groups. Total weight and volume amounts of the 4th and 5th groups were also significantly higher comparing to the first three groups.

Conclusion Maximal long-term durability and fat cell viability results were obtained in the groups with 2000?rpm or 447.2?G-force/4?minutes and 3000?rpm or 1006.2?G-force/4?minutes centrifugation speed, indicating that 4?minutes centrifugation with an average G-force of 698.75 or 2500?rpm provides the best results for the survival of autogenous fat grafts.     

纯化自体脂肪颗粒在上睑凹陷矫治中的应用

目的：探讨离心纯化脂肪颗粒在上睑凹陷患者的临床应用及治疗体会。方法：24例患者,40只眼,在大腿内侧吸脂及脂肪离心后,行眶隔内脂肪充填。进行治疗前后上睑饱满度对比及术后二次充填比例,评估离心纯化脂肪颗粒充填有效率及患者满意度。结果：24例患者,20例一次性注射,效果满意,有效率为83.33%;4例二次注射,补注后效果满意,有效率为16.67%。无一例发生感染、血肿、脂肪液化等并发症。结论：离心纯化脂肪颗粒因其来源丰富、不留瘢痕、注射量少、无排斥等优点,是治疗上睑凹陷的一种较好方法。     

Long-term clinical outcomes of fat grafting by low-pressure aspiration and slow centrifugation (Lopasce technique) for different indications

Abstract

Autologous fat grafts have been used successfully for structural fat grafting in facial, lip, and hand rejuvenation, body contour improvement, and traumatic defect restoration. The purposes of this study were to define a new fat graft harvesting and processing technique, which is named the “Lopasce technique” (low-pressure aspiration and slow centrifugation technique), and to evaluate the late clinical outcomes of fat grafting by this technique for different indications. A retrospective study was performed using the medical records of 21 patients (17 women and four men). The mean injected fat volume was 33.2 ± 34 cc (range 6–125 cc). The mean follow-up period was 13.2 ± 5.6 months (range 6–26 months). Postoperative results were evaluated by subjective and objective methods. In the subjective evaluation, 19 patients stated that there had been little resorption and that it was not necessary to repeat the fat grafting, one patient reported that the fat was resorbed in part, and one patient reported that the fat was resorbed completely. In the objective evaluation, the amount of fat graft taken in the recipient sites was between 60%–80% (average 70%) when compared with preoperative and late postoperative photographs of the patients at the 6- and 26-month follow-ups. Fat grafting is a simple, effective, and reproducible technique with a high satisfaction rate and few disadvantages or complications. We consider that structural fat grafting with the lopasce technique is an easy, effective, and long-lasting treatment for correction of congenital or acquired defects associated with various medical conditions.     

脂肪注射移植后皮肤质地改善的研究

目的:通过皮下脂肪注射移植,探索移植脂肪对皮肤质地的改善作用。方法:取30只裸鼠,随机分成三组,所有鼠左侧皮下移植人脂肪细胞,在另一侧10只注射硅凝胶,10仅行皮下穿刺,剩下10只无任何处置,8周取皮肤组织做HE、Masson’染色观察皮肤真皮层厚度及真皮层内胶原蛋白的含量。结果:取材时,所有裸鼠上都能看到所移植的脂肪,但体积较术前有较明显缩小。肉眼看,脂肪呈正常外观,有较多新生血管生成。组织学检测,移植脂肪外周有大量细胞外基质形成,实验侧真皮层较对照侧明显增厚,真皮内胶原含量增多。结论:移植的脂肪组织不仅仅是一种填充物,在改善轮廓的同时,还有真皮增厚、胶原含量增加等皮肤改善的效应。     

Percoll梯度离心与精子运动轨迹图像分析

目的：研究Percoll梯度离心后精子运动轨迹的变化。方法：Percoll梯度离心法处理精子运动状况较差的精液标本，分析精子运动轨迹的变化。结果：在24例精液标本中，Percoll处理前后的精子平均运动速度分别为18.4±4.6μm／s和25.7±5.4μm／s.二者之间具有显著差异（P＜0.01）。结论：用Percoll梯度离心法处理精子，可提高精子运动速度，改善精子质量。