乳腺癌细胞条件培养基对骨髓间充质干细胞生物学行为的影响

目的 探讨MCF-7乳腺癌细胞条件培养基对骨髓间充质干细胞（BMSC）增殖、凋亡和迁移的影响及分子机制。方法 正常环境下培养的BMSC为对照组,以MCF-7细胞条件培养基培养的BMSC为MCF-7条件培养基组,向MCF-7条件培养基组添加10 nmol/L GSK690693(Akt抑制剂)为Akt抑制剂组,向MCF-7条件培养基组添加10μmol/L Reparixin(CXCR1/2抑制剂)为CXCR1/2抑制剂组。MTT实验检测各组BMSC增殖情况,Annexin V-FITC/PI双标记流式细胞凋亡实验检测各组BMSC凋亡率,Transwell细胞迁移实验检测各组BMSC的迁移能力,酶联免疫吸附试验检测两种细胞培养上清液和MCF-7细胞条件培养基中白细胞介素（IL）-8蛋白含量,Western blot检测各组BMSC的蛋白激酶B(Akt)/磷酸化Akt(p-Akt)和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（m TOR）/磷酸化mTOR(p-mTOR)蛋白表达。结果 与对照组相比,MCF-7条件培养基组BMSC的细胞增殖水平、迁移数目以及p-Akt和p-mTOR蛋白相对表达量均增高,细胞凋亡率...     

用无血清培养基初代培养人二倍体成纤维细胞

作者在实验室用无血清培养基培养RITC80-7成纤维细胞.使用RITC80-7培养基能成功地进行人胎肺成纤维细胞(HEL)长期传代培养.RITC80-7培养基是改良的Eagle     

超顺磁性硫酸链霉素PLA-PEG微球的体外抗结核分枝杆菌药敏实验

目的:检验制备的超顺磁性硫酸链霉素PLA-PEG微球(spSPM)的体外抗结核分枝杆菌活性,为靶向治疗儿童骨关节结核提供实验基础。方法:用制备的spSPM溶出液制成药敏培养基,与硫酸链霉素标准品制备的药敏培养基进行对照,采用绝对浓度法接种,观察比较其抑菌效果。结果:4周后,15株菌在空白培养基上均生长旺盛(+++~++++),在TCH培养基均为阳性(+),在PNB培养基均为阴性(-)。spSPM组高浓度(100 mg/L)培养基7株阴性,低浓度(10 mg/L)仅1株阴性。硫酸链霉素标准品溶液组培养基高浓度(100 mg/L)7株阴性,低浓度(10 mg/L)2株阴性。spSPM组与溶液组在分枝杆菌生长情况上差异均无统计学意义(高、低浓度培养,χ2分别为0.1408、0.0997,P均>0.05)。spSPM组耐药菌株为11株(73.33%),溶液组耐药菌株为12株(80.00%),两组耐药率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:本实验制备的spSPM溶出液与硫酸链霉素标准品抑菌效果无明显差异,因此可应用于进一步的研究中。     

海洋维生素B_(12)产生菌培养条件研究

用大肠埃希氏菌 ( Escherichia coli) 113- 3测定 14株分离自我国海域的海洋细菌维生素 B12 ( VitB12 )产力。试验了它们产生 B12 的培养基及培养条件。结果表明 ,以海水浸提豆饼并添加一些营养组成的培养基适于进一步确定产 B12 的菌种。培养基中适当添加二氯化钴等盐类有利于 B12 合成。培养基酸碱度在所试菌种发酵过程中随时间延长而提高。保持偏碱性约 96h,可获得较好的 B12 生产效益。所测菌株中 ,No.2 62 7菌株表现良好。有 No.2 62 7菌株的混合培养 ,B12 产力常常有潜力和优势可取。     

药品检验用培养基配制及灭菌后贮存有效期的研究

目的本验证通过对药品微生物限度检查用和无菌检查用培养基(选取具有代表性的7种)的配制方法以及灭菌后贮存条件和贮存效期进行验证,确保每次配制的培养基质量均满足《中国药典》2010年版要求。方法随机抽取7种脱水培养基各2瓶,按照《中国药典》2010年版培养基适用性检查中规定的方法,分别进行3次独立试验。确定培养基的配制方法、灭菌后贮存有效期。结果与结论培养基按规定的配制方法、灭菌后贮存有效期内适用性检查均符合《中国药典》2010年版要求。     

NAP在7H9液体培养基快速鉴定分枝杆菌菌群的可行性

目的 探讨对硝基一苯丙酮(NAP)加入7H9液体培养基建立快速的菌种鉴定方法,以区别结核杆菌复合群(MTBC)与非结核分枝杆菌(NTM).方法 用含有NAP 7H9的液体培养基检测5株标准分枝杆菌菌株的体外抑菌浓度.结果 以NAP 300μg/ml为界,111株临床分离菌株NAP 7H9方法与传统罗氏(L-J)对硝基一苯甲酮(PNB)的菌型鉴定相比较,符合率为98.20%(P＞0.05);鉴定结果平均(7.72±1.74)d出报告,明显短于L-J PNB法的28 d(P＜0.01).结论 应用含NAP 7H9液体培养基法鉴定分枝杆菌菌群快速、准确、实用.     

海洋真菌Metarhizium sp. P2100来源的α-吡喃酮类化合物研究

目的 研究1株海洋绿僵菌属真菌新种Metarhizium sp. P2100中具有抗菌活性的次级代谢产物。方法 分别用大米固体培养基、葡萄糖蛋白胨酵母膏（GPY）液体培养基培养真菌,运用硅胶柱层析、凝胶柱层析、高效液相色谱等技术对真菌发酵产物进行分离纯化得到单体化合物,综合运用核磁（NMR）、质谱、旋光（ORD）、圆二色谱（CD）等手段解析其结构,并利用抗细菌模型进行活性筛选。结果 从大米培养基、GPY培养基发酵产物中分离获得了7个吡喃酮类化合物：分别为(S)-6-[(S)-2-hydroxypentanoyl]-4-methoxy-5,6-dihydro-2H-pyran-2-one(1)、LL-P 880γ(2)、(6S,1’S,2’S)-hydroxypestalotin(3)、LL-P880β(4)、(6S)-6-Pentanoyl-4-methoxy-5,6-dihydro-2H-pyran-2-one(5)、PC-2(6)、LL-P 880α(7)。其中化合物1为新化合物,5～7具有中等抗细菌活性,对弧菌、粪肠球菌、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌等多种致病菌的最小抑菌浓度（MIC...     

氨基酸与微量营养物在螺旋霉素生物合成中的作用

作者用合成培养基研究了螺旋霉素(Spiramycin)的生物合成,以及某些微量营养物(氨基酸、维生素与微量元素)对抗生素产量的影响。螺旋霉素产生菌——产二素链霉菌(S.ambofaciens)系保存在含:葡萄糖10.0、胨5.0、KH_2PO_41.0、MgSO_4·7H_2O0.5、琼脂20.0克/升的培养基上(pH6.0～6.5)。接种过的斜面于30℃培养10天,然后置于5℃冰箱中保存。种子培养基含:葡萄糖10.0、K_2HPO_41.0、NaNO_32.0、KH_2PO_41.0、MgSO_4·7H_2O 0.5克/升,pH调至7.0。每只装50毫升培养基的250毫升摇瓶,灭菌后用产二素链霉菌的孢子悬液接种,再置于27℃旋转式     

用半连续无血清无蛋白培养生产单克隆抗体-谷氨酰胺浓度与培养条件对细胞生长和抗体分泌的影响

作者曾报道,将分泌单克隆抗体(McAb)的小鼠杂交瘤细胞在转瓶中用无血清无蛋白培养基(BDM)进行半连续培养,与含血清培养基静止培养相比,McAb的分泌量可增加2.4倍。为进一步优化细胞在BDM中的生长和分泌McAb的培养条件,作者继续就BDM的成分与培养条件作了更深入的探讨。将杂交瘤细胞株7F11C7(分泌小鼠IgG1)解冻后,置于无血清无蛋白BDM(Eagle's:Ham's F12:NCTC135为5:5:1)中,在饱和湿度及10%CO_2的条件下培养,并经多     

从虫草菌培养物得到抗菌物质

将虫草属(Cordyceps)菌,特别是冬虫夏草(C.sinansis(Berk)Sace]或亲缘品种蛹虫草〔C.militaris(Link)〕在适宜的培养基,特别是在含碳、氮源和无机盐pH为6～7的培养基中进行好氧培养。用有机溶媒提取培养物得到抗菌物。在充足通气条件下从虫草培养物菌丝体中提取到一种化合物,可减少或预防龋齿,预防或抑制链球菌的生长。从虫草     

双相一步法支原体培养基的商品开架试验研究

为探索双相一步法支原体培养基在不同保存温度、保存时间、运输方式等条件下培养基质量稳定性 ,将 45 0 0人份的培养基以铁路、航空、轮船运输运送至三个不同的实验室 ,每一实验室将培养基各 80支在冷冻 (-2 0℃ )、冷藏 (4～ 8℃ )、室温 (2 5℃ )和高温 (3 7℃ )分别保存 1个月、6个月、12个月及 18个月 ,并以解脲脲原体标准菌株接种上述培养基 ,观察并比较培养基的生长阳性率及保存过程的污染率 ,以确定最佳运输方式、最佳保存温度和最佳保存期限。     

β-内酰胺酶抑制剂的筛选:细菌产生的脂肪酸的抑制作用

在筛选新型β-内酰胺酶抑制剂中,发现由一株形成内生孢子的革兰氏阳性杆菌——BMG287-AF7所产生的脂肪酸能够抑制β-内酰胺酶。本文报道了这些脂肪酸的分离和对β-内酰胺酶的抑制活性。形成内生孢子的革兰氏阳性杆菌——BMG287-AF7是在装有110毫升培养基的500毫升烧瓶中于28℃旋转式摇瓶机(180rpm)上培养。培养基含:2%半乳糖、2.0%糊精、1.0%豆胨、0.5%玉米浆、0.2%(NH_4)_2SO_4与0.2?CO_3,pH调至7.0。将72小时培养物接种入45只装有新鲜培养基的     

左旋氧氟沙星衍生物(YH54,YH57)体外抗菌活性

ＹＨ5 4、ＹＨ5 7是以左旋氧氟沙星为先导化合物合成的新氟喹诺酮[1] 。其化学名分别为 :(Ｓ) 9 氟 2 ,3 二氢 3 甲基 8 氨基 10 (4 甲基 1 哌嗪基 ) 7 氧代 7Ｈ 吡啶并 [1,2 ,3 ｄｅ][1,4]苯并 口恶嗪 6 羧酸、(Ｓ) 9 氟 2 ,3 二氢 3 甲基 8 氨基 10 (3 甲基 1 哌嗪基 ) 7 氧代 7Ｈ 吡啶并 [1,2 ,3 ｄｅ][1,4]苯并口恶嗪 6 羧酸。本文研究其抗菌活性。1　材料与方法1.1　细菌来源　 1998年至 1999年从上海、南通等地医院门诊及住院患者经常规分离获得的临床致病菌株 (Ｔａｂ 1)。1.2　培养基与药物　选用ＭＨ培养基。Ｙ…     

菊花斑枯病菌生理性状的研究

菊花斑枯病为华南地区菊花发生最普遍而严重的一个病害。病原菌鉴定为Septoriachrysanthemella Sacc.,与国内大多数地区所鉴定的相一致,但其生长适温比国外所报道的为高,而与我国台湾省所报道的极为相似,这可能是不同于国外所报道的另一菌系。 此菌在人工培养基上生长极缓慢,形成黑褐色紧密状菌落。合适培养基为燕麦培养基、PDA培养基和菊花叶汁培养基,尤以燕麦培养基为最佳,这是前人所未曾报道的,而文献认为适于Septoria生长的蔗糖硫酸铵等三种人工合成培养基却不适于此菌生长。 此菌产孢适温为20～24℃,在此温度下和合适培养基上产孢所需时间均为16天;光照或黑暗对产孢无影响;产孢量亦以燕麦培养基为最佳。分生孢子萌发适温为26～28℃,适宜pH为5～7,并需要充足水湿、氧气和一定养料,即使在饱和湿度下孢子也不萌发,在嫌气条件下或在清水中孢子不萌发或萌发率极低;在供试的9种糖液中,以鼠李糖(Rhamnose)、葡萄糖(Glucose)、淀粉(starch)、乳糖(Lactose)对孢子萌发较好,最差的为麦芽糖 (Maltose)。     

硫酸软骨素裂解酶发酵培养基的获得及发酵条件的优化

目的考察发酵培养基中碳源、氮源及无机盐等因素及各种发酵条件对温和气单孢菌YH311产硫酸软骨素裂解酶的影响,获得硫酸软骨素裂解酶最佳发酵培养基和发酵条件。方法采用单因素实验法、均匀设计法及正交设计法。结果获得的最优培养基配方(g·L-1)为:葡萄糖2 5 ,牛肉膏5 0 0 ,硫酸软骨素10 0 ,尿素0 5 ,MgSO4·7H2 O 9 0 ( pH 7 0 ) ;最适产酶条件为:2 % ( φ)种子液,2 8℃,2 0 0r·min-1,振荡通气培养2 4h。在优化条件下,硫酸软骨素裂解酶的产率可达110 0 0U·L-1。结论通过对发酵培养基及发酵条件的优化可将硫酸软骨素裂解酶的产量提高5倍。     

苯丙氨酸和酪氨酸对白花曼陀罗组织培养的生长和产生生物碱的影响

本文研究了苯丙氨酸和酪氨酸对白花曼陀罗(Datura metal L.)组织培养中生物碱含量的影响。于 Murashige-Skoog 培养基(简称 MS 培养基)中加进1ppm 2,4-二氯苯氧乙酸(简称2,4-D)和1%琼脂(此培养基简称 RT 培养基),接种培养32个月。然后将组织转移到下述三种培养基,即①新鲜的 RT     

2000年版药典增修订项目及科研课题

(1) 培养基灵敏度检査法:参照美国药典23版的写法,简化操作方法及文字描述。(2) 培养基改为单剂量包装,并标明灵敏度及使用期限。(3) 对照用菌液:金黄色葡萄球菌和生孢梭菌增加一个稀释度,由1:10⁶改为1:10⁷。     

人-人杂交瘤在添加乙醇胺的无蛋白培养基中的生长

由于人单克隆抗体(HuMAb)在治疗应用方面优于鼠MAb,故HuMAb的大规模生产受到高度重视。作者将经EB病毒转化的小细胞肺癌患者的外周血B淋巴细胞与淋巴母细胞系KR-4融合得到的4株杂交瘤细胞,以2×10~5/ml接种于无血清培养基和无蛋白培养基中,观察细胞的生长速度和存活率。基础培养基(BM):Iscove改良的Dulbccco培养基(IMDM)/Ham氏营养混合物(F12)(1∶1),再加20ng/ml孕酮,6.3μl/1α-硫甘油。无血清培养基(BSA/Tf):BM中加0.5%牛血清白蛋白(BSA)及10μg/ml转铁蛋白(Tf)。无蛋白培养基:BM中添加各种非蛋白成份[三     

免疫制品无菌试验:培养基效力及防腐剂作用的比较

作者对生物制品无菌试验常用的几种培养基上的微生物生长情况作了比较,并研究了培养基中所含防腐剂对微生物生长的影响。测试用的培养基有:大豆-酪蛋白肉汤(SCD)、Sabourauds肉汤(SAB)、巯基乙酸盐液体培养基(FTG)、加入0.5%牛肉浸膏的FTG(FTB)、营养肉汤(NB)和庖肉汤(CMB)。所用的11种菌株分别代表真菌、厌氧菌     

脂联素对脂肪细胞条件培养基促系膜细胞合成转化生长因子β1的作用

目的 探讨脂联素对脂肪细胞条件培养基促系膜细胞(MsMC)合成转化生长因子β1(TGFβ1)的作用.方法 将MsMC分为7组:A组加入无血清DMEM培养基;B组加入脂肪细胞条件培养基;C组加入pSuper质粒转染后条件培养基;D组加入pcDNA3.1(-)质粒转染后条件培养基;E组加入脂联素siRNA-pSuper表达质粒转染后条件培养基;F组加入脂联素pcDNA3.1(-)表达质粒转染后条件培养基;C组加入添加3 mg/L脂联素的脂肪细胞条件培养基.用脂联素pcDNA3.1(-)表达质粒、脂联素siRNA-pSuper表达质粒、pcDNA3.1(-)质粒及pSuper质粒分别转染3T3-L1细胞(脂质体2000转染法),诱导细胞分化为成熟脂肪细胞后收集细胞,以蛋白质印迹法检测细胞裂解液中脂联素蛋白含量.孵育MsMC 9 h后,收取细胞,用实时定量聚合酶链反应检测细胞裂解液中TGFβ1 mRNA水平;孵育24 h后收取上清液,用酶联免疫吸附试验检测上清液中TGFβ1蛋白质水平.结果 与未转染的成熟脂肪细胞比较,用脂联素pcDNA3.1(-)表达质粒转染3T3-L1细胞得到的成熟脂肪细胞的细胞裂解液中脂联素含量增加[(0.59±0.06)比(0.21±0.02)],差异有统计学意义(P＜0.05);用脂联素siRNA-pSuper表达质粒转染3T3-L1细胞得到的成熟脂肪细胞的细胞裂解液中脂联素含量减少[(0.12±0.01)比(0.39±0.02)],差异有统计学意义(P＜0.05).B组TGFβ1 mRNA水平及蛋白质表达含量高于A、F、G组[TGFβ1 mRNA:(3.09 ±0.15)比(1.50±0.35)、(2.1±0.53)、(1.8±0.42),TGFβ1蛋白质水平:(708±10)比(224±16)、(382±11)、(300 ±25)],差异有统计学意义(P＜0.05).结论 脂肪细胞条件培养基可刺激系膜细胞合成TGFβ1,而脂联素对这一效应具有明显抑制作用.