进行期银屑病患者神经内分泌免疫网络中相关介质的表达

目的:探讨进行期银屑病患者的神经内分泌免疫网络中相关介质的变化情况并分析其关系.方法:用免疫组化法检测银屑病患者皮损和正常皮肤表皮P物质及神经生长因子(NGF)表达情况.用放射免疫法检测进行期寻常型银屑病患者血浆中P物质、白介素-2(IL-2)、白介素-10(IL-10)及皮质醇水平.结果:患者皮损P物质及NGF表达显著高于对照组正常皮肤(P<0.05).患者血浆中P物质、IL-2、皮质醇水平明显高于正常对照组(P<0.05);血浆IL-10水平显著低于正常对照组(P<0.05).结论:进行期银屑病神经内分泌网络稳态破坏,涉及多种相关介质,其间存在内在联系,可能在促进银屑病皮损处炎症反应及角质形成细胞增生中起重要作用.     

结节性红斑患者皮损处CD4、CD8表达的变化及意义

目的:分析结节性红斑患者皮损处CD4、CD8表达的变化及意义.方法:采用MaxVisionTM免疫组织化学染色法检测49例结节性红斑患者皮损组织(疾病组)及10例正常皮肤组织(对照组)CD4、CD8的表达情况.结果:疾病组CD4阳性率为100.00％,明显高于对照组(P<0.01).疾病组、对照组CD8分子阳性率分别比较差异无统计学意义(P>0.05).结论:结节性红斑患者皮损处存在T细胞亚群的失衡,考虑CD4+T细胞介导的细胞免疫在结节性红斑的发病中具有重要作用.     

趋化因子受体CXCR3 mRNA在寻常型银屑病患者皮损及外周血单个核细胞中的表达

目的 研究手常型银屑病患者皮损及外周血单一核细胞(PBMC)中趋化因子受体CXCR3 mRNA的表达及其临床意义.方法 RT-PCR法测定20例银屑病患者皮损和10例健康正常人皮肤及其PBMC中CXCR3 mRNA的表达;直线相关性分析方法分析银屑病患者皮损及PBMC中CXCRB的表达水平与银屑病皮损面积和严重程度指数(PASI)之间的关系.结果 银屑病患者皮损及PBMC中CXCR3 mKNA表达相对含量分剐为(1.44±0.72)和(1.49±0.10),正常人皮肤及PBMC中CXCR3 mRNA相对含量为(0.51±0.10)和(0.45±0.09).经统计学分析,银屑病皮损及外周血PBMC中CXCR3的mRNA表达明显高于正常对照组,差异有显著性(P<0.05);银屑病患者CXCR.3 mRNA的表达水平与PASI呈正相关(P<0.05).结论 趋化性因子受体CXCR3可能参与了在银屑病的发病过程.     

TGF-α、VEGF与MVD在银屑病患者皮损中的表达及相关性分析

目的 探讨转化生长因子α(TGF-α)及血管内皮生长因子(VEGF)在银屑病患者皮损血管生成机制中的作用.方法 采用SP免疫组化法检测寻常型银屑病患者皮损处TGF-α、VEGF及微血管密度(MVD)的表达情况,并以正常人皮肤作对照.结果 银屑病患者皮损处GF-α、VEGF的表达及MVD值显著高于正常对照组(P<0.01);银屑病患者皮损中的TGF-α、VEGF表达与MVD呈正相关(r=0.672,r=0.735,均P<0.01),TGF-α与VEGF的表达也呈正相关(r=0.821,P<0.01).结论 银屑病患者皮损中TGF-α、VEGF及MVD的表达水平均增高,表明TGF-α及VEGF可能引起银屑病患者皮损处血管增生,三者在银屑病皮损的形成发展过程中可能发挥协同促进调节作用.     

火针治疗稳定期白癜风的临床疗效及其CLSM图像特点

目的 评价火针治疗白癜风的临床疗效及皮肤激光扫描共聚焦显微镜(CLSM)图像特点.方法 采用随机自身对照试验设计.每位患者选择2块对称或相邻白斑,随机接受火针治疗或他克莫司治疗,疗程为3个月.记录治疗前、火针治疗3次及6次后白斑CLSM图像.结果 41例白癜风稳定期患者,火针治疗组有效率为82.9%,他克莫司对照组有效率为78.0%,治疗后两组疗效比较差异无统计学意义(P>0.05).火针治疗后,CLSM 观察可见,树突状黑素细胞出现,基底层及真皮乳头周围逐步出现色素颗粒,形成色素环.结论 火针和他克莫司治疗白癜风的疗效相当,且CLSM 可作为白癜风黑素细胞恢复情况的无创性、客观可靠检测手段.     

白癜风患者皮损处核因子E2p45相关因子2核转位异常

目的 明确白癜风患者皮损处是否存在核因子E2p45相关因子2(Nrf2)核转位异常.方法 应用试剂盒检测8例表皮移植白癜风患者皮损处与正常供皮处疱液中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和过氧化氢酶(CAT)水平,采用细胞免疫荧光组化法鉴定8例寻常型白癜风患者皮损处与正常供皮处表皮细胞以及3例健康对照包皮原代培养的表皮细胞中Nrf2的表达,同时应用蛋白质印迹法检测上述样本中表皮细胞的胞质和胞核中Nrf2的表达水平.结果 皮损处SOD与CAT水平显著低于正常供皮处(P＜0.05),MDA水平显著高于正常供皮处(P＜0.05);细胞免疫荧光结果显示,健康对照、患者正常供皮处Nrf2在表皮细胞的胞质和胞核中均有表达,而患者皮损处Nrf2表达主要集中在胞质,胞核中表达量非常低.蛋白质印迹结果显示,核蛋白中Nrf2表达水平,白癜风患者皮损处(0.11±0.03)明显低于正常供皮处(0.27±0.06)和健康对照(0.32±0.02,均P＜0.01);胞质蛋白Nrf2表达水平,皮损处(0.63±0.04)与正常供皮处(0.61±0.03)和健康对照(0.65±0.04)差异无统计学意义(均P＞0.05).结论 白癜风患者皮损处表皮细胞存在Nrf2核转位异常.     

β-catenin在角化性皮肤病与非黑素细胞性皮肤肿瘤中的表达

目的 研究β-catenin在角化性皮肤病和非黑素细胞性皮肤肿瘤中的表达及意义.方法 应用免疫组化EnVision二步法检测β-catenin蛋白在10例脂溢性角化病(SK)、26例光线性角化病(AK)、17例Bowen病(BD)和35例初发皮肤鳞状细胞癌(SCC)皮肤组织中的表达,以10例正常皮肤组织作为对照组.结果 SK、AK、BD和SCC皮肤组织中β-catenin的表达显著高于对照组皮肤组织(P＜0.001).β-catenin的细胞质和(或)细胞核表达在SK与AK组间无明显差异(P＞0.05),但均显著低于BD组(P＜0.01).BD组β-catenin表达缺失显著低于SCC组(P＜0.05).SCC Ⅰ级与Ⅱ、Ⅲ级相比,β-catenin的细胞质和(或)细胞核表达及表达缺失均无显著性差异(P＞0.05).结论 在正常皮肤向角化性皮肤病和非黑素细胞性皮肤肿瘤的进展过程中,细胞质和(或)细胞核中β-catenin的异常表达可能起了一定作用.     

TIG2在皮肤鳞癌中的表达及意义

目的:研究TIG2(tazarotene induced gene-2)在皮肤鳞癌中的作用机制.方法:用免疫组化和原位杂交的方法检测正常皮肤组织,未受累组织及鳞癌皮损中TIG2蛋白和mRNA的表达变化.结果:TIG2蛋白和mRNA表达于正常组织及未受累组织的表皮全层;在鳞癌的边缘皮损中,可见TIG2表达于角质层,棘层上中部,而不表达于棘层下部及基底层;在Ⅰ-Ⅱ期鳞癌中,TIG2可轻度表达于分化较好的角化珠周围;而在Ⅲ～Ⅳ期鳞癌中无表达.在正常组织和未受累皮肤中,TIG2的表达高丁鳞癌组织中的表达(P<0.01);边缘皮损基底层中的表达低于正常组织及未受累组织基底层中的表达(P<0.01);在Ⅲ～Ⅳ期鳞癌中的表达明显低于鳞癌边缘皮损中的表达(P<0.01).结论:TIG2可能参与鳞癌的发生和发展.     

Caspase3、Bcl-2和PCNA在银屑病皮损组织中的表达

目的　探讨银屑病发生发展中细胞增殖和凋亡相关指标表达的趋势。方法　应用免疫组化技术检测 30例寻常型银屑病皮损、邻近皮肤及 10例正常皮肤中PCNA、Bcl - 2、Caspase3的表达。结果　在正常表皮中Bcl - 2和PCNA在基底层阳性表达 ,但在寻常型银屑病皮损中Bcl- 2表达明显低于正常皮肤组 ,皮损处与邻近皮损处表达、邻近皮损处与正常皮肤表达比较有统计学差异 (均P <0 0 5 ) ;PCNA在银屑病皮损处为角质形成细胞广泛阳性表达 ,皮损处与邻近皮肤的表达、邻近皮肤与正常皮肤相比有统计学差异 (P <0 0 1) ;Caspase3在寻常型银屑病皮损处与邻近皮肤及正常皮肤的表达无统计学差异 (P >0 0 5 )。结论　银屑病时 ,PCNA过度表达 ,Bcl - 2低表达 ,表明细胞过度增殖 ,凋亡基因Caspase3表达无统计学差异     

β-catenin在角化性皮肤病与非黑素细胞性皮肤肿瘤中的表达

目的研究β-catenin在角化性皮肤病和非黑素细胞性皮肤肿瘤中的表达及意义。方法应用免疫组化EnVision二步法检测β-catenin蛋白在10例脂溢性角化病(SK)、26例光线性角化病(AK)、17例Bowen病(BD)和35例初发皮肤鳞状细胞癌(SCC)皮肤组织中的表达,以10例正常皮肤组织作为对照组。结果SK、AK、BD和SCC皮肤组织中β-catenin的表达显著高于对照组皮肤组织(P<0.001)。β-catenin的细胞质和(或)细胞核表达在SK与AK组间无明显差异(P>0.05),但均显著低于BD组(P<0.01)。BD组β-catenin表达缺失显著低于SCC组(P<0.05)。SCCⅠ级与Ⅱ、Ⅲ级相比,β-catenin的细胞质和(或)细胞核表达及表达缺失均无显著性差异(P>0.05)。结论在正常皮肤向角化性皮肤病和非黑素细胞性皮肤肿瘤的进展过程中,细胞质和(或)细胞核中β-catenin的异常表达可能起了一定作用。     

白癜风皮损旁黑素细胞自噬相关蛋白表达的研究

目的通过比较体外培养的白癜风黑素细胞与正常黑素细胞中自噬标志物微管相关蛋白轻链3（LC3II/I）、自噬相关蛋白p62、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）和自噬相关基因5（Atg5）的表达差异,分析其在白癜风发病中的可能作用。方法分离并原代培养来自于泛发型白癜风患者皮损旁皮肤的黑素细胞（白癜风黑素细胞组）以及正常志愿者皮肤的黑素细胞（正常对照组）,采用免疫印迹法分别检测不同来源黑素细胞中自噬标志物LC3II/I、自噬相关蛋白p62、mTOR和Atg5的表达,同时以改良的多巴氧化法测定细胞中的酪氨酸酶活性。结果LC3II/I及Atg5的表达在白癜风黑素细胞组中明显高于正常对照组（t=10.36、13.01,均P＜0.01）,而p62、mTOR蛋白水平及酪氨酸酶活性在白癜风黑素细胞组中明显低于正常对照组（t=5.12、7.22、36.51,均P＜0.01）。结论体外培养的白癜风黑素细胞存在自噬的活化及上调并伴有黑素细胞黑素合成功能的下降,提示自噬可能与白癜风的发病有关。     

白癜风患者血清和皮肤组织液肿瘤坏死因子-α水平的检测

目的:探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在不同类型、不同时期白癜风患者血清及皮肤组织液中水平变化.方法:采用放射免疫测定法检测57例不同类型、不同时期白癜风患者血清中TNF-α的水平,并与20例正常对照组比较;对其中45例患者白斑区、非白斑区及10例正常对照组皮肤组织液同样进行上述细胞因子检测.结果:散发型白癜风血清TNF-α(0.91±0.13ng/ml)水平明显高于正常对照组(0.78±0.09ng/ml)(P<0.01),散发型白癜风白斑区皮肤组织液TNF-α(0.99±0.09ng/ml)水平高于正常对照组(0.71±0.11ng/ml)(P<0.01).节段型白癜风患者皮肤和组织液TNF-α水平与正常对照组比较无显著性差异.结论:研究表明TNF-α可能参与非节段型白癜风的发病.     

成年期甲减大鼠海马SynaptotagminⅠ表达和替代治疗的效果

目的 探讨成年期甲状腺功能减退症(简称甲减)大鼠海马内突触结合蛋白(SytⅠ)的表达及甲状腺素替代治疗后的恢复状况,探讨甲减脑损伤及恢复可能的分子基础.方法 用丙基硫氧嘧啶(PTU)建立成年期大鼠甲减模型,免疫组织化学方法分析甲减组、替代治疗组、正常对照组大鼠海马内SytⅠ的表达情况.结果 甲减组大鼠血清T3(triiodothyronine, T3)、T4(tetraiodothyronine, T4)显著低于正常对照组(P<0.05);海马CA1、CA3和齿状回(dentate gyrus,DG区)SytⅠ的蛋白表达水平显著低于正常对照组(P<0.05或P<0.01).甲状腺素替代治疗后,血清T3、T4恢复至正常水平(P>0.05);SytⅠ的蛋白表达水平在DG区分子层明显增加,达到正常水平(P>0.05);其他区域与甲减组比较无增加,仍明显低于正常对照组(P<0.05).结论 成年期甲减降低海马内SytⅠ蛋白表达,短期替代治疗可使血清甲状腺素恢复正常,部分SytⅠ的蛋白表达恢复.     

Smad3和Smad7蛋白在硬皮病患者皮损中的表达及意义

目的:探讨Smad3和Smad7在硬皮病发病机制中的作用。方法:采用免疫组化SP法检测46例硬皮病患者皮损中Smad3与Smad7蛋白的表达,以15例正常皮肤组织作为对照。结果:与对照组相比,Smad3蛋白在硬皮病患者皮损中明显升高(P<0.01),Smad7蛋白表达则降低(P<0.01);正常对照组皮肤中,Smad3与Smad7表达呈正相关(r=0.679,P<0.01),而硬皮病患者皮损中无相关性(P>0.05)。结论:Smad3表达上调与Smad7下调可能促进了硬皮病纤维化的发展。     

过氧化物酶体增殖激活物受体γ在皮肤恶性黑色素瘤中的表达及意义

目的 研究过氧化物酶体增殖激活物受体γ(PPARγ)在皮肤恶性黑素瘤(MM)中的表达及其意义.方法 采用免疫组化方法(SP法)检测26例MM患者(MM组)及30例色素痣对照组(色素痣组)皮损部位PPARγ蛋白的表达水平.结果 MM组PPARγ的表达强度显著高于色素痣组(P<0.01);且有转移MM组显著高于无转移MM组(P<0.05).结论 MM患者皮损部位PPAR<的表达增高,在MM的发病机制中可能起一定的作用,有可能成为治疗MM的新靶点.     

β防御素-2和γ干扰素在尖锐湿疣皮损中表达的研究

目的:研究和探讨β防御素-2(HBD-2)和γ干扰素(IFN-γ)在尖锐湿疣发病和预后中的作用.方法:用免疫组化法检测HBD-2和IFN-γ在25例尖锐湿疣(CA)(初发患者)皮损、20例寻常性银屑病皮损以及25例健康人皮肤石蜡切片中的表达.SPSS 16.0统计软件进行数据分析,组间行Wilcoxon秩和检验,并进行相关性分析.结果:HBD-2、IFN-γ在尖锐湿疣皮损的表达主要见于基底层, HBD-2、IFN-γ水平明显低于银屑病阳性对照组(Z=-7.174,-7.230;P<0.O1),HBD-2的水平较正常皮肤为高表达(Z=-5.147,P<0.01), IFN-γ的水平较正常皮肤为低表达(Z=-6.311,P<0.05),且HBD和IFN无相关性(r=0.123,P=0.467>0.01).结论:推测HBD-2、IFN-γ可能通过不同的途径共同参与了尖锐湿疣的免疫反应过程并发挥了一定的作用.     

氯化锂对尾吊大鼠骨丢失的防护作用

目的 研究GSK3特异性抑制剂氯化锂(lithium chloride,LiCl)对尾吊大鼠骨密度的影响.方法 SD雄性大鼠18只,分为3组:正常对照组(Control)、尾吊对照组、尾吊LiCl组,每组6只.尾吊LiCl组大鼠每日灌胃给予LiCl 20 mg/(kg·d).分别于第1天和第15天使用双能X线骨密度测量仪测定大鼠左股骨骨密度(bone mineral density,BMD);第15天处死大鼠取左胫骨近心端进行组织包埋切片,HE染色,进行骨组织计量学测量,包括骨小梁面积百分率 (Tb.Ar%)、骨小梁数量 (Tb.N)、骨小梁平均厚度(Tb.Th);对大鼠右股骨进行三点弯曲实验,测量骨力学指标.采用Western blot观察骨组织中β-catenin蛋白的表达.结果 实验结束后,尾吊对照组和尾吊LiCl组大鼠BMD均低于正常对照组(P<0.05),而尾吊对照组大鼠BMD明显低于尾吊LiCl组(P<0.01);骨组织计量学结果,尾吊对照组大鼠骨小梁平均厚度低于正常对照组(P<0.05),骨小梁面积百分率、骨小梁数量明显低于正常对照组(P<0.01),而尾吊LiCl组大鼠三项参数均高于尾吊对照组(P<0.05);骨力学测试结果,尾吊对照组大鼠股骨弹性模量低于正常对照组(P<0.05),刚性系数明显低于正常对照组(P<0.01),而尾吊LiCl组大鼠股骨弹性模量高于尾吊对照组(P<0.05),刚性系数明显高于尾吊对照组(P<0.01).Western blot结果显示,尾吊对照组β-catenin蛋白表达量明显低于正常对照组,而尾吊LiCl组β-catenin 蛋白表达量明显高于尾吊对照组.结论 尾部悬吊能够造成大鼠废用性骨丢失,而LiCl能有效地预防尾吊所导致的骨质疏松.     

扁平苔藓皮损中转化生长因子β_1的表达

目的 探讨转化生长因子β1在扁平苔藓中的表达及在其发病中的作用. 方法 用免疫组化的方法检测30例扁平苔藓皮损及20例正常皮肤中转化生长因子β1的表达情况. 结果 扁平苔藓皮损中基底液化区域转化生长因子β1的表达低于基底未液化区域及正常皮肤组织,差异有统计学意义(P<0.05). 结论 转化生长因子β1表达的减低在扁平苔藓的发病中起重要作用.     

银屑病患者皮损T-bet/GATA3表达的免疫组化研究

目的检测Th1/Th2细胞特异性转录因子T-bet/GATA3在寻常性银屑病患者皮损中表达,探讨T-bet/GATA3在银屑病发病机制中的作用及意义。方法采用免疫组化ABC法研究银屑病患者皮损中T-bet、GATA3表达,并以15例正常人作为对照组。通过图像分析技术进行定量分析。结果银屑病皮损中既可表达T-bet,又可表达GATA3,而在正常皮肤不表达。定量分析显示,皮损中T-bet表达水平显著高于GATA3(P<0.05)。结论T-bet/GATA3表达的失衡和T-bet高表达可能参与了银屑病发病过程。     

成纤维细胞生长因子10 mRNA在寻常型银屑病皮损中的表达

目的:研究成纤维细胞生长因子10 mRNA在寻常型银屑病皮损中的表达,探讨其在银屑病发病中的作用机制.方法:应用原位杂交法检测FGF10 mRNA在22例正常皮肤组织、银屑病皮损和未受累皮肤中的表达和分布.结果:原位杂交法检测发现,在22例正常皮肤组织、银屑病皮损和未受累皮肤表皮的全层或表皮中下层可见FGF10 mRNA表达(95%);在正常皮肤表皮的基底层或少量细胞内可见FGF10 mRNA的表达(5%);在寻常型银屑病非皮损表皮的中下层或个别细胞内可见FGF10 mRNA的表达(82%).寻常型银屑病皮损表皮中FGF10 mRNA的表达明显高于正常对照组(P＜0.05).结论:FGF10 mRNA在银屑病发病早期阶段的表达增高可能与银屑病的早期发病有关.