安徽省产CTX-M型超广谱β-内酰胺酶的肺炎克雷伯菌耐药性和基因型研究

目的 了解安徽地区产CTX-M型超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的肺炎克雷伯菌检出率,确定其基因型,并对其流行病学特征进行研究.方法纸片法进行表型鉴定;PCR检测产CTX-M型超广谱β-内酰胺酶菌株;分析基因型;琼脂稀释法进行药物敏感试验.结果 52株肺炎克雷伯菌经通用引物PCR检测证实产CTX-M酶,占所有分离菌株的23.4%(52/222),占产ESBLs菌株的49.5%(52/105);经序列分析显示:15株CTX-M-1组阳性结果有12株表达CTX-M-22,2株表达CTX-M-15,1株表达CTX-M-3;37株CTX-M-9组阳性结果有35株表达CTX-M-14,2株表达CTX-M-24;CTX-M-2组和CTX-M-8组未检测出;其中有2株新基因被检出(序列号分别为EU136031和EU202673);药敏结果显示临床野生菌株对多种β-内酰胺类耐药,对哌拉西林/三唑巴坦、阿米卡星、头孢他啶相对较敏感.结论安徽地区CTX-M酶以CTX-M-14型和CTX-M-22型为主,同时存在变异型;药敏结果显示产酶菌株对头孢噻肟和头孢曲松、氨苄西林高度耐药.     

产超广谱β-内酰胺酶细菌耐药性监测分析

目的掌握临床常见产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）细菌耐药性现状及变迁,为临床合理用药提供依据。方法药物敏感性试验多数采用分析仪检测,少数采用K-B法,对产超广谱β-内酰胺酶细菌耐药性进行分析。结果3年间,产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌总检出率分别为48．3％和45．5％,呈逐年增长趋势;其对氨基糖苷类、喹诺酮类、多数头孢菌素类等的耐药率高于非产ESBLs株,呈多重耐药,对碳青霉烯类和酶抑制剂类较敏感。结论应加强产ESBLs细菌耐药性监测,及时掌握耐药性的变迁,合理应用抗菌药物,控制细菌耐药性的进一步产生和蔓延。     

产超广谱β-内酰胺酶细菌的监测

目的 对我院各临床科室分离的肠杆菌科细菌产ESBLs情况及耐药性进行分析。方法 采用该酶确证试验。结果 产ESBLs菌检出率为26．84％，重症监护病房中ESBLs菌检出率为58．62％。结论 及时隔离并防止产酶菌的扩散有重要意义。     

产超广谱β-内酰胺酶细菌的检测及耐药性观察

目的 探讨大肠埃希氏菌和肺炎克雷伯氏菌中超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的发生率及其耐药现状，为临床合理用药提供依据。方法 对54株大肠埃希氏菌和74株肺炎克雷伯氏菌采用纸片扩散初筛法和复合纸片表型确证试验进行检测。结果 超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)发生率大肠埃希氏菌为40．7％，肺炎克雷伯氏菌为56．8％，超广谱β-内酰胺酶阳性菌株对多种抗生素耐药性高。结论 大肠埃希氏菌和肺炎克雷伯氏茵超广谱β-内酰胺酶发生率高，临床应慎用三代头孢菌素和氨曲南。     

液化沙雷菌超广谱β-内酰胺酶的特性研究

目的研究液化沙雷菌超广谱β-内酰胺酶的特性。方法超声破碎法提取临床分离液化沙雷菌CR04的β-内酰胺酶，等电聚焦（IEF）测定其等电点（pI）；硫酸铵反抽提、Sephadex G-75凝胶过滤和DE-52阴离子交换层析进行酶的纯化；SDS—PAGE法测定分子量和紫外分光光度法测定酶动力学参数。结果液化沙雷菌超广谱β-内酰胺酶的pI为7．5，分子量为28．77ku，动力学分析显示，该酶能水解头孢他啶、头孢噻肟和氨曲南，对舒巴坦（IC50为77nmol／L）和三唑巴坦（IC50为17nmol／L）敏感。结论液化沙雷菌产生的超广谱β-内酰胺酶对酶抑制剂敏感。     

肺炎克雷伯菌超广谱β-内酰胺酶基因型研究

目的探讨我院肺炎克雷伯菌中超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）基因分布规律。方法对20株经双纸片试验确证为ESBLs表型阳性的肺炎克雷伯菌进行bla TEM-1、blaSHV-1、CTX—M-1组、TOHO-1组等4种基因PCR扩增，并对16株blaSHV-1基因PCR扩增阳性的菌株进行基因序列测定，在Internet网上与GenBank中的已知序列进行核苷酸相似性分析，并进行编码基因对位和氨基酸序列对比分析。结果产ESBLs肺炎克雷伯菌中blaTEM-1，blaSHV-1，CTX—M-1组等3种基因扩增阳性率分别是50．0％、95．0％、20．0％。16株肺炎克雷伯菌中有4株序列与SHV—1a（序列号：X98101，74→934）氨基酸序列完全相同；有3株序列与SHV-2（序列号：AY570959，42→812）100％相同；有2株序列与SHV-11（序列号：AY293069，41→817）100％相同；有4株序列与SHV-27（序列号：AF293345，2→821）氨基酸序列完全相同；有1株序列与SHV-28（序列号：AF538324，12→823）100％相同；有2株序列在GenBank中未找到与之完全相同的序列。结论本地肺炎克雷伯菌中有SHV—1a、SHV-11、SHV-28广谱β-内酰胺酶基因和SHV-2、SHV-27 ESBLs基因存在。     

产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯氏菌的耐药性监测

目的 对肺炎克雷伯氏菌进行超广谱β-内酰胺酶检测及耐药性测定。为产ESBLs细菌的监控和治疗提供依据。方法 对临床分离的肺炎克雷伯氏菌采用K—B纸片扩散法．严格按照美国NCCLS制定的标准，进行ESBLs检测并对19种抗生素的耐药性测定。结果 在41株肺炎克雷伯氏菌中，检出16株产ESBLs阳性率为39．0％。ESBLs阳性株除对亚胺培南、头孢哌酮／舒巴坦高度敏感外，对其它抗生素的耐药性明显高于ESBLs阴性株。结论 产ESBLs的肺炎克雷伯氏菌在临床分离株中阳性率较高．且对多种抗生素耐药．应加强对ESBLs的检测和其感染者的治疗。     

肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶基因分型研究

目的调查广州地区下呼吸道感染肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBL)的分离率及各种基因型的流行病学分布。方法收集广州地区13家医院2001-10～2002-12临床分离的肺炎克雷伯菌511株,采用美国临床实验室标准化委员会规定的ESBL表型筛选和确证试验确定ESBL的发生率、PCR扩增对产ESBL菌初步分型,然后对部分PCR扩增阳性产物测序,序列分析进一步确定基因型。结果肺炎克雷伯菌产ESBL分离率为40.1%。TEM型49株占21.9%,均为TEM-1型;CTX-M型59株占28.8%;SHV型96株占46.8%。结论SHV型是广州地区下呼吸道感染肺炎克雷伯菌产ESBL流行的常见基因型。     

第三四代头孢菌素对细菌产超广谱β-内酰胺酶的影响

目的　了解第 3 ,4代头孢菌素的使用及其与细菌产超广谱 β 内酰胺酶的关系 ,以指导临床合理用药。方法　选取江汉大学附属医院确诊为下呼吸道感染的住院患者 44 3例 ,对每例患者送检的晨痰标本经涂片筛检合格后再培养分离 ,共培养出 473株致病菌 (真菌除外 )。采用Kirby Bauer扩散法进行药敏分析。对每例患者使用第 3 ,4代头孢菌素情况进行统计。结果　 2 0 0 1,2 0 0 2 ,2 0 0 3年第 3 ,4代头孢菌素使用率分别为 3 6 67% ,41 46%及 46 67% ;大肠埃希菌产超广谱 β 内酰胺酶分别为 17 65 % ,3 8 0 0 % ,3 9 0 2 % ;肺炎克雷白杆菌产超广谱 β 内酰胺酶分别为 19 2 3 % ,43 90 % ,44 74%。结论　第 3 ,4代头孢菌素的使用率增加 ,细菌产超广谱 β 内酰胺酶亦逐年增加。     

关于超广谱β-内酰胺酶与细菌耐药性的研究

目的：了解鞍山市第二医院大肠杆菌和肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）菌的发生率及其与细菌耐药性的关系。方法双纸片、酶抑制剂增强纸片扩散法;Kirby-Bauer（KB）法测定ESBLs株对抗菌药物的敏感性。结果大肠杆菌中产ESBLs菌株占26.67%,肺炎克雷伯菌中为24.27%;上述产ESBLs株对第三代头孢菌素和氨曲南多为耐药,亚安培南的耐药株少见,对阿米卡星、环丙沙星等多为耐药。结论超广谱β-内酰胺酶是对第三代头孢菌素、单环β-内酰胺类抗生素耐药的重要机制。     

产超广谱β-内酰胺酶的肠杆菌科细菌对喹诺酮类药物的耐药性分析

目的　分析从临床老年患者分离的产 ESBL s肠杆菌科细菌对喹诺酮类药物的耐药性。方法　利用法国 Bio- Merieux公司生产的全自动细菌分析系统 VITEK- 6 0和革兰氏阴性杆菌鉴定卡 GNI 及药敏卡 GNS- 5 0 6、GNS- 12 0对老年患者各种标本分离得到的 12 70株肠杆菌科细菌进行喹诺酮类抗菌药物耐药试验及 ESBL s检测 ,ESBL s产酶率为 2 0 .6 %。分析其中 ESBL s阳性的 2 4 1株菌株对喹诺酮抗菌药物环丙沙星、左氧氟沙星、培氟沙星和萘啶酸的耐药特性。结果　产 ESBL s的大肠埃希氏菌对这四种抗菌药物均高度耐药 ,耐药率在 92 .4 %以上。同时 ,喹诺酮类药物对肺炎克雷伯氏菌的体外抗菌活性亦不高 :左氧氟沙星、环丙沙星耐药率为 6 1.8% ,培氟沙星、萘啶酸的耐药率超过 70 %。而其它产 ESBL s的肠杆菌科细菌对左氧氟沙星、环丙沙星有较高的敏感性 ,敏感率为 77.4 % ,但培氟沙星、萘啶酸的耐药程度较高 ,耐药率为 75 .0 %。结论　应避免使用喹诺酮抗菌药物治疗 ESBL s阳性的大肠埃希氏菌感染。对肺炎克雷伯氏菌的 ESBL s产酶株 ,喹诺酮抗菌药物有一定的体外抗菌活性 ,临床使用时应以体外药敏试验结果为依据谨慎使用。除大肠埃希氏菌、肺炎克雷伯氏菌以外的 ESBL s阳性肠杆菌科细菌的感染 ,左氧氟沙星、环丙沙星     

TEM型超广谱β-内酰胺酶的载体构建及其表达

目的构建TEM型ESBLs表达载体。方法收集2006-2007年郑州大学第一附属医院分离产ESBLs大肠杆菌46株,通过PCR克隆目的基因后,采用T4连接pET28 a与目的基因,并通过双脱氧链终止法验证基因,最后采用酶抑制剂增强试验检测载体表达。结果PCR扩增条带约在900bp位置处;序列分析结果正确;酶抑制剂增强试验阳性。结论TEM型ESBLs表达载体构建成功。     

SHV型超广谱β-内酰胺酶的研究进展

β-内酰胺酶的产生是细菌对β-内酰胺抗生素耐药的主要机制。SHV型超广谱β-内酰胺酶在革兰阴性耐药菌中普遍存在,并通过不断的点突变,拓宽了酶活性谱或增强了耐受β-内酰胺酶抑制剂的能力。现就SHV型超广谱β-内酰胺酶研究进展作一综述。     

产超广谱β-内酰胺酶细菌感染的耐药性分析

目的:了解产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)细菌感染的发生率及耐药特征,为临床用药提供参考。方法:对我院2001年～2004年分离出的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌进行ESBLs检测,比较各年感染的发生率,并采用K-B纸片法进行药敏试验。结果:产ESBLs的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌感染发生率呈逐年上升趋势;产ESBLs的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌对亚胺培南的耐药率最低,分别为1.9%、2.9%,其次是哌拉西林/他唑巴坦、阿米卡星,分别为26.2%、20.5%和33.6%、35.2%。结论:碳青酶烯类抗生素可作为产ESBLs细菌感染的首选药。     

产超广谱β-内酰胺酶细菌的检测及耐药性分析

目的对超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)细菌进行检测,为防止其传播及治疗提供依据。方法应用纸片扩散确证法检测ESBLs,K-B法做药敏试验。结果在227株肠杆菌科细菌中检出ESBLs细菌89株,它们对几乎所有的β-内酰胺酶类抗生素产生交叉耐药,对氨基糖苷类,喹诺酮类部分耐药,对磺胺类全部耐药,对亚胺培南的敏感率为100％。结论产ESBLs细菌具有较高的交叉耐药性,通过耐药质粒可传递给其他细菌,实验室应积极开展ESBLs的检测,并向临床及时报告。     

产超广谱β-内酰胺酶细菌的检出率和耐药性分析

目的了解近年来产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)细菌感染的发生率及耐药特征。方法对常熟市第二人民医院2003—2005年住院患者送检的各类标本中分离到的肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌进行ESBLs检测。结果该院产ESBLs的肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌检出率从2003年的38.98%和36.36%上升到2005年的55.56%和50.54%;产ESBLs菌与非产ESBLs菌对亚胺培南100%敏感;产ESBLs菌对其他13种抗菌药物的耐药率均高于非产ESBLs菌,其中阿米卡星的耐药率上升较慢,而其他抗菌药物耐药率上升较快,特别是所有第3代以上头孢类抗生素的耐药率上升趋势令人担忧。结论肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌的ESBLs检出率与耐药率逐年增加,这与第3代以上头孢类抗生素使用率逐年增加有密切关系,抗菌药物的合理应用是控制和避免耐药菌株产生的关键所在;产ESBLs菌重症感染的患者应首选亚胺培南。     

下呼吸道细菌产超广谱β-内酰胺酶耐药性分析

目的:监测我院下呼吸道产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)菌株耐药状况,指导临床合理用药.方法:采集2003年8月至2005年2月呼吸科住院患者下呼吸道标本,分离大肠埃希菌41株及肺炎克雷伯杆菌95株;用双纸片初筛法及纸片扩散法确证试验、检测ESBLs;用琼脂扩散法作药敏试验,并对药敏试验结果以χ2检验分析.结果:检测菌株136株,其中ESBLs阳性株44株,总阳性率32.4%.大肠埃希菌和肺炎克雷伯杆菌产ESBLs菌株对碳青霉烯类抗生素的耐药率分别为0和3.2%;对头孢哌酮-舒巴坦的耐药率分别为23.1%和25.8%;对哌拉西林-三唑巴坦的耐药率分别为15.4%和6.5%.结论:产ESBLs细菌对β-内酰胺类抗生素耐药率较高,对不同种类抗生素有多重耐药的特点.碳青霉烯类仍然是对产ESBLs菌最有效的药物,含酶抑制剂的β-内酰胺类复合抗生素对其仍有较强的抗菌活力;氨基糖苷类抗生素中以阿米卡星敏感性最高;喹喏酮类药物对其耐药率较高,建议对其应用加以控制.     

三种超广谱β-内酰胺酶手工检测方法的比较

目的评价三种超广谱β-内酰胺酶手工检测方法的可靠性。方法采用NCCLS纸片确证试验、双纸片增效法和E-test法对60株大肠埃希菌和50株肺炎克雷伯菌进行了检测比较。结果纸片确证试验、双纸片增效法和E—test法的敏感性分别为95．2％、88．1％和97．6％，特异性分别为98．5％、100％和100％。结论E—test法的特异性和敏感性最高、其次是NCCLS纸片确证试验。     

血流感染产超广谱β-内酰胺酶细菌的药敏分析

目的筛选对超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的敏感抗生素,为提高ESBLs感染患者临床治愈率提供指导。方法血液感染患者用BacT/Alert全自动血培养仪细菌培养、VitekⅡ细菌鉴定仪进行鉴定,K-B药敏纸片测定法进行药敏试验并筛选出ESBLs细菌160株,肉汤稀释法测定最低抑菌浓度(MIC)。结果 ESBLs菌以大肠埃希菌为主,对亚胺培南、美罗培南、头孢美唑、替加环素、黏菌素和阿米卡星的敏感性分别为100%、100%、94.38%、100%、100%和95.63%,而对头孢他啶和四代头孢菌素的头孢吡肟的敏感率仅达58%,加酶抑制剂的复合抗生素敏感性分别为哌拉西林/三唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦、替卡西林/克拉维酸和氨苄西林/舒巴坦,敏感率分别为82.50%、80.63%、13.13%和3.75%。结论治疗ESBLs感染应以抗生素敏感性试验为指导,提高救治率。