单免疫球蛋白白细胞介素1受体相关蛋白在脂多糖诱导的急性肺损伤小鼠肺组织中表达的研究

目的 通过构建小鼠急性肺损伤（ ALI） 模型, 观察单免疫球蛋白白细胞介素1 受体相关蛋白（ SIGIRR） 在正常小鼠及ALI 小鼠模型肺组织中的表达规律, 为SIGIRR 在ALI 预防及治疗方面的应用提供基础。方法 将30 只雄性BALB/C 小鼠随机分为对照组及脂多糖（ LPS） 组, 每组15只。腹腔注射戊巴比妥钠麻醉满意后, 行气管插管, 呼吸机辅助呼吸。气管内缓慢滴入LPS 溶液（ 1 mg/kg, 500 μL） 构建ALI 模型。对照组按上述操作步骤, 气管内注射入生理盐水。观察小鼠肺弹性阻力的变化; 肺水肿程度观察; 肺组织病理切片HE 染色后光镜下观察肺组织病变情况; 收集小鼠支气管肺泡灌洗液（ BALF） , ELISA 法检测细胞因子白细胞介素1β（ IL-1β） 、肿瘤坏死因子α（ TNF-α） 和IL-6 浓度; 收集肺组织, ELISA 法检测肺组织匀浆内一氧化氮（ NO） 浓度和髓过氧化物酶（ MPO） 活性;免疫组化检测肺组织中SIGIRR 表达,Western blot 检测各个时间点肺组织SIGIRR 表达水平的变化。结果 模型小鼠肺弹性阻力较对照组明显上升; 模型小鼠肺组织湿/ 干重比值较对照组明显增高; 模型小鼠肺组织的病理呈现典型的ALI 病理改变特征, 对照组小鼠则表现为正常的肺组织病理学特点;模型建立3 h后, ELISA 法检测ALI 小鼠BALF中IL-1β、TNF-α及IL-6 浓度分别为（ 517 ±18） pg/mL、（ 3523 ±168） pg/mL和（ 676 ±25） pg/mL, 显著高于对照组（ P 〈 0. 05） ; ELISA 法检测模型小鼠肺组织匀浆液中NO 的浓度和MPO 的活性分别为（ 88. 1 ±2. 6） μmol /mL 和（ 215 ±7） μIU/mL, 显著高于对照组（ P 〈0. 05） ; 免疫组化染色提示SIGIRR 在正常的小鼠肺组织中存在表达, 主要分布于肺泡及气道上皮细胞; 模型小鼠肺组织Western blot 结果表明： LPS 诱导小鼠ALI 后1 h, SIGIRR 的表达即开始下降, 3 h 后降至最低, 随后缓慢恢复, 至24 h时基本恢复正常表达水平。结论 SIGIRR 在正常的小鼠肺组织中存在表达, 主要分布于肺泡及气道上皮细胞, LPS 诱导小鼠ALI 后SIGIRR 的表达短期内下降, 至24 h后基本恢复正常表达水平。     

急性肺损伤时白细胞介素10在肺泡巨噬细胞中的表达

急性肺损伤(ALI)发病的根本原因是肺内过度、失控的炎性反应。白细胞介素10(IL-10)是重要的抗炎性细胞因子,主要由肺泡巨噬细胞(AM)产生,在ALI时起重要调控作用。现通过IL-10与AM表型的关系、IL-10在ALI中的抗炎机制以及IL-10在AM中的释放时相三方面,来阐述IL-10在AM中的表达。IL-10在ALI中AM的表达亟待更多的研究,使其成为治疗ALI的有效手段。     

人IL—1,IL—1ra及IL—6在胸腺上皮细胞中的表达

应用ＭＴＴ及原位杂交技术对本室建立的人胸腺上皮样细胞株（ＴＥＣ１）分泌的细胞因子活性蛋白及其ｍＲＮＡ的表达进行了测定。结果表明，ＴＥＣ１细胞自发性分泌ＩＬ－１及ＩＬ－６活性蛋白，ＴＥＣ１细胞的起始浓度为５×１０４／ｍｌ，培养５天后，ＴＥＣ１细胞培养上清液中ＩＬ－１的活性平均为８４．６±１２．０Ｕ／ｍｌ；ＩＬ－６的活性平均为６５．４±１４．０Ｕ／ｍｌ；经原位杂交发现ＴＥＣ１具有ＩＬ－１、ＩＬ－１ｒａ及ＩＬ－６ｍＲＮＡ的表达。提示：ＴＥＣ１细胞分泌的上述三种细胞因子对Ｔ细胞的发育具有重要意义。     

布雷菲德菌素A在脂多糖诱导急性肺损伤中的作用

目的 探讨布雷菲德菌素A(Brefeldin A)在脂多糖(LPS)诱导急性肺损伤中的作用。 方法 小鼠肺泡巨噬细胞(MH-S)和上皮细胞(MLE-12)分别给予浓度为1、10、100 μM的Brefeldin A后,立即用LPS 500 ng/ml处理,收集3、6、9、24 h的细胞上清并测定MH-S中的肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量和MLE-12中的趋化因子KC值;ICR小鼠随机分为生理盐水组(Normal组)、模型组(LPS组)、地塞米松组(Dex组,5 mg/kg)、Brefeldin A组(BFA组,10 mg/kg),每组12只,气道内2 mg/kg滴入LPS制备急性肺损伤模型,生理盐水组给予等体积生理盐水。6 h后观察肺组织病理改变,测定肺泡灌洗液(BALF)中白细胞、白蛋白含量和TNF-α、白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)等炎症因子含量,检测肺组织中髓过氧化物酶(MPO)、cAMP含量和MAPK信号通路中ERK、p38和JNK等蛋白激酶分子磷酸化水平的变化。 结果 100 μM的Brefeldin A能显著减少MH-S中TNF-α的释放和MLE-12细胞中KC的产生(P<0.001)。Brefeldin A显著改善肺组织病理变化,降低BALF中白细胞(P<0.001)和TNF-α(P<0.05)含量,对BALF中白蛋白、IL-1β和IL-6无显著影响,显著降低小鼠肺组织中MPO活性(P<0.05),升高cAMP的水平(P<0.001),同时能显著抑制ERK的磷酸化(P<0.05)。 结论 Brefeldin A对急性肺损伤可产生保护作用,其机制与抑制相关炎症因子释放、升高细胞内cAMP的含量、抑制ERK磷酸化等途径有关。      

肝细胞生长因子在内毒素诱导肺泡Ⅱ型上皮细胞损伤中的作用

目的 探讨肝细胞生长因子(HGF)对经内毒素(LPS)诱导的肺泡Ⅱ型上皮细胞(AT-Ⅱ)磷脂分泌功能及细胞增殖和凋亡的影响.方法 建立体外培养的AT-Ⅱ细胞内毒素损伤模型,加入不同剂量的HGF,采用流式细胞仪(FCM)检测AT-Ⅱ细胞凋亡率,MTT法绘制细胞生长曲线,化学测定法测定培养介质中总磷脂含量.结果 内毒素可导致AT-Ⅱ细胞损伤,表现为细胞凋亡发生率增高;HGF能促进AT-Ⅱ细胞增殖并降低其凋亡率,在5～20ng/ml范围内其抗凋亡作用呈剂量依赖性增强,在10～20ng/ml时,肺泡Ⅱ型上皮细胞有最佳增殖速率,但对培养介质中磷脂含量无明显影响(P＞0.05).结论 肝细胞生长因子对内毒素诱导的肺泡Ⅱ型上皮细胞损伤具有保护作用,但对其分泌磷脂没有促进作用.     

肺泡Ⅱ型上皮细胞凋亡在急性肺损伤中的作用

细胞凋亡 (Ａｐｏｐｔｏｓｉｓ)又称为程序性细胞死亡(Ｐｒｏｇｒａｍｍｅｄｃｅｌｌｄｅａｔｈ ,ＰＣＤ) ,是一种由基因调控的主动而有序的细胞死亡过程 ,参与机体许多重要的生理及病理过程。目前认为许多参与全身炎症反应的细胞和介质均可对细胞凋亡产生影响 ,因此细胞凋亡已开始成为全身炎症性疾病的研究热点。急性肺损伤 (Ａｃｕｔｅｌｕｎｇｉｎｊｕｒｙ ,ＡＬＩ)是指机体遭受严重感染、创伤、辐射、休克等打击后 ,出现的以弥漫性肺泡毛细血管膜损伤导致的肺水肿和微肺不张为病理特征的一种肺部炎症和通透性增加综合征 ,目前认为是机体…     

脂多糖预处理对大鼠急性胰腺炎IRAK-4表达的影响

目的:观察脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)预处理后白细胞介素-1受体相关激酶-4(Interleukin-1 receptor-associated kinase 4,IRAK 4)表达在大鼠急性胰腺炎(Acute pancreatitis,AP)早期的变化,探讨LPS预处理减轻AP的可能机制。方法:雄性SD大鼠63只,随机分为3组:假手术组(Sham组)、急性胰腺炎(AP组)和LPS预处理组(LPS组),LPS组经腹腔注射LPS,其余两组均给予等体积生理盐水。Sham组造模后3 h取材,其余两组分别于造模后3、6、12、24 h取材。HE染色显微镜下观察各组病理改变,Western blot及RT-PCR法测定胰腺组织IRAK 4蛋白和mRNA表达,免疫组化法检测胰腺组织NF-κB表达,ELISA法检测血浆中TNF-α含量。结果:病理损伤AP组>LPS组>Sham组。AP组IRAK 4 mRNA及蛋白的表达于12 h达到高峰,随后降低,而LPS预处理后其表达明显低于AP组(P<0.01),且随时间的延长无明显改变(P>0.05)。LPS组各时间点NF-κB及血液TNF-α表达明显低于AP组(P<0.01),两组均于12 h达到高峰(P<0.01)。结论:抑制IRAK 4表达,进而抑制NF-κB及TNF-α等的表达,可能是脂多糖预处理对AP保护作用的重要机制之一。     

脂多糖预处理对大鼠急性胰腺炎IRAK-4表达的影响

目的：观察脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)预处理后白细胞介素-1受体相关激酶-4(Interleukin-1 receptor-associated kinase 4,IRAK-4)表达在大鼠急性胰腺炎(Acute pancreatitis,AP)早期的变化,探讨LPS预处理减轻AP的可能机制。方法：雄性SD大鼠63只,随机分为3组：假手术组(Sham组)、急性胰腺炎(AP组)和LPS预处理组(LPS组),LPS组经腹腔注射LPS,其余两组均给予等体积生理盐水。Sham组造模后3 h取材,其余两组分别于造模后3、6、12、24 h取材。HE染色显微镜下观察各组病理改变,Western blot及RT-PCR法测定胰腺组织IRAK-4蛋白和mRNA表达,免疫组化法检测胰腺组织NF-κB表达,ELISA法检测血浆中TNF-α含量。结果：病理损伤AP组>LPS组>Sham组。AP组IRAK-4 mRNA及蛋白的表达于12 h达到高峰,随后降低,而LPS预处理后其表达明显低于AP组(P<0.01),且随时间的延长无明显改变(P>0.05)。LPS组各时间点NF-κB及血液TNF-α表达明显低于AP组(P<0.01),两组均于12 h达到高峰(P<0.01)。结论：抑制IRAK-4表达,进而抑制NF-κB及TNF-α等的表达,可能是脂多糖预处理对AP保护作用的重要机制之一。     

急性肺损伤时大鼠肺组织结构及Cx26表达变化的观察

目的 观察急性肺损伤不同时段大鼠肺组织结构的变化，及连接蛋白Eonnexin 26（Cx26）在急性肺损伤不同时段表达的变化。方法采用油酸（0．25ml/kg）经大鼠尾静脉缓慢注入复制急性肺损伤模型，分别于注射油酸后1，5，12，24，48h取出肺脏，用HE染色法观察肺组织结构变化，同时用免疫组织化学评价Cx26的表达情况。结果Cx26蛋白表达既定住于肺泡上皮细胞质中，又定位于胞膜上。Cx26在正常组及损伤后1，5，12，24。48h组的阳性表达率分别为12．25％，9．11％，5．71％，6．22％，6．64％，8．25％。经单向方差分析，正常对照组的阳性细胞率明显高于损伤各组（P〈0．05）；损伤后1h组的阳性细胞率也明显高于损伤后5，12，24h组（P〈0．05）；损伤后5h组的阳性细胞率则明显低于损伤后48h组（P〈0．05）。结论间隙连接蛋白Cx26表达的改变可能与急性肺损伤及其修复有密切的关系。     

核转录因子NF-κB调节人肾小管上皮细胞SIGIRR表达机制的研究

目的 探讨人肾小管上皮细胞(HKC)内核转录因子NF-κB(NF-κB)反馈调控单免疫球蛋白白介素1受体相关蛋白(SIGIRR)表达的分子机制。方法 分子克隆法构建pLNCX2-G418-SIGIRR过表达载体,经PT67细胞包装后感染HKC细胞,构建SIGIRR过表达细胞和对照细胞。使用IL-1β诱导,Western blot验证过表达SIGIRR可抑制NF-κB活化。使用NF-κB阻断剂和干涉NF-κB活性后,免疫荧光法验证活化的NF-κB可调控SIGIRR表达。在线工具预测SIGIRR启动子区存在NF-κB结合位点。分子克隆法从人基因组DNA内获取含有结合位点的SIGIRR启动子序列,连接至荧光素酶载体pGL3-Luc,构建pGL3-Luc-SIGIRR,并突变结合位点。使用荧光素酶报告基因实验和染色质免疫沉淀技术(ChIP)共同验证活化的NF-κB可结合在SIGIRR启动子区调控SIGIRR基因的表达。结果 构建的pLNCX2-G418-SIGIRR逆转录病毒载体经酶切、测序验证后对比SIGIRR基因编码序列完全一致,重组体和对照载体经病毒包装后转入HKC细胞后成功构建HKC/...     

骨髓间充质干细胞向肺泡细胞转化的实验研究

目的通过观察外源性骨髓间充质干细胞（MSC）的肺脏迁移及分化情况,探讨MSC治疗肺纤维化的细胞学机制。方法体外分离、培养雄性Wistar大鼠的MSC。将60只雌性Wistar大鼠随机分为4组,A组制备博莱霉素致肺纤维化模型;B组和C组分别于博莱霉素注射后,立即和7 d后通过尾静脉注入5-溴-2-脱氧尿苷（BrdU）标记的雄鼠MSC液0.5 mL（含细胞数2.5×106个）;D组造模后,立即注入未标记的等量雄鼠MSC液,作为阴性对照。提取肺组织的DNA,通过聚合酶链反应（PCR）检测雄性鼠的性别决定基因（sry基因）,以判断外源性MSC是否存在于雌性鼠肺组织中;留取肺组织、新鲜提取的骨髓干细胞和培养至第5代的MSC行BrdU和肺表面活性蛋白C（SP-C）的双重免疫荧光染色,通过逆转录PCR（RT-PCR）检测其是否表达SP-C mRNA和水通道蛋白5（AQP-5）的mRNA,观察MSC移植前后的分化情况。结果造模后立即和7 d后移入雄性MSC的雌性鼠肺组织均可表达sry基因,且肺组织中的MSC可转化为Ⅱ型肺泡上皮细胞（AECⅡ）,并具备AECⅡ的形态学特征和分子生物学表型,但立即移入组明显好于7 d后移入组（P〈0.01）。新提取的骨髓干细胞和培养至第5代的MSC表达SP-C mRNA,而不表达AQP-5 mRNA,且SP-C的免疫荧光染色阴性。结论外源性MSC可移入到损伤的肺组织内并转化为AECⅡ,而且早期移入更显著。这种分化潜能在骨髓阶段已具备,但要到损伤的微环境下才能发生转化。     

脂氧素A4对急性肺损伤肺泡上皮通透性及claudin-4蛋白的影响

目的 探讨脂氧素A₄（lipoxin A₄,LXA₄）对内毒素性急性肺损伤（acute lung injury,ALI）肺泡上皮通透性及claudin-4蛋白的影响。方法 通过尾静脉注射脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）制作大鼠内毒素性急性肺损伤模型,并予以脂氧素A₄治疗。测定各组大鼠肺泡上皮的通透性,观察肺组织形态学变化,检测肺组织湿干重比（wet to dry weight ratio,W/D）,以及测定claudin-4蛋白含量。结果 与内毒素损伤组相比,脂氧素A₄组可显著降低肺泡上皮通透性,改善肺组织形态,降低W/D,上调claudin-4蛋白表示水平。结论 脂氧素A₄可降低急性肺损伤大鼠肺泡上皮通透性,减轻肺水肿,其机制可能与其上调claudin-4蛋白表达水平有关。     

肺表面活性蛋白A,D在内毒素急性肺损伤时变化的研究

目的 探索急性肺损伤(ALI)时肺组织表面活性蛋白A,D(SP-A、SP-D)随时间变化的规律.方法 110只SD幼鼠被随机分为正常对照组和ALI组(每组分6个亚组).腹腔内注射脂多糖(LPS)建立ALI模型,正常对照组注射等量生理盐水.LPS及生理盐水注射后6,12,24,36,48和72 h每亚组各处死8只大鼠.用Western blot方法测定肺组织SP-A和SP-D的相对含量.结果 与正常对照组相比,ALI时肺组织SP-A、SP-D的变化在最初的12 h内无明显变化(P＞0.05) .SP-A从24 h至48 h上升(P＜0.01),于36 h达最高值(6.94±0.80,P＜0.01),72 h下降至最低点(3.87±0.50,P＜0.01). SP-D 48 h达最低点(0.92±0.11,P＜0.01).结论 肺组织SP-A、SP-D在LPS诱导的ALI中的变化呈时间依赖性.SP-D的变化与病情变化关系更为密切,SP-D最低时,临床表现也最重;SP-A的代偿能力大于SP-D.     

β-连环素及相关蛋白在脂多糖致急性肺损伤小鼠气道上皮的表达

目的研究脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）致小鼠急性肺损伤（acute lung injury，ALI）时β-连环素（-βcatenin，-βcat）在气道上皮细胞的表达变化及其意义。方法在建立LPS气管注射致小鼠急性肺损伤模型基础上，应用免疫组织化学染色检测-βcat、糖原合成酶激酶3-β（GSK3-β）在气道上皮的表达；应用Western blot检测肺组织内蛋白激酶C（PKC）、GSK3-β、磷酸化GSK3-β（P-GSK3-β）以及-βcat蛋白的表达。结果免疫检测显示，与正常组小鼠相比，LPS致急性肺损伤的小鼠气道上皮中，胞膜上-βcat及胞质内GSK3-β蛋白含量均明显降低（均P〈0.05）；Western blot检测显示，肺组织内PKC、P-GSK3-β及-βcat蛋白含量均较正常组小鼠明显升高（均P〈0.05），而GSK3-β蛋白含量显著下降（P〈0.05）。结论由LPS所致的小鼠ALI，一方面引起胞膜上行使连接功能的-βcat含量显著下降；另一方面可能通过PKC激活、GSK3-β磷酸化失活，导致胞质内-βcat含量的增加，使-βcat转入核内并与转录因子结合，启动Wnt途径靶基因转录，从而在气道上皮的损伤修复中发挥重要作用。     

博莱霉素致肺纤维化大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞凋亡

目的研究博莱霉素(BLM)对肺纤维化大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞(ATⅡ)凋亡的影响及其可能机制。方法32只雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为假手术组(n=8)和BLM组(n=24),分别给予BLM组和假手术组大鼠气管内一次性注入5mg/kgBLM和等量生理盐水。于给药后1、3、7d随机取BLM组大鼠8只,给药后7d取假手术组大鼠进行ATⅡ分离和纯化。采用流式细胞术进行细胞周期、细胞凋亡率、细胞内游离Ca2 浓度、线粒体跨膜电位(MMP)检测;免疫细胞化学法检测ATⅡBax、Bcl-2和Fas的表达;比色法测定ATⅡCaspase-3、Caspase-8和Caspase-9的活性。结果BLM组ATⅡS期细胞比率显著低于假手术组(P<0.05)。BLM组1和3d时ATⅡ的凋亡率显著高于假手术组(P<0.01)。BLM组1、3和7d时ATⅡ内游离Ca2 浓度显著高于假手术组(P<0.05),MMP显著低于假手术组(P<0.05)。BLM组1、3和7d时ATⅡBax和Fas染色阳性率和Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9的活性均显著高于假手术组(P<0.05,P<0.01)。BLM组1和3d时ATⅡBcl-2染色阳性率显著低于假手术组(P<0.05)。结论BLM在ATⅡ损伤早期可能通过升高细胞内Ca2 浓度,激活Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9,降低MMP,诱导Fas、Bax高表达,促使ATⅡ凋亡,引发肺纤维化。     

地塞米松对急性肺损伤大鼠肺组织iNOS mRNA表达的影响

目的　观察地塞米松对内毒素性急性肺损伤肺组织的影响 ,并探讨其机制。方法　 30只SD大鼠随机分为 3组 ,即正常对照组、损伤组和地塞米松组。用内毒素复制急性肺损伤模型 ,地塞米松组同时注射内毒素和地塞米松 ,注射后 2h处死动物。观察形态学变化并分别测定一氧化氮 (NO)和丙二醛 (MDA)的含量 ;用原位杂交方法检测各组大鼠肺组织中诱导型一氧化氮合酶mRNA(iNOSmRNA)的表达水平。结果　损伤组肺组织MDA、NO含量和iNOSmRNA表达量较正常对照组显著增加 (P <0 .0 5 ) ;地塞米松组肺组织MDA、NO含量和iNOSmRNA表达量明显低于损伤组 (P <0 .0 5 )。结论　内毒素性急性肺损伤时 ,肺组织iNOSmRNA大量表达 ,导致内源性NO爆发式产生 ,从而介导肺损伤。而地塞米松能显著减轻其损伤作用     

大鼠急性肺损伤时iNOS mRNA和eNOS mRNA表达的时相变化

目的 :观察内毒素性急性肺损伤时肺组织中一氧化氮 (NO)和一氧化氮合酶mRNA的时相变化 ,并探讨其相互关系。方法 :用内毒素 (LPS)复制急性肺损伤模型 ,分别测定 0 .5 ,1,2 ,3,4h各组肺组织NO和丙二醛 (MDA)的含量 ;用原位杂交方法检测各组大鼠肺组织中诱导型一氧化氮合酶mRNA(iNOSmRNA)和内皮型一氧化氮合酶mRNA(eNOSmRNA)的表达水平。结果 :大鼠给予LPS后 ,①肺组织MDA含量随时间延长而逐渐增加 ,不同时点的均值互有差异 (P <0 .0 5 ) ,并且均显著高于正常对照组 (P <0 .0 5 ) ;②各时点肺组织NO含量和iNOSmRNA表达量均显著大于正常对照组 (P <0 .0 5 ) ,并且均在 2h时达到高峰 ,以后呈下降趋势。二者的变化呈显著正相关 (P <0 .0 1) ;③ 2h前 (含 2h)肺组织MDA含量随iNOSmRNA表达增加所致的NO产量增多而增加 ,2h后二者变化趋势相反 ;④各时点肺组织eNOSmRNA表达量与正常对照组比差异均无显著性。结论 :内毒素性急性肺损伤时 ,肺组织iNOSmRNA大量表达 ,导致内源性NO爆发式产生 ,从而介导肺损伤。NO产量在静注内毒素后 2h达到高峰 ,以后呈下降趋势。     

Paxillin基因在肺癌组织中的表达研究

目的:研究桩蛋白(Paxillin)基因在人肺癌组织中表达,探讨它与肺癌患者病理特征、临床分期、淋巴结转移、预后的关系。方法:应用免疫组织化学S-P方法检测120例肺癌、80例癌旁无癌浸润的肺组织、53例正常肺组织的桩蛋白的基因表达。结果:肺癌、癌旁无癌浸润肺组织、正常肺组织桩蛋白的阳性表达率分别为39.1％(47/120),81.3％(65/80),83.3％(44/53),三者的阳性表达差异有高度显著性(P<0.05)。桩蛋白表达低下与肺癌P-TNM分期、病理分级、淋巴结转移有关(P<0.05),小细胞肺癌(SCLC)中桩蛋白的阳性表达率6.251％(1/16),显著低于非小细胞肺癌(NSCLC)桩蛋白的阳性表达率44.2％(46/104)(x~2=8.40,P<0.05)。结论:肺癌组织中Paxillin基因的表达低下与肺癌侵袭转移有关,可作为评价肺癌浸润转移的生物学标志之一。     

细菌脂多糖体外诱导子宫内膜细胞炎症模型的建立

目的探讨体外建立人子宫内膜细胞炎症模型,为子宫内膜炎症、出血及修复机制研究提供一个标准模型。方法取年龄20～40岁门诊女性患者,3月内未服用激素类药物,无菌条件下刮取宫腔前后壁内膜组织体外培养,以大肠杆菌细菌脂多糖(LPS)诱导子宫内膜细胞炎症,以培养细胞形态学和传统炎症指标作为炎症发生和发展的判断标准,以免疫细胞化学(ICC)方法鉴定细胞类型,以不同浓度的LPS作用于培养细胞,收集0、24、48、72h4个时段培养上清液用(ELISA)测定肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-β(IL-β)的含量。结果ICC显示培养细胞分别表达间质细胞标记物(Vimtein)、上皮细胞标记物(CK)及血管内皮细胞标记物(VEGF),部分细胞出现Vimtein与CK联合表达,炎症模型组培养上清液中TNF-α、IL-1β的含量相比同期空白组随LPS作用发展而逐渐上升(P<0.01)。结论培养的子宫内膜细胞类型包含上皮性、间质性、血管内皮源性细胞和少数具有双向分化潜能之细胞,在100ngm/LLPS作用下,体外培养的子宫内膜细胞诱导炎症达最合适浓度,炎症因子TNF-α、IL-1β含量增加表明模型建立成功。