系统性红斑狼疮患者自体外周血造血干细胞移植前后外周血CD4~+CD25~+调节性T细胞的变化

目的观察SLE患者自体外周血造血干细胞移植(APBSCT)前后CD4+CD25+调节性T淋巴细胞及Th1、Th2细胞亚群的变化。方法对4例行APBSCT的重症SLE病人分别采集不同时间段的外周血,分别用流式细胞仪检测外周血CD4+CD25+细胞、T淋巴细胞亚群(CD4+、CD8+、CD69+、CD95+细胞)及用ELISA方法检测细胞因子IL-2、INF-γ、IL-4、IL-10、TGF-β以判断患者免疫功能的变化。结果病人症状明显改善,自身抗体转阴。IL-4、IL-10在移植后明显低于动员前水平,"Th2优势"得到纠正。移植后CD4+细胞回升缓慢,CD4+/CD8+持续降低;CD4+CD25+/CD4+在移植后降低。结论初步观察APBSCT后重症SLE病人"Th2优势"得到纠正,CD4+CD25+/CD4+降低。     

妊娠期高血压疾病子痫前期患者外周血中调节性T细胞及其细胞因子的变化

目的:探讨CD4+CD25+调节性T细胞在妊娠期高血压疾病可能发挥的作用。方法:采用流式细胞术检测妊娠期高血压疾病患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞数量变化,应用ELISA方法测定上皮性卵巢癌患者外周血清TGF-β1及IL-10浓度。结果:妊娠期高血压疾病患者外周血中CD4+CD25+T细胞比例明显低于正常妊娠妇女,外周血中IL-10的浓度明显降低,TGF-β1的浓度明显增高。结论:CD4+CD25+调节性T细胞可能在妊娠期高血压疾病的发病机制中发挥重要作用。     

脐带血来源的调节性T细胞对SLE病人淋巴细胞的作用初探

目的 通过分析脐带血调节性T细胞(CD4+CD25+细胞)的基本特性以及对系统性红斑狼疮(Systemic Lupus Erythematosus,SLE)患者淋巴细胞的抑制功能,为治疗SLE等疾病提供新的思路.方法 收集脐带血3例、SLE患者外周血6例和健康人外周血3例,肝素抗凝;检测CD4+CD25+及Foxp3+细胞比例;磁珠分选法分离各样本中CD4+CD25+细胞和CD4+CD25-细胞,分析各亚群细胞的纯度并进行体外扩增试验及体外抑制功能试验.结果 脐带血中CD4+CD25+细胞和CD4+ Foxp3+细胞比例最高,SLE患者外周血中最少;脐带血中CD4+CD25+细胞体外扩增能力比健康成人和SLE患者的CD4+CD25+细胞强.扩增后的脐带血CD4+CD25+细胞的体外抑制功能较扩增前及其它两者扩增后均增强,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 脐带血中调节性T细胞比例多,生物活性强,输注脐带血来源的调节性T细胞可以成为治疗系统性红斑狼疮等自身免疫性疾病的理想途径.     

输卵管癌患者治疗前后及健康女性CD4~+CD25~+调节性T细胞数量与功能和免疫抑制因子表达水平比较

目的比较输卵管癌患者治疗前后及健康女性CD4~+CD25~+调节性T细胞数量与功能和免疫抑制因子表达水平。方法选取2006年1月-2016年7月徐州市妇幼保健院住院的14例输卵管癌患者为研究组,另选取14例同期健康女性为对照组。通过酶联免疫吸附法(ELISA)检测血浆转化生长因子-β_1(TGF-β_1)与白细胞介素-10(IL-10)水平。采用体外增殖抑制实验计算抑制率来评价两组患者外周血CD4~+CD25~+调节性T细胞的数量与功能。结果治疗前,研究组与对照组CD4~+CD25~+调节性T细胞数量比较差异有统计学意义(t=2.19,P0.05)。研究组治疗前后CD4~+CD25~+调节性T细胞数量比较差异有统计学意义(t=2.23,P0.05)。治疗前,研究组与对照组抑制率比较差异有统计学意义(t=2.45,P0.05)。研究组治疗前后抑制率比较差异有统计学意义(t=2.53,P0.05)。治疗前,研究组与对照组血浆TGF-β_1与IL-10水平比较差异有统计学意义(t=13.52,P0.05;t=3.07,P0.05)。研究组治疗前后血浆TGF-β_1与IL-10水平比较差异有统计学意义(t=15.23,P0.05;t=4.12,P0.05)。结论输卵管癌患者外周血CD4~+CD25~+调节性T细胞数量较多,功能较强,且与TGF-β_1及IL-10水平相关。治疗可降低外周血CD4~+CD25~+调节性T细胞数量,使其功能减弱,并降低血浆TGF-β_1与IL-10水平。CD4~+CD25~+调节性T细胞可能通过TGF-β_1与IL-10发挥抑制作用,在调控肿瘤免疫耐受中起重要作用,对输卵管癌的免疫学防治十分重要。     

系统性红斑狼疮患者外周血中IL-23与TGF-β的表达水平及其意义

随着调节性T细胞(Tr)、辅助性T细胞17(Th17)等新的T淋巴亚群的发现,人们对T淋巴细胞及其相关细胞因子的研究成为当今热点,同时它们在SLE发病机制中的研究也有了更深入的认识,现就对近年IL-23及TGF-β在SLE中的表达水平及临床相关研究做一综述。     

调节性T细胞及其细胞因子在弱精子症患者的表达与临床意义

目的：探索弱精子症患者调节性T细胞及其细胞因子的变化规律以及与精子质量的相关性。方法：以我院收入的60例弱精子症患者为观察组,36例健康志愿者为对照组,使用流式细胞仅检测两组的CD4＋CD25＋Treg、TGF-β1和IL-10的含量,使用精子质量分析仪检测存活率、平均运动速度、精子活力指数等指标。结果：观察组外周血CD4＋CD25＋Treg的含量显著低于对照组,外周血的TGF-β1和IL-10显著低于对照组;观察组前列腺液的TGF-β1和IL-10显著低于对照组;外周血的TGF-β1和IL-10均显著低于前列腺液;两组精液量比较差异无显著性;观察组精子活率、运动速度和ATP含量指标均显著低于对照组;经Pearson检验,CD4＋CD25＋Treg、TGF-β1和IL-10与精子活率、畸形率、运动速度、精子ATP指标之间均呈正相关性。结论：CD4＋CD25＋Treg免疫异常是弱精子症发病的重要影响因素。     

儿童轮状病毒感染性腹泻早期血清CD4~+T细胞相关细胞因子水平检测

目的:分析儿童轮状病毒感染性腹泻疾病中CD4+T细胞相关细胞因子所起的作用。方法:采用ELISA法定量检测40例轮状病毒感染性腹泻儿童及同期40例正常对照儿童的血清CD4+T细胞相关细胞因子IL-17、IL-6、IFN-γ、IL-4、TGF-β水平。结果:观察组患儿血清IL-17、IL-6、IFN-γ、IL-4的水平与正常对照组相近(P>0.05);而血清中TGF-β水平则观察组高于对照组(P<0.05)。结论:轮状病毒感染性腹泻儿童引起腹泻的重要原因是早期病毒活化具有免疫抑制作用的调节性T细胞,导致免疫功能失调。     

特发性血小板减少性紫癜患者外周血Treg细胞及相关细胞因子检测的临床意义

目的：检测特发性血小板减少性紫癜（ITP）患者外周血中CD4＋、CD25＋调节性T（Treg）细胞的比例及相关细胞因子水平的变化,探讨其在ITP发病中的作用。方法：依据临床诊断标准,检测22例健康人、35例初诊ITP患者的外周血标本,流式细胞学方法检测各组CD4。CD25h,￡hTreg细胞和CD4＋CD25＋CD127d。mTreg细胞的表达水平,酶联免疫吸附试验（ELISA）检测Treg细胞分泌的细胞因子IL-10、IL-2、TNF—α、IFN-γ的表达水平。结果：初诊ITP患者CD4＋CD25highTreg细胞、CD4＋CD25＋CD127d;mTreg细胞比例明显低于正常对照组（P〈0．01）,ITP患者血清IL-2、TNF—α及IFN-γ水平明显高于正常对照组（P〈0．01）;血清IL-10水平明显低于正常对照组（P〈0．01）。结论：调节性T（Treg）细胞表达异常是特发性血小板减少性紫癜发病机制的重要环节,对ITP患者应定期观察其血液中IL、TNF—α和IFN-γ水平变化,以判断其病情变化、疗效观察。     

妇科恶性肿瘤患者外周血中CD4+CD25highCD127low调节性T细胞的检测及临床意义

[目的]探讨妇科恶性肿瘤患者外周血中CD4+CD25highCD127low调节性T细胞的表达水平及临床意义。[方法]采用流式细胞术检测33例妇科恶性肿瘤患者和30例健康女性外周血中CD4+CD25highCD127lowTreg、CD4+T淋巴细胞、CD8+T淋巴细胞和NK细胞的表达水平;用ELISA法检测血清细胞因子TGF-β水平。[结果]妇科恶性肿瘤患者外周血相对于健康女性,CD4+CD25highCD127lowTreg表达水平较高,且差异有统计学意义(t=5.482,P﹤0.05);CD4+CD25highCD127lowTreg表达水平与NK细胞呈负相关(r=-0.568,P﹤0.05),与细胞因子TGF-β呈正相关(r=0.485,P﹤0.05)。[结论]妇科恶性肿瘤患者外周血CD4+CD25highCD127lowTreg水平升高,且与肿瘤TNM分期有关,可能参与了肿瘤的发生发展。     

手足口病患儿外周血淋巴细胞亚群变化研究

目的探讨临床不同分型手足口病患儿外周血T淋巴细胞亚群水平变化研究。方法选择2012年6月至2015年11月诊断手足口病患儿150例,依据2010年版手足口病诊疗指南,按照患儿入院病情严重程度分为普通组120例与重症组30例。入院后第24h采用流式细胞术检测外周血T淋巴细胞亚群(CD3~+T细胞、CD4~+T细胞、CD4~+/CD8~+T细胞比及CD4~+CD25~+调节性T淋巴细胞比例变化),采用酶联免疫吸附法检测血清中IL-10以及TGF-β1水平变化,分析2组患者血清IL-10、TGF-β1水平以及外周血CD3~+T细胞、CD4~+T细胞、CD4~+/CD8~+T细胞比及CD4~+CD25~+调节性T淋巴细胞比例变化差异。结果重症组与普通组患儿外周血CD3~+T细胞[(50.61±5.83)%比(59.08±6.21)%,t=3.017]、CD4~+T细胞[(23.87±3.91)%比(32.90±4.06)%,t=2.874]、CD4~+/CD8~+T细胞比[(1.05±0.47)%比(1.43±0.51)%,t=2.478]明显减少,外周血CD4~+CD25~+调节性T淋巴细胞比例[(17.42±3.85)%比(11.09±3.26)%,t=2.804]明显减少,,2组比较差异有统计学意义(P0.05)。血清IL-10[(37.90±6.17)ug/L比(11.09±3.28)ug/L,t=2.873],TGF-β1[(41.09±5.83)ug/L比(13.80±4.27)ug/L,t=2.905]水平明显升高,2组间点比较差异有统计学意义(P0.05)。结论重症手足口病患儿发病后免疫调节机制紊乱,表现为抑制性调节性T细胞水平升高,炎性细胞因子分泌增多,水平升高,机体处于免疫抑制状态。     

子宫内膜异位症治疗前后CD19＋CD5＋B细胞变化的研究

目的研究子宫内膜异位症患者治疗前、后CD19＋CD5＋B细胞数量及分泌细胞因子的变化,为临床治疗提供实验依据。方法对本院35例子宫内膜异位症患者（实验组）,29例子宫肌瘤患者（对照组）行流式细胞术、Q—PCR检测患者外周血、腹腔冲洗液及子宫内膜组织中CD19＋CD5＋B细胞的数量及分泌细胞因子的检测,比较治疗前、后子宫内膜异位症患者外周血中CD19＋CD5＋B细胞数量以及分泌细胞因子的变化。结果子宫内膜异位症患者外周血、腹腔冲洗液及异位子宫内膜组织中CD19＋CD5＋B细胞的比例高于对照组[（13．1±1．9）％、（12．1±2．0）％、（11．7±1．7）％vs（2．9±0．8）％、（2．6±0．9）％、（2．8±1．1）％,P〈0．01],CD19＋CD5＋B细胞的IFN-1mRNA的表达水平高于对照组[（7．2±1．0）×10^3、（7．9±1．3）×10^3、（7．4±1．1）×10^3拷贝vs（1．9±0．7）×10^3、（2．2±0．8）×10^3、（2．0±0．5）×10^3拷贝],IL-10mRNA表达水平高于对照组[（6．4±0．9）×10^3、（6．8±1．2）×10^3、（6．1±0．8）×10^3拷贝vs（1．7±0．5）×10^3、（2．1±0．9）×10^3、（1．6±0．4）×10^3拷贝,P〈0．01]。治疗后,子宫内膜异位症患者外周血中CD19＋CD5＋B细胞数量低于治疗前[（13．1±1．9）％vs（7．3±1．2）％,t=16．12,P〈0．01],仍高于对照组[（2．8＋-0．7）％,t=18．51,P〈0．01],CD19＋CD5＋B细胞中的IFN-y mRNA的表达水平低于治疗前[（7．2±1．0）×10^3拷贝vs（3．3±0．6）×10^3拷贝,t=20．89,P〈0．01],仍高于对照组[（2．4±0．5）×10^3拷贝,t=6．702,P〈0．01],IL-10mRNA的表达水平低于治疗前[（6．4±0．9）×10^3拷贝vs（3．2±0．7）×10^3拷贝,t=17．53,P〈0．01],仍高于对照组[（2．1±0．4）×10^3拷贝,t=7．79,P〈0．01]。结论子宫内膜异位症中CD19＋CD5＋B细胞数量的增加,通过高分泌IFN-γ、IL-10,其参与了疾病的发生。     

肺炎链球菌疫苗抗原促进CRTH2(CD4~+CD294~+Th2)细胞增殖的实验研究

目的研究肺炎链球菌疫苗通过树突状细胞抗原递呈作用对CRTH2(CD4~+CD294~+Th2)细胞促增殖作用,为扩增及分选Th2细胞提供新方法。方法外周血单核细胞培养为树突状细胞,负载肺炎链球菌疫苗抗原后与T淋巴细胞共培养,CCK8法测定混合淋巴细胞反应,流式细胞仪分析DC及CRTH2细胞。结果肺炎链球菌疫苗可促进树突状细胞成熟,与TNF-a共同是DC成熟佐剂。DC负载肺炎链球菌疫苗抗原能使第5天CRTH2细胞亚群比率[(0.93±0.10)%]较首日[(0.70±0.02)%]升高,其绝对数也升高(均P0.05)。结论树突状细胞负载肺炎链球菌疫苗抗原能够促进CRTH2细胞增殖,可能是扩增Th2细胞有效方法之一。     

CD4+CD25+调节性T细胞在艾滋病病毒感染中的作用

CD4+CD25+调节性T细胞(Tregs)是一类具有特殊免疫调节功能的T细胞亚群,是Tregs的重要组成部分,参与多种感染性疾病的免疫应答,在病毒感染的慢性化、免疫病理、阻止自身免疫应答和维持机体免疫平衡等方面发挥重要的作用.此文就CD4+CD25+Tregs在HIV感染进程中的作用作了综述.     

子宫内膜异位症患者中CD19＋CD5＋B细胞及BAFF变化的研究

目的 了解子宫内膜异位症患者中CD19＋CD5＋B细胞的变化,CD19＋CD5＋B细胞中BAFF（B淋巴细胞刺激因子）的表达和凋亡敏感性变化,探讨CD19＋CD5＋B细胞与子宫内膜异位症的关系.方法 39例子宫内膜异位症患者为实验组,31例子宫肌瘤患者为对照组,流式细胞术检测患者外周血、腹腔冲洗液以及子宫内膜组织中CD19＋CD5＋B细胞的变化,Q-PCR检测CD19＋CD5＋B细胞中BAFF mRNA的表达,流式细胞术PI-Annexin V检测CD19＋CD5＋B细胞对CD95L诱导的凋亡敏感性.结果 实验组患者外周血、腹腔冲洗液以及异位子宫内膜组织中CD19＋CD5＋B细胞高于对照组（P＜0.01）;实验组患者各样本中CD19＋CD5＋B细胞的BAFF mRNA表达水平高于对照组,CD19＋CD5＋B细胞能明显抵抗CD95L所诱导的凋亡（P＜0.01）.结论 在子宫内膜异位症中,CD19＋CD5＋B细胞高表达BAFF,高对抗CD95L诱导的凋亡,参与疾病的发生.     

芳香烃受体在类风湿关节炎患者外周血CD4+CD25+T细胞的表达及意义

目的 以类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者为研究对象,观察芳香烃受体(aryl hydrocarbon receptor,AHR)在患者外周血CD4+CD25+T细胞中的表达水平,探讨AHR在RA发病机制中的意义.方法 采用流式细胞术检测RA患者(35例)及健康对照组(14例)中AHR阳性细胞在外周血CD4+CD25+T及CCR6+CD4+T细胞中所占比例,并将所得结果与患者临床指标的相关性做分析.结果 RA组外周血CD4+ CD25+T细胞中AHR阳性细胞所占比例为(17.90(6.10,80.10))％,低于健康对照组(52.43(19.18,96.43))％,差异有统计学意义(Z=-4.362,P＜0.001);正常对照组外周血CD4+ CD25+T细胞中AHR阳性细胞比例为(52.49±19.18)％,高于CCR6+ CD4+T细胞中(23.18±5.62)％,且都高于外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)中(18.06±7.80)％,三组间差异有统计学意义(x2=24.03,P＜0.001);RA组CD4+ CD25+T细胞中的AHR比例为(17.90(6.10,80.10))％,低于PBMCs中的(34.43(8.72,56.37))％,且都低于CCR6+CD4+T细胞中的(46.15(20.18,87.31))％,三组间差异有统计学意义(x2=38.29,P＜0.001).结论 RA外周血CD4+CD25+T细胞中,AHR阳性细胞比例降低,而在CCR6+ CD4+T细胞中升高,AHR可能通过调节辅助性T细胞17与调节性T细胞细胞的分化,影响Th17与Treg之间的平衡,从而参与RA的发病机制.     

丹参注射液联合地塞米松对哮喘大鼠CD4+CD25+调节性T细胞的影响

目的 探讨丹参注射液联合地塞米松(DXM)抑制哮喘气道炎症的免疫学机制.方法 50只Wistar大鼠随机分成正常对照(NC)组、哮喘组、丹参组、DXM组、联合用药组,计数支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞总数并分类,HE染色行肺组织病理学检查,流式细胞仪检测外周血单个核细胞(PBMCs)中CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+Treg)比例,ELISA检测BALF中IL-4、IL-5含量.结果 与哮喘组比较,药物干预组细胞总数、中性粒细胞(Neu)、淋巴细胞(Lym)、嗜酸性粒细胞(Eos)百分率下降(P<0.05,P<0.01),联合用药组下降程度大于丹参组、DXM组(P<0.05).哮喘组呈显著炎症变化,丹参组呈中度炎症变化,DXM组呈轻度炎症变化,联合用药组无炎症改变.与哮喘组比较,药物干预组CD4+CD25+Treg/CD4+T升高(P<0.05),IL4、IL-5含量下降(P<0.05),联合用药组CD4+CD25+ Tree/CD4+T升高程度和IL-4、IL-5下降程度大于丹参组和DXM组(P<0.05).结论 丹参注射液具有抑制哮喘大鼠气道炎症的作用,和DXM联合应用后,抑制作用更加明显,该作用可能和促进CD4+CD25+Treg产生,进而抑制IL-4、IL-5产生,纠正Th1/Th2失衡,最终减轻气道炎症有关.     

Identification of CD4+ and CD8+ T cell epitopes of woodchuck hepatitis virus core and surface antigens in BALB/c mice

A therapeutic vaccine against chronic hepatitis B virus (HBV) infection requires the development of a strong and multispecific Th1 cell immune response. Woodchucks chronically infected with the woodchuck hepatitis virus (WHV) closely resemble HBV infection and represent the best animal model for this hepadnavirus-induced disease. Using the BIMAS “HLA Peptide Binding Predictions” program, we have identified and further characterized novel H-2^d-restricted CD8+ epitopes within the WHV core (peptides C#12–21, C#18–32, C#19–27, C#61–69) and surface antigens (peptides preS2#10–18, preS2#27–35, S#76–84, S#133–140 and S#257–265), respectively. These peptides bind to H-2^d with high efficiency and upon immunization of mice with peptide and Freund's adjuvant they induce the development of IFN-γ producing T cells. More importantly, WHV core peptides C#19–27 and C#61–69 and WHV surface peptides S#133–140 and S#257–265 were also recognized by CD8+ T cells after immunization of mice with DNA/PEI nanoparticles. Direct stimulation of splenocytes obtained from such DNA-immunized mice with peptides C#18–32, S#76–84, and S#257–265 resulted in significant production of IFN-γ. Thus, we have identified T cell determinants in mice from WHV core and surface antigens that have important value for designing and evaluating an effective vaccine against hepadnavirus infection.     

CD27和CD28在肺结核病人抗原特异性CD4＋T细胞中的表达分析

目的 研究肺结核病人与健康人外周血结核抗原特异性CD4^＋T细胞中CD27和CD28的表达情况,了解不同分化程度T细胞在结核发病中的作用.方法 以荧光标记的抗CD4、CD154、CD27、CD28四种抗体共染色,用流式细胞仪检测肺结核病人和健康人外周血CD4^＋ CD154^＋ T细胞中CD27和CD28的分布比例.通过对比分析,了解不同分化阶段CD4^＋T细胞在病人与健康人之间的分布差异.结果 特异性结核抗原刺激后,肺结核病人外周血CD4^＋ CD154^＋ T细胞中CD27^＋ CD28^＋（早期分化）、CD27^- CD28^＋ 和CD27^＋ CD28^-（中期分化）以及CD27^-CD28^-（晚期分化）T细胞的比例分别为（49.55±6.15）%、（26.85±3.87）%、（7.2±1.37）%和（16.35±3.97）%;而在健康人中这四群细胞的比例分别为（51.81 ±4.94）%、（29.83±5.33）%、（12.65±4.48）%和（5.7±2）%.结核病人与健康人以早期分化CD4^＋T细胞为主,在晚期分化CD4^＋T细胞比例上差异有统计学意义（t=2.26,P〈0.05）.结论 肺结核病人抗原特异性CD4^＋T细胞中晚期分化阶段细胞的比例显著高于健康人,提示抗原特异性CD4^＋T细胞的分化程度与结核病相关.     

外周血CD4+CD25+调节性T细胞及C反应蛋白在慢性阻塞性肺疾病急性加重期的变化及临床意义

目的 探讨COPD急性加重期患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞及CRP水平的变化及意义.方法 以36例COPD急性加重期患者(COPD组)和36例COPD稳定期患者(对照组一)及36例健康人(对照组二)作为研究对象,采用流式细胞技术检测三组外周血中CD4+CD25+调节性T细胞的表达水平,并常规检测血清CRP水平.结果 COPD组外周血中CD4+CD25+占CD4+T细胞的百分比为(2.56±1.83)%,明显低于对照组一和对照组二(P均<0.01);COPD组CRP水平为(55.7±14.8)mg/L,明显高于对照组一和对照组二(p均<0.01).CD4+CD25+调节性T细胞表达水平与CRP水平呈负相关(r=-0.312,P<0.05).结论 CD4+CD25+调节性T细胞比例减少导致COPD急性加重期患者细胞免疫失调,CRP参与了炎性反应激活过程,可能为COPD急性加重期免疫治疗提供理论依据.