气管内滴入MARCKS相关多肽和硫氦卓酮对气道黏液高分泌的影响

目的研究在大鼠气管内滴入豆蔻酰化富丙氨酸激酶C底物相关多肽（MANS）或／和硫氮卓酮对气道黏液分泌的影响并探讨其可能的作用机制。方法通过雾化吸入丙烯醛建立大鼠气道黏液高分泌模型后，依组别不同分别在气管内滴入MANS或硫氮卓酮以及二者同时滴入，对照组气管内滴入生理盐水，经匹罗卡品刺激后获取支气管肺泡灌洗液（BALF）。用酶联凝集素分析法（ELLA）对BALF中的黏蛋白（mucin）进行定量。结果MANS组、联用组（MANS与硫氮卓酮联合滴入）分别同对照组比较，黏蛋白的量均减少（P均〈0．05），且联用组较MANS组减少更为明显（P〈0．05）；硫氮卓酮组与对照组比较差异无统计学意义。结论在丙烯醛诱导的大鼠气道黏液高分泌模型中，气管内滴入MANS可以减少气道黏液的分泌，单用硫氮卓酮气管内滴入不能减少气道黏液的分泌，但二者联合滴入时硫氮卓酮对MANS抑制气道黏液的分泌可能具有协同作用。     

气管内滴入MARCKS相关多肽和硫氮卓酮对气道黏液高分泌的影响

目的研究在大鼠气管内滴入豆蔻酰化富丙氨酸激酶C底物相关多肽(MANS)或/和硫氮卓酮对气道黏液分泌的影响并探讨其可能的作用机制。方法通过雾化吸入丙烯醛建立大鼠气道黏液高分泌模型后,依组别不同分别在气管内滴入MANS或硫氮卓酮以及二者同时滴入,对照组气管内滴入生理盐水,经匹罗卡品刺激后获取支气管肺泡灌洗液(BALF)。用酶联凝集素分析法(ELLA)对BALF中的黏蛋白(mucin)进行定量。结果MANS组、联用组(MANS与硫氮卓酮联合滴入)分别同对照组比较,黏蛋白的量均减少(P均<0.05),且联用组较MANS组减少更为明显(P<0.05);硫氮卓酮组与对照组比较差异无统计学意义。结论在丙烯醛诱导的大鼠气道黏液高分泌模型中,气管内滴入MANS可以减少气道黏液的分泌,单用硫氮卓酮气管内滴入不能减少气道黏液的分泌,但二者联合滴入时硫氮卓酮对MANS抑制气道黏液的分泌可能具有协同作用。     

地尔硫(艹卓)治疗持续性心房颤动临床观察

地尔硫[艹卓]系钙离子阻滞剂。多用于冠心病自发性心绞痛及心肌梗死的治疗。我院2002-2004年用地尔硫[艹卓]片剂治疗持续性心房颤动与传统药物地高辛作比较，报告如下。     

氨氯地平和地尔硫(艹卓)治疗高血压疗效分析

目的:评价氨氯地平和地尔硫(艹卓)治疗高血压合并心脏X-综合征(CSX)的效果.方法:37例轻、中度高血压病合并CSX患者被随机分成2组,A组胀用氨氯地平片和B组服用地尔硫(艹卓)片.比较治疗前及治疗8周后对临床症状、心率、坐位血压、活动平板运动试验阳性率的影响.结果:服用8周后A组和B组胸痛发作次数均下降,两组间比较P>0.05.心率分别无明显变化和(8.7±6.2)次/分.坐位血压分别平均下降(25.5±9.8)/(19.7±8.2)mmHg和(21.5±10.1)/(17.7±7.6)mmHg.白昼、夜间平均血压均有明显下降,两组间比较P<0.05.活动平板运动试验阳性率分别为原来的20%和26.7%.A组和B组不良方应发生率分别为10.5%和16.7%.结论:氨氯地平的降压作用强于地尔硫(艹卓),地尔硫(艹卓)减慢心率作用优于氨氯地平,氨氯地平与地尔硫(艹卓)均有较好的缓解胸痛作用.     

地尔硫(艹卓)与心痛定治疗不稳定性心绞痛对比观察

目的比较地尔硫(艹卓)与心痛定治疗不稳定性心绞痛(UAP)的疗效.方法61例UAP病人,男42例,女19例.年龄(51±2.6)岁,45～66岁.随机分为两组,治疗组31例,地尔硫(艹卓)30mg,3次/d;对照组30例,心痛定10mg,3次/d;以治疗30d为统计界限.结果两组治疗前后临床疗效比较差异显著(P＜0.05);心电图改善比较差异显著(P＜0.05).结论地尔硫(艹卓)治疗UAP优于心痛定.     

静脉注射地尔硫(艹卓)控制新发房颤患者心室率的疗效观察

目的 观察静脉注射地尔硫(艹卓)控制新发房颤患者心室率的疗效和安全性.方法 19例新发房颤患者,心室率≥120次/min,在常规治疗的基础上,予地尔硫(艹卓)0.25mg/kg静脉注射,继以10mg/h静脉滴注维持,记录给药前及给药后5,15,30,60min时的心室率以及治疗过程中的不良反应.结果 给药前及给药后5,15,30,60min时的心室率分别为(141±10)、(127±80)、(103±13)、(104±13)、(104±15)次/min,给药治疗前后具有统计学意义,P＜0.01,用药过程中无严重不良反应发生.结论 静脉注射地尔硫(艹卓)控制新发房颤的快速心室率安全有效,起效迅速,对无需紧急复律和无地尔硫(艹卓)使用禁忌的患者,可作为首选药物使用.     

静滴地尔硫(艹卓)对不稳定心绞痛的临床疗效评价

目的评价地尔硫(艹卓)对不稳定心绞痛(UAP)的临床疗效.方法 56例UAP患者随机分为两组.治疗组(Ⅰ组):地尔硫(艹卓)60mg/d及硝酸甘油10～20mg/d静滴,连用7d;对照组(Ⅱ组):硝酸甘油10～20mg/d静滴,连用7天.观察治疗前后疼痛缓解、心律、心率(HR)、血压(BP)、ECG(ΣST、NST)变化情况.结果一周内Ⅰ组疼痛缓解率、房颤转窦律数较Ⅱ组有显著差异(P＜0.05);发展为AMI无差异(P＞0.05).Ⅰ组治疗后ΣST、NST、HR、SBP较治疗前均有显著差异(P＜0.01);Ⅱ组治疗后NST有差异(P＜0.05).两组治疗后ΣST、NST有显著差异(P＜0.05);HR、SBP有非常显著差异(P＜0.01).窦缓、低血压为治疗副作用.结论地尔硫(艹卓)及硝酸甘油静滴治疗UAP较单一使用硝酸甘油更有效,对心功能＜3级较安全.     

地尔硫(艹卓)治疗快速型心律失常疗效及安全性观察

目的观察静脉注射地尔硫(艹卓)对快速型心律失常的疗效及其安全性.方法对10例快速型心律失常患者静注地尔硫(艹卓)10～20mg,分别测量用药前及用药后2、5、10、15和120min心率和血压及观察其不良反应.结果与治疗前相比,用药后起效时间2min,最高效应时间15min,治疗前后心率差异显著(P＜0.01),收缩压及舒张压变化不明显(P＞0.05),未见不良反应出现.结论静脉注射地尔硫(艹卓)对控制快速型心律失常快速、有效而安全.     

地尔硫(艹卓)对维库溴铵肌松时效的影响

目的:探讨地尔硫对维库溴铵肌松时效的影响。方法:30例ASAⅠ～Ⅱ级择期手术的全麻患者,随机分为3组,每组10例。3组患者均行静脉快速诱导气管内插管,Ⅰ组静注芬太尼5μg/kg,异丙酚2mg/kg,和维库溴铵0.1mg/kg(2×ED95)诱导,气管插管;Ⅱ组先缓慢静注地尔硫0.05mg/kg,3min后静注与Ⅰ组同等剂量的诱导用药,气管插管。Ⅲ组先缓慢静注地尔硫0.1mg/kg,3min后静注与Ⅰ组同等剂量的诱导用药,气管插管。Ⅱ、Ⅲ组中,静注地尔硫3min后收缩压下降15%以上的病例不纳入研究,每组各选10例参与研究。3组均以异丙酚维持麻醉,用Biometer加速度仪监测肌松情况。结果:Ⅰ组的无反应期为(26.5±5.5)min,Ⅱ、Ⅲ组的无反应期分别为(35.2±4.2)min和(36.4±7.2)min,Ⅱ、Ⅲ组明显延长于Ⅰ组(P<0.01),而Ⅱ组与Ⅲ组间无统计学差异;Ⅰ组的临床作用时间为(37.4±5.8)min,Ⅱ、Ⅲ组的临床作用时间分别为(48.5±4.4)min和(54.5±8.9)min,Ⅱ、Ⅲ组显著长于Ⅰ组(P<0.01),Ⅱ组短于Ⅲ组,但无统计学意义;起效时间与恢复指数各组间无统计学差异。结论:地尔硫能延长维库溴铵的无反应期与临床作用时间。     

MUC5AC黏蛋白在哮喘大鼠肺组织的表达及红霉素的抗炎机制探讨

目的 研究哮喘大鼠肺组织MUC5AC黏蛋白的分布及红霉素对其影响.方法 36只清洁级SD大鼠随机分成对照组、哮喘组、和红霉素治疗组,采用免疫组化SP法和计算机图象分析检测肺组织中MUC5AC黏蛋白的分布.结果 哮喘组MUC5AC黏蛋白表达(2.4167±0.6686)较对照组(0.5833±0.7930)明显增加,红霉素治疗组(1.1667±0.9374)降低,和哮喘组相比有统计学意义.结论 反复抗原刺激引起气道过敏性炎症,导致气道黏蛋白的大量产生,加重哮喘气道炎症和气道阻塞,红霉素可下调MUC5AC黏蛋白,对气道黏蛋白高分泌有明显的治疗作用.     

Role of extracellular signal-regulated kinase 1/2 in cigarette smoke-induced mucus hypersecretion in a rat model

Background  Airway mucus hypersecretion is an important pathophysiological feature of chronic obstructive pulmonary disease, which is closely associated with cigarette smoking. However, the signal transduction pathway from the cell surface to the nucleus through which cigarette smoke causes upregulation of mucin gene expression is not well known. This study was designed to investigate the role of extracellular signal-regulated Kinase 1/2 (ERK 1/2) in airway mucus hypersecretion induced by cigarette smoke in rats.

Methods  A rat model of airway mucus hypersecretion was induced by exposure to cigarette smoke for 4 weeks．Rats exposed to inhalation of cigarette smoke or normal saline were given an intraperitoneal injection of U0126, a specific MEK1 kinase inhibitor, at doses of 0.25 mg/kg, 0.5 mg/kg and 1 mg/kg for 14 days. Expression of MUC5AC mRNA and protein, ERK 1/2 and phosphorylated-ERK 1/2 (p-ERK 1/2) were detected by RT-PCR, immunohistochemistry and Western blotting.

Results  Cigarette smoke significantly increased airway goblet cells metaplasia, induced the overexpression of MUC5AC mRNA and protein in bronchial epithelia, and increased the ratio of p-ERK 1/2 and ERK 1/2. U0126 significantly attentuated the expression of MUC5AC mRNA and protein induced by cigarette smoke (P <0.05). Moreover, there was a significant positive correlation between the ratio of p-ERK1/2 to ERK1/2 and the expression of MUC5AC mRNA and protein (P <0.05).

Conclusions  Inhibition of ERK 1/2 by U0126 decreased the ratio of p-ERK 1/2 to ERK 1/2 and expression of MUC5AC mRNA and protein. ERK 1/2 may play an essential role in cigarette smoke-induced mucus hypersecretion in vivo.

     

哮喘小鼠肺组织中水通道蛋白5和黏蛋白5AC的表达变化及其相关性研究

目的探讨支气管哮喘(以下简称哮喘)小鼠肺组织水通道蛋白5(AQP5)和黏蛋白MUC5AC基因和蛋白的表达变化及其两者的相关性。方法制作小鼠哮喘模型,测定支气管肺泡灌洗液细胞分类及肺组织湿干重比值,应用Real-time PCR法测定哮喘组(OVA组)和对照组肺组织中AQP5和MUC5AC mRNA的表达,应用免疫组化法测定AQP5在肺组织中的分布,免疫印记法、ELISA法测定AQP5和MUC5AC蛋白在肺组织中的表达。结果小鼠哮喘组肺组织中AQP5表达较对照组明显减低(P<0.01),而MUC5AC表达显著升高(P<0.01),两者呈负相关(r=0.901,P<0.01)。结论哮喘时肺组织中AQP5表达的减低可能与气道MUC5AC表达的升高有关,从而促进了气道黏液过度分泌。     

罗格列酮对大鼠气道黏液高分泌的影响

目的探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）激动剂罗格列酮对丙烯醛所致大鼠气道黏液高分泌的影响及其机制。方法将36只雄性SD大鼠随机分为6组，即对照组（A组）、罗格列酮自身对照组（B组）、模型组（C组）、低剂量罗格列酮组（D组）、中剂量罗格列酮组（E组）和高剂量罗格列酮组（F组）。采用酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测支气管肺泡灌洗液（BALF）中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）和IL-8浓度。分别用阿辛蓝．过碘酸雪夫（AB-PAS）和免疫组化染色检测气道黏蛋白和MUCSAC的表达。结果丙烯醛吸入各组BALF中TNF-α、IL-1β和IL-8浓度，以及气道黏蛋白、MUCSAC表达与A组比较明显增加（P〈0．01，P〈0．05），TNF-α、IL-1β、IL-8浓度与黏蛋白、MUCSAC表达分别呈正相关（r分别为0．827，0．795，0．924,0．805，0．812和0．917；P〈0．01或P〈0．05）。给予低、中、高剂量罗格列酮治疗后，D组、E组和F组BALF中TNF-α和IL-8浓度，以及气道黏蛋白和MUCSAC表达均逐渐降低，其中E、F组与C、D组比较，F组与E组比较，差异均有统计学意义（P〈0．01或P〈0．05）。结论罗格列酮能够下调TNF-α和IL-8的表达，减轻气道黏液高分泌。     

铜绿假单胞菌诱导气道上皮细胞产生MUC5AC的分子机制

目的探讨铜绿假单胞菌（Pseudomonasaeruginosa,Pa）诱导气道上皮细胞表达产生粘蛋白MUCSAC的影响,并探讨其可能的分子机制。方法体外培养NCI—H292细胞,用Pa感染后,采用ELISA检测MUC5AC的产生情况;并用商品化的MMP-9活性检测试剂盒检测其产生以及酶活性情况。同时,采用EGFR,P13K,NADPH,ROS和MMP特异性抑制剂AG1478,LY294002,DPI,NAC和GM6001预处理NCI—H292细胞,观察MUC5AC以及MMP-9的产生情况。结果Pa能以时间依赖性方式诱导NCI—H292细胞产生MMP-9．并增加其活性。EGFR活化后,经P13K途径激活Racl并诱导MMP-9的表达,最终诱导MUC5AC产生。结论Pa经EGFR／P13K／Racl／NADPH／ROS／MMP-9通路诱导NCI—H292细胞产生MUC5AC。     

TIM-1对哮喘小鼠气道MUC5AC及Th2细胞因子表达的影响

目的 研究T细胞免疫球蛋白-黏蛋白-1(TIM-1)表达对哮喘小鼠气道MUC5 AC及Th2细胞因子的作用,探讨气道黏液高分泌的机制.方法 30只健康雌性C57BL/6小鼠,按随机数字表法分为正常、哮喘模型组(哮喘组)和哮喘模型+ TIM-1抗体处理组(TIM-1抗体组),每组10只.检测小鼠外周血单个核细胞(PBMCs)TIM-1+细胞比例、气道MUC5ACmRNA表达、肺泡灌洗液(BALF)中IL-13、IL-4、IL-5水平及黏液细胞数量和细胞体积的改变.结果 (1)哮喘组及TIM-1抗体组小鼠外周血PBMCs中TIM-1+细胞比例(11.20％,5.11％)均高于正常组(0.64％,P＜0.05),且TIM-1抗体组低于哮喘组(P＜0.05).(2)哮喘组及TIM-1抗体小鼠气道黏液细胞MUC5AC mRNA相对表达(17.3±1.4,5.6±0.3)及IL-13[(16.80±0.63) ng/ml,(5.70±0.64) ng/ml]、IL-4[(614.72±117.39) pg/ml,(325.78±86.54) pg/ml]、IL-5[(1 681.13±613.55) pg/ml,(513.42±86.87)pg/ml]水平均高于正常组[1,(1.09±0.25) ng/ml,(17.56±3.01) pg/ml,(30.78±9.67) pg/ml],TIM-1抗体组小鼠上述指标低于哮喘组(P＜0.05).(3)气道MUC5AC及IL-13表达与TIM-1+细胞表达均呈正相关(r1=0.946,P1=0.004;r2=0.984,P2=0.000).结论 哮喘小鼠外周血TIM-1+细胞升高,可致气道黏液过度分泌;抑制TIM-1表达可减少哮喘气道黏液高分泌.调节TIM-1表达有可能成为减少黏液高分泌及治疗哮喘的新途径.     

大环内酯类抗生素对气道黏液高分泌过程的调控作用及其机制研究

目的了解十四环大环内酯类抗生素对气道黏液高分泌过程的调控作用及其可能的机制。方法大鼠气道内注入脂多糖（LPS）建立气道黏液高分泌模型。分别给予罗红霉素（1—10mg／kg）、交沙霉素（10mg／kg）和阿莫西林（40mg／kg）管喂4d。提取肺组织和支气管肺泡灌洗液（BALF），采用ELLA、ELISA、免疫组化、RT-PCR及Western Blot等方法检测炎性细胞因子[白细胞介素1β（IL-1β）、IL-8和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）]、黏蛋白、Muc5ac和核因子-κB（NF-κB）等的表达水平。结果LPS刺激可以使大鼠气道上皮Muc5ac蛋白和mRNA表达增高，使BALF中性粒细胞增高、黏蛋白含量增多、炎性细胞因子（IL-1β、1L-8和TNF-α）表达增加。同时气道上皮细胞胞浆NF-κB表达和NF-κB入核率均增高。罗红霉素（5和10mg／kg）可以抑制由LPS导致的Muc5ac高表达和NF-κB的核内转移，抑制肺组织内中性粒细胞聚集和肺泡灌洗液中性粒细胞的数量以及炎性细胞因子水平。NF-κB的入核率与细胞因子、Muc5acn mRNA水平呈正相关关系。交沙霉素组和阿莫西林组未观察到类似结果。结论罗红霉素可以抑制LPS所致的肺组织炎症反应和气道黏液高分泌状态，其机制可能是部分通过抑制NF-κB活化、中性粒细胞聚集和炎性细胞因子释放而发挥作用。     

人呼吸道粘液分泌体外实验方法的建立

目的建立研究人类呼吸道粘液分泌的体外实验方法。方法直径小于3mm的小支气管组织(HSBT)剪碎后被均匀地放入24孔培养板中。分别记录基础粘蛋白分泌量(BM)和激发粘蛋白分泌量(SM)，SM用超过BM的百分率表示。在含50nmol／L视黄酸的BEGM与DMEM(1：1)混合液中进行支气管粘膜上皮的原位培养，在带半透膜的插入培养板中培养正常人支气管上皮细胞(NHBE)。MUC5AC粘蛋白ELISA以其多克隆抗体为一抗，绵羊抗兔IgG为二抗，邻苯二甲酰胺显色。酶连二花葙豆凝集素(DBA)试验(ELDBAA)以DBA铺盘以便与粘蛋白结合，用过氧化物酶标记的DBA识别被捕捉的粘蛋白。结果MUC5AC ELISA的敏感性为10ng／ml，而ELDBAA为30ng/ml。经过3h培养，HSBT的基础MUC5AC和DBA粘蛋白分泌量分别为11和19ng／mg组织。原位培养的支气管粘膜上皮细胞3h积聚的粘蛋白分泌量分别为MUC5AC粘蛋白793-1868ng／孔和DBA粘蛋白290-2675ng／孔。NHBE细胞在气液界面形成后的第6d，3h积聚的基础DBA粘蛋白分泌量为22ng／孔。结论:上述组织和细胞培养以及粘蛋白测量方法的建立为呼吸道粘液分泌的研究奠定了良好基础。     

杏杷止咳颗粒对气道黏液高分泌大鼠杯状细胞的影响研究

目的：研究杏杷止咳颗粒对气道黏液高分泌大鼠杯状细胞的影响。方法：48只SD大鼠随机分为6组,空白组（A）、模型组（B）、低（C）、中（D）、高剂量止咳颗粒组（E）、氨溴索组（F）各8只,采用丙烯醛雾化造模气道黏液高分泌大鼠,应用阿尔辛蓝-过碘酸-希夫（AB-PAS）染色检测杯状细胞阳染率、管腔内黏液分泌。结果：1AB-PAS染色病理切片：正常大鼠气管及支气管见到极少量杯状细胞存在;模型组小鼠每一级气道均可见到大量杯状细胞增生并有大量黏液分泌;低剂量组杯状细胞分布稍减少;中剂量组杯状细胞分布明显减少;高剂量组和氨溴索组可见少量杯状细胞分布;2杯状细胞阳染率：模型组、低剂量止咳颗粒组杯状细胞阳染率较空白组、高剂量止咳颗粒组、氨溴索黏组高（P〈0.01）。结论：杏杷止咳颗粒能够减轻气道黏液高分泌杯状细胞增生,其机制有待进一步研究。     

吸入烟曲霉孢子对哮喘大鼠气道上皮重构和MUC5AC表达的影响

目的研究吸入烟曲霉孢子(A f)对哮喘大鼠气道上皮重构和黏蛋白5AC(MUC5AC)表达的影响。方法64只雄性W istar大鼠随机分为正常对照组(A)、慢性哮喘模型组(B)、慢性哮喘 A f孢子吸入组(C)、慢性哮喘 生理盐水吸入组(D)。C、D两组又分为吸入1周、3周和5周组(C1、C3、C5和D1、D3、D5组),每组8只。测定肺泡灌洗液(BALF)中Il-4和IFN-γ水平、气道阻力变化率、杯状细胞增生程度、气道上皮细胞MUC5AC和肺组织MUC5AC mRNA的水平。结果C组BALF中IL-4水平、杯状细胞面积与上皮细胞面积比值、气道阻力变化率、气道上皮细胞MUC5AC表达及肺组织MUC5AC mRNA水平在不同时间点均高于B组和D1、D3、D5组(P<0.05),且C1、C3、C5三组间比较差异有统计学意义(P<0.05);MUC5AC的表达强度与杯状细胞面积/上皮细胞面积比值正相关(r=0.757,P<0.01),与气道阻力变化率正相关(r=0.521,P<0.05)。结论反复吸入A f孢子可上调哮喘大鼠气道MUC5AC的表达,促进杯状细胞增生,增加气道阻力和气道反应性。