人类白细胞抗原-B27检测中实时荧光PCR法的应用价值

人类白细胞抗原（humanleucocyteantigen,HLA）是指一组位于人体细胞膜表面能够识别“自己”或者“非己”的抗原分子,是由位于人类6号染色体短臂上的一组主要组织相容性复合体基因编码,其中人类白细胞抗原-B27（HLA-B27）是HLA-B基因座位上的一个重要等位基因。以往,检测HLA-B27主要有实时荧光PCR法、酶联免疫法、流式细胞术及微量细胞毒试验法。本文对实时荧光PCR法与流式细胞术在HLA-B27检测中的应用作一比较,旨在探讨实时荧光PCR法的可靠性。     

流式细胞术与定量PCR法检测HLA-B27的比对

目的评价实时荧光定量PCR法和流式细胞术两种方法检测人类白细胞抗原HLA-B27对强直性脊柱炎的临床诊断价值。方法将疑似强直性脊柱炎患者199例全血分别采用实时荧光定量PCR和流式细胞仪法检测HLA-B27,以流式细胞术HLA-B27阳性作为判断标准,确定实时荧光定量PCR法检测HLA-B27的敏感度、特异度、阳性预测值及阴性预测值。将流式细胞术HLA-B27阳性的样本44例,按照实时荧光定量PCR检测结果将其分为疑似组、阴性组及阳性组,确定有无表达抗原表达强度的差异。结果91.5%样本分型结果相同,差异不具有统计学意义（P〈0.05）。实时荧光定量PCR检测HLA-B27的敏感度为95.1%,特异度达到96.8%,阳性预测值为88.6%,阴性预测值为98.7%。实时荧光定量PCR检测疑似组、阴性组及阳性组,无显著表达抗原表达强度的差异。结论实时荧光定量PCR与流式细胞术检测HLA-B27具有相似敏感度和特异度,是一种较为快速、简单、有效的检测方法。     

PCR-SSP法在强直性脊椎炎患者中HLA-B27的诊断作用

HLA-B27是人类白细胞抗原B位点上的一个重要的等位基因,与脊椎关节系统疾病如强直性脊柱炎（AS）、反应性关节炎（ReA）、Reiter氏综合征（RS）等许多严重危害人类健康的疾病密切相关。HLA-B27的检测有血清学检测和PCR技术检测两种,我们对疑为强直性脊椎炎患者的HLA-B27进行了两种方法的检测,报告如下。     

流式细胞术检测人类白细胞抗原-B27在诊断强直性脊柱炎中的价值

目的 探讨应用流式细胞术检测人类白细胞抗原-B27（HLA-B27）对临床强直性脊柱炎（AS）的诊断价值.方法 应用流式细胞仪检测947例临床疑似AS患者的T淋巴细胞上的HLA-B27抗原,采用流式细胞仪（FCM）自带的数据获取与分析软件获取数据并进行分析.结果 947例患者HLA-B27抗原阳性率为44.8%,男女比例为4.3∶1,其中95.6%HLA-B27抗原阳性的患者确诊为AS.结论 利用流式细胞术检测HLA-B27有助于AS的诊断,检测快速,特异性、稳定性均较好.     

内蒙古地区疑似强直性脊柱炎患者HLA-B27抗原阳性率观察

目的通过检测998例疑似强直性脊柱炎（Ankylosing spondylitis,AS）患者HLA-B27抗原阳性率和表达强度,了解内蒙古地区AS与HLA-B27抗原的相关性,并初步探讨其临床意义。方法采用流式细胞术检测患者外周血T淋巴细胞膜上的HLA-B27抗原和其平均荧光强度（mean fuorescence intensity,MFI）。结果 998例疑似AS患者以21~50岁青壮年为主,占77.35%;男女比例为1.4∶1;998例疑似AS患者的HLA-B27抗原阳性率28.86%;男女患者HLA-B27抗原阳性率分别为33.05%和23.02%（P〈0.05）;男女阳性患者的MFI有明显差异（P〈0.05）。结论内蒙古地区AS患者与HLA-B27抗原有着很强的相关性。采用流式细胞技术检测临床疑似AS患者T淋巴细胞HLA-B27表达强度有助于诊断和鉴别诊断AS。     

HLA-B27抗原检测在强直性脊柱炎诊断中的意义

目的：探讨 HLA-B27抗原表达与强直性脊柱炎（AS）的相关性,及其对 AS 诊断和鉴别诊断的意义。方法采用流式细胞术检测人类白细胞抗原 B27（HLA-B27）,纳入研究的包括354例疑似 AS 患者、35例确诊 AS 患者和30例确诊类风湿性关节炎（RA）患者。结果354例疑似 AS 患者的 HLA-B27总阳性率为22．0％,确诊 AS 患者 HLA-B27的阳性率为85．7％,均高于RA 组（P ＜0．05）。AS 患者中男性占77．1％,女性占22．9％,且发病年龄主要集中在青壮年时期;AS 患者 HLA-B27抗原检测用于AS 诊断的灵敏度为85．7％,特异度为100．0％。结论HLA-B27抗原的检测对 AS 患者的早期诊断和鉴别诊断具有重要意义。     

流式细胞术检测HLA-B27两种试剂比较与结果分析

目的 比较两种人类白细胞抗原B27(HLA-B27)检测试剂盒临床检测效果与异常结果 分析,为临床提供可靠的检测报告.方法 采用HLA-B27-FITC/HLA-B7-PE和HLA-B27-FITC/CD3-PE两种检测试剂盒检测1208例腰椎病、颈椎病、关节痛、脊柱僵硬和强直性脊柱炎患者标本中HLA-B27的表达,结...     

强直性脊柱炎实验室指标结果分析

目的探讨血沉（ESR）、HLA-B27抗原、C-反应蛋白（CRP）等9项实验室指标对强直性脊柱炎（AS）的诊断价值。方法检测103例确诊AS患者和23例健康对照ESR、HLA-B27抗原、CRP等9项实验室指标并进行对比分析。结果AS患者ESR、HLA-B27抗原、CRP的阳性率分别为68.9%、89.3%和66.0%,与健康对照组比较有统计学意义,3项指标综合可将AS的诊断率提高到93.6%;其他指标两组比较差异无统计学意义。结论联合检测ESR、HLA-B27抗原和CRP对AS的诊断和疗效观察价值较大。     

2种HLA-B27检测方法在强直性脊柱炎诊断中的比较

目的：通过比较2种中国药监局（CFDA）批准的人类白细胞抗原（HLA）-B27体外诊断试剂盒,探讨荧光聚合酶链式反应（PCR）体外诊断试剂盒在 HLA-B27检测中的临床应用价值。方法收集该院573例临床血液样本,分别采用基于荧光PCR 技术和流式细胞法的2种上市获批试剂盒进行 HLA-B27检测,对于2种方法检测结果不一致的样本采用 PCR 测序方法进行确认,同时随机抽取5％的荧光 PCR 法检测结果为阳性的样本进行复验。结果573例样本,采用流式细胞法试剂盒检测出阳性191例,阴性382例;相同样本使用荧光 PCR 试剂盒检测 HLA-B27基因阳性共194例,阴性379例。最终结果以流式细胞法作为参照,2种试剂盒阳性符合率为96.33％（184／191）,阴性符合率为94.76％（362／382）,27例样本不符（占总样本数的4.71％）,2种方法的总符合率为95.29％[（184＋362）／573],Kappa 值为0.896,（P ＝0.02）;四格表资料卡方检验 P ＝0.021,2种方法检测结果一致性较高,但检测结果存在差异。复测标本中（包括27例检测结果不一致标本）HLA-B27基因测序结果与荧光PCR 试剂盒检测判断结果一致。结论相比临床 HLA-B27检测的权威方法流式细胞方法,荧光 PCR 法试剂盒在保证较高结果一致性的基础上,在 HLA-B27检测上可能具有更为准确的判断能力,且相比标本制备和操作更为简单,具有较强的临床应用价值和前景。     

流式细胞术检测HLA-B27诊断强直性脊柱炎临界值设置的探讨分析

目的 应用流式细胞术检测外周血白细胞HLA-B27,并结合临床诊断,寻求诊断强直性脊柱炎（Ankylosing spondylitis,AS）的最适合临界值.方法 应用美国Beeton Dickinson公司流式细胞仪检测95例AS患者、226例非AS（包括腰腿背痛患者87例,其他SPA患者62例,类风湿性关节炎43例,风湿性关节炎34例）患者及50例健康体检者的外周血HIA-B27表达强度.结果 以美国BD公司试剂设定的界值≥荧光强度147道数为准,仅58例AS患者（61.05%）HLA-B27阳性,其中有17例检测值在140-146道数之间;非AS组中,HLA-B27阳性11例（4.87%）;健康对照组HLA-B27阳性3例（6.00%）.结论 以进口试剂盒设置的临界值为准,AS组阳性率过低,与临床不符,影响一部分AS患者的早期诊断.如降低其临界值,提高流式细胞术检测HLA-B27抗原的阳性率,更符合临床诊断,有利于AS患者的诊断和治疗.     

人类白细胞抗原-B27检测在临床诊断强直性脊柱炎中的应用价值

目的通过临床资料探讨人类白细胞(HLA)抗原-B27检测在强直性脊柱炎(AS)临床诊断中的应用价值。方法用ELISA法对临床确诊96例AS患者、230例疑似AS患者和200例健康体检者进行HLA-B27抗原检测。结果确诊AS组、疑似AS组和健康对照组HLA-B27阳性率分别为90.6%、45.7%和5.5%,确诊AS组、疑似AS组HLA-B27阳性率明显高于健康对照组(P0.01),确诊AS组的HLA-B27阳性率明显高于疑似AS组(P0.01)。结论 HLA-B27抗原与AS疾病密切相关,检测HLA-B27抗原对早期诊断AS有重要意义。     

强直性脊柱炎患者HLA-B27、B7、B13、B40抗原表达及免疫学指标的分析

目的探讨强直性脊柱炎患者HLA-B 27、B 7、B 13、B 40的抗原表达,发现抗原相互杂合与交叉反应,以及强直性脊柱炎患者的免疫学指标的变化。方法采用N IH微量淋巴细胞毒法对HLA-B 27等抗原进行检测,抗核抗体采用间接免疫荧光法,免疫球蛋白及补体均采用免疫速率散射法测定。结果126例初诊患者中HLA-B 27阳性率为34.1%,HLA-B 7、B 13、B 40的阳性率分别为6.3%,13.5%,11.1%。HLA-B 27阳性组中HLA-B 13阳性率为27.9%,HLA-B 40阳性率为23.3%,分别高于HLA-B 27阴性组(6.0%,4.8%),而HLA-B 7的阳性率两组无显著性差异。HLA-B 27阳性组的免疫球蛋白、补体、抗核抗体指标均显著高于HLA-B 27阴性组(P均<0.05)。结论检测强直性脊柱炎患者HLA-B 27及相关B抗原有助于疾病诊断和抗原交叉反应的分析,体液免疫异常及自身抗体的出现与HLA-B 27密切相关。     

强直性脊柱炎患者人类白细胞抗原B27三种检测方法的对比

目的对流式细胞术（FCM）B27／B7双标法用于强直性脊柱炎（AS）患者人类白细胞抗原B27（HLA-B27）表达情况的测定进行评估，探讨HLA．B27平均荧光强度用于原发性As及继发性脊柱炎鉴别诊断的可能性。方法采用FCMB27／B7双标法、微量淋巴细胞毒试验（CDC）及引物特异性聚合酶链反应（SSP-PCR）测定76名正常人、57例原发AS和106例继发性脊柱炎患者HLA-B27。结果CDC、SSP-PCR和FCMB27／B7双标法特异性和敏感性分别为76．3％和78．5％、88．4％和86．3％、86．8％和88．9％。原发性AS及继发性脊柱炎患者HLA-B27平均荧光强度差异无显著性（P〉0．05）。结论FCMB27／B7双标法是一种快捷、简便、高效的HLA-B27检测方法。     

HLA-B27检测对强直性脊柱炎诊断的临床意义

目的探讨人类白细胞抗原（HLA）-B27对强直性脊柱炎（AS）的诊断价值。方法选择2 768例疑诊AS患者作为研究对象,其中600例为确诊AS患者。采用流式细胞术进行血HLA-B27检测。结果 2 768例疑诊AS的患者中,HLA-B27阳性598例（21.6%）,阴性2 170例（78.4%）。男、女性患者HLA-B27阳性率的差异有统计学意义（P〈0.05）;20~〈40岁的AS疑诊患者HLA-B27阳性率显著高于其他年龄段的阳性率（P〈0.05）。600例AS确诊患者中,HLA-B27阳性536例（89.3%）。结论 HLA-B27检测结合临床表现有助于AS的早期诊断。     

PCR-SBT与IMS-ELISA法在强直性脊柱炎患者HLA-B27检测中的比较

目的 比较聚合酶链反应-直接测序法(polymerase chainreaction sequence-based typing,PCR-SBT)和磁珠酶联免疫法(immunomagnetic separation and enzyme-linked immunosorbent assay,IMS-ELISA)检测人类白细胞抗原B27(human leukocyte antigen B27,HLA-B27)在强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)临床诊断中的价值。方法 应用PCR-SBT法和IMS-ELISA法对120例疑似AS患者外周血进行HLA-B27检测。以SPSS17.0软件的配对χ²检验和受试者工作特征曲线下面积对两种方法检测HLA-B27在AS诊断中的价值进行评价。结果 120例疑似AS患者中,PCR-SBT和IMS-ELISA法HLA-B27检测阳性率分别为45.83%(55/120)和37.50%(45/120)。两种方法检测HLA-B27差异有统计学意义(χ²=59.455,P=0.000)。PCR-SBT法敏感度和特异度分别为96.36%和96.92%; IMS-ELISA法的敏感度和特异度分别为69.09%和89.23%。两者的AUC分别为0.966和0.792。结论与IMS-ELISA法相比,在AS的临床诊断中PCR-SBT法检测HLA-B27的敏感度和特异度更高,方法更优。     

强直性脊柱炎患者HLA-B27抗原、ESR、CRP等检测指标水平分析及临床意义

目的探讨HLA-B27抗原、红细胞沉降率(ESR)、C-反应蛋白(CRP)等检测指标在强直性脊柱炎(AS)诊断中的临床价值。方法 33例临床确诊为AS患者和30例健康体检者,进行HLA-B27抗原、ESR、CRP等项实验室指标的检测。结果 AS患者HLA-B27抗原、ESR、CRP阳性率分别为87.9%、63.6%和45.5%,与健康对照组比较均显著增高,差异有统计学意义(P0.05),且HLA-B27抗原阳性率显著高于其他两项指标,3项指标联合检测可将AS的阳性率提高到93.9%,但特异度会相应降低;其他指标两组比较差异均无统计学意义(P0.05)。结论 HLA-B27抗原与AS具有密切相关性,联合检测HLA-B27抗原、ESR、CRP对AS的诊断更有价值。     

强直性脊柱炎867例HLA-B27的表达及意义

目的：通过检测临床疑为强直性脊柱炎（AS）患者的HIA-B27表达，探讨HIA-B27抗原的检测在AS早期诊断中的意义。方法：采用流式细胞术对1807例疑为AS患者外周血进行HLA-B27表达的检测。结果：在867例诊断为AS的患者中，HLA-B27阳性758例，HIA-B27检测AS的敏感性为87．4％（758／867），特异性为91．9％（864／940），诊断正确率为89．8％。结论：AS与HIA-B27阳性高度相关，临床疑为AS的患者若加上流式HLA-B27抗原检测结果将对AS的早期诊断起到重要作用。[著者文摘]     

实时荧光PCR法和流式细胞术检测HLA-B27的结果分析

目的比较实时荧光PCR法和流式细胞术两种方法检测人类白细胞抗原B27(HLA-B27)的临床应用价值。方法分别采用实时荧光PCR法和流式细胞术两种方法检测225例疑似强直性脊柱炎患者血中HLA-B27,比较和分析两种方法的检测结果。结果 95.11%样本检测结果相同,差异不具有统计学意义(P0.05),将存在差异的标本进行基因测序后,结果与实时荧光PCR的检测结果一致。结论两种方法检测HLA-B27均具有较高的灵敏度和特异度,实时荧光PCR法在结果的准确性上更优于流式细胞术。     

PCR-SSP法与流式细胞仪检测强直性脊柱炎患者HLA-B27的比较

目的 评价序列特异性引物-聚合酶链式反应(PCR-SSP)法和流式细胞仪两种方法检测人类白细胞抗原(HLA-B27)对强直性脊柱炎(AS)的临床诊断价值,以找出一种准确有效更加适合临床的检测方法.方法 将按照纽约诊断标准划分的病例组和对照组分别采用PCR-SSP法和流式细胞仪法检测HLA-B27,分别比较两种方法的敏感度和特异度,并采用PCR-SSP法对阳性病例的HLA-B27等位基因分型.结果 PCR-SSP法的敏感度(94.8%)高于流式细胞仪法(88.6%),差异具有统计学意义(χ2=4.55,P＜0.05).24例HLA-B27阳性患者等位基因分型HLA-B*270401和HLA-B*2705共占87.4%.结论 PCR-SSP法检测HLA-B27具有较高的敏感度和特异度,是一种快速、简单、有效的检测方法.存在于AS患者的HLA-B27等位基因主要是HLA-B*270401和HLA-B*2705.     

MLCT和ELISA法检测HLA-B27的比较

目的比较微量淋巴细胞毒试验（MLCT）和酶联免疫吸附试验（ELISA）检测HLA-B27结果差异性。方法采用MLCT法和ELISA法同步检测483例患者的HLA-B27的表达。结果两种方法经配对χ2检验（χ2=80.378,P〈0.01）。Kappa值评价（K=0.308）,显示两种方法一致程度不够满意。MLCT法敏感度,阳性预测价值和阴性预测价值分别为0.801 1,0.980 3,0.888 2,均优于ELISA法。结论两种方法检测HLA-B27存在差异,ELISA法的敏感度较低,MLCT法的敏感度、阳性预测价值和阴性预测价值均优于ELISA法。