IFN-γ通过JAK-STAT1通路诱导乳腺上皮细胞表达趋化因子CXCL17

背景与目的：趋化因子在白细胞浸润、免疫调节和肿瘤转移等病理生理过程中发挥着广泛而重要的作用,但人们对其调控机制了解甚少。研究表明,细胞因子可刺激趋化因子的表达,从而发挥其生物学功能。CXC趋化因子配体17(CXC chemokine ligand 17,CXCL17)是2006年发现的CXC趋化因子中新的一员。CXCL17具有抗炎、抗菌、抗肿瘤免疫和促血管生成等作用。通过研究其上游调控机制可为其用于临床诊断与治疗提供线索。本研究旨在探讨何种细胞因子可以影响CXCL17的表达。方法：实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)检测多种细胞因子(TNF-α、IL-1β、IFN-γ)及细菌脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)作用于MCF-10A正常乳腺上皮细胞12 h后,CXCL17的mRNA表达水平改变。蛋白［质］印迹法(Western blot)检测IFN-γ作用于MCF-10A细胞后JAK-STAT通路的活化情况。结果：多种细胞因子及LPS可不同程度地促进CXCL17基因转录,IFN-γ作用最为显著,其通过增加STAT1蛋白的表达水平和磷酸化水平,极大地提高了CXCL17基因转录水平。结论：IFN-γ通过激活JAK-STAT1信号通路使CXCL17在乳腺上皮细胞MCF-10A中表达上调。作为IFN-γ的靶基因,CXCL17很可能是IFN-γ发挥抗炎、抗癌作用的重要环节之一。     

Salubrinal抑制射线诱导NF-κB活化增加口腔癌细胞凋亡

目的 探讨Salubrinal调控射线诱导口腔癌细胞凋亡的作用机制。方法 构建放射抗拒口腔癌细胞KBR (4 Gy/次,7~10d 1次共4次);克隆形成实验检测Salubrinal预处理后口腔癌细胞放射敏感性;蛋白印迹法检测射线及Salubrinal调控口腔癌细胞NF-κB-HIF-1α信号通路及凋亡标志蛋白cleaved PARP的表达;Annexin V、PI染色、流式细胞仪检测凋亡分数。结果 克隆形成实验示Salubrinal增加口腔癌细胞放射敏感性,KB及KBR细胞放射增敏比分别为1.19和1.24。蛋白印迹法结果示射线诱导口腔癌细胞NF-κB-HIF-1α细胞活化具有时间依赖性,而Salubrinal抑制射线诱导其异常活化。Salubrinal增加射线诱导口腔癌细胞凋亡标志蛋白cleaved PARP表达及凋亡指数,而NF-κB激活剂TNF-α逆转了这一作用,提示Salubrinal通过抑制NF-κB活化增加射线调控口腔癌细胞凋亡。进一步应用NF-κB抑制剂Bay11-7082同样增加射线诱导口腔癌细胞凋亡,KB及KBR细胞系Bay11-7082+IR组cleaved PARP的表达为2.67±0.26、1.91±0.17,IR组为2.1±0.16、1.44±0.15(P<0.05)。结论 Salubrinal抑制射线诱导NF-κB活化增加射线诱导口腔癌细胞凋亡进而调控口腔癌细胞放射敏感性。     

叶酸代谢相关酶基因多态性与消化系统肿瘤的关系

叶酸的主要生物学功能是作为甲基供体参与脱氧核糖核酸合成和细胞内甲基化反应.亚甲基四氢叶酸还原酶(methylene tetrahydrofolate reductase,MTHFR)、甲硫氨酸合成酶(methionine synthase,MTR)、甲硫氨酸合成酶还原酶(methionine synthase reductase,MTRR)、胸苷酸合成酶(thymidylate synthase,TS)和亚甲基四氢叶酸脱氢酶(methylenetetrahydrofolate dehydrogenase,MTHFD)等是叶酸代谢通路中重要的酶.叶酸代谢相关酶基因变异、叶酸缺乏或代谢障碍与肿瘤的发生和发展有关.本文就叶酸代谢相关酶基因多态性与消化系统肿瘤间的关系进行简要综述.     

γ射线诱导大鼠外周血淋巴细胞差异表达基因及相关通路的研究

目的： 为在分子水平上研究外周血淋巴细胞辐射生物剂量估算和辐射损伤机制提供依据。方法：利用全基因组芯片技术对大鼠离体外周血淋巴细胞经2.0 Gyγ射线照后不同时间点 (6、12、24 h)的差异基因表达谱和通路进行分析,并利用荧光定量PCR技术对基因芯片结果进行验证。结果：与未经照射的淋巴细胞比较,照后6 h差异表达基因有534个,其中上调差异基因332个,下调差异基因202个;照后12 h 差异表达基因有2 001个,其中上调差异基因1 258个,下调差异基因743个;照后24 h差异表达基因有6 925个,其中上调差异基因2 814个,下调差异基因4 111个;照后3个时间点共同差异表达基因有270个,其中上调差异基因143个,下调差异基因127个。另外在差异表达基因分析的基础上,发现照后6 h时差异表达基因涉及到的通路有27个,照后12 h时差异表达基因涉及到的通路有22个,照后24 h时差异表达基因涉及到的通路有41个。RT-PCR结果表明,Trmt61a、Tlr3及Enc1 3个差异表达基因的相对定量结果与基因芯片检验结果表达趋势一致。结论：随着照后时间延长,辐射诱导大鼠离体外周血淋巴细胞差异表达基因有增多趋势,且筛选出的通路也明显不同,表明照后不同时间辐射引起的损伤可能不同。     

Salubrinal抑制射线诱导NF-κB活化增加口腔癌细胞凋亡

目的 探讨Salubrinal调控射线诱导口腔癌细胞凋亡的作用机制。方法 构建放射抗拒口腔癌细胞KBR (4 Gy/次,7~10d 1次共4次);克隆形成实验检测Salubrinal预处理后口腔癌细胞放射敏感性;蛋白印迹法检测射线及Salubrinal调控口腔癌细胞NF-κB-HIF-1α信号通路及凋亡标志蛋白cleaved PARP的表达;Annexin V、PI染色、流式细胞仪检测凋亡分数。结果 克隆形成实验示Salubrinal增加口腔癌细胞放射敏感性,KB及KBR细胞放射增敏比分别为1.19和1.24。蛋白印迹法结果示射线诱导口腔癌细胞NF-κB-HIF-1α细胞活化具有时间依赖性,而Salubrinal抑制射线诱导其异常活化。Salubrinal增加射线诱导口腔癌细胞凋亡标志蛋白cleaved PARP表达及凋亡指数,而NF-κB激活剂TNF-α逆转了这一作用,提示Salubrinal通过抑制NF-κB活化增加射线调控口腔癌细胞凋亡。进一步应用NF-κB抑制剂Bay11-7082同样增加射线诱导口腔癌细胞凋亡,KB及KBR细胞系Bay11-7082+IR组cleaved PARP的表达为2.67±0.26、1.91±0.17,IR组为2.1±0.16、1.44±0.15(P<0.05)。结论 Salubrinal抑制射线诱导NF-κB活化增加射线诱导口腔癌细胞凋亡进而调控口腔癌细胞放射敏感性。     

丙型肝炎病毒对精液和精子质量影响的研究进展

【摘要】丙型肝炎病毒 (hepatitis C virus,HCV)是一种通过血液、性和母婴传播的疾病,其感染具有隐蔽性,引起的症状不具有特异性,易造成感染者表现为肝硬化等严重的疾病,成为公共卫生领域关注的重大问题。本文就HCV感染过程及其对男性精液和精子造成的影响进行简要综述。     

核因子-κB受体及其配体信号通路在肿瘤中的表达及其研究进展

核因子-κB受体（RANK）及其配体（RANKL）在最近十几年得到广泛研究。RANK在正常细胞和肿瘤细胞中均能高频表达。RANKL在肿瘤微环境中经常被检测到,并且在骨的重塑和免疫过程中起着关键作用。研究表明RANK和RANKL共同参与了肿瘤发生发展过程的各个阶段。RANK-RANKL信号通路主要由3个因素调节,它们分别是骨保护素（OPG）、骨保护素配体和一个能够结合RANKL的膜受体（LGR4）。本文以肿瘤转移为重点,探讨RANK-RANKL信号通路在肿瘤侵袭和转移中的意义以及以RANK-RANKL为靶点治疗肿瘤的相关研究进展。     

妊娠期急性白血病患者的治疗及预后分析

目的:探讨妊娠期急性白血病患者的临床特点、诊断和治疗措施。方法:回顾性分析中国科学技术大学附属第一医院2009年1月至2018年12月妊娠期间确诊急性白血病16例患者的临床资料。分析患者诊疗方案、妊娠结局、胎儿情况及患者生存情况。结果:16例患者均行骨髓穿刺明确诊断白血病并分型,其中急性髓系白血病13例（非急性早幼粒细胞白血病5例,急性早幼粒细胞白血病8例）,急性淋巴细胞白血病3例。确诊时,处于妊娠早期6例,妊娠中期6例,妊娠晚期4例。妊娠结局：自然分娩1例,剖宫产5例,人工流产9例,自然流产1例。妊娠期间化疗15例,11例在妊娠结束后继续行原发病化疗,3例在治疗期间死亡。13例随访患者中生存8例,失访5例。结论:妊娠期急性白血病的早期诊断很重要,产检发现血常规异常时应及时进行骨髓穿刺以明确诊断。应及时启动多学科会诊,制定最佳治疗方案。     

BRAFV600E基因突变与甲状腺乳头状癌

 BRAF^V600E基因突变是甲状腺乳头状癌中最常见的遗传学事件,是浸润性肿瘤临床表型和预后不佳的指标,BRAF^V600E因突变检测对甲状腺恶性结节的术前鉴别诊断及指导甲状腺癌的手术切除范围、判断患者预后、指导术后后继治疗均有重要的指导意义。     

成年人急性早幼粒细胞白血病治疗后转型一例并文献复习

目的 观察成年人急性早幼粒细胞白血病(APL)治疗后转变为急性单核细胞白血病(M5)的发生过程.方法 对1例APL患者诊断、缓解和复发的整个过程应用细胞形态学、免疫组织化学、细胞遗传学和分子遗传学方法进行监测.结果 该患者经骨髓细胞形态学、染色体以及融合基因检查确诊为APL,缓解期间PML-RARα融合基因转阴;完全缓解4个月后复发,此时染色体未见异常,但细胞形态和分子遗传学检查提示转变为M5,转型后再次诱导治疗无效出院.结论 APL治疗后转变为M5的病例临床较为罕见,转型后治疗效果不佳.     

miR-146a对氢醌抑制HL-60细胞分化的调控作用

目的： 观察氢醌对HL-60细胞向单核细胞分化的影响,并初步探讨miR-146a的调控作用。方法：设miR-146a-5p 抑制剂和阴性对照处理的HL-60细胞,分别以不同浓度(0、0.5、1.0、2.5和5.0 μmol/L)的氢醌处理3 h后,接种于含豆蔻酰佛波醇(PMA)的培养基中,培养72 h诱导其分化。采用实时荧光定量PCR检测细胞内miR-146a及其靶基因TRAF6的表达量,流式细胞术检测CD11b和CD14的表达,Western blot检测TRAF6蛋白及其下游调控因子IκBα蛋白的表达水平。结果：与对照组相比(0 μmol/L), 氢醌可抑制PMA诱导的HL-60细胞CD11b和CD14的表达,5.0 μmol/L的氢醌使其表达量分别减少44%和38% (P均<0.01);同时miR-146a的表达比对照组升高近2倍(P<0.01);TRAF6 mRNA的表达下降约40%,其蛋白表达下降74%(P均<0.01);磷酸化IκBα蛋白的表达减少约45%,IκBα总蛋白表达升高约73%(P均<0.01)。当抑制miR-146a的表达后,氢醌对TRAF6、IκBα和磷酸化IκBα蛋白表达的影响不明显。结论：miRNA-146a是氢醌影响HL-60细胞分化的调控因子之一。     

双色荧光原位杂交技术在膀胱尿路上皮肿瘤诊断中的应用价值

 目的 探讨双色荧光原位杂交技术（FISH)诊断膀胱尿路上皮肿瘤的临床应用价值。方法 标记为3,7,17号染色体着丝粒及9号染色体p16位点9p21区带探针,采用FISH对80例膀胱尿路上皮肿瘤患者尿液间期细胞核进行荧光原位杂交,同时选取20例健康体检者作为正常对照组,建立阈值,以组织病理结果作为诊断“金标准”,统计染色体畸变情况,分析其与病理分期、分级的关系以及染色体畸变组合诊断膀胱尿路上皮肿瘤的敏感性。结果 3、7、17号染色体和9p21的畸变率分别为47.5%（38/80）、60.7%（49/80）、51.3%（41/80）和58.8%（47/80）,3、7、9和17号染色体联合检测膀胱癌的阳性率为76.3%(61/80),畸变和肿瘤分期无相关性,3、7、17号染色体与肿瘤病理分级有显著相关性（P﹤0.05）。 结论 膀胱尿路上皮肿瘤的进展可能与染色体的畸变有关,FISH可以作为膀胱尿路上皮肿瘤诊断的一项重要方法,并可能在术后监测复发以及预后判断中具有重要临床意义。     

微小RNA在伴遗传学异常的急性白血病中的研究进展

微小RNA（miRNA）是一类长度为19～25 nt的单链小分子非编码RNA,通过与靶基因mRNA 3＆#39;端非翻译区结合引起mRNA的剪切、降解及翻译抑制,参与基因的转录后调控.近年来的研究发现,miRNA的异常表达可参与部分癌基因或抑癌基因的表达调控,影响造血细胞的发育和分化,导致血液肿瘤的发生和发展.不同的miRNA表达谱与特异的遗传学异常及编码基因突变相关,能够为不同类型白血病的生物学研究提供新的依据.文章就近年来miRNA在伴不同细胞及分子遗传学异常的急性髓系白血病及急性淋巴细胞白血病中的研究进展作一综述.     

肿瘤患者化疗期间的血栓形成及抗凝治疗

大量数据表明肿瘤患者化疗期间血栓形成的相关事件明显增加.化疗期间抗凝治疗不但可有效改善患者高凝状态,预防血栓发生,还具有潜在的抗肿瘤作用,延长患者的生存期.     

慢性淋巴细胞白血病免疫治疗研究进展

慢性淋巴细胞白血病（CLL）是一种异质性的成熟B细胞克隆性疾病,好发于老年人。免疫疗法,如嵌合抗原受体T细胞疗法、双/三特异性抗体、免疫检查点疗法等,为CLL的治疗提供了更多选择,新旧疗法的多种联合应用也展现出良好的疗效及安全性。文章就现有CLL的免疫疗法及联合应用进行综述。     

自噬在癌症发生中的双重作用

自噬是一种在真核生物正常细胞和病理状态细胞中普遍存在的生理过程。它利用膜包被需要降解的细胞质、长寿蛋白和受损细胞器形成自噬体,与溶酶体融合后降解包含的内容物。自噬维持了细胞内蛋白质代谢平衡和内环境稳定,增强了细胞的胁迫适应。自噬缺失与许多疾病的发生有关,如肝功能衰竭、神经退行性病变、衰老和癌症。自噬与癌症的关系错综复杂,不同的组织和基因背景下,自噬对癌症发生所起的作用不同。自噬缺失后,细胞遭受氧化胁迫,DNA损伤累积,基因组稳定性下降,以及持续的炎症,从而导致癌症的发生。然而在特定的细胞类型、时期和微环境中,自噬为癌细胞生长提供所需的代谢物,有利于癌细胞氧化胁迫适应和转移,从而促进了癌症的发生。本文主要综述自噬在癌症发生中的双重作用及其可能的机制,并评价自噬干预在癌症临床辅助治疗中的可能应用。     

强直性脊柱炎合并bcr-abl融合基因阳性急性淋巴细胞白血病一例

患者 男性,48岁.因面色苍白、乏力1个月于2014年10月17日首次入院.患者缘于1个月前无明显诱因出现面色苍白、乏力,未重视,乏力渐进性加重,在当地医院查血常规三系减低(具体不详),未明确诊断,来我院就诊,门诊以全血细胞减少待查收住院.入院查体:体温36.6℃,呼吸频率20次/min,血压120/80 mmHg(1 mmHg=0.133 kPa),重度贫血貌,全身皮肤黏膜无黄染及出血点,周身浅表淋巴结未触及肿大;双肺呼吸音粗,未闻及干湿性啰音,心率102次/min,律齐,腹软,无压痛,肝脾未触及,胸10、腰5椎体压痛,下胸椎、腰椎、腰骶关节强直,前弯、后仰、侧弯均受限.双下肢轻度水肿.     

p53和γ-H2AX作为乙醛引起DNA损伤早期生物标记物的实验研究

目的： 评价乙醛染毒p53野生型人类淋巴母细胞(TK6)后,细胞中DNA损伤标记物p53、γ-H2AX的表达变化,并与彗星试验中的DNA链断裂指标进行敏感性比较,探讨p53和γ-H2AX 作为乙醛引起DNA损伤的早期生物标记物的可能。方法：乙醛在0.5~20 mmol/L的浓度范围分别染毒TK6细胞20 min、2和12 h后,采用高通量的流式细胞术检测肿瘤抑制蛋白total-p53、磷酸化p53(p-p53)以及磷酸化组蛋白(γ-H2AX)的细胞表达率和表达强度(平均荧光强度);同时采用碱性彗星试验检测乙醛引起的DNA链断裂指标(细胞拖尾率、尾长、尾部DNA百分含量以及尾矩)的变化。结果：乙醛染毒TK6细胞12 h后,γ-H2AX的表达强度在15及20 mmol/L浓度下显著升高(P<0.05),p-p53的细胞表达率在0.5~7.5 mmol/L浓度范围内呈现剂量依赖的升高趋势,total-p53的细胞表达率趋势与p-p53相似,但与阴性对照组相比,差异无统计学意义。彗星试验中,细胞拖尾率、尾长、尾部DNA百分含量以及尾矩在5.0~12.5 mmol/L浓度范围内均增加,并呈现剂量依赖性。染毒2 h后,与阴性对照组相比,total-p53和p-p53的细胞表达率在15和20 mmol/L浓度下显著升高(P均<0.05),细胞拖尾率、尾部DNA百分含量以及尾矩在20 mmol/L浓度升高(P均<0.05)。染毒20 min后,3种生物标志物均未见清晰的变化趋势,4种DNA链断裂指标均未见显著变化(P均＞0.05)。结论：乙醛染毒TK6细胞12 h可诱导p-p53细胞表达率升高、γ-H2AX细胞表达强度升高、 total-p53细胞表达率轻微升高,以及细胞拖尾率、尾长、尾部DNA百分含量、尾矩的升高。p-p53比γ-H2AX和DNA链断裂指标在检测乙醛诱导的DNA损伤方面更加敏感。     

丙酮酸乙酯对氯气染毒大鼠肺组织炎症的抑制作用

目的： 研究丙酮酸乙酯 (ethyl pyruvate,EP)对氯气导致的肺组织炎症反应的抑制作用及其机制。方法：60只SD雄性大鼠分为2批,每批随机分为阴性对照组、阳性对照组和EP处理组,每组各10只,阴性对照组以空气为对照。阳性对照组和EP处理组给予2 536 mg/m3的氯气动态染毒,染毒时间为20 min,染毒后立即分别腹腔注射生理盐水或EP (40 mg/kg)。染毒后6 h 采集肺泡灌洗液,检测TNF-α、IL-1β以及IL-8含量,取肺组织检测核因子NF-κB核转位。于染毒后24 h取肺组织检测高迁移率族蛋白B1(high mobility group box 1,HMGB1)的表达并检测ⅡA型分泌型磷脂酶A2 (type-ⅡA secretary phospholipase A2,sPLA2-ⅡA) 活性。结果：与阴性对照组比较,氯气染毒6 h后肺泡灌洗液中TNF-α、IL-1β、IL-8含量显著增加 (P<0.05),NF-κB核转位显著升高 (P<0.05),染毒后24 h肺组织中HMGB1表达以及sPLA2-ⅡA活性显著升高 (P<0.05)。与阳性对照组比较,给予EP处理后上述指标均显著降低 (P<0.05)。结论：氯气中毒后启动了早期和晚期炎症反应,引起肺组织释放大量炎症因子,导致炎症反应发生。EP处理可有效抑制肺组织炎症反应。