雷公藤甲素单次及多次给药对大鼠肝药酶活性的影响

目的:研究雷公藤甲素对大鼠肝药酶活性的影响。方法:对SD大鼠以雷公藤甲素(150、300、450μg·kg-1)灌胃给药,每天1次,给药1d或14d,分别测定细胞色素P450、细胞色素b5含量及红霉素N-去甲基酶(ERD)、二甲基亚硝胺脱甲基酶(NDMA)、甲氧基异唑脱甲基酶(MROD)、乙氧基异唑脱乙基酶(EROD)和戊氧基异唑脱烷基酶(PROD)活性;CYP3A和CYP2E1蛋白含量采用Westernblotting法分析。结果:单次灌胃雷公藤甲素对肝药酶活性及CYP2E1、CYP3A蛋白表达基本无影响;多次给予雷公藤甲素(450μg·kg-1,14d)能诱导NDMA活性,抑制ERD活性,轻度升高CYP2E1蛋白表达,显著降低CYP3A蛋白表达。结论:长期较高剂量给予雷公藤甲素能抑制CYP3A活性,轻度诱导CYP2E1活性。     

Bay41-4109对大鼠肝脏P450酶系诱导作用的研究*

目的观察Bay41-4109(2-heteroaryl-dihydropyrimidines,HAP,异芳基二氢嘧啶类化合物)诱导处理对大鼠肝细胞色素P450(CYP450)及其主要亚型的影响,并探讨其可能的机制.方法雄性Wistar大鼠分别用Bay41-4109 7.5,30和120mg·kg-1·d-1连续灌胃诱导处理5 d,测定肝脏脏器系数、微粒体总CYP450含量和CYP1A2,2B1/2和3A4亚型活性,并以苯巴比妥为对照.结果经Bay41-4109三个不同剂量诱导后,大鼠肝脏脏器系数、总P450含量、CYP1A2,2B1/2和3A4活性与对照相比均有不同程度升高,并有明确的剂量效应关系,其诱导CYP450代谢酶谱的改变与苯巴比妥基本一致;且Bay41-4109在7.5mg·kg-1·d-1时即对CYP2B1/2和CYP1A2有非常显著的诱导作用,120 mg·kg-1·d-1时引起此两种亚型活性变化大致与苯巴比妥60 mg·kg-1·d-1相当.结论Bay41-4109属于苯巴比妥类的肝药酶强诱导剂,可能通过药物代谢酶系统影响其他药物的代谢.     

四物汤及其有效成分对大鼠肝脏主要药物代谢酶的影响

目的研究四物汤及其有效成分对大鼠肝脏P450酶的影响,从药物代谢酶角度为四物汤的配伍规律提供实验依据。方法大鼠口服灌胃四物汤10 g·kg-1·d-1及其有效成分果糖0.334 g·kg-1·d-1,阿魏酸0.002 g·kg-1·d-1,川芎嗪0.011 g·kg-1·d-1,芍药苷0.022 g·kg-1·d-1,连续给药1周后处死,用生理盐水灌流肝脏,制备肝微粒体,采用混合探针与肝微粒体体外孵育法考察四物汤及其有效成分对大鼠肝脏细胞色素P450酶的影响。利用实时定量聚合酶链式反应(Q-PCR)检测四物汤及其有效成分对大鼠肝脏P450 mRNA表达的影响,利用Western blot法检测四物汤及其有效成分对大鼠肝脏CYP2B1蛋白表达的影响。结果肝微粒体孵育结果显示,果糖对CYP1A2、CYP2B6、CYP2C9、CYP2D6酶活性具有抑制作用,阿魏酸对CYP2C9、CYP2B6酶活性具有抑制作用,川芎嗪对CYP1A2、CYP2C9、CYP2B6的酶活性具有抑制作用,芍药苷对CYP2D6、CYP2B6酶活性具有抑制作用。阿魏酸、果糖、芍药苷组对CYP2B1mRNA的表达具有抑制作用,与酶活性水平一致。4种单体成分对CYP2B1蛋白表达具有抑制作用。结论阿魏酸、果糖、芍药苷组在CYP450酶活性、mRNA基因转录水平及蛋白表达水平对CYP2B1均有抑制作用。     

淫羊藿苷对不同月龄大鼠肝微粒体细胞色素P450的影响

目的 揭示淫羊藿苷(Ica)对大鼠肝微粒体细胞色素P450的含量及部分亚型的影响,并比较月龄的差异.方法 ig给予6月龄和18月龄的♂SD大鼠Ica( 60 mg· kg -1),4周后取肝脏,用钙沉淀法提取肝微粒体,BCA法测定微粒体蛋白浓度;用一氧化碳还原差示光谱法测定CYP450的含量;用ELISA法测定CYP1 A1、CYPb5的含量;用比色法测定苯胺羟化酶(反映CYP2E1活性)和红霉素-N-脱甲基酶(反映CYP3A活性)的活性;用real - time RT - PCR检测CYP1 A1、CYP2A3、CYP2E1、CYP3A1、CYP3A2和CYP4B1 mRNA的表达.结果 60 mg· kg-1 Ica明显增加了CYP450的总酶和CYP1 A1的含量、CYP3A的活性及CYP1 A1、CYP3A1、CYP3A2 mRNA的表达,降低了CYP2E1的活性及其mRNA的表达;但Ica对上述各指标的诱导或抑制作用在大鼠月龄方面差异不明显;Ica对CYPb5的含量及CYP2A3、CYP4B1 mRNA的表达未见明显影响.结论 Ica对大鼠肝微粒体CYP450总酶、CYPI A1和CYP3A具有诱导作用,对CYP2E1具有抑制作用,该作用未见明显月龄差异.     

Caspase抑制剂F1013对大鼠肝CYPs含量及其主要亚型mRNA表达的影响

目的:探讨Caspase抑制剂F1013对大鼠肝CYPs含量及其主要亚型CYP1A2,CYP2D1,CYP2E1,CYP2C11,CYP3A1 mRNA相对表达水平的影响。方法:Wistar大鼠40只,随机分成空白组、诱导剂组、F1013低、中、高剂量组。空白组和诱导剂组分别灌胃给予0.9%氯化钠溶液和地塞米松50 mg·kg-1.d-1,F1013低、中、高组分别肌内注射F1013 1.25,2.5,5.0 mg·kg-1.d-1,每日1次,连续6 d。取大鼠肝组织制备肝微粒体,测定微粒体蛋白浓度及CYP总酶含量。并采用实时定量荧光RT-PCR法分析大鼠CYP各主要亚型mRNA的相对表达水平。结果:F1013低、中、高组肝微粒体CYP总酶含量与空白组比有显著增高(P<0.05),提示该药对CYP总酶有诱导作用。低剂量组CYP2D1酶活性显著升高(为空白组2.54倍,P<0.05);中剂量组CYP1A2及CYP2E1酶活性显著升高,分别为空白组4.24和2.46倍(P<0.05);3个剂量的F1013对CYP2C11均无显著诱导作用。结论:F1013在1.25,2.5,5.0 mg.kg-1剂量范围内,可显著诱导CYP总酶活性。F1013 1.25 mg·kg-1可诱导CYP 2D1 mRNA表达,2.5 mg·kg-1剂量可诱导CYP1A2及CYP2E1 mRNA的表达,其诱导机制可能与升高各主要亚酶mRNA相对表达水平有关。     

Z24对大鼠肝脏CYP450酶系的影响

目的:观察Z24对大鼠肝脏CYP450酶系的影响.方法:雌性Wistar大鼠,灌胃(ig)给予Z24(0,50,100,200 mg·kg-1·d-1),连续5 d,以0.9%氯化钠溶液作对照,末次给药后次日,处死大鼠,测定肝微粒体中CYP450总含量、细胞色素b5(Cyt-b5)含量、NADPH-CYP450还原酶活性以及1A2,181,2E1,3A4亚型活性.结果:与对照组相比,各剂量组CYP450总含量、NADPH-CYP450还原酶活性及CYPlB1、2El亚型活性均明显升高(P＜0.05);100和200 mg·kg-1组Cyt-b5含量升高(P＜0.05);200 mg·kg-1组CYPlA2和3A亚型活性升高(P＜0.05).结论:Z24对CYP450、NADPH-CYP450还原酶及CYPlB1、2El亚型有诱导作用,剂量达100和200 mg·kg-1时分别对cyt-b5和CYPlA2、3A亚型产生诱导作用.     

中药莪术激活PXR及对大鼠肝细胞色素P450 3A的影响

目的考察莪术能否通过体外激活PXR调节细胞色素P4503A4(CYP3A4)的转录表达及对大鼠肝脏CYP3A在酶活性及mRNA表达的诱导作用。方法在HepG2细胞中,采用瞬时共转染报告基因实验研究莪术对PXR介导的CYP3A4的转录调节作用;在大鼠体内,采用紫外分光光度法和RT-PCR技术检测莪术对大鼠肝脏CYP450含量及CYP3A同工酶红霉素N-脱甲基酶(ERD)的活性和CYP3A基因mRNA表达的影响。结果在体外报告基因实验研究中,莪术提取物及其有效成分能不同程度的诱导CYP3A4的表达;在大鼠体内实验中,莪术提取物能够增加CYP450蛋白含量和CYP3A酶活性;在mRNA水平上,莪术提取物能够明显诱导CYP3A1及CYP3A2的基因表达。结论莪术提取物及其有效成分能够明显激活PXR并诱导CYP3A4的转录表达;莪术提取物对大鼠体内CYP3A的酶活性及mRNA表达均有明显诱导作用。     

双环醇对肝脏部分切除大鼠CYP450酶活性和表达的影响(英文)

本研究考察双环醇对肝脏部分切除(PH)后大鼠肝脏微粒体细胞色素P450(CYP)活性、基因和蛋白表达的影响及相关机制。大鼠PH前灌胃给予双环醇(300 mg.kg-1)3次,PH后处死大鼠,取其血清和肝组织进行检测,依次测定血清谷丙转氨酶(ALT)、肝微粒体丙二醛(MDA)和肝脏总CYP含量、4种CYP同工酶活性、基因和蛋白表达。结果显示,双环醇可显著抑制PH大鼠血清ALT和肝微粒体MDA的升高,抑制肝脏总CYP含量的减少,抑制CYP2C6、2C11活性和mRNA表达的下降,明显抑制CYP3A1/2活性的下降,并上调CYP3A1和2E1的mRNA和蛋白表达。结果表明,双环醇对PH大鼠肝脏CYP450酶及部分同工酶活性和表达的改变有明显改善作用,其作用机制可能与其抗氧化作用和酶诱导作用密切相关。     

青蒿素类药物对大鼠肝内组成型雄烷受体和CYP2B的诱导作用

目的探讨青蒿素(ART)和双氢青蒿素(DHA)对大鼠肝内组成型雄烷受体(CAR)和细胞色素P450s(CYP450s)的诱导作用。方法 SD大鼠随机分为8组:口服ART诱导组(80mg·kg-1·d-1);口服DHA诱导组(10mg·kg-1·d-1);口服溶剂对照组;静脉注射ART诱导组(16mg·kg-1·d-1);静脉推注DHA诱导组(5mg·kg-1·d-1);静脉推注溶剂(ART)对照组;静脉推注溶剂(DHA)对照组;空白对照组。连续给药5d,第6天处死大鼠,取肝组织,采用实时荧光定量聚合酶链反应方法检测各组大鼠肝内核受体和CYP450s mRNA水平。结果相比溶剂对照组和空白对照组,口服ART诱导组大鼠CAR和CYP2B1 mRNA水平显著增加(P<0.01),口服DHA诱导组中CYP2B1 mRNA水平显著增加(P<0.01),而静脉推注ART和DHA诱导组大鼠CAR及CYP450s mRNA水平与对照组间差异无统计学意义。结论多剂量口服青蒿素类药物很可能激活核受体CAR,进而上调CYP2B mRNA水平,从而增加自身代谢。而多剂量静脉注射ART和DHA对核受体CAR及CYP450s mRNA水平均没有影响,说明青蒿素类药物对于CYP450s的诱导作用基于首过代谢。     

联苯双酯对大鼠黄曲霉毒素B1代谢及肝毒性的影响

目的研究抗肝炎药联苯双酯对大鼠黄曲霉毒素B1代谢和肝毒性的影响.方法大鼠po联苯双酯300 mg*kg-1*d-1, 连服3 d后ip黄曲霉毒素B1 1.5 mg*kg-1.给黄曲霉毒素B1 16 h后测定血清ALT和AST水平,观察联苯双酯对黄曲霉毒素B1引起肝损伤的保护作用以及对体外代谢的影响.结果联苯双酯(300 mg*kg-1*d-1,连服3 d)可明显降低黄曲霉毒素B1引起的大鼠血清转氨酶升高,增加低毒代谢产物AFM1的生成.联苯双酯还可增加大鼠肝脏细胞色素P450总量和胞浆GSH含量,诱导P450 2B1介导的PROD和GST的活性.此外,联苯双酯对P450 3A介导的红霉素脱甲基酶和P450 1A介导的EROD也有一定的诱导作用.结论联苯双酯可通过增加大鼠肝脏对AFB1代谢的解毒功能起到肝保护作用.