氟比洛芬减轻小鼠肝脏缺血再灌注损伤的作用及其机制

目的 探讨环氧化酶(COX)抑制剂氟比洛芬减轻肝脏缺血再灌注(IR)损伤的作用及机制.方法 将C57BL/6小鼠分为假手术组、IR组和氟比洛芬组(根据药物剂量不同分为A、B、C、D组4个亚组).除假手术组外,其余组建立70％小鼠肝IR损伤模型,肝脏缺血时间为90 min.A、B、C、D组于缺血前20 min经小鼠尾静脉分别注射5、7.5、10和15 mg/kg的氟比洛芬.再灌注后通过血清学和组织学指标观察肝损伤情况,比较各组COX及其相关炎症因子的基因表达情况,检测各组肝细胞线粒体膜转换孔(mPTP)的敏感性.结果 与IR组比较,再灌注后氟比洛芬组血清天冬氨酸转氨酶和丙氨酸转氨酶均明显降低(P＜0.05),其中C组下降最为明显.再灌注6h,与IR组比较,氟比洛芬组肝组织损伤较轻,凋亡细胞数明显减少(P＜0.05);同时,肝组织COX-2及相关炎症因子白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的基因表达也明显减少(P＜0.05);再灌注后6h,氟比洛芬组mPTP对外源性Ca2+刺激的耐受性增加.结论 氟比洛芬预处理能减轻小鼠肝脏IR损伤,该作用可能与减少炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α的表达,以及抑制mPTP.     

缺血预处理对肝脏缺血再灌注损伤保护作用的实验研究

在大鼠肝脏缺血再灌注模型基础上建立稳定的缺血预处理模型,观察其保护作用,结果发现预处理与缺血再灌注组相比比清肝酶（ＡＬＴ,ＡＳＴ）,透明质酸水平及肝组织局部ＭＤＡ含量均低,而组织ＡＴＰ含量及能荷值均高,形态学损伤改变轻;同时发现预处理组织腺苷含量明显高于缺血再灌注组。实验表明缺血预处理能有效减轻肝脏的缺血再灌注损伤,腺苷分子参与了这一保护机制。     

姜黄素对大鼠肝脏冷缺血再灌注损伤的保护作用及其机制

目的探讨姜黄素预处理对大鼠肝脏冷缺血再灌注损伤(IRI)的保护作用及其机制。方法将40只Wistar大鼠随机分为:实验组(21只),于术前2 h将60 mg/kg的姜黄素溶于1mL DMSO中静脉注射;对照组(19只),于术前2h静脉注射1 mL DMSO。肝脏冷灌注时间为30 min,恢复血供复流6 h后处死动物,留取血液和肝脏标本,行血清ALT,AST,LDH和组织匀浆SOD,MDA,MPO测定,并进行组织病理和细胞凋亡检测。酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肝组织匀浆中TNF-α及MIP-2的水平变化。结果实验组大鼠血清ALT,AST,LDH水平明显低于对照组(P0.01);实验组MDA,MPO,TNF-α和MIP-2水平较对照组明显降低(P0.05),SOD含量较对照组明显增高(P0.05)。并且实验组大鼠肝组织损伤程度和细胞凋亡程度明显轻于对照组。结论姜黄素预处理能减轻大鼠肝脏冷IRI,其保护机制可能与提高肝组织SOD含量,抑制脂质过氧化与细胞凋亡,下调炎性因子TNF-α和MIP-2的表达以及减少中性粒细胞浸润有关。     

肝脏缺血再灌注损伤机制和缺血预处理保护作用

缺血再灌注(ischemia reperfusion, IR)损伤是指缺氧器官细胞损伤在恢复氧供之后更加加重的现象。Toledo Pereyra 等在 1975 年首先认识到IR损伤是肝移植过程中一种重要病理损伤状态,可发生移植肝淤血、进行性血栓形成和/或器官坏死,导致移植失败。直到80年代中期,“再灌注损伤(reperfusion injury)”才逐渐在肝移植文献中应用。　　肝脏IR损伤可分为热缺血和冷保存缺血再灌注损伤。热 IR 损伤(warm ischemia reperfu sion injury)与肝脏外科、肝移植、低血容量性休克、毒性肝损害、静脉阻塞性疾病和 Budd Chiari综合征等普遍相关…     

肝脏缺血再灌注损伤

肝脏是一易受再灌注损伤的器官，原位缺血再灌注〔１〕、移植肝脏〔２〕、离体肝脏〔３〕及孤立肝细胞（如枯否氏细胞〔４〕和肝实质细胞〔５〕）实验都表明肝脏可产生再灌注损伤。近年来实验表明，肝脏的缺血再灌注损伤与多种机理有关。１氧自由基暴发性形成氧自由基的大...     

肝脏缺血再灌注损伤机制和缺血预处理保护作用

缺血再灌注(ischemia reperfusion，IR)损伤是指缺氧器官细胞损伤在恢复氧供之后更加加重的现象。Toledo—Pereyra等在1975年首先认识到IR损伤是肝移植过程中一种重要病理损伤状态，可发生移植肝淤血、进行性血栓形成和／或器官坏死，导致移植失败。直到80年代中期，“再灌注损伤(reperfusion injury)”才逐渐在肝移植文献中应用。     

缺血预处理对大鼠肝脏缺血再灌注损伤保护作用机制的研究

目的　探讨缺血预处理 (IPC)保护作用的发生机制。方法　建立大鼠部分肝脏热缺血再灌注模型。IPC采用肝脏缺血 10min ,再灌注 10min。结果　IPC后肝组织中腺苷和NO水平明显升高 ,与对照组相比差异显著 (P <0 0 1) ,但IPC前应用腺苷A2 受体拮抗剂后NO的升高被抑制 (P<0 0 1)。缺血再灌注 (I/R) 2h后血清中TNF α、AST、ALT、LDH及W/D水平和假手术组相比明显增加 ,而IL 10含量降低 (P <0 0 1) ;IPC、I/R前加入腺苷、IPC前应用腺苷A1受体拮抗剂显著地降低TNF α释放和AST、ALT、LDH及W /D水平 ,提高IL 10含量 ,与I/R组相比差异显著 (P <0 0 1) ;但IPC前应用腺苷A2 受体拮抗剂 (IPC +A2 antag)和NO合成酶抑制剂NAME并没有能像IPC组那样有效降低TNF α、AST、ALT、LDH及W /D的水平 ,提高IL 10的含量 (P <0 0 1) ;而IPC前给IPC+A2 antag组提供NO前体精氨酸又获得和IPC组同样的结果 (P >0 0 5 )。结论　IPC引起细胞外腺苷水平升高 ,腺苷A2 受体活化 ,介导了NO合成增加 ,最终通过抑制效应器TNF α的释放、增加IL 10的合成来实现对缺血组织的保护作用。     

不同时间的缺血预处理对肝脏缺血再灌注损伤的影响

我们通过观察不同时间的缺血预处理对肝脏缺血再灌注损伤的影响,旨在探讨ＰＣ对肝脏缺血再灌注损伤的保护作用所需要的适合的预处理时间。一、材料与方法１．动物模型：雄性ＳＤ大鼠６０只,体重１８０～２２０ｇ,参照Ｊａｅｓｃｈｋｅ和Ｍｅｔｚｇｅｒ法制备成右肝全部缺血、左肝部分缺血后再灌注大鼠模型［１］。２．预处理方案：本实验共设５组,每组１２只大鼠;假手术组（Ｓ组）：仅行假手术;缺血再灌注组（ＩＲ组）：肝脏持续缺血６０分钟,再灌注３０分钟;预处理组分为３组,在肝脏持续缺血之前分别进行５分钟缺血及５分钟的再灌…     

缺血预处理对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护机制

目的验证缺血预处理(IPC)对大鼠肝脏缺血再灌注损伤(I/R)的保护作用,探讨一氧化氮(NO)与蛋白激酶C(PKC)在IPC过程中的作用.方法在原位灌流的大鼠肝脏缺血再灌注模型上,观察IPC的保护作用.同时经肠系膜上静脉注射NO前体L-精氨酸和蛋白激酶C特异性激动剂1,2-二辛酸甘油(DOG)以及两者的特异性阻滞剂N-硝基-L-精氨酸甲酯(NAME)和多粘菌素B,来检测NO和PKC在IPC中的关系.结果预处理可阻止血清谷丙转氨酶(ALT)[(200.86±40.30)U/Lvs.(257.65±20.18)U/L],谷草转氨酶(AST)[(211.06±13.59)U/Lvs.(309.17±24.79)U/L],乳酸脱氢酶(LDH)[(824.73±127.11)U/Lvs.(1118.60±82.21)U/L]及脂质过氧化物(LPO)[(0.414±0.069)mmol/mgvs.(0.531±0.054)mmol/mg]水平升高(P＜0.05),而使组织超氧化歧化酶(SOD)保持在较高水平[(10.33±0.88)U/mgvs.(6.01±0.91)U/mg],(P＜0.05).NO与PKC均可模拟预处理的保护效应.结论缺血预处理对大鼠肝脏I/R有明确的保护作用,NO与PKC发挥IPC保护作用的途径不同.     

低剂量雷公藤甲素预处理减轻小鼠肝脏缺血再灌注损伤的作用及其机制

目的 探讨雷公藤甲素(TPT)预处理减轻小鼠肝脏缺血再灌注损伤的作用及其作用机制.方法 将60只雄性C57BL/6小鼠分成4组,每组15只.(1)TPT手术组:手术方法参照Kobayashi法,术中夹闭肝门静脉左支、肝动脉左支及左肝管,90min后开放血管,建立小鼠肝脏缺血再灌注损伤模型;(2)TPT假手术组:手术方式同TPT手术组,但术中不阻断血流,仅用生理盐水(NS)纱布覆盖切口90 min;(3)NS手术组:手术方式同TPT手术组;(4)NS假手术组:手术方式同TPT假手术组.两TPT组小鼠于术前1周开始腹腔注射TPT0.1 mg·kg-1·d-1,术前1 h加用1次,而两NS组同期仅腹腔注射等体积无菌NS.再灌注后24 h,检测各组小鼠肝功能和观察肝组织病理学变化,采用流式细胞术检测各组TH17细胞占单个核细胞的比例,采用实时聚合酶链反应(PCR)检测各组肝组织中IL-17和ROR-γt mRNA的表达,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中IL-6、IL-17和TGF-β的含量.结果 TPT手术组肝功能的损伤较NS手术组明显减轻(P＜0.05);NS假手术组、TPT假手术组、NS手术组和TPT手术组TH17细胞占单个核细胞的比例分别为(0.72±00.23)%、(0.41±0.18)%、(4.26±0.82)%和(1.77±0.53)%;两TPT组IL-17和ROR-γt mRNA的表达量以及外周血中IL-6、IL-17和TGF-β的含量,均明显低于相应的NS组(P＜0.05).结论 低剂量TPT预处理能够减轻小鼠肝脏缺血再灌注损伤,这可能与TPT预处理抑制小鼠体内Th17细胞分化、发育及其功能有关.     

17-β-雌二醇对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护作用及其机制

目的 探讨17-β-雌二醇对雄性大鼠肝脏缺血再灌注(I／R)损伤的保护作用及其机制。方法 采用大鼠部分肝脏缺血再灌注损伤模型，将健康雄性SD大鼠96只随机分成两组：A组(缺血再灌注组)，B组(17-β-雌二醇处理组)。每组分别随机取6只于缺血前、肝脏再灌注后1h、2h、4h、1d、3d、5d、7d时检测血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)和肿瘤坏死因子(TNF-α)水平，并进行统计学处理。结果 除缺血前和再灌注7d外A组动物在相应时点ALT、AST、LDH、TNF-α水平均高于B组，且A组动物肝功能恢复正常时间(与缺血前相比)迟于B组。结论 17-β-雌二醇对肝脏缺血再灌注损伤有显著的保护作用，并可缩短病程，其作用机制可能与17-β-雌二醇降低肝脏I／R时血清TNF-α水平有关。     

异丙酚复合川芎嗪对大鼠肝脏缺血/再灌注损伤的作用

目的探讨异丙酚复合川芎对大鼠肝脏缺血/再灌注损伤的作用及其机制。方法50只雄性SD大鼠随机分5组,每组10只,即Sham、Mod、Pro、Lig、Pro Lig组。各组均在阻断第一肝门前20min用药,Pro组经尾静脉持续输注异丙酚20mg·kg-1·h-1,Lig组经尾静脉注射川芎嗪60mg·kg-1,Pro Lig组经尾静脉注射川芎嗪60mg·kg-1后,经尾静脉持续输注异丙酚20mg·kg-1·h-1;Sham、Mod组分别经尾静脉持续输注等容量生理盐水。在阻断第一肝门前即刻停止输注药物。分别在肝门阻断30min、再灌注60min取腹主动脉血,测定血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)活性。取血后立即处死大鼠,测定肝组织丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)、黄嘌呤氧化酶(XOD)活性,并观察肝细胞超微结构。结果Mod、Pro、Lig、Pro Lig组血清ALT、AST活性均高于Sham组(P<0.01),Pro、Lig、Pro Lig组血清ALT、AST活性均低于Mod组(P<0.05或0.01),Pro Lig组血清ALT。活性均低于Pro、Lig组(P<0.05)。与Sham组比较,Mod、Pro、Lig组肝组织MDA含量升高,Mod组肝组织SOD活性降低,Pro、Lig、Pro Lig组肝组织SOD活性升高,Mod、Pro、Lig、Pro Lig组肝组织XOD活性升高(P<0.05或0.01);与Mod组比较,Pro、Lig、Pro Lig组肝组织MDA含量降低,SOD活性升高,Pro L     

N-乙酰半胱氨酸对鼠肝冷缺血/再灌注损伤的保护作用

目的 为提高肝移植手术后供肝存活率,研究抗氧化剂Ｎ－乙酰半胱氨酸（ＮＡＣ）预处理是否能减少移植肝的冷缺血／再灌注损伤。方法 从大鼠肠系膜上静脉分别注入ＮＡＣ１５mg/kg或５％葡萄糖1ml,15min后取肝,以４℃ＵＷ液保存４８h,再将鼠肝置于离体灌注仪上循环灌流2h。取各时点样本测转氨酶、乳酸、酸性磷酸酶和ＡＴＰ。使用谷胱甘肽合成抑制剂ＢＳＯ处理组,在取肝前2h经用腔注射ＢＳＯ3mmol/kg。结果 ＮＡＣ可以减少鼠肝冷缺血／再灌注后ＡＳＴ、ＡＬＴ和ＬＤＨ释放,提高胆汁分泌量。ＮＡＣ抑制离体鼠肝酸性磷酸酶释放。用谷胱甘肽合成抑制剂ＢＳＯ预处理后,ＮＡＣ减少ＡＳＴ、ＡＬＴ和ＬＤＨ释放,提高胆汁产量的作用依然存在。结论 ＮＡＣ可抑制鼠肝冷缺血／再灌注损伤,其保护作用与直接抑制枯否细胞激活有关,而与促肝细胞谷胱甘肽合成作用无关。     

山莨菪碱对肝脏缺血再灌注损伤的保护作用

目的 探讨山莨菪碱对肝脏缺血再灌注损伤的保护作用。方法 将雄性Wistar大鼠制成肝脏缺血再灌注模型,随机分为正常对照组、缺血再灌注组、生理盐水组和山莨菪碱组,观察肝脏缺血60min再灌注1、3、6、12及24h后血浆和／或肝组织中内皮素－1（ET－1）、透明质酸（HA）、丙氨酸转氨酶（ALT）、丙二醛（MDA）和再灌注1h后肝细胞内游离Ca^2 ([Ca^2 ]i)、ATP含量变化以及肝组织病理学改变。结果 肝脏缺血再灌注后血浆和／或肝细胞中ET－1、HA、ALT、MDA和肝细胞内[Ca^2 ]u含量均显著升高,而肝组织中ATP含量明显降低;肝脏缺血再灌注前应用山莨菪碱2.0mg/kg者,血浆HA和肝细胞内[Ca^2 ]i含量明显降低,肝组织中MDA也有不同程度的降低,而肝组织中ATP含量明显升高,同时肝酶的漏出减少,肝组织病理学损害明显减轻。结论 山莨菪碱对肝脏缺血再灌注损伤具有保护作用。     

齐墩果酸预先给药对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的影响

目的 探讨齐墩果酸预先给药对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的影响.方法 清洁级健康雄性SD大鼠128只,体重230～250 g,随机分为4组(n=32):假手术组(S组)、缺血再灌注组(IR组)、羧甲基纤维素钠组(CMC组)和齐墩果酸预处理组(OA组).OA组胃内灌注齐墩果酸混悬液100 mg/kg,CMC组以相同容积的0.5%羧甲基纤维素钠溶液、S组与IR组以相同容积的饮用水替代,每天1次,连续7 d,第8天时IR组、CMC组和OA组采用阻断门静脉及肝动脉分支60 min后再灌注的方法制备肝脏缺血再灌注模型,S组仅分离胆管及门静脉、肝动脉分支.于再灌注即刻、3、6和12 h时取下腔静脉血样,测定血清ALT活性;取左肝中叶组织,测定SOD活性、MDA和谷胱甘肽(GSH)含量和磷酸化磷脂酰肌醇-3激酶(p-PI3K)、蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶(Akt)、p-Akt、Bcl-2、Bax、p-Bad和Bad的表达水平,观察肝组织病理学结果.结果 与S组比较,IR组、CMC组和OA组再灌注期间血清ALT活性和肝组织MDA含量升高,肝组织SOD活性和GSH含量降低,p-PI3K、p-Akt、Bax、Bad、p-Bad表达上调,Bcl-2表达下调(P＜0.05);与IR组比较,OA组再灌注期间血清ALT活性和肝组织MDA含量降低,肝组织SOD活性和GSH含量升高,p-PIK、p-Akt、Bcl-2和p-Bad表达上调,Bad和Bax表达下调(P＜0.05),CMC组上述指标差异无统计学意义(P＞0.05);与CMC组比较,OA组再灌注期间血清ALT活性和肝组织MDA含量降低,肝组织SOD活性和GSH含量升高,p-PI3K、p-Akt、Bcl-2和p-Bad表达上调,Bad和Bax表达下调(P＜0.05).OA组肝组织病理学损伤较IR组减轻.结论 齐墩果酸预先给药可减轻大鼠肝脏缺血再灌注损伤,其机制可能与激活PI3K/Akt信号通路,抑制细胞凋亡有关.     

异氟醚对大鼠肺缺血再灌注损伤的保护作用

目的 探讨异氟醚对大鼠肺缺血再灌注损伤的保护作用。方法 120只SD雄性大鼠，随机分成4组（n=30）：假手术组（S组）、缺血再灌注组（IR组）、异氟醚-缺血再灌注组（ISO-IR组）和异氟醚组（ISO-S组）。IR组、ISO-IR组建立肺缺血再灌注模型，ISO-IR组吸入1MAC异氟醚30min时行肺缺血再灌注，ISO-S组吸入1MAC异氟醚，不进行肺缺血再灌注。分别在缺血45min、再灌注30、60、120min处死6只大鼠，测定肺组织湿干比（W／D）、髓过氧化物酶（MPO）活性、中性粒细胞（PMN）膜表面CD18和肺组织ICAM-1mRNA表达、支气管肺泡灌洗液（BALF）中自细胞计数、沉渣白细胞分类和总蛋白（TP）浓度，并进行肺组织病理学检查。结果 再灌注期间IR组肺组织W／D、MPO活性、CDl8和ICAM-1mRNA表达、BALF中PMN百分比、TP浓度及PMN膜表面CD18表达均升高。而异氟醚预先给药减弱了缺血再灌注诱导的上述指标的升高。肺组织病理学检查显示异氟醚预先给药减轻了肺缺血再灌注损伤。结论 通过抑制PMN浸润和肺组织ICAM-1mRNA及CD18表达上调，缺血前吸入异氟醚对肺缺血再灌注损伤有一定的保护作用。     

阿霉素预处理对大鼠供肝热缺血再灌注损伤的保护作用

目的探讨阿霉素预处理对无心跳大鼠供肝热缺血再灌注损伤的保护作用。方法根据阿霉素预处理与否及供肝获取前经历的供体心脏停搏时间30min或45min，将实验动物分为4组，即非预处理的30min（N-30）组和45min（N-45）组，阿霉素预处理的30min（tN-30）组和45min（tN-45）组行原位肝移植，观察存活状况，取材行光学显微镜及电子显微镜检查，移植术后1、3、7d采集血样检测肝功能。结果N-30组和N-45组的1周存活率分别为50．0％和16．7％，而tN-30组和tN-45组的1周存活率分别为83．3％和66．7％，预处理组移植肝脏的病理及肝功能明显好于非预处理组。结论阿霉素预处理能够减轻供肝的热缺血再灌注损伤。改善肝功能，减轻病理损害，提高大鼠肝移植的存活率。     

七氟醚对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的评价七氟醚对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用及其机制。方法雄性SD大鼠24只，随机分为假手术组、损伤组、七氟醚组，每组8只。采用大脑中动脉线栓法阻断前脑血供3h、再灌注24h制备大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型。七氟醚组于再灌注前30min经面罩吸入七氟醚（呼气末浓度维持1．0MAC，持续30min）。再灌注24h时用Zea Longa评分法进行神经功能缺陷评分，并测定体重。再灌注24h时用原位末端脱氧核苷酸转移酶标记法测定纹状体神经细胞凋亡，计算神经细胞凋亡密度，并用免疫组织化学法测定纹状体PKCγ蛋白的表达。结果与缺血前比较，再灌注24h时损伤组体重减轻（P〈0．01）；与假手术组比较，再灌注24h时损伤组和七氟醚组神经功能缺陷评分及神经细胞凋亡密度增加，七氟醚组纹状体PKCγ表达降低；与损伤组比较，七氟醚组神经功能缺陷评分、纹状体神经细胞凋亡密度降低，PKCγ表达增加（P〈0．05或0．01）。结论吸入1．0MAC七氟醚对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤产生保护作用，其机制与上调纹状体PKCγ蛋白表达有关。