Xpert MTB/RIF试验检测结核分枝杆菌及其耐药性研究

目的 探讨利福平耐药实时荧光定量核酸扩增技术(Xpert MTB/RIF)在检测结核分枝杆菌(M.tubercutosis,MTB)及其利福平耐药性方面的应用价值.方法 收集151例疑似结核患者标本,分别进行液体变色培养基培养、涂片镜检、传统比例法药敏试验以及Xpert MTB/RIF试验检测,分析Xpert MTB/RIF试验检测MTB及其耐药性的敏感度和特异度.结果 以液体变色培养基培养试验作为金标准,Xpert MTB/RIF试验检测MTB的敏感度和特异度分别为75.8％(25/33)和79.7％(94/118),两者一致性好(K=0.472).以传统比例法药敏试验为金标准,Xpert MTB/RIF试验检测利福平耐药的敏感度和特异度分别为80.0％(4/5)和89.3％(25/28),两者一致性好(K=o.595).结论 Xpert MTB/RIF试验检测MTB及其耐药性具有较高的灵敏度和特异度.     

荧光定量聚合酶链反应检测脑脊液中结核分枝杆菌DNA对鉴别诊断结核性脑膜炎的应用价值分析

目的 探究荧光定量聚合酶链反应（polymerase chain reaction,PCR）检测脑脊液中结核分枝杆菌（mycobacterium tuberculosis,MTB）DNA对鉴别诊断结核性脑膜炎（tuberculous meningitis,TBM）的应用价值。方法 选择2019年7月—2021年6月于安陆市普爱医院就诊的存在脑膜刺激征的80例患者作为研究对象,所有患者均经MTB培养后明确诊断,将确诊为TBM的37例患者分入脑膜炎组,疑似TBM的18例患者分入疑似组,非TBM的25例患者分入非TBM组,对3组患者行腰椎穿刺,留取5 m L脑脊液及时送检,分别行MTB培养法、抗酸染色涂片法、荧光定量PCR检测。对比3种检测方法在MTB中的阳性检出率,对比脑膜炎组与疑似组患者MTB的DNA检测数值。结果 脑膜炎组应用荧光定量PCR检测MTB的阳性检出率高于疑似组,差异有统计学意义（P<0.05）;脑膜炎组与疑似组采用MTB培养法、抗酸染色涂片法的MTB阳性检出率比较,差异无统计学意义（P>0.05）。脑膜炎组患者MTB的DNA检测数值为（4.71±0.97）,疑似...     

实时荧光核酸恒温扩增检测技术对痰标本中结核分枝杆菌的诊断价值*

目的 评估实时荧光核酸恒温扩增检测（SAT）技术对痰标本中结核分枝杆菌（MTB）的诊断价值。方法 收集确诊为活动性肺结核（PTB）的115例和无证据显示为活动性PTB的67例总计182例患者的痰液标本,采用集菌涂片法、罗氏培养法、PCR荧光探针法及Xpert MTB/RIF法及SAT法进行检测,分析对比检测结果。结果 SAT法检测PTB患者MTB的检出率为40.00%,与罗氏培养法的检出率（40.87%）比较,差异无统计学意义（P?>0.05）。以罗氏培养法为标准,SAT法敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值、约登指数分别为95.74%（95% CI：0.8975,0.10174）,98.53%（95% CI：95.59%,101.46%）,0.9783（95% CI：0.9345,0.1022）,0.9710（95% CI：0.9304,0.1012）和0.94。其中阳性预测值高于Xpert MTB/RIF法,各指标均优于PCR荧光探针法。ROC曲线结果显示SAT法AUC为0.936。结论 SAT法检测MTB敏感性、特异性和准确度较高,操作简单,检测周期短,其检测结果可以作为临床诊断参考。     

荧光定量核酸扩增系统在肺结核及利福平耐药性检测中的应用价值分析

目的 ：探究荧光定量核酸扩增（Gene Xpert MTB/RIF）系统在肺结核及利福平耐药性检测中的应用价值。方法：选取2021年2月～12月本院收治的102例结核分枝杆菌感染的患者为观察组,对照组选取健康体检者50例。所有受试者接受Gene Xpert MTB/RIF系统分析、痰液酸性罗氏培养、痰液抗酸染色镜检。统计上述检测方法对核酸分枝杆菌的检出率,并分析Gene Xpert MTB/RIF系统在利福平耐药检测中的应用价值。结果：在观察组102例结核分枝杆菌感染患者中,Gene Xpert MTB/RIF系统全部检测出阳性,其中高级、中级、低级以及极低级结核分枝杆菌感染者分别为12例、30例、32例以及4例;总检出率同病原菌酸性罗氏培养检出的相符率为76.47%,同抗酸染色镜检出的相符率为57.84%。Gene Xpert MTB/RIF系统检测出利福平耐药16例,比例法药敏试验检测出利福平耐药19例,差异无统计学意义（P>0.05）。结论：Gene Xpert MTB/RIF系统对结核分枝杆菌的检测具有良好的准确率,能够有效提高检测效率,同时对利福平耐药基因的表达有一定的...     

结核分枝杆菌/利福平耐药基因联合结核感染T细胞斑点检测在耐药结核性胸膜炎中的应用价值

目的 探讨结核分枝杆菌/利福平耐药基因检测(Xpert MTB/RIF)联合结核感染T细胞斑点检测(T-SPOT.TB)对耐药性结核性胸膜炎诊断及治疗的价值.方法 选取2014年1月至2019年12月河北省胸科医院收治的62例结核性胸膜炎患者为结核性胸膜炎组,选择同期来河北省胸科医院院救治的非结核性胸膜炎患者60例为对...     

实时荧光定量聚合酶链反应检测结核分枝杆菌在结核性脑膜炎诊断中的价值

目的探讨实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)法检测结核分枝杆菌在结核性脑膜炎诊断中的价值。方法对181例临床确诊的结核性脑膜炎患者、可疑结核性脑膜炎患者和非结核性脑膜炎患者的脑脊液标本采用涂片、实时荧光定量PCR 2种方法进行检测,对其结果进行对比分析。结果 181例脑脊液标本中,脑脊液涂片检测阳性率为2.21%(4/181),PCR检测阳性率为12.15%(22/181);脑脊液涂片、PCR法检测51例临床确诊的结核性脑膜炎患者脑脊液标本阳性率分别为5.88%(3/51)和25.49%(13/51);检测80例临床可疑结核性脑膜炎患者脑脊液标本阳性率分别为1.25%(1/80)和11.25%(9/80),2种方法的阳性检测率比较差异有统计学意义(χ2=10.654,P<0.05)。50例非结核性脑膜炎患者脑脊液标本涂片及PCR检测均为阴性。结论实时荧光定量PCR法检测结核分枝杆菌具有较高的临床价值,可作为临床结核病检测诊断的有效方法之一。     

Hain和Xpert MTB/RIF技术对结核分枝杆菌药物敏感性的检测

目的应用线性探针耐多药检测技术(Hain)和利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测技术(Xpert MTB/RIF)分析辽宁地区耐多药结核分枝杆菌(multiple-drug resistant Mycobacterium tuberculosis,MDR-TB)的检出情况,为本地区结核病的控制及临床诊断治疗提供科学依据。方法收集193株结核分枝杆菌菌株应用Hain、Xpert MTB/RIF和比例法鉴定利福平(rifampin,RFP)和异烟肼(isoniazid,INH)的耐药性;以比例法为金标准,分析另外两种方法检测耐药结核分枝杆菌的敏感性和特异性。结果 Hain检测利福平耐药的灵敏度为81.8%(72/88),特异度为87.6%(92/105);Hain检测异烟肼耐药的灵敏度为81.2%(82/101),特异度为70.7%(65/92);Hain检测MDR-TB的灵敏度为76.7%(46/60),特异度为81.2%(108/133);Xpert MTB/RIF检测利福平耐药的灵敏度为90.9%(80/88),特异度为81.9%(86/105)。Hain、Xpert MTB/RIF两种检测方法与比例法相比差异均无统计学意义(P0.05)。结论 Hain和Xpert MTB/RIF是快速有效地检测结核分枝杆菌耐药的方法,适用于辽宁地区结核病患者耐药性检测。     

GeneXpert MTB/RIF对结核性胸膜炎的诊断价值

目的 评价GeneXpert MTB/RIF(Xpert)检测对结核性胸膜炎早期诊断价值.方法 选取133例胸腔积液患者,依据临床诊断分为结核性胸膜炎组62例、恶性胸腔积液组28 例、类肺炎性胸腔积液组20例及漏出性胸腔积液组23例.对各组胸腔积液行抗酸染色涂片、结核分支杆菌罗氏培养、结核抗体、腺苷脱氨酶(ADA)及X...     

核酸飞行时间质谱技术对结核与非结核分枝杆菌的菌种鉴定及耐药检测的应用

目的 ：应用核酸飞行时间质谱技术（简称“核酸质谱”）对结核分枝杆菌（TB）与非结核分枝杆菌（NTM的菌种鉴定及耐药检测的临床价值。方法 ：前瞻性纳入2020年3月—2022年5月我院收治的胸部感染性疾病（排除病毒和真菌感染）患者共199例,提取痰液或者支气管肺泡灌洗液分别进行抗酸染色、菌落培养和药物试验以及核酸质谱分析,比较诊断性能。结果 ：根据临床症状、影像学表现、菌落培养以及PCR结果进行综合判断,最终确诊TB阳性113例,NTM阳性51例和TB、NTM均阴性35例。核酸质谱共检出TB阳性130例,NTM阳性59例和均阴性10例。核酸质谱检出TB阳性准确率为88.4%[(110+66)/199],敏感度为97.3%(110/113),特异度为76.7%(66/86),阳性预测值为84.6%(110/130),阴性预测值为95.7%(66/69)。检出NTM阳性准确率为92.0%[(47+136)/199],敏感度为92.2%(47/51),特异度为91.9%(136/148),阳性预测值为79.7%(47/59),阴性预测值为97.1%(136/140)。与其他两种检测方法相比,核...     

IL-27联合ADA、GeneXpert MTB/RIF在结核性胸膜炎诊断中的应用价值

目的 IL-27联合ADA、利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测技术（GeneXpert MTB/RIF）检测在结核性胸膜炎（TBP）诊断中的应用观察。方法 研究对象为2020年1月—2022年3月在该院就诊的疑似TBP患者123例，最终确诊为TBP的患者81例为观察组，非TBP患者42例为对照组。检测二组胸腔积液中白介素-27(IL-27)、腺苷脱氨酶（ADA）水平，绘制受试者工作特征（ROC）曲线分析其对TBP的诊断效能；并分析胸腔积液中IL-27、ADA联合GeneXpert MTB/RIF检测对TBP的诊断效能。结果 观察组IL-27、ADA水平均高于对照组（P<0.05）；胸水积液中IL-27诊断TBP的AUC为0.788，临界值161.45ng/L，敏感度、特异度分别为59.26%、92.86%；胸水积液中ADA水平诊断TBP的AUC为0.991，临界值40.72U/L，敏感度、特异度分别为95.06%、95.24%;GeneXpertMTB/RIF检测诊断TBP的灵敏度为81.48%、特异度为95.24%、准确率为86.18%、阳性预测值为97.06%、阴性预测值为7...     

纤维支气管镜灌洗液Xpert MTB/RIF检测对肺结核诊断和利福平耐药菌株筛选的临床价值

目的探讨利福平耐药实时荧光定量核酸扩增(Xpert MTB/RIF)技术对肺结核诊断和利福平耐药菌株筛选的价值。方法选取2014年4月至2015年4月武汉市结核病防治所收治的疑诊为肺结核的患者193例,进行纤维支气管镜(纤支镜)灌洗液抗酸涂片、结核培养以及Xpert MTB/RIF检测,对结果进行分析,以罗氏比例法药物敏感试验作为金标准对RIF耐药情况进行分析。结果193例疑诊肺结核患者中153例确诊和临床诊断为肺结核,其中结核培养阳性61例,结核培养阴性92例,余40例为非结核肺部疾病患者。纤支镜灌洗液抗酸涂片、结核培养和Xpert MTB/RIF检测结核分枝杆菌(MTB)诊断肺结核的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值及准确度分别为20.3%、39.9%、62.1%;90.0%、95.0%、100.0%;88.6%、96.8%、100.0%;22.8%、29.2%、40.8%;34.7%、51.3%、69.9%。三种检测方法的受试者工作特征曲线曲线下面积分别为0.551、0.674、0.810,显示Xpert MTB/RIF检验诊断效能最大,与结核培养和抗酸涂片比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。92份结核培养阴性标本经Xpert MTB/RIF方法检出MTB 35份,其中循环阈值为中等含量者7份,低含量16份,极低含量12份。Xpert MTB/RIF检测RIF耐药的灵敏度为100.0%(14/14),特异度为93.6%(44/47)。结论 Xpert MTB/RIF技术对结核辅助诊断的临床价值优于抗酸涂片和结核培养,在结核分枝杆菌及其对利福平耐药快速检测方面有良好的应用前景。     

GeneXpert MTB/RIF检测结核性脑膜炎患者脑脊液标本的临床应用价值

目的 探讨GeneXpert MTB/RIF（以下简称“GeneXpert”）检测结核性脑膜炎患者的脑脊液应用价值。方法 选取2014 年12 月至2019 年12 月在沈阳市第十人民医院住院治疗的初诊为结核性脑膜炎患者120 例作为研究对象,收集患者的脑脊液标本,进行脑脊液抗酸杆菌涂片检测、脑脊液结核分枝杆菌960 培养及脑脊液GeneXpert 检测,分析GeneXpert 的检测效能。结果 脑脊液抗酸杆菌检测阳性9 例,阴性111 例;脑脊液结核分枝杆菌960 培养阳性40 例,阴性80 例;脑脊液GeneXpert 检测阳性39 例,阴性81 例。以脑脊液涂片为标准,GeneXpert检测的灵敏度及特异度分别为100.00%和72.97%;以脑脊液960 培养为标准,GeneXpert 检测的灵敏度及特异度分别为97.50%和100.00%;以临床诊断为标准,GeneXpert 检测的灵敏度及特异度分别为95.12%和100.00%。结论 脑脊液GeneXpert 检测灵敏度和特异度较高、检测时间短,有利于临床早期诊断结核性脑膜炎。     

荧光定量PCR在结核分枝杆菌耐药性检测中的应用价值

目的 探究和分析荧光定量PCR检测技术在结核分枝杆菌耐药性检测方面的价值。方法 随机选取苏州市第五人民医院门诊或者住院病人的痰培养阳性标本菌株,并提取核酸。应用荧光定量PCR扩增试剂盒对菌株标本的链霉素、利福平、异烟肼、乙胺丁醇、阿米卡星以及莫西沙星的耐药情况进行检测分析,并将检测结果与传统的罗氏药敏比例法进行比对分析。结果 与罗氏药敏比例法相比较,荧光定量PCR检测法对链霉素、利福平、异烟肼、乙胺丁醇、阿米卡星以及莫西沙星的耐药检测符合率分别为90.48%、82.14%、83.33%、88.09%、89.29%、89.28%。Kappa检验结果显示,两种方法对链霉素的检测结果一致性较高,Kappa值为0.815;对利福平、异烟肼、乙胺丁醇、莫西沙星的检测结果一致性一般,Kappa值分别为0.637、0.631、0.623、0.578;对阿米卡星的检测结果一致性较差,Kappa值为0.279。结论 荧光定量PCR检测技术对于结核分枝杆菌耐药性的快速检测均有很好的应用价值,对于临床上的精准用药具有一定的指导意义。     

结核分枝杆菌利福平耐药突变基因检测与BD960药敏的对比

目的 分析对比结核分枝杆菌利福平PCR-反向点杂交法耐药基因突变位点检测和BACTEC MGIT960 System表型药敏结果的相关性。方法 同时对220例住院患者的痰或肺泡灌洗液 (BALF) 用PCR-反向点杂交法检测利福平耐药基因突变位点与BACTEC MGIT 960 System检测利福平表型药敏结果进行对比分析。结果 2种方法检测利福平药敏结果符合205例, 特异度93% (205/220) ;2种方法检测利福平都敏感的有172例;基因耐药, 表型耐药的有33例, 其中有3例检出rpo B基因H526位点突变, 突变率9%;基因耐药, 表型敏感的有15例, 其中有11例均检出rpo B基因H526位点突变, 突变率73%。结论 PCR-反向点杂交法检测具有快速高效、特异度高等特点, 对临床诊断、治疗有指导意义。     

基因芯片技术在结核分枝杆菌对利福平敏感性检测中的临床价值

目的 探讨基因芯片技术在结核分枝杆菌(MTB)对利福平敏感性检测中的临床价值.方法 同时采用罗氏固体培养法及基因芯片技术对2015年7月至2016年2月就诊于常州市第三人民医院的76例疑似耐多药结核涂阳患者的痰标本进行MTB对利福平的敏感性检测,以罗氏固体培养法为金标准,对基因芯片技术的检测效果进行评价.结果 76例标本中,经罗氏固体培养法常规培养及药敏试验初步鉴别,12例为非结核分枝杆菌,MTB标本共64例;经基因芯片技术检测,其中野生型54例,突变株10例,突变率为15.63%(10/64),突变株中rpoB526突变5例、rpoB531突变2例、rpoB511突变、rpoB516突变及rpoB511、rpoB516两者联合突变各1例.以罗氏固体培养法的药敏结果为金标准,基因芯片法药敏检测的准确率为98.44%,敏感度为98.18%,特异度为100.00%,阳性预测值为100.00%,阴性预测值为90.00%.结论 采用基因芯片技术检测MTB对利福平的敏感性具有快速、灵敏、准确的特点.     

非结核分枝杆菌荧光定量PCR检测和分子流行病学研究

目的探讨非结核分枝杆菌(NTM)荧光定量PCR检测技术及我院NTM分子流行病学现状,以便更好地检测和防治非结核分枝杆菌在医院内的感染。方法用常规确诊的方法收集来自我院环境和临床住院病人的标本,并分离菌株,然后用荧光定量PCR检测技术鉴定菌株,并对菌株进行基因测序。结果86株非结核分枝杆菌荧光定量PCR检测结果与细菌培养鉴定及涂片检查所得结果完全符合,44株来自临床住院病人的NTM中有37株与42株来自环境分离株其中的7株基因测序高度相符。结论应用荧光定量PCR方法对非结核分枝杆菌进行鉴定,结果快速、准确、可靠,为临床非结核分枝杆菌病的快速诊断提供了有效的手段,对菌株进行基因测序可确定其克隆同源性,为分子流行病学研究提供可靠数据,具有很好的临床应用价值。     

Xpert MTB/RIF 联合T-SPOT.TB 对结核性胸膜炎及其耐药性的临床研究

目的 探讨利福平耐药实时荧光定量核酸扩增技术（Xpert MTB/RIF）、结核感染T 细胞斑点检 测（T-SPOT.TB）胸腔积液对结核性胸膜炎及其耐药性的临床价值。方法 选取2012 年6 月-2016 年10 月于天津市海河医院就诊的确诊结核性胸膜炎患者101 例;同期选取院内其他疾病合并胸腔积液的患者79 例, 分别留取胸腔积液标本进行Xpert MTB/RIF 和T-SPOT.TB 检测,同时完成胸腔积液BACTE C MG1T960 液体培养以及药物敏感性等相关性检查,分别与临床诊断和BACTEC MG1T960 液体培养作为参考标准进行 评价。结果 结核性胸膜炎组Xpert MTB/RIF 和T-SPOT.TB 的敏感性分别为82.18% 和88.12%,两组比较, 差异有统计学意义（P <0.05）,特异性分别为96.10% 和98.73%,差异无统计学意义（P >0.05）;Xpert MTB/ RIF 和T-SPOT.TB 与BACTEC MU1T960 液体培养的Kappa 值分别为0.277 和0.668 ;Xpert MTB/RIF 在诊 断利福平耐药率与BACTEC MU1T960 液体培养Kappa 值为0.786。结论 T-SPOT.TB 的敏感性结合Xpert MTB/RIF 的特异性不但缩短了诊断时间而且提高了胸膜炎诊断的准确性,减少误诊率,为结核性胸膜炎的早 期诊断提供了有利的帮助,Xpert MTB/RIF 能对利福平的耐药性做出快速的判断。     

Gene Xpert MTB/RIF检测在结核性胸膜炎诊断及利福平耐药检测中的应用价值

目的探讨Gene Xpert MTB/RIF检测(简称Xpert检测)在结核性胸膜炎诊断及利福平耐药检测中的应用价值。方法回顾性分析2016年7月1日至2018年7月31日在西安市胸科医院外科就诊的86例初步诊断为结核性胸膜炎患者和同期34例诊断为非结核胸膜炎患者的胸腔积液标本,分别行抗酸染色、BACTEC MGIT 960液体快速培养、荧光定量PCR和Xpert检测,对比4种方法检测结核分枝杆菌的敏感度、特异度、符合率等指标。对不同方法获取的胸腔积液标本行Xpert检测,评估不同获取标本方法对Xpert检测结核分枝杆菌效能的影响。以BACTEC MGIT 960液体快速培养药敏试验结果为金标准,分析Xpert检测利福平耐药的效能。结果结核性胸腔积液Xpert检测阳性率较其他三种检测方法阳性率高,差异有显著统计学意义(P<0.01);胸腔积液Xpert检测的敏感度、特异度、符合率、阳性预测值及阴性预测值分别为65.1%、100.0%、75.0%、100.0%、53.1%,相对于其他3种方法,Xpert检测符合率、敏感度最高,与抗酸染色和BACTECMGIT960液体快速培养比较差...