WT1、NKD1基因在急性髓系白血病中的表达及其与预后的关系

目的 探讨Wilms(WT1)基因、裸角质膜同源蛋白(NKD1)基因在急性髓系白血病中的表达及其与预后的关系.方法 将2018年2月至2019年6月该院收治的100例急性髓系白血病患者纳入研究作为观察组,选取同期于该院治疗的造血系统非恶性肿瘤(缺铁性贫血)患者100例作为对照组.纳入研究者均进行WT1、NKD1基因检测...     

急性髓系白血病中HtrA2和WT1基因的表达

本研究通过检测HtrA2和WT1基因在急性髓系白血病(AML)患者骨髓单个核细胞及细胞系中的表达,探讨其表达水平与临床变量的关系及二者之间的相关性。应用RQ-PCR方法检测104例初诊AML患者的HtrA2和WT1基因表达水平;比较其表达量与正常对照的差别,并分析与年龄、性别、白细胞计数、诊断分型、预后分型及治疗疗效的关系;比较治疗前后表达量的变化,分析HtrA2与WT1二者相关性。结果表明:AML患者骨髓细胞中HtrA2表达量显著低于正常对照组(P<0.01),而WT1则显著高于正常对照组(P<0.01);二者表达量与患者年龄、性别、白细胞计数无关;HtrA2在不同的NCCN预后分组中表达量无显著差异,而WT1在预后良好组表达量明显低于预后中等组(P=0.003);无论完全缓解(CR)组还是非完全缓解(non-CR)组HtrA2表达量在治疗后均显著高于治疗前(P<0.05),而WT1表达量只有在CR组治疗后才低于治疗前(P<0.01),non-CR组治疗后虽然也低于治疗前,但差异无统计学意义;HtrA2与WT1的表达水平呈弱负相关(r=-0.249,P=0.011)。结论:HtrA2和WT1表达与白血病的发生、发展密切相关,二者表达水平呈负相关,上调HtrA2基因的表达和干扰WT1基因的表达有望成为白血病治疗的靶点。     

定量检测WT1基因表达水平在急性髓系白血病微量残留病监测中的意义

目的评价定量检测WT1基因表达水平在监测急性髓系白血病（AML）微量残留病（MRD）中的意义．方法采用实时定量RT-PCR（RQ-PCR）技术分别测定了15名正常人骨髓及72例AML患者治疗前后123份骨髓标本WT1基冈mRNA表达水平，同时对62份患者标本定量检测了AML1-ETO融合基因mRNA表达水平，对跟踪观察的8例患者50份标本同时监测了WT1及AML1-ETO基因mRNA水平变化。WT1及AML1-ETO基因表达水平用内参照基因ABL归一化。结果WT1、AML1-ETO及ABLRQ-PCR的标准曲线相关系数均〉0．99，日内差及日间差均〈4％。正常骨髓WT1mRNA中位水平为0．008（0．001～0．019）。67例初治AML患者中61例（91．0％）WT1mRNA表达高于正常水平，其中37例（55．2％）高于正常100倍以上。各型AML中M4EO及M3患者WT1mRNA水平最高，明显高于其他亚型，M1及M5型最低。WT1与AML1-ETOmRNA水平明显正相关（r=0．88，P〈0．001），4例血液学持续缓解患者中3例WT1mRNA水平始终在正常范同内波动。4例发生血液学复发的患者中3例复发前1个月WT1mRNA的水平分别超出正常上限的31.4，11.4及4.0倍。结论RQ-PCR定量检测WT1mRNA水平可用于监测大多数AML患者MRD，但是敏感度不如AML1-ETO融合基因，WT1mRNA水平持续增高或明显异常预示复发。     

儿童急性髓细胞性白血病中SOX4表达水平及其临床意义研究

目的 研究儿童急性髓细胞性白血病(AML)中性别决定相关的高迁移率基因群4(SOX4)表达水平及其的临床意义。方法 前瞻性选择2014年4月至2017年12月期间在河北北方学院附属第一医院首次诊断为AML的45例患儿作为AML组,同期接受骨髓穿刺活检并证实为正常骨髓、一般资料与AML患儿匹配的20例儿童作为对照组。检测AML组和对照组骨髓组织中SOX4的表达;分析AML组中不同临床病理特征患儿骨髓中SOX4表达水平的表达。根据AML组中SOX4表达分为SOX4阳性组和SOX4阴性组,比较两组患儿增殖、侵袭基因[细胞周期蛋白D(Cyclin D1)、p21、基质金属蛋白酶-9(MMP9)、神经性钙粘附蛋白(N-cadherin)、上皮性钙粘附蛋白(E-cadherin)]表达水平;随访AML患儿的生存情况。结果 AML组骨髓中SOX4的阳性表达率及mRNA表达水平均明显高于对照组(P <0. 05),且AML组外周血白细胞计数≥100×109/L患儿骨髓中SOX4的阳性表达率明显高于外周血白细胞计数<100×109/L患儿(P <0. 05);AML组中SOX4阳性表达患儿骨髓中cyclin D1、MMP9、N-cadherin的mRNA表达水平明显高于SOX4阴性表达患儿,p21、E-cadherin的mRNA表达水平明显低于SOX4阴性表达患儿,总生存时间短于SOX4阴性表达患儿(P <0. 05)。结论 儿童AML骨髓中SOX4高表达与增殖侵袭基因表达的变化、生存时间的缩短有关。     

P-糖蛋白与乳腺癌耐药蛋白基因在急性髓系白血病中表达的意义

目的:探讨多药耐药蛋白(P-gp)和乳腺癌耐药蛋白(BCRP)基因在急性髓系白血病(AML)中的表达以及它们的相关性。方法:本研究应用半定量逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)的方法,以β-actin作为内对照,检测41例AML患者及20例非恶性血液病对照组的骨髓白细胞的BCRP mRNA表达;应用流式细胞仪(FCM)采用直接免疫荧光标记法对41例AML患者及20例正常对照的骨髓单个核细胞(BMMNC)进行P-gp检测。结果:(1)AML中P-gp总阳性率与正常对照组无显著性差异(P>0.05);BCRP基因总阳性率明显高于正常对照组(P<0.05)。(2)AML中P-gp难治/复发组阳性率明显高于初治组(P<0.05);AML中BCRP基因难治/复发组阳性率与初治组无显著差异(P>0.05)。(3)P-gp 组完全缓解(CR)率和BCRP 组CR率明显低于P-gp-组和BCRP-组(P<0.05)。P-gp 组和BCRP 组早期复发率明显高于P-gp-组和BCRP-组(P<0.05)。(4)P-gp /BCRP 组CR率明显低于P-gp-/BCRP-组(P<0.01);P-gp /BCRP 组早期复发率明显高于P-gp-/BCRP-组(P<0.05)。(5)P-gp和BCRP基因在初治组和难治/复发组表达不相关(P>0.05)。结论:(1)P-gp和BCRP基因均与临床耐药密切相关。(2)P-gp和BCRP基因高表达均提示预后不良。联合检测P-gp和BCRP基因对评价AML的预后有较大意义。(3)P-gp和BCRP基因表达无相关性。     

急性髓系白血病中乳腺癌多药耐药蛋白基因的研究进展

乳腺癌耐药蛋白(BCRP)是新近发现的一种肿瘤耐药相关蛋白,与P-gp和多药耐药相关蛋白(MRP)同属ABC转运蛋白超家族。本文对BCRP的发现、组织表达、结构特点、急性髓系白血病中多药耐药BCRP基因的表达及应用等方面的研究进展进行综述。     

初治急性髓系白血病患者MDR1和BAALC基因的表达情况及其与预后的关系分析

目的分析初治急性髓系白血病(AML)患者多药耐药蛋白1(MDR1)和脑和急性白血病胞质(BAALC)基因的表达情况及其与预后的关系。方法选取100例成人初治AML患者为研究对象,均接受蒽环类药物诱导化疗联合阿糖胞苷等治疗,检测MDR1和BAALC基因表达水平,分析其表达水平与AML患者临床特征、遗传学分型、治疗疗效及预后的关系。结果MDR1基因和BAALC基因高、低表达患者白细胞、血红蛋白、血小板等临床特征比较差异不显著(P0.05)。不同染色体危险度分层患者MDR1基因表达水平比较有显著差异(P0.05),BAALC基因表达水平比较无统计学意义(P0.05)。经化疗干预后,MDR1基因高表达患者CR率60.78%显著低于MDR1基因低表达87.76%(P0.05),BAALC基因高表达患者CR率67.31%略低于MDR1基因低表达81.25%,但差异无统计学意义(P0.05)。MDR1基因高、低表达患者中位OS及OS率对比,差异有统计学意义(P0.05);BAALC基因高、低表达患者中位OS及OS率对比,差异无统计学意义(P0.05)。结论与BAALC基因表达相比,初治AML患者中,MDR1基因表达对评估治疗疗效及预后的价值更高,临床可联合MDR1和BAALC基因检测以提高初治AML患者的预测准确性。     

髓系细胞生长因子在急性髓系白血病治疗中的作用

应用髓系细胞生长因子治疗急性髓系白血病(AML)目前在临床上仍有争议。本文总结近年来有关文献,认为该类药物在AML治疗中除纠正粒细胞减少外,尚有抗真菌作用、诱导AML细胞成熟、增强化疗药物的作用等有益用途。如何应用最佳,尚需进一步研究。     

急性髓系白血病中RAGE-1基因的表达

摘要本研究通过检测RAGE-1基因在急性髓系白血病（AML）患者骨髓单个核细胞（BMMNC）中的表达,探讨其表达水平与临床变量的相关性。应用RQ-PCR方法检测94例初诊AML患者BMMNC中RAGE-1基因表达水平,分析其与患者年龄、性别、血象、诊断分型和预后的关系,并比较治疗前后RAGE-1表达量的变化。结果表明：26例（28％）AML患者存在着RAGE-1转录本的过表达（1．34-16．34,中位3．07）;RAGE-1过表达阳性组与阴性组在性别、年龄、血象和FAB亚型之间均无显著性差异;不同核型预后分组之间RAGE-1过表达频率无显著性差异,且不同类型核型AML患者中RAGE-1转录本过表达频率也无差异。治疗后获得完全缓解的患者RAGE-1表达水平较治疗前明显降低。RAGE-1过表达组与阴性组患者的总体生存时间并无显著性差异。结论：RAGE-1基因过表达是AML中的一个常见分子事件,但对患者预后并无明显影响。     

急性髓系白血病ID4基因甲基化研究

本研究旨在探讨急性髓系白血病(AML)患者中ID4基因甲基化状态。采用甲基化特异性聚合酶链反应(M S-PCR)对46例不同亚型、不同病期的AML患者骨髓细胞进行ID4基因启动子区甲基化状况检测,并以10例缺铁性贫血患者骨髓作为对照。结果表明,ID4基因在对照组患者骨髓中呈完全性非甲基化状态,在46例AML患者中有39例患者出现ID4基因甲基化(阳性率为84.8%),其中各AML亚型M1、M2、M3、M4、M5、M6患者ID4基因甲基化阳性率分别为4/4、9/12、8/8、7/9、9/11、2/2。初治,完全缓解的AML患者ID4基因甲基化阳性率分别为27/30、7/11,另有5例复发难治患者均检测出ID4基因甲基化,与对照组相比,差异均有统计学意义(p<0.01)。结论 :与对照组患者相比,AML不同亚型、不同病期患者ID4基因发生了不同程度的甲基化改变,这表明ID4基因甲基化可能是AML发生发展过程中的一个早期分子事件。     

c-MPL在急性髓系白血病患者白血病干细胞中的表达

本研究通过检测c-MPL在急性髓系白血病(AML)患者骨髓细胞中的表达,探讨c-MPL表达与CD34、CD38的相关性,以确定c-MPL在白血病干细胞的表达。通过流式细胞术检测29例初诊AML患者的c-MPL和CD34、CD38阳性细胞比例;比较患者c-MPL表达水平与正常对照的差别及与临床指标的关系;分析患者的c-MPL表达水平与CD34、CD38各部分细胞分群的关系及它们之间的相关性。结果表明:AML患者骨髓细胞中c-MPL表达水平显著高于正常对照组(P<0.05);c-MPL的表达与患者的年龄、性别、白细胞计数、AML1-ETO融合基因、化疗后缓解情况无关;c-MPL在M2和M5分型中的表达显著高于正常对照组(P<0.05)。CD34阳性AML患者组的c-MPL表达水平显著高于CD34阴性AML患者组(P<0.01)。AML患者c-MPL在CD34+细胞中的表达显著高于CD34-细胞(P<0.001);AML患者中c-MPL在CD34+CD38+和CD34+CD38-两群细胞中的表达无显著性差异(P>0.05);c-MPL和CD34的表达呈正相关(r=0.380,P=0.042)。结论:c-MPL在AML患者中高表达,且与CD34的表达水平具有一定的正相关性,c-MPL表达于白血病干细胞。     

急性髓细胞白血病患者多药耐药基因mdr1表达的研究

为了评估患预后，用ＲＴ－ＰＣＲ方法研究了２７例急性髓细胞白血病（ＡＭＬ）患骨髓细胞中ｍｄｒ１ｍＲＮＡ表达，同时用３例正常人白细胞、敏感Ｋ５６２和耐药Ｋ５６２／ＶＣＲ细胞系作对照。     

Survivin在急性髓系白血病患者中的表达

本研究通过检测Survivin在急性髓系白血病（AML）患者骨髓中的表达,探讨其表达水平与临床变量之间的关系及其与BCL-2、Bcl-xL和MCL-1之间的相关性.应用免疫组织化学染色技术检测63例初诊AML患者的Survivin表达水平,比较其表达量与正常对照者的差别,并分析其与年龄、性别、白细胞计数、诊断分型、预后分型以及治疗疗效等临床参数之间关系,特别是与AML1/ETO融合蛋白之间的联系;描绘患者的生存曲线;分析Survivin表达与BCL-2、Bcl-xL和MCL-1表达之间的相关性.结果表明：AML患者骨髓中Survivin的表达量显著高于对照组（P＜0.01）,其表达量与患者的年龄、性别、白细胞计数等无关;在不同NCCN预后分组中表达量无显著差异;伴AML1/ETO阳性以及FLT3-ITD突变的患者,其Survivin表达水平与其他类型患者无明显差异;Survivin阳性患者,其CR率低于阴性患者而复发率高于阴性患者,但无统计学差异;Survivin阳性患者的累积生存率低于阴性患者（P=0.04）;Survivin表达水平与MCL-1呈明显正相关（R=0.639,P=0.000）.结论：Survivin的表达与白血病发生、发展密切相关,有可能用作为预后分析的参考指标;Survivin与MCL-1可能相互作用或协同作用.     

骨髓DNA甲基转移酶基因在急性髓系白血病患者的表达及意义

本研究旨在探讨DNMT1基因在急性髓系白血病(AML)患者骨髓中的表达及其意义。应用实时定量PCR方法检测30名正常人和126例AML患者骨髓中DNMT1基因的表达。结果表明,30例正常人骨髓中检测到较低水平的DNMT1基因表达;DNMT1基因在AML患者骨髓中的表达水平增高,AML缓解后DNMT1基因的表达水平较初诊时明显降低;DNMT1基因表达水平与AML患者的年龄、性别及初诊白细胞数等临床特征无关;治疗后DN-MT1基因高表达组完全缓解率高于低表达组。结论:骨髓DNMT1基因表达水平在AML发病中可能起重要作用,可作为判断AML预后的指标之一。     

粒系集落刺激因子对急性髓系白血病原代细胞mdr1基因表达的调节作用

研究多药耐药基因(mdr 1)与急性髓系白血病(AML)细胞分化之间的关系。采用常规分离白血病细胞,体外培养7天,然后通过形态学、细胞化学、细胞功能(NBT)、细胞免疫化学(APAAP)和逆转录.聚合酶链反应(RT-PCR)及MTT技术观察了细胞分化和mdr1表达变化以及AML细胞对柔红霉素敏感性反应。结果表明,AML细胞分化成熟后mdr1表达水平下降,并且随mdr1水平下降,AML细胞对柔红霉素敏感性增加。结论提示,AML细胞分化与mdr1之间有密切的内在联系,利用分化诱导剂粒系集落刺激因子从基因水平逆转白血病耐药是一种行之有效的方法。     

抑制SIX1表达对急性髓系白血病耐药细胞HL-60/ADR的影响

目的：建立抑制同源盒基因1(SIX1)表达的HL-60细胞及耐阿霉素的HL-60细胞（HL-60/ADR）,研究抑制SIX1对HL-60及HL-60/ADR细胞耐药作用的影响。方法：用慢病毒感染HL-60及HL-60/ADR细胞,经嘌呤霉素筛选获得稳定抑制SIX1表达的细胞株。采用CCK-8法检测各组细胞的增殖能力,流式细胞凋亡试剂盒检测细胞凋亡情况,实时定量PCR检测耐药相关基因的表达水平。结果：成功构建了抑制SIX1表达的HL-60及HL-60/ADR稳定转染细胞株。与对照组相比较,抑制SIX1的表达使HL-60及HL-60/ADR细胞的增殖明显受抑制（P<0.05）,细胞的凋亡率显著增加（P<0.05）,并且抑制SIX1表达后细胞对阿霉素的敏感性升高。结论：抑制SIX1的表达可以提高细胞对阿霉素的敏感性,其逆转耐药性的作用可能与促进细胞凋亡基因的表达有关。     

ABC转运分子与急性髓系白血病耐药关系的研究进展

耐药是引起急性髓系白血病化疗失败的主要原因之一。ABC转运分子是一个转运蛋白超家族,它通过ATP依赖的药物排出泵介导耐药。急性髓系白血病细胞中,ABC转运分子的活性是固有的,其活性与化疗反应密切相关。     

急性髓系白血病NPM1基因突变研究

核仁磷酸蛋白（NPM1）又称B23、N038,是位于核仁颗粒区的一种在各种类型的细胞中广泛表达的多功能蛋白质。目前的多项研究发现,NPM1突变在急性髓系白血病（AML）中,尤其是在正常核型AML（nk-AML）中检出率最高的一种分子遗传学异常。NPM1突变是AML一类特殊的亚群,具有相对独特的临床特点,且是AML独立的预后良好的指标。NPM1突变的研究对AML患者诊断、治疗及预后判断具有重要的临床意义。本文综述近年来AML中NPMl基因突变的发现,包括NPM1基因结构与生理功能,AML中NPM1基因突变及NPM1基因突变检测方法等问题。     

儿童急性髓系白血病WT1基因的实时荧光定量RT-PCR检测及其临床意义

本研究建立实时荧光定量RT-PCR方法检测儿童急性髓系白血病WT1基因(AML)mRNA的表达并探讨其临床意义。采用SYBR G reen I实时荧光定量RT-PCR方法,检测30例初治AML患儿、12例缓解期患儿(30份)、18例复发患儿,30例细胞形态学正常人的骨髓标本中的WT1基因的表达水平,并动态检测20例初治患儿WT1基因的表达。以ABL为内参照,采用2-△△ct法计算其相对表达量。结果表明:①初治AML患儿WT1基因的表达高于正常对照组和缓解组(p<0.001);缓解AML患儿WT1基因的表达与正常对照组的差异无统计学意义(p>0.05);复发AML患儿WT1基因的表达与初治组的差异无统计学意义(p>0.05);②动态监测儿童AML20例显示,初治时W T1高表达,完全缓解后W T1表达水平下降,复发时W T1表达水平明显升高。20例中5例在临床复发前3-7个月表达水平开始上升。③动态检测的20例患儿初治时W T1阳性组和阴性组完全缓解率(CR)、3年总生存率(O S)无显著差异(p>0.05),治疗后第22-30天的W T1阳性组3年O S显著低于阴性组(p<0.05)。结论:SYBR G reen I实时荧光定量RT-PCR方法是一种快速有效,灵敏度高,特异性好的方法。WT1基因在儿童急性AML中表现为促癌基因的作用,WT1基因表达水平的变化有助于疗效评价,微小残留病的检测和预后判断。     

急性髓系白血病中eIF4E高表达与疾病进展相关

本研究检测未治疗、未缓解/复发及缓解期间急性髓系白血病(AML)和其他良性血液病患者骨髓细胞中eIF4E基因表达水平并分析其与疾病进展的关系。采用SYBR Green I荧光定量PCR和相对定量分析法检测30例AML患者(M2型6例,M3型5例,M4型8例,M5型10例,M6型1例),11例AML化疗后完全缓解患者和20例非肿瘤性血液病患者骨髓单个核细胞的eIF4E表达情况,以β2微球蛋白基因(β2M)作为内参,采用公式2-△Ct×100%计算eIF4E基因表达水平。结果表明:AML未治疗及未缓解/复发组患者骨髓细胞eIF4E表达水平(7.098±5.544)%明显高于非肿瘤患者(0.248±0.163)%(P<0.01)和化疗后完全缓解患者(0.964±0.312)%(P<0.01),各AML亚型之间不存在统计学差异,尽管M4、M5亚型的表达水平相对较高。非白血病患者与缓解患者比较,eIF4E表达水平不存在显著性差异。结论:eIF4E基因在急性髓系白血病细胞中出现高表达,并随着疾病的缓解而明显降低,因此eIF4E有可能作为监测白血病进展的一项参数。