大鼠创伤性深静脉血栓形成中Ca^2＋通道相关基因表达研究

分析Ca^2＋通道相关关键基因在大鼠创伤性肢体深静脉血栓形成中的表达变化，初步探讨该信号通路在此病理过程中的生物学意义。采用定量击打双侧大腿＋双后肢石膏固定的方式，对150只SD大鼠造模，建立创伤性深静脉血栓形成动物模型。应用Genechip Rat Genome 430 2．0芯片，检测创伽出果静脉血栓形成过程中8种不同生物学状态下（正常对照、创伤即刻、血栓形成初始期、高峰期血栓形成、高峰期血栓不形成、血栓消退、血栓不消退、血栓不形成）股静脉RNA表达情况，筛查出差异表达基因，并进行pathway分析。重点关注高峰期血栓形成与不形成两种生物学状态下，Ca^2＋通道相关关键基因表达变化。结果显示：高峰期血栓形成组与不形成组比较，Ca^2＋通道中CaMK、IP33K、CaN等多个关键基因表达均呈现下调，可能使包括内皮细胞在内的多种血管细胞，增殖、分化、代谢等功能受到抑制，并影响下游信号通路，引起组织细胞功能失调，最终导致血栓发生。因此，推测Ca^2＋通道功能受抑制可能与TDVT发生有关。     

大鼠创伤性深静脉血栓形成中Ca2+通道相关基因表达研究

分析Ca2 通道相关关键基因在大鼠创伤性肢体深静脉血栓形成中的表达变化,初步探讨该信号通路在此病理过程中的生物学意义。采用定量击打双侧大腿 双后肢石膏固定的方式,对150只SD大鼠造模,建立创伤性深静脉血栓形成动物模型。应用Genechip Rat Genome 430 2.0芯片,检测创伤性深静脉血栓形成过程中8种不同生物学状态下(正常对照、创伤即刻、血栓形成初始期、高峰期血栓形成、高峰期血栓不形成、血栓消退、血栓不消退、血栓不形成)股静脉RNA表达情况,筛查出差异表达基因,并进行pathway分析。重点关注高峰期血栓形成与不形成两种生物学状态下C,a2 通道相关关键基因表达变化。结果显示:高峰期血栓形成组与不形成组比较,Ca2 通道中CaMK、IP3 3K、CaN等多个关键基因表达均呈现下调,可能使包括内皮细胞在内的多种血管细胞,增殖、分化、代谢等功能受到抑制,并影响下游信号通路,引起组织细胞功能失调,最终导致血栓发生。因此,推测Ca2 通道功能受抑制可能与TDVT发生有关。     

两种创伤性深静脉血栓大鼠模型中炎症相关基因的表达研究

比较分析本课题组原创的急性、亚急性创伤性深静脉血栓形成大鼠模型中炎症相关基因的表达变化,探讨炎症在创伤性深静脉血栓形成中的意义。分别将急性、亚急性血栓形成模型各150只大鼠,随机分为正常组和模型组。急性血栓模型组采用直接钳夹股静脉 双后肢石膏固定,亚急性组采用定量击打双侧大腿 双后肢石膏固定的方式造模。根据深静脉血栓形成过程中不同的生物学状态,将实验动物分为正常对照、创伤即刻、血栓形成初始期、血栓形成高峰期、血栓消退、血栓不消退和血栓不形成7组。采用Gene-chip Rat Genome 4302.0芯片,动态测定股静脉RNA表达情况,运用基因芯片数据分析方法(倍数变化分析),筛选出差异性表达基因。重点分析和比较2种模型中炎症相关基因的表达变化。结果表明:两种模型中共有28个(急性模型中23个,亚急性模型中24个;其中2种模型中均出现差异性的基因19个;仅出现于一种模型中的8个)炎症相关基因呈现差异性表达,但两组的基因表达水平具有统计学差异(Z=-2.513,P=0.012<0.05)。说明炎症相关基因的变化与创伤性深静脉血栓形成密切相关,它可能通过影响内皮细胞的功能参与血栓形成。     

创伤性深静脉血栓形成大鼠模型Wnt信号通路的作用

背景：创伤后深静脉血栓形成具有潜在的临床危害性,可并发肺栓塞、脑栓塞。Wnt信号途径调节控制多种疾病过程,可能影响深静脉血栓的形成。 目的：探讨Wnt信号通路在创伤性深静脉血栓形成中的作用。 方法：将30只SD大鼠随机分为正常对照组和模型组。模型组根据造模后的不同生物学状态再分为高峰期血栓形成组和高峰期血栓不形成组,造模后5d无创切取股静脉血管组织,随后抽取各组大鼠总RNA,用Genechip Rat Genome 230 2.0芯片测定股静脉RNA表达,并分析Wnt信号通路基因表达变化情况。 结果与结论：与正常对照组比较,血栓形成组发现1 906个基因出现表达差异,无血栓形成组差异表达基因数目合计1 568个;与无血栓形成组比较,血栓形成组有437个出现表达差异,其中Wnt信号通路卷曲相关蛋基因、膜联结合蛋白基因、酪蛋白激酶Ⅱ基因、p53基因、蛋白磷酶2A 基因、环腺苷酸依赖性激酶同功酶基因、连接素β基因、原癌基因、fos相关抗原基因、Rac基因、钙调素依赖型蛋白激酶Ⅱ基因、钙调神经磷酸酶基因等均上调;卷曲蛋白基因、磷脂酶C基因等下调。提示Wnt信号通路可能是调控血栓的生物学状态的重要信号通路之一。     

亚急性创伤性深静脉血栓形成模型大鼠基质金属蛋白酶3的表达

背景：创伤性深静脉血栓发生率和死亡率呈逐年递增趋势,但其发生发展机制尚未清楚。因此有必要采用先进的基因芯片技术对其进行研究,探索其发生发展的内在规律。 目的：观察创伤性深静脉血栓形成过程中基质金属蛋白酶3的表达变化规律,探讨其在创伤性深静脉血栓形成中的作用机制。 方法：从110只SD大鼠中随机取10只大鼠作为正常组,其余100只大鼠作为实验组,采用定量击打双侧大腿+髋人字石膏固定方式,建立大鼠亚急性创伤性深静脉血栓动物模型。在伤后即刻、24,72,120和168 h时相点切取股静脉血管组织,随后抽取总RNA,采用Affymetrix 230 2.0芯片对股静脉血管组织进行基因表达检测。 结果与结论：在亚急性创伤性深静脉血栓形成演化过程中,基质金属蛋白酶3在实验组的表达随伤后时间的延长而增加,说明其参与血栓形成过程,可能是影响深静脉血栓生物学状态的主要因素之一。     

几种凝血/纤溶标志物在部分血栓性疾病中的应用

机体凝血增强、纤溶降低,可能预警血栓形成。相关标志物凝血酶-抗凝血酶复合物(TAT)、纤溶酶-α2纤溶酶抑制剂复合物(PIC)、血栓调节蛋白(TM)、组织纤溶酶原激活物-纤溶酶原激活物抑制剂-1复合物(tPAI-C)、纤维蛋白(原)降解产物(FDP)和D-二聚体(DD)水平异常成为临床上分析血栓性病变的重要参考指标,并在深静脉血栓、心血管疾病、弥散性血管内凝血(DIC)等的应用中获益。这些指标能反映血管内皮受损、血液高凝、纤溶状态,相较于常规指标:凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)、纤维蛋白原(FIB)等的变化,出现更早、更灵敏,因而对血栓形成的警示更及时,遗漏更少。     

凝血酶激活的纤溶抑制物: 新的凝血纤溶调控因子

凝血酶激活的纤溶抑制物(Thrombin—activatable fibrinolysis inhibitor，简称TAFI)，作为凝血及纤溶调控因子，是近十年来国外医学界研究的热点之一；TAFI的基础研究是对经典凝血及纤溶调控机制的重要补充；在体内主要由凝血酶、凝血酶调节蛋白、纤溶酶、肝素、胰蛋白酶等物质激活而导致纤溶机制受抑，血栓溶解时间延长，从而增加血栓形成的危险性。TAFI在体内还参与缓激肽、补体等活性物质的调节。动物血栓模型运用TAFI拮抗剂与溶栓剂联合治疗，取得良好效果。国外医学界对TAFI与血液、心血管、内分泌等系统疾病的发病关系已展开广泛研究。     

凝血、纤溶状态与糖尿病肾病

目的观察2型糖尿病（Diabetes mellitus，DM）患者的凝血、纤溶状态指标在糖尿病肾病（Diabetic nephropathy，DN）各期的水平，探讨其在DN发生、发展中的作用。方法检测30例正常人和90例2型DM患者凝血、纤溶状态指标：抗凝血酶-Ⅲ（AT-Ⅲ）、凝血酶-抗凝血酶复合物（TAT），组织型纤溶酶原激活剂（t-PA），纤溶酶原激活抑制物-1（PAI-1）。结果①DM各组血浆TAT水平高于正常对照组，t-PA水平、AT活性低于正常对照组，在DM无并发症时即出现上述改变（P〈0．01）。②血浆PAI-1水平在DN正常白蛋白尿组出现有统计学意义的升高（P分别〈0．05）。结论①DM在无并发症时，即存在凝血活性亢进、纤溶系统活性抑制。②PAJ-1是早期诊断DN较敏感的指标，并能反映DN的发生和发展，与尿白蛋白排泄量（Urinary Albumin Excretion，UAE）指标联合检测有助于早期诊断DN。     

低分子肝素对大鼠创伤性深静脉血栓形成中促细胞分裂原活化蛋白激酶通路的影响

观察低分子肝素治疗大鼠创伤性深静脉血栓形成的效果,从基因水平探讨低分子肝素治疗创伤性深静脉血栓形成的作用机制。将150只SD大鼠采用定量击打双侧大腿 双后肢石膏固定的方式造模,再将造模后5天有血栓形成的大鼠,随机分为药物治疗组和对照组,分别用低分子肝素和生理盐水进行干预,第一次干预后3h,各组随机取10只大鼠股静脉血管及其主要属支,采用Trizol一步法提取总RNA,运用Gene-chip Rat Genome 4302.0芯片测定股静脉RNA表达。倍数变化分析筛查出差异性表达基因,进一步行path-way分析。结果表明:对照组比较,药物组血栓消退率较高(x2=4.698,P<0.05);有1229个基因呈现差异性表达,该基因主要参与了MAKP、Ca2 、细胞因子及受体信号传导通路,参与MAPK通路的始动基因如IL1、TGF、FGF及其受体,末端效应基因如c-Junn、ur77、p53等均呈现上调。低分子肝素可调控促细胞分裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路并影响血栓的预后。     

肝癌患者组织中凝血及纤溶因子的基因表达检测与分析

目的:检测组织因子（TF）、尿激酶型纤溶酶原激活物（uPA）及其受体（uPAR ）mRNA在肝细胞癌组织中的表达并探讨其临床意义。 方法:利用RT-PCR法分别检测27例肝细胞癌、癌旁及27例正常肝组织中TF、uPA、uPA mRNA表达阳性率及相对表达强度，并结合临床病理资料进行分析。 结果:TF、uPA、uPAR在肝细胞癌组织中阳性率及相对表达强度分别为62.96%（17/27）、70.37%（19/27）、77.78%（21/27）；0.567±0.268、0.964±0.458、0.784±0.322,均显著高于癌旁组织及正常组织，差异显著(P<0.05)。3者在肝癌组织中相对表达强度与肿瘤大小及部分侵袭转移指标有关，其中TF mRNA表达强度在肝内及肝外转移及门脉癌栓组高于无肝内及肝外转移及无门脉癌栓组(P<0.05) ，uPA mRNA在有包膜侵润、肝内转移及门脉癌栓组高于无包膜侵润、无肝内转移及门脉癌栓组(P<0.05)；uPAR mRNA在有肝内转移及门脉癌栓组高于无肝内转移及门脉癌栓组(P<0.05)。经Pearson检验肝细胞癌患者TF、uPA和uPAR mRNA表达呈正相关［TF-uPA：r=0.373(P<0.01)，TF-uPAR：r=0.534(P<0.01)，uPA-uPAR：r=0.365 (P<0.01)］。 结论:肝细胞癌组织中TF、uPA及uPAR的mRNA显著升高并与部分侵袭转移指标有关，提示3者可能在肝细胞癌的发生及侵袭转移起协同作用。     

配合做好颈椎骨折后深静脉血栓的临床护理分析

目的配合实施颈椎骨折后深静脉血栓(DVT)的预防和诊断工作,做好针对性护理。方法将我科2002年1月~2013年2月收治的311例颈椎骨折患者按处理措施不同分为对照组和观察组,进行回顾性分析。结果对照组148例患者共发生19例DVT,发生率为12.83%。观察组163例患者共发生9例DVT,发生率为5.22%。两组分别有1例因肺动脉栓塞死亡,其余患者未发生严重并发症。结论颈椎骨折患者中,伴有脊髓损伤、多发伤者更易发生DVT。采取综合预防措施及有效护理可有效预防颈椎骨折后深静脉血栓形成,及时诊断有效护理对预后至关重要。     

介入联合手术治疗急性下肢深静脉血栓形成1

目的：探讨下肢深静脉血栓形成的手术治疗方法。方法：急性下肢深静脉血栓形成14例，先经健侧股静脉置入下腔静脉滤器，再切开患侧股静脉，远端血栓以挤压法驱出，近端髂股静脉内血栓以Fogarty球囊取出；球囊扩张左髂静脉狭窄11例，其中5例放置支架；最后做临时性股动静脉瘘。结果：14例手术成功。13例随访2。30个月，其中12例患肢肿胀消退，1例复发：结论：本方法创伤小，恢复快，疗效好，多数患者能耐受。下腔静脉滤器应以临时性为首选。     

人工关节置换术后隐性失血对下肢深静脉血栓形成的影响

目的探讨人工髋、膝关节置换术（Total hip arthroplasty，THA；Total knee arthroplasty，TKA）围手术期失血情况对术后下肢深静脉血栓形成（deep vein thrombosis，DVT）的临床影响。方法92例THA、TKA术后DVT发生情况进行分析。THA为51例（56髋），TKA为41例（49膝）。术后7～10d采用彩色多普勒检查双下肢DVT的发生。对临床失血的相关指标与人工关节置换术后DVT的改变进行了分析。结果术后发生DVT患者共计28例，发生率为30．43％（28／92）。发生DVT的患者临床实际失血总量、隐性失血总量、术后失血总量、术后隐性失血量平均值分别为1648．53ml、844．35ml、1016．17ml、735．87ml，与未发生DVT的患者四项指标比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论隐性失血量的增加提高了术后DVT形成的风险。对隐性失血量变化的认识和发生机制的研究有助于人工关节置换术后下肢DVT的防治。     

Circulating Progenitor and Mature Endothelial Cells in Deep Vein Thrombosis

Introduction: Mature circulating endothelial cells (CEC) and circulating endothelial progenitor cells (EPC) have been described in several conditions associated with endothelial injury. Their role in deep vein thrombosis (DVT) has not been previously evaluated. Patients and Methods: In this pilot study we evaluated the time course of CEC and EPC release after vena cava experimental DVT in mice, using the FeCl3 model. We also evaluated their presence in patients with DVT at different phases of the disease (acute and chronic phase). CEC and EPC were evaluated by Flow Cytometry. Results: In mice, both CEC and EPC were increased 24 hours after DVT induction, peaking 48 hours thereafter. After 72 hours, CEC counts decreased sharply, whereas EPC counts decreased less substantially. In DVT patients we observed a significant increase in CEC counts immediately after DVT compared to healthy individuals. Patients with chronic disease also presented a significant elevation of these cell count. In a subgroup of patients for whom serial samples were available, CEC counts decreased significantly after 9-15 months of the acute event. Conclusions: Our results suggest the participation of these cells in the reparative processes that follows DVT, both at immediate and late time-points. The different kinetics of CEC and EPC release in experimental DVT suggests a heterogeneous role for these cells in the reparative events after DVT.     

腔静脉滤器置入联合胫后静脉置管溶栓治疗急性下肢深静脉血栓形成

目的：探讨腔静脉滤器置入联合胫后静脉途径置管直接溶栓治疗急性下肢深静脉血栓形成的临床应用价值。方法：18例急性下肢深静脉血栓形成患者,先行患肢血管造影明确诊断后,在下腔静脉滤器置入的基础上采用胫后静脉置管微泵持续推注尿激酶直接溶栓治疗,对其中髂静脉狭窄5例和闭塞1例患者在拔除溶栓导管后实施髂静脉球囊扩张成形术。结果：18例患者置管溶栓治疗后症状均得到明显改善,1例术前合并肺动脉栓塞者症状消失。溶栓后的健、患侧大腿周径差及小腿周径差比治疗前明显减小,差异均有统计学意义（P〈0．001）。治疗期间,无一例围手术期死亡,无肺动脉栓塞发生,无置管处渗血或血肿形成、神经损伤等置管相关并发症发生。术后17例获随访,随访时间1～12个月,平均5个月。15例肢体肿胀基本消退、肌张力减低、恢复正常劳动力;2例活动后肢体出现轻微肿胀伴沉重感,能进行正常家务劳动;17例均未出现患肢浅静脉曲张及静脉营养性障碍。结论：腔静脉滤器置入联合胫后静脉置管直接溶栓治疗急性下肢深静脉血栓形成具有疗效好、创伤小、安全性高、适应证宽,便于护理等优点,是一种安全、有效的治疗方法。     

Deep Vein Thrombosis in the Lower Extremities in Comatose Elderly Patients with Acute Neurological Diseases

PurposeComatose elderly patients with acute neurological illness have a great risk of deep vein thrombosis (DVT). In this study, the incidence of DVT and the effectiveness of early initiation of treatment were evaluated in those patients.ResultsDVT was positive in 19 (44.2%) patients, and PE was in 4 (9.3%). D-dimer was significantly higher in DVT-positive group on day 7 (p<0.01). No DVT were identified in patients with ischemic disease, while 66.7% of intracerebral hemorrhage and 53.3% of brain contusion patients were DVT positive. Surgery was a definite risk factor for DVT, with an odds ratio of 5.25. DVT and PE disappeared by treatment in all cases, and no patients were succumbed to the thrombosis.ConclusionPatients with hemorrhagic diseases or who undergo operation possess high risk of DVT, and initiation of heparin treatment in 7 days after admission is an effective prophylaxis for DVT in comatose elderly patients without causing bleeding.     

品管圈活动降低护士对深静脉血栓风险评估的差异率分析

目的 探讨品管圈活动降低护士对深静脉血栓评估的差异率,从而提升护士评分意识,提高护理安全。方法 2017年3月我院成立品管圈,通过品管圈步骤,于2017年3~8月对全院护士进行培训,以实地查看及访谈的形式,包括护士对Autar评分的理解,及给出一个固定病例,让不同层级护士对此进行评分,最后分析对比。结果 通过品管圈的开展,使团队各个方面的能力都得到了锻炼和提升。目标达成率为129.76%,进步率为79.88%,各层级护士对Autar评分表理解有差异由46.31%下降至23.12%,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 通过此次品管圈活动,规范了护理人员Autar风险评估量表使用,增加了护士工作中的主观能动性,提高工作效率。