长期血液透析患者内皮祖细胞变化与同型半胱氨酸的关系

目的检测长期血液透析患者内皮祖细胞（EPCs）数量和功能的改变,并探讨其与同型半胱氨酸的关系。方法采用密度梯度离心法分离培养长期血液透析患者和健康者的外周血单个核细胞,将其接种在人纤维连接蛋白包被培养板,7d后取贴壁细胞进行Dil—LDL和FITC—UEA-I双染色,并通过流式细胞仪检测其表面标志CD34、CD133、KDR,以鉴定EPCs。采用改良的Boyden小室、粘附功能检测评价其迁移和粘附能力,并与患者血清半胱氨酸含量进行相关性分析。结果患者EPCs的数量和迁移、粘附功能都低于健康者,差异有统计学意义（P〈0．05）;患者血清半胱氨酸含量[（57．10±24．76）umol／L]显著高于健康者[（6．75±3．58）umol／L]（P〈0．05）,并且含量与患者EPCs的数量和迁移、粘附功能分别呈明显负相关（P〈0．05）。结论长期血液透析患者的EPCs数量减少,功能降低,可能与患者的高同型半胱氨酸血症有关。     

糖基化终末产物对人外周血内皮祖细胞生物学特性的影响

目的 观察糖基化终末产物(AGEs)对体外培养的人外周血内皮祖细胞(EPCs)生物学特性的影响.方法 以密度梯度离心法获取人外周血单个核细胞(MNCs),由激光共聚焦显微镜鉴定FITC-UEA-1和Dil-acLDL双染色阳性细胞为正在分化的EPCs.加入不同浓度AGEs培养48h,然后分别采用MTT法、Boyden小室测定来观察EPCs的增殖、迁移能力;以人纤维连接蛋白(hFN)检测EPCs的黏附能力;分别采用甲醛和Dnase Ⅰ诱导EPCs凋亡作为阳性对照组,用AnnexinV-FITC/PI和TUNEL法流式细胞仪检测AGEs对EPCs凋亡率的影响.结果 高浓度AGEs可减少EPCs贴壁细胞数量(P<0.01),明显减弱EPCs的黏附(P<0.01)、增殖(P<0.001)、迁移能力(P<0.05),提高EPCs的早期凋亡率(P<0.001).结论 AGEs可减少EPCs的数昔并使EPCs的功能受损.     

疏肝活血方含药血清对内皮祖细胞数量及功能的影响

目的：观察疏肝活血方含药血清对大鼠骨髓来源的血管内皮祖细胞（EPCs）数量及功能的影响。方法：从大鼠骨髓中获取单个核细胞,体外培养9d后,收集贴壁细胞,加入低、中、高浓度的疏肝活血方及其拆方的含药血清,培养12、24、48h。激光共聚焦显微镜鉴定,FITC-UEA-I和Dil-acLDL双染色阳性细胞为正在分化的EPCs,并在倒置荧光显微镜下计数,分别采用黏附能力测定、MTT比色法及改良的Boyden小室实验来观察疏肝活血中药对EPCs黏附能力、增殖能力和迁移能力的影响,用流式细胞仪检测PI-/AnnexinⅤ＋的凋亡细胞。结果：疏肝活血方能明显促进EPCs的分化,提高EPCs的数量,明显改善EPCs的黏附、增殖及迁移能力,减少EPCs的凋亡率,中浓度组培养24h达到作用的高峰（P〈0.01）。结论：疏肝活血方能促进EPCs数量的增加、功能的改善,减少EPCs的凋亡。     

肾性继发性甲状旁腺功能亢进患者血清Hcy、 VCAM-1水平及其与认知功能的相关性分析

目的:探讨肾性继发性甲状旁腺功能亢进(SHPT)患者血清同型半胱氨酸(Hcy)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)水平及其与认知功能的相关性。方法:选择2020年01月—2021年12月本院收治的发生轻度认知障碍的SHPT患者113例作为研究对象,选择同期未发生认知障碍的110例患者作为对照组,检测血清Hcy、VCAM-1水平,ROC曲线分析血清Hcy、VCAM-1对SHPT患者发生认知功能障碍的诊断价值,Logistics多因素回归分析影响SHPT患者发生认知功能障碍的危险因素。结果:与认知功能正常组比较,认知功能障碍组血液透析比例、血清iPTH、Scr、血磷、血钙、Hcy、VCAM-1水平显著升高,MoCA评分显著降低(P<0.05);血清Hcy、VCAM-1及联合诊断SHPT患者发生认知功能障碍的曲线下面积(AUC)分别为0.828、0.850、0.914;透析方式、血清iPTH、受教育年限、Hcy、VCAM-1是影响SHPT患者发生认知功能障碍的危险因素(P<0.05)。结论:SHPT患者血清Hcy、VCAM-1水平升高,与患者认知功能有关,是发生认知功能障碍的独...     

腹主动脉瘤患者腔内血栓厚度及外周血中同型半胱氨酸与C反应蛋浓度的临床意义及相互关系

目的:探讨腹主动脉瘤(AAA)患者瘤腔内血栓(ILT)厚度及外周血中同型半胱氨酸(Hcy)与C反应蛋白(CRP)浓度的临床意义及相互关系。方法:选取2014年1月—2015年12月年间收治的AAA患者60例,以ELISA法测定外周血中Hcy浓度和CRP浓度,影像学方法测定ILT厚度。分析ILT厚度与临床因素的关系,以及ILT厚度、Hcy、CRP之间的相互关系。结果:厚ILT(厚度≥7.8mm)患者的高血压史比例、Hcy和CRP浓度明显高于薄ILT(厚度7.8mm)患者(均P0.05);相关分析显示,Hcy浓度与ILT厚度(r=0.942)、ILT厚度/AAA最大直径比值(r=0.844)、AAA最大直径(r=0.505)均呈明显正相关(均P0.05),而CRP浓度与其他因素间均无相关(均P0.05)。结论:ILT厚度、外周血Hcy与CRP浓度均可能是AAA进展的危险因素,且ILT厚度与Hcy浓度之间可能存在相互促进的关系。     

酸性成纤维细胞生长因子对人脐血内皮祖细胞的影响

目的 观察酸性成纤维细胞生长因子(aFGF)对体外培养内皮祖细胞(EPCs)数量、功能及凋亡的影响.方法 密度梯度离心法获取人脐血单个核细胞(MNCs),培养6 d后,收集贴壁细胞流式细胞仪和激光共聚焦显微镜鉴定EPCs.并向贴壁细胞分别加入aFGF 2、5、10μg/L干预培养24 h,同时对作用效果最为显著的组(aFGF 5μg/L组)分别培养6、12、24、48 h,分别观察EPCs数量、增生、迁移、黏膜及凋亡状况,从而对其时效关系进行观察.结果 与对照组比较,不同浓度的aFGF可以显著提高EPCs的数量、生物学功能并抑制其凋亡(P<0.05);本研究5μg/L aFGF作用24 h时对EPCs数量、生物学功能及凋亡抑制的影响最为显著(P<0.05).结论 aFGF增加体外培养条件下EPCs的数目、改善其生物学功能并抑制其凋亡.     

维持性血透患者心肌病变及相关因素分析

目的:探讨维持性血透(MHD)患者的心肌病变,特别是左心室肥厚(LVH)和心肌缺血损害,以及与其相关的因素.方法:根据彩色多普勒超声心动图和心电图结果,分析60例MHD患者左心室质量指数(LVMI)和ST-T改变情况,并进一步探讨LVH和心肌缺血与血压(BP)、血红蛋白(Hb)、血浆C反应蛋白(CRP)、甲状旁腺素(PTH)、同型半胱氨酸(Hcy)、白蛋白(Alb)、前白蛋白(PA)、转铁蛋白(TF)等指标之间的关系.结果:(1)有80%的MHD患者存在LVH,与non-LVH组相比,LVH组SBp、DBp、MAp和CRP显著增高,RBC、Hb水平显著低下(P均<0.01),单因素相关分析显示,LVMI与SBp、DBp、MAp、CRP成显著正相关(r=0.362,0.374,0.389,0.635,P均<0.01),与RBC、Hb呈显著负相关(r=-0.337,-0.310,P<0.01,0.05),多因素逐步回归分析显示LVMI与CRP、DBp有关,逐步回归方程为y=3.02 x1 0.93 x2 23.52(y为LVMI,x1为CRP,x2为DBp).(2)65%的MHD患者存在心肌缺血,心肌缺血组血Hcy和CRP水平均显著高于无心肌缺血组(P均<0.01).结论:MHD患者LVH、心肌缺血损害普遍存在,LVH的发生与高血压、贫血、慢性炎症关系密切,心肌缺血损害与慢性炎症、高Hcy血症有关.     

维持性血液透析患者自体动静脉内瘘血栓影响因素观察

目的观察维持性血液透析(maintenance hemodialysis,MHD)患者血浆同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)、C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)水平及透析低血压发生率等指标是否影响自体动静脉内瘘(autogenous arteriovenous fistulas,AVF)血栓的发生。方法选择以自体AVF为血管通路的MHD患者92例,观察1年是否有过1次或1次以上的内瘘血栓栓塞事件,将其分为AVF血栓组和非AVF血栓组。比较2组患者的透析中低血压发生率、Hcy、CRP、低密度脂蛋白(low density lipoprotein,LDL)、血浆白蛋白(albumin,Alb)、血红蛋白(hemoglobin,Hb)、红细胞比容(hematocrit value,Hct)、铁蛋白等1年内两次化验的平均值指标及透析时间,并进行相关危险因素分析。结果入选92例MHD患者的透析低血压发生率为19.6%(18/92),AVF血栓组和非AVF血栓组的透析低血压发生率比较,差异有统计学意义(P0.05)。92例MHD患者Hcy异常发生率为100%,但2组患者的血浆Hcy水平差异无统计学意义,2组患者的CRP和铁蛋白水平差异也无统计学意义。危险因素分析提示Hb和透析低血压是AVF血栓形成的危险因素,Hcy、CRP不是AVF血栓形成的危险因素。AVF血栓组的透析时间及Hct低于非AVF血栓组,其差异有统计学意义(P0.05),其他白细胞、SCr、血小板、LDL、Alb等生化指标的差异无统计学意义。结论透析低血压、Hb都是MHD患者AVF血栓发生的危险因素,而Hcy、CRP等与AVF血栓的发生无相关性。     

骨髓刺激对大鼠骨髓源内皮祖细胞的影响

目的 观察大鼠骨髓刺激后骨髓源内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)数量和功能的改变,探讨采用骨髓刺激后骨髓干细胞移植提高下肢缺血性疾病疗效的可能机制. 方法 取12只SPF级雄性Lewis大鼠,体重200～250 g,按是否皮下注射重组人粒细胞集落刺激因子注射液分为刺激组和对照组(n=6).取骨髓单个核细胞用EBM.2培养液进行诱导分化,培养7 d后对贴壁细胞采用异硫氰酸荧光素.荆豆凝血素1和DiI标记的乙酰化低密度脂蛋白染色进行EPCs鉴定及计数;同时采用黏附能力测定实验观察EPCs的黏附能力.另取12只SPF级雄性Lewis大鼠制备单侧后肢缺血模型,在模型制备后3 d将8×106个EPCs移植至缺血侧后肢的肌肉内,按照移植EPCs来源不同将后肢缺血大鼠分为刺激组和对照组(n=6).EPCs移植3周后行后肢血管造影,计算缺血侧后肢侧支血管数目. 结果 大鼠骨髓单个核细胞培养7 d后刺激组EPCs数量为(145.2 4±37.0)个/HP,大于对照组(95.2 4±39.4)个/HP(P<0.05);刺激组黏附EPCs数量为(21.8 4±4.3)个/HP,大于对照组(15.0 4±5.2)个hip(P<0.05).大鼠骨髓源EPCs移植至缺血肢体后3周,刺激组EPCs移植后缺血侧后肢侧支血管数目为(4.2 4±1.2)个,大于对照组的(2.7 4±0.8)个(P<0.05). 结论 骨髓刺激使骨髓源EPCs数量增加、功能改善,可能是骨髓刺激后骨髓干细胞移植提高下肢缺血性疾病疗效的机制之一.     

负压创面疗法对Ⅲ/Ⅳ度烧伤患者外周血内皮祖细胞循环数量的影响研究

目的:探讨负压创面疗法(Negative pressure wound therapy,NPWT)对于Ⅲ/Ⅳ度烧伤患者外周血内皮祖细胞(Endothelial progenitor cells,EPCs)循环数量的影响。方法:本研究纳入了2017年3月-2019年3月在笔者医院烧伤科接受治疗的Ⅲ/Ⅳ度烧伤患者130例,将患者随机分为观察组(n=65)和对照组(n=65),均接受常规治疗,观察组在此基础上接受NPWT治疗,疗程为1周,比较两组患者治疗前后的外周血EPCs数量,并分析影响其变化的因素。结果:治疗后,观察组的外周血EPCs数量明显增加[(85.3±18.1)×10^6 vs(34.1±12.5)×10^6],差异有统计学意义(P<0.05)。而对照组无明显变化[(45.2±19.4)×10^6 vs(34.7±16.8)×10^6],差异无统计学意义(P>0.05)。此外,观察组的治疗后外周血的血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)水平和肉芽组织内的VEGF和基质细胞衍生因子-1α(Stromal cell-derived factor-1α,SDF-1α)均显著增加(P<0.05),而对照组没有明显变化(P>0.05)。相关性分析结果显示,外周血EPCs数量与外周血和肉芽组织内的VEGF和SDF-1α水平显著相关(P<0.05)。结论:NPWT可以增加Ⅲ/Ⅳ度烧伤患者外周血EPCs数量,其机制可能与全身性和局部性的VEGF和SDF-1α水平上调相关。     

Changes of the peripheral blood endothelial progenitor cells in peritoneal dialysis patients and its impact factors

Objective To investigate the number and activities changes of peripheral blood endothelial progenitor cells (EPCs) in continuous ambulatory peritoneal dialysis (CAPD) patients, and explore the connection between EPCs' number and the levels of advanced glycosylation end products (AGEs), homocysteine (Hcy) and C-reactive protein (CRP). Methods Twenty-five CAPD patients and thirty healthy volunteers were involved. Total mononuclear cells (MNCs) were isolated from peripheral blood of patients. EPCs were characterized as adherent cells by double staining of FITC-UEA-1 and DiL-AcLDL binding, and were further demonstrated by positive cells of CD34, CD133 and KDR using flow cytometry. The abilities of cell proliferation, adhesion and migration were further observed by fluorescent microscope. The correlations between the CEPCs' number and the levels of AGEs, Hcy andCRP were analyzed. Results The number and activities including migration and adhesion of EPCs in CAPD group were significantly lower than control group (P＜0.05). The levels of serum AGEs, Hcy and CRP in CAPD patients were increased (all P＜0.05) and had negative correlation with EPCs' number. Conclusions The number and activities of EPCs decrease in patients with CAPD, and EPCs' number is negatively correlated to the levels ofAGEs, Hcy and CRP.     

紫绀型先天性心脏病病人循环内皮祖细胞的数量及功能变化

目的 探讨紫绀型先天性心脏病病人外周血内皮祖细胞(endothelial progenitor cell,EPC)的数量及功能特点.方法 选取法洛四联症及单纯室间隔缺损病人各10例,采用Ficoll密度梯度离心法从外周血中分离单个核细胞,用添加牛脑垂体提取物和胎牛血清的M199培基进行体外诱导分化培养.用免疫组化和透射电镜行EPC表型鉴定;采用流式细胞仪计数CD133+/KDR+细胞;采用改良的Boyden小室,黏附能力测定实验和MTT比色法,观察EPC的迁移、黏附及增殖能力.结果 紫绀型先天性心脏病病人外周血内皮祖细胞的数量增多[集落记数(14.7±3.1)/100倍视野对(8.2±1.3)/100倍视野;DiIAcldl+/UEA-Ⅰ+细胞数(72.2±9.73)/200倍视野对(51.2±3.83)/200倍视野;CD133+/KDR+细胞百分比(0.66±0.20)%对(0.18±0.08)%,P＜0.01],其迁移能力[(140.6±9.24)/200倍视野对(91.84±8.58)/200倍视野]、黏附能力[(149.00±11.58)/200倍视野对(112.6±7.02),200倍视野]及增殖能力(OD值0.34±0.02对0.27±0.01)增强(P＜0.01).结论 紫绀型先天性心脏病病人循环内皮祖细胞的数量增多,其迁移、黏附及增殖能力增强.     

左卡尼汀对血液透析患者微炎症及营养状况的影响

目的探讨左卡尼汀对维持性血液透析患者微炎症及营养状况的影响。方法选择62例维持性血液透析患者,随机分为左卡尼汀组和对照组,检测二组患者治疗前、治疗后血C反应蛋白（CRP）、血红蛋白（Hb）、白蛋白（Alb）和血肌酐（SCr）值,计算Kt／V值。结果与治疗前及对照组治疗后比较,左卡尼汀组患者治疗后CRP水平下降,Alb、Hb升高,差异有统计学意义（P〈0．05）;对照组患者治疗前后CRP、Alb、Hb无统计学差异（P〉0.05）;二组患者治疗前后SCr、Kt/V值均无统计学差异（P〉0．05）。结论左卡尼汀可减轻维持性血液透析患者微炎症反应,改善患者营养状态。     

不同通量透析对维持血液透析患者叶酸、维生素B12等贫血相关指标的影响及其与贫血的关系研究

目的 探讨不同通量透析对维持血液透析(MHD)患者叶酸、维生素B12及其他贫血相关指标水平的影响及其与贫血的关系.方法 将本院血液透析中心进行维持透析的69例患者随机分为高通量透析组(HFHD组)和低通量透析组(LFHD组),观察两组患者入组时及治疗1年后血清叶酸、维生素B12、C-反应蛋白(CRP)、甲状旁腺素(PTH)等指标变化情况,并分析上述指标变化与贫血之间的关系.结果 经过治疗,两组平均Hb水平均有明显增加,和治疗前比较差异均有统计学意义(P＜0.05);LFHD组治疗前后其他指标均无明显变化(P＞0.05);HFHD组患者叶酸、维生素B12、Hct水平和初始值比较均明显增加(P＜0.05),CRP、PTH水平以及EPO使用量均明显下降(P＜0.05),和LFHD组比较差异均有统计学意义(P＜0.05).HFHD组叶酸、维生素B12、CRP以及PTH等4个指标的变化与贫血是否达标有明显的相关性(r =0.370 ～0.448,P＜0.05),HFHD组上述指标的变化与贫血相关性不强(r=0.017 ～0.241,P＞0.05).结论 高通量透析可以降低维持血液透析患者体内毒素水平,提高叶酸、维生素B12等造血原料营养物质水平,比低通量透析更加利于改善患者贫血状态.     

血液灌流串联血液透析治疗对终末期糖尿病肾病患者胰岛素抵抗与营养状态的影响

目的：探讨血液灌流串联血液透析治疗对终末期糖尿病肾病（ESDN）患者胰岛素抵抗、微炎症状态与营养不良的关系.方法：入选ESDN患者75例,其中单纯血液透析组（HD组）25例、血液透析联合血液滤过组（HD＋ HDF组）28例、血液透析串联血液灌流组（HD ＋HP组）22例,比较各组患者治疗前、后与胰岛素抵抗、C反应蛋白（CRP）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）、血红蛋白（Hb）、血清白蛋白（Alb）、空腹胰岛素（FINS）、空腹血糖（FBS）及体重指数（BMI）的相关性,应用Daugirdas公式计算透析充分性（KT/V）,分析血液灌流串联血液透析对ESDN患者胰岛素抵抗、微炎症状态与营养不良的影响;健康人16例作为对照组.结果：治疗前,3组胰岛素抵抗、微炎症状态与营养状态差异无统计学意义（P＞0.05）,而CRP、TNF-α及IL-6均高于正常对照组（P＜0.001）;治疗12周后,血液灌流治疗与胰岛素抵抗、CRP、TNF-α、IL-6、Hb、Alb及BMI均显著相关;胰岛素抵抗和营养状态：HD＋ HP组治疗前后有改善（P＜0.05）,较HD组和HD＋ HDF组差异有统计学意义（P＜0.05）;炎症因子：HD＋ HP组治疗前后、以及较其他两组显著降低（P＜0.01）,较正常对照组仍增高（P＜0.05）,HD＋ HDF组与HD组之间差异也有统计学意义（P＜0.05）,HD组治疗前后差异无统计学意义（P＞0.05）.结论：血液透析的ESDN患者体内长期存在的胰岛素抵抗、微炎症状态和营养不良,血液灌流可有效清除炎症介质,降低ESDN患者的胰岛素抵抗,改善营养状态.     

维持性透析患者红细胞生成素抗体水平及其临床意义

目的 检测透析患者红细胞生成素（EPO）抗体水平及探讨其临床意义。 方法 本院80例维持性血液透析患者和30例维持性腹膜透析患者为对象。用酶联免疫吸附法（ELISA）检测EPO抗体。用电化学发光法检测全段甲状旁腺素（iPTH）。用常规方法检测血红蛋白（Hb）、BUN、Scr、C反应蛋白（CRP）。分析透析患者EPO抗体水平与Hb、BUN、Scr、iPTH、CRP的关系。分析不同基础病患者与EPO抗体、Hb、BUN、Scr、iPTH、CRP的关系。研究EPO抗体和贫血关系。 结果 透析患者EPO抗体水平显著高于健康人,差异有统计学意义（P ＜ 0.05）,而血透患者与腹透患者间EPO抗体水平差异无统计学意义。不同基础病的EPO抗体水平、Hb、BUN、Scr、iPTH、CRP差异无统计学意义。透析患者Hb与EPO抗体、CRP呈负相关（r = -0.56、-0.20,P ＜ 0.05）,而与BUN、Scr、iPTH均无相关;EPO抗体与BUN、Scr、iPTH、CRP均无相关。1例应用重组人红细胞生成素（rHuEPO,环尔博)患者EPO抗体为43.63 U/L,骨髓活检示红细胞系增生低下——纯红细胞再生障碍性贫血。 结论 透析患者EPO抗体水平显著高于健康人。血透患者与腹透患者间EPO抗体水平差异无统计学意义。透析患者EPO抗体与BUN、Scr、iPTH、CRP无相关。透析患者Hb与EPO抗体、CRP呈负相关。使用rHuEPO能产生抗体,可导致骨髓红细胞系增生低下,加重贫血。