维生素D3,9—顺式维甲酸及其相应核受体对hsp90β基因？…

目的 研究维生素Ｄ３（ＶＤ３）、９－顺式维甲酸（９－ｓｉｃ－ＲＡ）及其相应核受体对ｈｓｐ９０β基因表达的调控作用。方法 采用ＤＥＡＥ－Ｄｅｘｔｒａｎ方法将人ｈｓｐ９０β基因调控片段（－１ ０３９ ｂｐ／＋１ ５３１ ｂｐ）介导的荧光素酶（Ｌｕｃ）报告基因质粒β１．１１转染Ｊｕｒｋａｔ细胞,并用ＶＤ３和９－ｃｉｓ－ＲＡ分别或同时刺激细胞,或将质粒β１．１１及野生型维生素Ｄ３受体（ＶＤＲ）或／和维甲酸     

鼻咽癌中EB病毒感染与癌基因、抑癌基因表达的关系研究

目的：观察ＥＢ病毒感染与癌基因、抑癌基因在鼻咽癌（ＮＰＣ）中的表达与相互关系,研究ＮＰＣ发生的有关机制。方法：免疫组化检测５０例ＮＰＣ组织中ＥＢ病毒潜伏膜蛋白（ＬＭＰ１）癌基因蛋白、细胞周期素Ｄ１（ＣｙｃｌｉｎＤ１）、Ｈ－ｒａｓ、ｃ－ｆｏｓ,抑癌基因收害ＮＰＣＷＨＯⅢ型中显著高于ＷＨＯⅡ型（Ｐ〈０．０１）,在转移组中表达亦增加。ＣｙｃｌｉｎＤ１在癌呈巢性膨胀性生长中显著高于其他类型（Ｐ〈０．０１）     

急性髓系白血病H—ras,凋亡及多药耐药的研究

目的 研究急性髓系白血病（ＡＭＬ）Ｈ－ｒａｓ／Ｐ２１,抗凋亡基因、细胞凋亡与多药耐药基因的疗效的影响,并证实流式细胞术检测Ｐ－ｇｐ和逆转录多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测ｍｄｒ－１ ｍＲＮＡ间的相关。方法 用ＦＣＭ检测８５例初始ＡＭＬ患者的Ｈ－ｒａｓ／Ｐ２１、ｂｃｌ－２,细胞凋亡和ｍｄｒ－ｌ产物Ｐ－ｇｐ的表达;用ＲＴ－ＰＣＲ检测其中４７例的ｍｄｒ－ｌ／ｍＲＮＡ。结果 Ｐ２１＾＋／Ｐ－ｇｐ＾＋者完全     

重组丙型肝炎病毒基因载体的构建与表达

应用基因重组技术。从载体ＣＤＺ２酶切获得１．７３ｋｂＤＮＡ片段（含１６ｄ９３ｂｐ的ＨＣＶ结构区ｃＤＮＡ，其特异性已为ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ证实）。将ＨＣＶｃＵＮＡ片段插入载体ｐｃＤＮＡ３，构建ＨＣＶ重组体。经在大肠杆菌中表达，筛选、酶切分析，获得重组ＨＣＶ（ＰｃＤＮＡ３－ＨＣＶ）。以重组质粒转染Ｈ９细胞（ＣＤ淋巴细胞系），用Ｇ４１８筛选出抗性细胞。经ＲＴ－ＰＣＲ、ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ验证表明，ｐｃＤＮＡ３－ＨＣＶ能在Ｈ９细胞中进行复制、转录和表达。这为丙型肝炎发病机理的研究提供了一个有用模型。     

庚型肝炎病毒不同地理株5‘端非编码区序列的变异性分析

目的：为明确了解中国不同地区（广东，云南，香港）庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）株５‘端非编码区（ＮＣＲ）序列的差异。方法：采用逆转录巢式聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术，从广东省２例，云南省１例，香港３例共６例ＨＧＶ感染者血浆中扩增ＨＧＶ５’ＮＣＲ ｃＤＮＡ片段，为２３８ｂｐ，ＰＣＲ产物纯化后直接经对脱氧链末端终止法测定核苷酸序列。结果：中国ＨＧＶ株间５‘ＮＣＲ相应序列的同源性介乎９２．９３％￣９７．９８     

淋巴细胞免疫活化基因表达与移植肾排斥反应的关系

目的：分析肾移植受得外周血淋巴细胞免疫活化基因表达，与移植肾排斥反应之间的相互关系。方法：采用ＲＴ－ＰＣＲ技术，检测６１例肾移植受者外周血淋巴细胞ＩＬ－２、ＩＦＮ－γ、ＦａｓＬ和颗普酶Ｂ４种免疫活化基因表达状况，并结合临床资料全面分析，结果：发现ＩＬ－２、ＩＦＮ－γ、ＦａｓＬ和颗粒酶Ｂ的ｍＲＮＡ表达阳性率分别为４１％、５４．１％、６０．７％、６７．２％，以４种基因同时表达诊断标准，诊断敏感性和特异     

重组人单链白细胞介素12融合基因（rhscIL—12）的构建和真？…

目的 克隆人ＩＬ－１２（ｈＩＬ－１２）ｐ４０和ｐ３５亚单位ｃＤＮＡ，构建人单链ＩＬ－２（ｒｈｓｃＩＬ－２）融合基因，并在哺乳动物细胞中进行表达。方法从经ＰＤＢｕ刺激的ＥＢＶ转化的人Ｂ淋巴细胞株ＮＣ３７中提取ｍＲＮＡ，经ＲＴ－ＰＣＲ分别获得ｈＩＬ－１２ｐ４０和ｐ３５亚单位编码序列的ｃＤＮＡ，运用重组ＰＣＲ技术将两段基因通过一疏水性多肽接头（Ｇｌｙ４Ｓｅｒ）３ＤＮＡ序列进行体外基因重组，构建ｒｈｓｃＩ     

人白细胞介素—2基因真核表达载体pDORIL—2的构建

构建逆转录病毒载体介导的人白细胞介素－２（ＩＬ－２）基因真核细胞表达载体。方法：合成带有和表达载体克隆位点相匹配酶切位点的聚合酶链式反应（ＰＣＲ）引物，用ＰＣＲ方法从质粒ｐＨＩＧ５３中扩增出人的ＩＬ－２ｃＤＮＡ，将其定向克隆入表达载体ｐＤＯＲ－ｎｅｏ。结果：ＰＣＲ扩增出的ＩＬ－２ｃＤＮＡ片段约４７５ｂｐ，酶切鉴定该片段已被克隆入ｐＤＯＲ－ｎｅｏ的多克隆位点，构建成人ＩＬ－２基因真核表达载体ｐＤＯＲ     

人白细胞介素10在支气管上皮细胞株H292中的表达及生物 …

目的 探讨在支气管上皮细胞Ｈ２９２株（Ｈ２９２）中表达人白细胞介素１０（ｈＩＬ－１０）,并鉴定其生物活性。方法 将载有ｈＩＬ－１０基因的ｐｃＤＳＲα质粒（ｐｃＤＳＲα－ＩＬ－１０）,经脂质体Ｆｕｇｅ－６介导转染Ｈ２９２株。应用逆转录聚合酶链反应（ＲＴ）及聚合酶链反应（ＰＣＲ）,检测转染后４８ｈＨ２９２株中ＩＬ－１０ｍＲＮＡ的表达;用ＥＬＩＳＡ法测定ｈＩＬ－１０在不同时期Ｈ２９２培养上清液中的表达的     

急性髓系白血病H-ras、凋亡及多药耐药的研究

目的研究急性髓系白血病（ＡＭＬ）Ｈｒａｓ／Ｐ２１、抗凋亡基因（ｂｃｌ２）、细胞凋亡与多药耐药基因（ｍｄｒ１／Ｐｇｐ）对疗效的影响,并证实流式细胞术（ＦＣＭ）检测Ｐｇｐ和逆转录多聚酶链反应（ＲＴＰＣＲ）检测ｍｄｒ１ｍＲＮＡ间的相关。方法用ＦＣＭ检测８５例初治ＡＭＬ患者的Ｈｒａｓ／Ｐ２１、ｂｃｌ２、细胞凋亡和ｍｄｒ１产物Ｐｇｐ的表达;用ＲＴＰＣＲ检测其中４７例的ｍｄｒ１／ｍＲＮＡ。结果Ｐ２１＋／Ｐｇｐ＋者完全缓解（ＣＲ）率明显低于Ｐ２１－／Ｐｇｐ－者（分别为５８．１％和１００％,Ｐ＜０．０２５）,高ｂｃｌ２／Ｐｇｐ＋的ＣＲ率明显低于低ｂｃｌ２／Ｐｇｐ－者（分别为６０％和９６．３％,Ｐ＜０．００５）。Ｐｇｐ＋３１例中２９例ｍｄｒ１ｍＲＮＡ阳性,Ｐｇｐ－１６例中仅２例ｍｄｒ１ｍＲＮＡ阳性。结论Ｐｇｐ＋同时Ｐ２１＋、高ｂｃｌ２者ＣＲ低,ＦＣＭ检测Ｐｇｐ和ＲＴＰＣＲ检测ｍｄｒ１ｍＲＮＡ相关性良好     

维持性血液透析患者外周血中性粒细胞预激活gp-91phox基因表达和吞噬杀菌功能异常

目的　探讨维持性血液透析 (HD)患者机体免疫功能下降的原因。方法　用RT PCR方法 ,对HD患者和正常对照者外周血中性粒细胞的 gp 91phox、白介素 (IL) 8、胞内型白介素 1受体拮抗物 (icIL 1ra)和分泌型白介素 1受体拮抗物 (sIL 1ra)基因表达进行研究。细胞吞噬和杀菌功能通过菌落计数以细胞外和胞内活菌下降的百分比表示。结果　健康对照组新鲜分离的中性粒细胞有 gp 91phox mRNA表达 ,而HD患者不表达。HD患者中性粒细胞自发表达IL 8、icIL 1ra和sIL 1ra。HD患者中性粒细胞对金黄色葡萄球菌的吞噬和胞内杀菌能力均明显下降。结论　HD患者中性粒细胞表达 gp 91phox障碍 ,提示烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶(NADPH)系统受损。粒细胞自发表达IL 8、icIL 1ra和sIL 1ra ,这种预激活状态与对金黄色葡萄球菌吞噬和杀灭作用下降相一致     

Impaired gp-91phox gene expression and dysfunction of peripheral blood neutrophils in patients maintaining hemodialysis

Ｎｅｕｔｒｏｐｈｉｌｓｐｌａｙａｎｉｍｐｏｒｔａｎｔｒｏｌｅｈｏｓｔｄｅｆｅｎｓｅｓｙｓｔｅｍａｇａｉｎｓｔｉｎｆｅｃｔｉｏｎ Ｔｈｅｎｅｕｔｒｏｐｈｉｌｓｇｒａｎｕｌｅｓｆａｌｌｉｎｔｏｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ ｐｏｓｉｔｉｖｅｇｒａｎｕｌｅｓｄｅｆｉｎｅｄｂｙｔｈｅｉｒｃｏｎｔｅｎｔｓｏｆｍｙｅｌｏｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ (ＭＰＯ)ａｎｄｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ ｐｏｓｉｔｉｖｅｇｒａｎｕｌｅｓｗｈｉｃｈｍａｙｂｅｆｕｒｔｈｅｒｓｕｂｄｉｖｉｄｅｄｉｎｔｏｓｐｅｃｉｆｉｃｇｒａｎｕｌｅｓａｎｄｇｅｌａｔｉｎ…     

尿路感染患者血清和尿sIl—2R,IL—8水平的变化及其意义

该研究应用ＥＬＩＳＡ双抗夹心法对悄路感染（ＵＴＩ）患者血清和尿ｓＩＬ－２Ｒ，ＩＬ－８水平进行了测定。结果表明：ＵＴＩ患者尿ＩＬ－８浓度与尿白细胞数量呈显著正相关（ｎ＝４６，ｒｓ＝０．４０１，Ｐ〈０．０１），肾盂肾炎患才尿ＩＬ－８浓度显著高于血清浓度（Ｐ〈０．０５），提示尿ＩＬ－８主要由肾脏局部产生且可有是中性粒细胞自血流游放尿中的重要因素之一；膀胱炎患者血清和尿ｓＩＬ－２Ｒ水平显著低于健康人（Ｐ〉     

恶性肿瘤患者外周血T淋巴细胞亚群与血清sIL—2R水平的相？…

目的：探讨恶性肿瘤患者外周血Ｔ淋巴细胞亚群与血清ｓＩＬ－２Ｒ水平的关系。方法：采用双抗体夹心ＥＬＩＳＡ法对６５例恶性肿瘤患者及正常人外周血Ｔ淋巴细胞亚群和血清可溶性白细胞介素２受体（ｓＩＬ－２Ｒ）水平进行检测。结果：恶性肿瘤患者外周血Ｔ淋巴细胞亚群ＣＤ３、ＣＤ４及ＣＤ４／ＣＤ８比值均显著低于正常人,ＣＤ８与ｓＩＬ－２Ｒ水平则显著高于正常人。经相关分析,Ｔ细胞亚群中ＣＤ３、ＣＤ４及ＣＤ４／ＣＤ８比值     

透析膜和内毒素对单个核细胞白细胞介素—1受体拮抗物产生的协同作用

目的：研究不同透析膜和内毒素对尿毒素对尿毒症患者外周血单个核细胞（PBMC）白细胞介素－1受体拮抗物（IL－1Ra）基因转录和IL－1Ra合成的影响。方法：细胞和不同透析膜孵育后采用细胞原位杂交检测mRNA水平,PBMC培养后采用酶联免疫吸附试验法测定细胞IL－1Ra水平。结果：不同析膜孵育后的PBMC在未用内毒素刺激情况下IL－1RamRNA水平有显著判别,但IL－1Ra合成量无差异。其中正常人仅有极微量IL－1Ra合成;内毒素刺激下的PBMC IL－1Ra合成明显明显高于未刺激组,与铜仿膜孵育后的合成量明显高于聚砜膜孵育后和对照组。结论：内毒素和透析膜对正常人和尿毒症患者PBMC的IL－1Ra的合成协同作用。     

~(99)Tc-MDP对类风湿性关节炎患者外周血单核细胞产生细胞因子的影响

目的 :探讨“云克”(99Tc MDP)治疗类风湿性关节炎 (RA)的免疫机制。方法 :采用ELISA双抗体夹心法 ,观察“云克”体外对RA患者外周血单核细胞 (PBMC)产生白介素 1(IL 1)和可溶性白介素 2受体 (sIL 2R)的影响。结果 :“云克”有抑制RA患者IL 1的分泌及细菌脂多糖 (LPS)的促分泌作用 ,并对可溶性白介素 2受体的自发分泌及植物血素 (PHA)诱导分泌均有抑制作用。结论 :“云克”对RA的治疗机制可能与其降低IL 1和sIL 2R的作用有关     

白血病患者血T淋巴细胞亚群和sIL-2R水平的变化

目的：探讨白血病患者外周血Ｔ淋巴细胞亚群和可溶性白细胞介素－２受体（ｓＩＬ－２Ｒ）的变化。方法：分别应用单克隆抗体技术和酶联吸附试验检测３１例白血病患者外周血Ｔ淋巴细胞亚群和ｓＩＬ－２Ｒ水平,并以３５名正常人作对照。结果：白血病患者外周血ＣＤ３＾＋、ＣＤ４＾＋细胞数低于正常人,ＣＤ８＾＋细胞数高于正常人（Ｐ〈０．０１）,ＣＤ４＾＋／ＣＤ８＾＋比值下降（Ｐ〈０．０１）。血清ｓＩＬ－２Ｒ活性明显高于正     

乳酸盐与丙酮酸盐腹膜透析液对外周血中性粒细胞凋亡的影响

目的 :比较研究乳酸盐与丙酮酸盐腹膜透析 (腹透 )液对外周血中性粒细胞 (PMN)凋亡以及吞噬和杀菌能力的影响。方法 :含有不同浓度 (1.5 % ,4.2 5 % )葡萄糖的乳酸盐或丙酮酸盐腹透液 ,与外周血 PMN孵育不同时间 (10 ,30 m in)后 ,利用流式细胞术及荧光素标记的 Annexin- 检测细胞凋亡情况 ;通过菌落计数方法观察 PMN对金黄色葡萄球菌 (金葡菌 )吞噬和杀菌功能的改变 ,分别以细胞外和细胞内活菌下降的百分数表示。 结果 :PMN与 1.5 %乳酸盐腹透液 (p H6 .7)孵育 10min,收集细胞 ,培养 72 h后细胞凋亡率与正常对照组比较无差异 ,而孵育时间延长至 30 min后 ,培养的 PMN在 72 h凋亡率[(6 6 .90± 2 .35 ) % ]明显增加 ,与 4.2 5 %乳酸盐腹透液 (p H7.2 ) 10 m in组结果相似 [(6 5 .36± 2 .6 0 ) % ];1.5 %葡萄糖乳酸盐腹透孵育 30 m in及 4.2 5 %葡萄糖乳酸盐腹透液孵育 10 m in组 ,PMN的吞噬及杀菌功能均较对照组显著降低。无论是含1.5 %还是 4.2 5 %葡萄糖的丙酮酸盐腹透液 ,PMN凋亡率均与对照组无显著差异 ;对 PMN吞噬和杀金葡菌功能也无显著影响。 结论 :丙酮酸盐腹透液对外周血 PMN凋亡以及吞噬和杀菌功能的影响均较小 ,具有较好的临床应用前景