负压吸引对兔眼视网膜和视神经的影响

探讨准分子激光原位角膜磨镶术(1aser in situ keratomileusis,LASIK)中眼压急剧升高对视网膜和视神经的影响。方法将LASIK术中使用的巩膜负压环置于兔眼,瞬时压力达到65mm Hg(1mm Hg=0.133kPa),分别持续30s、1min及3min,在光镜和电镜下观察负压吸引后即刻摘除的(即刻组)和2周后摘除的(修复组)兔眼视神经和视网膜组织,并与正常兔眼(对照组)进行比较。结果负压吸引30s,视神经和视网膜细胞改变轻微;负压吸引1min,部分视神经纤维改变,视网膜视细胞出现异常;负压吸引3min,神经纤维和视网膜视细胞结构明显异常。即刻组和修复组组织改变基本相同。结论LASIK术中眼压急剧升高,可导致视网膜和视神经细胞的亚细胞结构改变,且持续时间越长改变越明显。     

LASIK术中负压吸引时间对猪角膜瓣厚度和直径的影响

目的:探讨准分子激光原位角膜磨镶术(LASIK)术中负压吸引时间对角膜瓣厚度和直径的影响。方法:根据负压吸引时间的不同将60只猪眼随机分为3组:组1(10s)、组2(20s)和组3(30s),使用法国产MoriaM2型角膜板层刀分别吸引角膜10s,20s和30s后切削角膜瓣,利用角膜超声测厚仪测量角膜瓣厚度,应用镀铬游标卡尺测量角膜瓣直径。结果:组1、2和3角膜瓣厚度分别为146.05±13.46,157.35±18.95和169.25±21.02μm,各组间比较有显著性差异(P=0.001)。各组的平均角膜瓣直径分别为8.63±0·19mm(组1,10s),8.89±0.24mm(组2,20s)和9.06±0·18mm(组3,30s)。各组间比较有显著性差异(P<0·01)。结论:LASIK术中随着负压吸引时间的延长,角膜瓣厚度和直径均增加。     

阿魏酸钠对兔实验性高眼压视网膜缺血-再灌注损伤的保护作用

目的 探讨阿魏酸钠(sodium ferlate,SF)对实验性高眼压视网膜缺血-再灌注(retinal ischemic reperfusion,RIR)损伤的保护作用及机制,方法采用眼内灌注法,前房灌注生理盐水建立RIR损伤模型32只新西兰大白兔随机分为SF治疗组、生理盐水对照组,每组16兔.2组于再灌注后立即按50 mg·kg-1体质量耳缘静脉推注25 g·L-1SF和生理盐水,每隔24 h推注相同量的药物和生理盐水.每组分别于推注后24 h、72 h空气栓塞法处死动物,用硫代巴比妥分光光度法(TBA)测定丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量,黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性结果再灌注24 h后,对照组视网膜MDA含量为(3.434±1.003)μmol·g-1,较治疗组(1.394±0.564)μmol·g-1升高(P＜0.05),SOD含量为(70.734±1.329)U·mg-1,低于治疗组(98.892±8.979)U·mg-1(P＜0.05);再灌注72 h后,对照组视网膜MDA含量为(2.639±1.412)μmol·g-1,高于治疗组(1.459±1.552)μmol·g-1(P＜0.05),SOD含量为(113.169±0.072)U·mg-1,低于治疗组(139.222±10.066)U·mg-1(P＜0.05)结论 SF注射液可通过降低视网膜组织MDA含量,提高SOD活性,对新西兰大白兔实验性高眼压RIR损伤起一定的保护作用.     

糖尿病大鼠视网膜氧化应激损伤及葛根素的干预作用

目的研究糖尿病大鼠视网膜氧化应激指标的变化及葛根素对其的干预作用。方法 40只清结级雄性SD大鼠,其中构建糖尿病大鼠模型30只,随机分为糖尿病模型组、葛根素低剂量组和葛根素高剂量组,每组10只;另设一正常对照组(10只鼠)。造模成功后,葛根素低剂量组与葛根素高剂量组分别给予葛根素250mg·kg-1·d-1和500mg·kg-1·d-1,正常对照组与糖尿病模型组每日给予3mL灭菌生理盐水。均经食道灌胃给药,每日1次,连续4周。4周后测定各组鼠血清及视网膜中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(maleic dialdehyde,MDA)、总抗氧化能力(total antioxidant capability,T-AOC)的变化,免疫组织化学法检测视网膜组织8-羟-2’-脱氧鸟苷(8-hydroxy-2’-deoxyguanosine,8-OHdG)和聚腺苷二磷酸核糖聚合酶[poly(ADP-ribose)polymerase,PARP]活性,Western blot法检测p38MAPK蛋白表达。结果造模后4周,与正常对照组相比,糖尿病模型组大鼠血清与视网膜组织中SOD活性明显下降,分别为(83.20±5.51)U·mL-1、(122.96±10.98)U·mg-1;MDA含量显著增高,分别为(29.58±0.41)μmol·L-1、(8.87±0.49)μmol·g-1;视网膜中T-AOC含量明显下降,为(1.72±0.31)U·mg-1(均为P<0.05)。gn糖尿病模型组相比,葛根素低剂量组血清SOD活性升高,为(97.80±1.75)U·mL-1(P<0.05),但其他指标变化不大(均为P>0.05)。与糖尿病模型组相比,葛根素高剂量组血清与视网膜组织中SOD活性升高,分别为(114.17±4.02)U·mL-1、(146.48±8.04)U·mg-1;视网膜TAOC含量升高,为(2.12±0.37)U·mg-1;血清和视网膜MDA含量降低,分别为(20.73±1.51)μmol·L-1、(5.73±0.76)μmol·g-1(均为P<0.05)。正常对照组大鼠视网膜中8-OHdG、PARP阳性细胞极少,糖尿病模型组表达较正常对照组明显增加,葛根素干预后表达明显减弱,葛根素高剂量组作用更显著。Western blot结果显示:各组大鼠视网膜中总p38MAPK表达无明显差异(P>0.05),但糖尿病模型组视网膜p38MAPK的磷酸化程度较正常对照组显著增强,高剂量葛根素干预后p38MAPK的磷酸化程度明显下降(P<0.05)。结论糖尿病大鼠存在视网膜的氧化应激损伤,葛根素可减轻该损伤作用,其机制可能与p38MAPK信号途径有关。     

腺病毒介导BDNF基因转染对大鼠视神经损伤后视网膜中SOD、MDA水平的影响

目的:腺病毒介导脑源性神经营养因子(Brain-derived neurotrophic factor,BDNF)转染对大鼠视神经损伤后视网膜中丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)水平的影响。方法:建立大鼠视神经夹挫伤模型,随机分为BDNF腺病毒组、lac-Z腺病毒组和生理盐水组,将药物经玻璃体途径注射入大鼠眼内,并设正常大鼠对照。观察各组不同时间视网膜组织中MDA和SOD的含量变化。结果:正常SD大鼠视网膜组织MDA的含量为(5.21±1.32)nmol/ml,SOD的含量为(1751.57±180.55)U/g·pro。大鼠视神经夹伤后MDA含量升高,SOD含量降低。BDNF腺病毒组视网膜MDA含量为(6.67±1.36)nmol/ml(3d)、(5.72±1.66)nmol/ml(7d)、(5.54±1.03)nmol/ml(14d)and(5.33±1.45)nmol/ml(21d),低于两损伤对照组,而SOD含量为(158.55±173.39)U/g·pro(3d)、(161.24±184.57)U/g·pro(7d)、(1694.49±184.30)U/g·pro(14d)和(1721.75±179.86)U/g·pro(21d),高于两损伤对照组。在3 d、1 wk和2 wk时有显著统计学差异(P<0.05),两对照组间在各时间点均无统计学差异。结论:腺病毒介导BDNF转染对视神经损伤后视网膜损伤具有早期防护作用,其作用可能与BDNF刺激局部的SOD含量增加有关。眼科学报 2002;18:249-252.     

LASIK术中瞬时高眼压对兔视网膜功能影响的研究

目的 探讨LASIK术中负压吸引致瞬时高眼压对兔视网膜功能的影响.方法 32只健康新西兰大耳白兔随机分为正常对照组、实验对照组、负压吸引20 s组和3 min组.实验对照组只进行激光治疗,负压吸引20 s组和负压吸引3 min组先分别用负压发生器吸引兔眼角巩膜缘20 s及3 min.分别于术后不同修复期通过闪光-视觉诱发电位和闪光-视网膜电图观察视网膜视神经功能的变化,并与正常对照组进行比较.结果 正常对照组和实验对照组左右眼的视网膜电图(electroretinogram,ERG)a波波幅和b波波幅比较差异无统计学意义(P＞0.05).与正常对照组相比,负压吸引20 s组和3 min组术后30 min～7 d各时间点ERG的b波振幅相比,差异有统计学意义(F=5.18,P＜0.05),负压吸引20 s组修复10 min ERG b波波幅为(112.01±11.08)μV较正常对照组(84.96±13.48)μV升高(P＜0.05),修复20 min逐渐降低,为(94.51±14.43)μV;负压吸引3 min组修复10 min ERG b波波幅为(55.89±9.46)μV较正常对照组明显降低(P＜0.05),修复20 min ERG b波波幅逐渐降低为(67.73±16.42)μV,修复30 min时兔眼ERG b波波幅仍低,与正常相比差异有统计学意义(P＜0.05).随着负压吸引时间的延长,各时间点ERG的b波振幅降低,随着修复时间的延长,ERG的b波振幅逐渐恢复正常.而ERG的a波波幅和潜伏期、视觉诱发电位各波波幅和潜伏期均无差异.结论 LASIK术中负压吸引引起的眼压急剧升高,不会影响视网膜的功能.     

两种糖尿病大鼠模型血-视网膜屏障对EB通透性的比较

目的 探讨2种糖尿病大鼠模型血-视网膜屏障对伊凡思蓝(Evans-Blue,EB)通透性的改变.方法 对照组及1周、4周和16周时Sprague-Dawley(SD)和Brown-Norway(BN)糖尿病大鼠,EB 45 mg·lg-1颈静脉注入,分别检测视网膜中EB含量.结果 对照组及1周、4周和16周时SD和BN糖尿病大鼠视网膜标准化EB含量分别为(12.24±3.11)ng·mg-1、(21.68±4.41)ng·mg-1、(21.78±3.17)ng·mg-1、(23.56±4.05)ng·mg1和(13.22±3.59)ng·mg-1、(23.41±4.47)ng·mg1、(26.40±5.00)ng·mg-1、(31.01±4.46)ng·mg-1,糖尿病大鼠视网膜标准化EB含量明显高于对照组,其差异均有显著性(P＜0.05).2种不同种系大鼠相比,BN糖尿病大鼠1周、4周和16周时视网膜标准化EB含量均显著高于SD大鼠(P＜0.05),而对照组差异无显著性(P＞0.05).结论 通过检测视网膜内EB含量,可以比较精确的发现早期糖尿病大鼠视网膜病变中血-视网膜通透性的改变.不同大鼠种系的差异性决定了其对STZ诱导的糖尿病大鼠视网膜通透性改变的不同.     

LASIK术中瞬时高眼压对视网膜神经节细胞凋亡的影响

目的 研究准分子激光原位角膜磨镶术(laser in situ keratomileusis,LASIK)术中瞬时高眼压对视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGC)凋亡的影响.方法 40只健康新西兰大耳白兔随机分为正常对照组、实验对照组、负压吸引20 s、45 s和2 min组,每组各8只.正常对照组不做处理,实验对照组只进行激光治疗.负压吸引20 s、45 s和2min 组先用负压发生器吸引兔眼角巩膜缘,负压吸引分别持续20 s、45 8及2 min,分别于术后不同时间通过透射电镜和光镜观察RGC凋亡的存在,利用TUNEL法检测RGC的凋亡,并与正常对照组进行比较.结果 实验对照组和各负压吸引组之间TUNEL标记的凋亡RGC数进行方差分析,各组间比较凋亡RGC数差异均无统计学意义(P均＞0.05).光镜下负压吸引2 min组0 d时偶见染色阳性RGC,7 d时可见神经节细胞层少量的TUNEL阳性RGC,核内出现棕黄色颗粒.透射电镜下观察负压吸引20 s和45 s组各时间点视神经和视网膜细胞改变轻微,未见凋亡细胞;2 min组术后0d、7 d、14 d神经纤维和视网膜结构明显异常,未见凋亡细胞,至术后28 d时恢复正常.结论 LASIK术中常规负压吸引时间越长,视网膜结构损伤改变越明显.     

结膜下注射自由基清除剂Edaravone治疗大鼠视网膜静脉阻塞

目的 探讨自由基清除剂Edaravone对大鼠视网膜静脉阻塞后脂质过氧化反应和炎症因子的抑制作用.方法 利用孟加拉玫瑰红联合氩激光制备大鼠视网膜静脉阻塞模型并经眼底血管荧光造影确认.将眼底血管荧光造影显示完全阻塞的眼随机分为2组,每组18眼.在激光照射后1 h,治疗组结膜下注射Edaravone 300 μg(0.2 mL),对照组结膜下注射0.2 mL BSS.每天1次,共3～7 d.术后第3天、第7天摘除眼球制备行病理检查和视网膜匀浆,定量测定视网膜组织中丙二醛及白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)的含量.结果 静脉阻塞成功后,阻塞部位远端的视网膜静脉立刻出现淤曲、扩张、动脉变细.阻塞后短时间内即出现渗出性视网膜脱离,并逐渐出现视网膜出血、水肿和玻璃体出血.视网膜静脉阻塞第3天,治疗组和对照组视网膜组织中丙二醛的含量分别为272.50 nmol·g-1和352.65 nmol·g-1(视网膜湿质量,P=0.003 5);第7天分别为217.50nmol·g-1和318.33 nmol·g-1(视网膜湿质量,P=0.017 7).视网膜静脉阻塞第3天,治疗组和对照组视网膜组织中IL-6的含量分别为15.67 ng·g-1和22.67 ng·g-1(视网膜湿质量,P=0.003 7);第7天分别为17.17 ng·g-1和25.50 ng·g-1(视网膜湿质量,P=0.004 8).结论 Edaravone能够抑制视网膜静脉阻塞造成的急性缺血所致的脂质过氧化反应,同时又能抑制炎症因子的产生.因此,Edaravone有望成为新的治疗视网膜静脉阻塞的药物.     

重组腺相关病毒载体介导的人色素上皮衍生因子对糖尿病大鼠血-视网膜屏障的影响

目的 以重组腺相关病毒(recombinant adeno-associated virus,rAAV)栽体介导的人色素上皮衍生因子(human pigment epithelium-derived factor,hPEDF)转染糖尿病大鼠视网膜,观察其对血-视网膜屏障的影响.方法 雄性Wistar大鼠75只应用链脲佐菌素诱导形成糖尿病模型后,随机分为1个月组、3个月组和6个月组,每组各25只.所有大鼠右眼玻璃体内注射rAAV2-cMV-hPEDF作为治疗组,左眼注射rAAV2-CMV-GFP做自身对照.正常大鼠20只右眼假注射,左眼不注射.应用Evans-Blue 测定血-视网膜屏障的渗漏变化,应用Western-blotting测定ICAM-1和Occludin蛋白的表达情况.结果 随着糖尿病病程进展,视网膜渗漏不断增强,视网膜中Evans-Blue含量不断增加,一直持续到6个月达到高峰.各治疗眼组与自身对照眼组相比视网膜渗漏减轻,其中1个月治疗眼组Evans-Blue含量(68.673±24.083)ng·mg-1低于自身对照眼组(93.850 4±24.969)ng·mg-1,二者比较,差异无统计学意义(P>0.05);3个月Evans-Blue含量(46.021±16.091)ng·mg-1及6个月(55.198±25.060)ng·mg-1治疗眼组均显著低于自身对照眼组Evans-Blue含量(102.528 4±39.421)ng·mg-1、(128.225±34.603)ng·mg-1(P<0.05).但各治疗眼组与正常眼注射组相比Evans-Blue含量仍显著增加(均为P<0.05).随糖尿病病程进展,视网膜中ICAM-1蛋白含量不断增加,Occludin蛋白含量不断降低.治疗眼组与自身对照眼组相比,ICAM-1蛋白含量均显著下降(均为P<0.01).3个月及6个月治疗眼组与自身对照眼组相比,Occludin蛋白含量均显著升高(均为P<0.01).糖尿病大鼠视网膜ICAM-1与Occludin蛋白表达呈显著负相关(r=-0.754,P<0.01).结论 rAAV2-CMV-hPEDF玻璃体内注射可增加糖尿病大鼠视网膜Occludin的表达,抑制ICAM-1表达,从而减轻糖尿病大鼠视网膜血管的渗漏.