线粒体DNA3243、3316点突变与中国云南2型糖尿病的关系（摘要）

目的：研究中国云南2型糖尿病人群中线粒体水．NA^Leu（UUR）基因nt3243A／G突变和ND-1基因nt3316G／A突变的发生频率及其与2型糖尿病的相关性．寻求准确、快速、简易的临床糖尿病基因诊断技术．对象及方法：随机选择225例中国云南2型糖尿病患者和195例无糖尿病家族史的健康对照者作为研究对象．通过聚合酶链反应及限制性片断长度多态性分析（PCR-RFLP）检测tRNA^Leu（UUR）基因3243A／G突变和ND-1基因3316G／A突变，并经DNA直接测序确证.     

云南地区2型糖尿病患者线粒体tRNALeu（UUR） 3243 A/G突变的筛查

目的探讨线粒体tRNALeu(UUR)基因3243位点A/G突变在云南地区2型糖尿病(T2DM)患者中的发生率.方法采用聚合酶链反应和限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP)、DNA测序技术,对235例T2DM患者和128例糖耐量正常的健康对照者进行检测.结果在235例T2DM患者及128例对照者中未检出线粒体tRNALeu(UUR)3243 A/G突变.结论线粒体tRNALeu(UUR)基因3243位点A/G突变在云南地区T2DM人群中并不常见,可能不是该地区T2DM的常见遗传易感因素.     

线粒体DNA3316、3394等4个突变位点与2型糖尿病的关系研究

目的:探讨DNA tRNA Leu(UUR)基因及ND-1基因3316 G/A、3394 T/C等4个突变位点与2型糖尿病的关系。方法:对236例海南地区2型糖尿病患者和252例健康对照者进行空腹血糖测定并采用聚合酶链式反应—限制性核酸内切酶片段长度多态性(PCR-RFLP)的分析方法进行mtDNA的3243、3316、3394、和3593共4个位点进行突变筛选,并采用DNA测序方法确证。结果:实验组空腹血糖(9.37±3.01)mmol/L与健康对照组(4.96±0.76)mmol/L差异有统计学意义(P<0.05);实验组检出3316(G→A)突变8例,3394(T→C)突变3例;健康对照组未发现上述突变;突变检测结果与测序一致。两组间3316(G→A)突变率差异有统计学意义(P<0.05)。结论:线粒体DNAtRNALeu(UUR)基因及ND-1基因3316、3394位点的基因突变,尤其是3316位点(G→A)突变可能与某些核基因或环境因素协同促进了2型糖尿病的发生。     

一个线粒体基因突变糖尿病家系的三年随访研究

目的探讨线粒体基因tRNALeu(UUR)m t3243A→G突变糖尿病的临床特征及病情演变。方法回顾性分析一线粒体基因tRNALeu(UUR)m t3243A→G突变糖尿病家系成员共10例,随访3年,观察其临床特点及胰岛功能变化。结果随访3年后tRNALeu(UUR)m t3243A→G突变者体质指数、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)较随访前显著下降,1例出现耳聋症状加重,2例出现了蛋白尿,2例演变为糖尿病,3例进展为糖耐量异常(IGT),其中1例突变阳性者新生1女也为该基因突变阳性。结论线粒体基因tRNALeu(UUR)m t3243A→G突变者是糖尿病的高危人群,易演变为IGT或糖尿病,其临床表现呈一定的异质性。     

线粒体DNA ND4基因12026（A→G）点突变与2型糖尿病相关性研究

目的 研究中国云南2型糖尿病人群线粒体ND4基因ntl2026A→G点突变的发生频率及其与2型糖尿病的相关性.寻求准确、快速、简易的临床糖尿病基因诊断方法.方法 随机选取350例中国云南2型糖尿病患者和225例无糖尿病家族史的健康对照者作为研究对象.通过聚合酶链式反应及限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP)检测线粒体12026A→G点突变.结果 经DNA直接测序确证.结果 350例2型糖尿病患者中12026A→G点突变者11例(3.14%),225例对照者中携带该突变者6例(2.67%),突变发生率在两组间差异尤统计学意义(x2=0.0059,P=0.8064).结论 线粒体ND4基因12026A→G突变可能仪为人群中线粒体基因组的正常多态,不是中国(特别是云南)人群中2型糖尿病的常见致病因.     

线粒体DNA ND1基因G3316A突变与2型糖尿病相关性研究

目的 研究浙江台州地区汉族人群线粒体DNA ND1基因中G3316A突变的发生率与2型糖尿病的相关性.方法 应用聚合酶链反应技术对无血缘关系的270例2型糖尿病患者和185例健康对照者的外周血DNA进行检测.结果 发现10例T2DM患者存在G3316A突变(3.70%),对照组中有1例突变(0.54%),G3316A在两组间比较有显著性差异(P＜0.05).结论 线粒体DNA ND1 G3316A突变可能与浙江台州地区汉族人群2型糖尿病的发生与发展有关.     

线粒体DNA 3243、3316、3394位点突变与精神分裂症相关分析

目的分析线粒体tRNALeu(UUR)基因3243位点及ND1基因3316、3394位点突变对精神分裂症(SZ)发病的影响。方法采用PCR扩增、限制性内切酶消化、琼脂糖凝胶电泳分型检测、DNA测序等方法,对随机抽取的无亲缘关系的250例患者(SZ组)和292例对照组的外周血mtDNA进行3243、3316和3394位点的突变检测。结果在SZ组中发现8例3316G/A突变,对照组中3例,两组相比差异无统计学意义(P=0.138)。在SZ组中发现15例3394T/C突变,对照组中有4例,两组相比差异有统计学意义(P=0.007)。在精神分裂症患者组和对照组中均未发现3243A/G突变。结论 mtDNA3394T/C突变可能与SZ发生有一定关系,mtDNA 3243A/G、3316G/A突变可能与SZ发生无关。     

中国人2型糖尿病人群中线粒体基因tRNAleu~((UUR))nt324 3A→G和ND-1基因nt331 6G→A突变的发生率及其临床特点的研究(英文)

目的　为了解线粒体tRNALeu(UUR) nt32 4 3A G突变和ND 1基因nt3316GA突变在中国人 2型糖尿病人群中的精确发病率及该基因突变所导致的II型糖尿病的临床特征。方法　我们采用PCR RFLP技术对 716例随机抽取的无亲缘关系的 2型糖尿病患者进行了突变的筛查。结果　在 2型糖尿病组中发现 3例 (0 4 % )该基因突变携带者 ,并在先证者一级亲属中又发现 4例携带该突变的2型糖尿病患者。比较mt32 4 3A G突变阳性的 2型糖尿病患者与mt32 4 3A G突变阴性的 2型糖尿病患者的临床特点后发现mt32 4 3A G突变阳性的 2型糖尿病患者具有以下特征 :1) 发病早 (38 0± 10 1vs 5 3 4± 10 0岁 ,P <0 0 0 1) ;2 ) 体重减轻 (BMI,19 5± 2 0vs 2 4 9± 10 9kg/m2 ,P <0 0 0 0 1) ;3) 胰岛素分泌能力下降 (OGTT试验胰岛素曲线下面积 ,2 94 6± 16 47 2vs74 6 9± 6 6 47 7,P <0 0 1)。在 2型糖尿病组中发现ND1基因nt3316G A突变16例 (2 2 % ) ,在 181例正常对照组中发现 5例突变携带者 (2 7% ) ,突变的发生率在两组间无显著性差异。携带mt3316位点G A突变的 2型糖尿病组与无该突变的 2型糖尿病组之间的临床特点亦无显著差异。结论　线粒体tRNALeu(UUR) nt32 4 3A G突变在中国人 2型糖尿病人群中的发病率为 0 4     

2 型糖尿病患者线粒体常见基因突变PCR检测的局限性

目的:研究北京地区汉族人群中线粒体DNA(m itochondrial DNA,m tDNA)多位点突变频率与2型糖尿病之间的相关性。方法:采用直接PCR、PCR-限制性片段长度多态性(restriction fragm ent length polymorph ism,RFLP)、PCR-时相温度梯度凝胶电泳(temporal temperature grad ient gel electrophoresis,TTGE)法筛查m tDNA 4977片段缺失、线粒体tRNALeu(UUR)A3243G突变和m tDNA T14577C突变。结果:在250例2型糖尿病患者及142例健康对照外周血基因组总DNA中,未发现m tDNA 4977缺失、线粒体tRNALeu(UUR)A3243G突变及m tDNA T14577C突变。结论:m tDNA 4977缺失、线粒体tRNALeu(UUR)A3243G突变及m tDNA T14577C突变在外周血中没有检出,采用常规PCR法检测2型糖尿病患者外周血线粒体DNA突变具有较大的局限性。     

云南2型糖尿病350例患者线粒体DNA 12SrRNA基因C1310T突变的检测

目的研究中国云南2型糖尿病人群中线粒体12SrRNA基因C1310T突变的发生频率及其与2型糖尿病的相关性.方法随机选取350例中国云南2型糖尿病患者和225例无糖尿病家族史的健康对照者作为研究对象,通过聚合酶链反应及限制性片段长度多态性分析（PCR-RFLP）检测C1310T突变,并经DNA直接测序确证.结果350例2型糖尿病患者及225例对照者中无1人携带C1310T突变.结论线粒体12SrRNA基因C1310T突变在中国云南2型糖尿病人群中发生频率低,不是该地区人群中2型糖尿病的常见致病因.     

基因芯片筛查糖尿病线粒体基因突变

目的建立一种快速、准确的高通量检测线粒体DNA突变的基因芯片技术,并探讨这些突变与糖尿病的关系。方法以尼龙膜为介质,通过紫外交联固定28个待测突变位点的野生型和突变型探针,并采用该基因芯片对200例2型糖尿病患者和210名健康对照的线粒体tRNA leu（UUR）基因及ND1基因进行筛查,DNA测序进一步确证突变位点,Mfold和Antheprot软件预测变异型基因及蛋白质二级结构。结果成功研制可检测28个突变位点的线粒体DNA芯片,在糖尿病组检出tRNA leu（UUR）基因13290C突变2例（1．0％）,ND1基因突变23例：G3316A突变6例（3．0％）、13394C突变5例（2．5％）、A4164G突变8例（4．0％）,T4216C突变2例（1．0％）,T3593C（0．5％）和A3606G突变各1例（0．5％）;对照组检出G3316A突变1例（0．5％）、A4164G突变5例（2．4％）。这些突变位点的测序结果与基因芯片检测结果一致。两组间仅13394C突变率差异有统计学意义（P=0．027）。G3316A突变导致丙氨酸→苏氨酸,13394C突变导致酪氨酸→组氨酸,13593C突变导致缬氨酸→丙氨酸,T4216C突变导致酪氨酸→组氨酸,A3606G和A4164G突变分别为亮氨酸和蛋氨酸的无意义突变,前4种突变型的ND1蛋白二级结构不同于野生型。结论线粒体DNA芯片是一种快速可靠的高通量基因突变检测方法,ND1基因13394C突变可能参与了线粒体基因缺陷型糖尿病的发病。     

线粒体DNA突变糖尿病的特点

对线粒体DNA突变，尤其是转移核糖核酸亮氨酸tRNA（Leu，UUR）基因nt3243A→G点突变在糖尿病发病机制中的作用作一综述．nt3243A→G点突变常常是导致MIDD（母系遗传糖尿病伴耳聋）、MELAS（线粒体脑肌病、乳酸酸中毒、癫痫样发作综合征）及肾衰的常见病因．由于mtDNA突变影响ATP生成及可改变细胞内线粒体代谢产物的含量，从而可能导致与mtDNA突变有关的特殊类型糖尿病的发生，临床上出现一系列的特殊表现．     

线粒体基因突变所致糖尿病发病机制及治疗进展

对线粒体DNA突变、尤其是转移核糖核酸亮氨酸tRNALeu(UUR)基因nt3243A→G点突变在糖尿病发病机制中的作用进行综述。nt3243A→G点突变常常是导致母系遗传糖尿病伴耳聋、MELAS(线粒体脑肌病、乳酸酸中毒、癫痫样发作综合征)常见病因。由于mtDNA突变影响ATP生成及可改变细胞内线粒体代谢产物的水平,从而可能导致与mtDNA突变有关的特殊类型糖尿病的发生,临床上出现一系列的特殊表现。基于其发病机制的特殊性,其诊断及治疗也有一定的特殊性。     

线粒体DNA3160-3755区域基因突变与2型糖尿病的关系

目的研究线粒体DNA3160-3755区域基因在延边地区2型糖尿病（T2DM）患者中的突变情况,探讨该区域线粒体基因突变与2型糖尿病的关系。方法应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（polymorphismchainreaction-restrictionfragmentlengthpolymorphism,PCR-RFLP）技术和直接测序法对延边地区人群108例正常健康体检者、328例T2DM患者（其中2例合并耳聋）,进行线粒体DNA3160-3755区域基因突变筛查。结果线粒体DNA3316G-A在糖尿病组和正常对照组中的突变率分别为3．7％和3．8％。两组间差异无统计学意义（P〉0．05）;3394T→C在糖尿病组和正常对照组中的突变率分别为7．3％和1．9％,两组间差异有统计学意义（P〈0．05）;在糖尿病组及正常对照组中均未检测到线粒体DNA3243A→G、3593T→C和3714A→G突变。结论线粒体DNA3316G→A突变与延边地区T2DM的发生无关;线粒体DNA3,394T→C突变与延边地区T2DM的发生有关;线粒体DNA3423A→G,3593T→C,3714A→G突变在延边地区T2DM中的发生率为0,提示上述位点基因突变率极低。     

线粒体脑肌病患者骨骼肌mtDNA点突变与发病类型的关系

目的：探讨线粒体脑肌病患者骼肌mtDNA在3243及8344位点的点突变与发病类型的关系,方法：提取5例患者骨骼肌中的总DNA,对2对寡核苷酸为引物行PCR扩增,分别应用BglI和Apal酶酶切后,琼脂糖电泳判定,结果：2例患者nt3243位点出出A→G点突变,座中样发病型（MELAS）和不整红边纤维型9MERRF）各1例,2例MERRF患者nt8344位点出现A→G点突变,其中1例同时存在着3243位点突变,结论：nt3243及nt8344位点突变分别与MELAS和MERRF的发病有关,1例MERRF中层得同时在上述2个位点的突变,这可能与线粒体脑肌病临床表现的多样化有关。     

Prevalence and clinical characteristics of mitochondrial tRNA leu(UUR) mt 3243 A→G and ND-1 gene mt 3316 G→A mutations in Chinese patients with type 2 diabetes

Objective To assess the prevalence of mitochondrial tRNA leu((UUR)) gene mt 3243 A→G mutation and ND-1 gene mt 3316 G→A mutation in Chinese type 2 diabetes. Methods 716 randomly selected, unrelated patients with type 2 diabetes were screened for the mutation with a PCR-RFLP technique.Results Three individuals with mitochondrial tRNA leu((UUR)) gene mt 3243 A→G mutat ion were identified, representing approximately 0.4% of the type 2 patients scr eened.Further screening of first-degree relatives of these 3 patients identi fied another 4 affected carriers.In comparison with type 2 diabetic patients without the mutation, these 7 carriers of the mt3243 mutation had: 1) an earlier diagnosis age of diabetes (38.0±10.1 year vs 53.4±10.0 year, P&lt;0.001 ); 2) lower Body Mass Index (BMI) (19.5±2.0 kg/m(2) vs 24.9±10.9 kg/m(2) , P&lt;0.0001); and 3) lower post-challenge insulin levels (Area under the cu rve of insulin levels during the Oral Glucose Tolerance Test (OGTT), 2946±1647 .2 μIU·ml［-1］ vs 7469±6647.7 μIU·ml［-1］, P&lt;0.01).ND- 1 gene mt 3316 G→A mutation was found in 16 patients with type 2 diabetes (2.2 %) and 5 out 181 controls (2.7%) with normal glucose tolerance.Therefore, th e frequency of the mutation was not different in patients and controls.Moreov er, clinical characteristics such as age of onset of diabetes, BMI, and insulin levels were not different between diabetic patients with the mt 3316 mutation an d those without it.Conclusions In this large cohort of Chinese Type 2 diabetes, the prevalence of mitochondrial tRNA leu((UUR)) gene mt 3243 A→G mutation was 0.4%, and the ND-1 gene mt 3316 G→A mutation is a polymorphism unrelated to diabetes.     

中国人线粒体tRNA~(Leu(UUR))基因突变糖尿病研究

近年非胰岛素依赖型糖尿病(NIDDM)分子遗传学研究的进展之一为发现线粒体基因突变糖尿病。1992年,Van den Ouweland等用分子生物学技术发现第一个线粒体tRNA~(Leu(UUR))基因nt3243 A—G突变糖尿病家系。其临床上呈母系遗传,部分伴神经性耳聋的不典型且病情较重的NIDDM,提示这可能是群体中常见NIDDM和     

线粒体tRNA^Leu（UUR）基因突变糖尿病的研究

目的：了解新发现的糖尿病类型－线粒体tRNA^Leu(UUR)基因－3243A→G突变在中国人糖尿病中的发病情况及临床特征。方法：应用聚合酶链反应（PCR）结合限制性内切酶酶切分析,对厦门地区404例糖尿病（DM）患进行该基因筛查。结果：首次发现线粒体tRNA^Leu(UUR)基因突变糖尿病。结论：该类糖尿病主要发生在2型DM患中,为母系遗传方式,具有一系列的临床特征。     

线粒体基因突变糖尿病

概述线粒体DNA突变,尤其是转移核糖核酸亮氨酸tRNALeu(UUR)基因nt243A→G点突变在糖尿病发病机制中的作用。由于线粒体DNA突变影响ATP生成,改变了细胞内线粒体代谢产物的含量,同时引起核糖体蛋白基因的表达下调,从而导致与线粒体DNA突变有关的特殊类型糖尿病的发生,临床上出现一系列的特殊表现。基于线粒体糖尿病与2型糖尿病病因的不同,对线粒体糖尿病的诊断与治疗也不同。     

线粒体ND1基因nt3434A→G突变与糖尿病关系的研究

目的 探讨线粒体NADH脱氢酶1（ND1）基因nt3434A→G突变与糖尿病的关系。方法 运用PCR-RFLP技术在糖尿病组（216例）和正常对照组（203例）中筛查线粒体ND1基因nt3434A→G突变,并分析其家系的突变特点和临床特征。结果 在糖尿病组中发现1例nt3434A→G突变者,而正常对照组中未发现,两组间突变频率差异无统计学意义。携带nt3434A→G突变的糖尿病患者胰岛素水平稍低,体质量指数低,伴高乳酸血症,家系中其妹和女儿携带nt3434位点突变且伴高乳酸血症,但糖耐量正常。结论 线粒体ND1基因nt3434A→G突变与糖尿病的发病风险增高是否相关值得进一步研究.