抗人VEGF的单克隆抗体对乳腺癌生长及转移的影响

目的用具有中和活性的抗人血管内皮细胞生长因子（ｖａｓｃｕｌａｒｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ，ＶＥＧＦ）单抗进行抑瘤动物实验，探讨ＶＥＧＦ在肿瘤生长及转移中的作用。方法采用杂交瘤技术制备抗ＶＥＧＦ的单抗，经亲和层析纯化单抗，在ＩＶＴ２ＭＡ－８９１津白ＩＩ小鼠自发乳腺癌伴肺转移动物模型中进行实验研究。结果Ｄ７、Ｅ５、Ｇ１、Ｃ５、Ｄ１１及Ｈ５６株单抗都能显著地抑制肿瘤的肺转移，对肺转移灶数的抑制率分别为４４％，４５％，６２％，７０％，７２％和７４％。对肺转移灶大小的抑制率为７９％～１００％。其中Ｄ７、Ｃ５、Ｇ１、Ｄ１１４株单抗也能明显地抑制原发瘤的生长。其抑制率分别为４１％，４６％，５３％和８３％。结论ＶＥＧＦ单抗能阻断肿瘤血管的形成，显著地抑制原发瘤的生长和转移，在肿瘤的治疗中显示出潜在的应用价值。     

乳腺癌治疗靶点及靶向治疗研究新进展

乳腺癌靶向治疗在临床实践中取得了显著的疗效,把乳腺癌的治疗推向了一个前所未有的水平。信号转导干预治疗是针对信号转导通路中发生异常的环节来干预这种不正常的信号转导,从而达到抑制肿瘤生长的目的,主要治疗药物有曲妥珠单抗、拉帕替尼、蛋白激酶C（PKC）-α抑制剂、环氧化酶2（COX-2）抑制剂。表皮生长因子受体（EGFR）靶向治疗的主要药物有吉非替尼和西妥昔单抗,其它的靶点和药物有血管内皮生长因子（VEGF）的靶向治疗（贝伐单抗）、血管生成抑制（阿瓦斯丁）、细胞凋亡（G3139和组蛋白脱乙酰基转移酶抑制剂）和热点靶蛋白（Mr70000）。本文主要讲述了乳腺癌治疗的靶点及靶向治疗研究新进展。乳腺癌分子靶向治疗的优势很多,但还不能替代传统的手术切除和化疗,靶向治疗只是术后辅助治疗的一种重要的手段。     

西妥昔单抗或贝伐单抗联合FOLFIRI方案治疗转移性结直肠癌的研究进展

结直肠癌(colorectal cancer,CRC)在恶性肿瘤中的发病率与死亡率分别高居第三位和第四位。目前,以单克隆抗体为基础的靶向治疗药物已经成为CRC治疗的新策略。西妥昔单抗是以表皮生长因子(epidermal growth factor receptor,EGFR)为靶点,其可竞争性阻断EGFR与配体结合,阻断细胞内下游信号转导途径,从而起到抑制癌细胞增殖,诱导癌细胞凋亡的作用。贝伐单抗则以血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)为靶点,特异性抑制肿瘤组织血管生成,从而抑制肿瘤组织生长和肿瘤细胞血行转移。单抗药物通过联合FOLFIRI(氟尿嘧啶、亚叶酸钙和伊立替康)细胞毒性化疗方案对CRC的治疗有显著疗效。本文主要对西妥昔单抗或贝伐单抗联合FOLFIRI方案治疗转移性结直肠癌的疗效及安全性进行综述。     

肿瘤局部湿热治疗乳腺癌实验动物模型的建立及意义

目的：探讨局部湿热治疗对肿瘤生长的影响及意义。方法：建立Balb／c乳腺癌4T1实验动物模型，并以不同温度和作用时间对肿瘤进行局部湿热处理。结果：结果发现43℃作用35min，每周1次，局部湿热治疗可有效控制肿瘤生长．减少肺转移的发生。结论：局部湿热治疗可以有效抑制肿瘤生长，具有潜在的临床推广应用价值。     

转化生长因子β通过血管生成素样蛋白-4促进乳腺肿瘤肺转移

原发性肿瘤细胞转移至特定的器官是一个非随机化过程。在乳腺癌细胞转移至肺的过程中，乳腺癌微环境中的转化生长因子B（TGFβ）起着关键性作用。TGFβ是一种多功能细胞因子，对于内环境稳态有着关键作用。在正常细胞，TGFβ抑制细胞增殖，控制肿瘤生长；在肿瘤微环境中，缺氧和炎症可诱导TGFβ产生。     

VEGF-C在淋巴管生成及乳腺癌淋巴道转移中的作用

目的： 探讨阻断VEGF-C/Flt-4调控系统对淋巴管生成和乳腺癌淋巴道转移的影响。方法： 体外培养胎牛胸导管内皮细胞，观察VEGF-C和抗Flt-4抗体对淋巴管内皮细胞增殖的影响；设计合成VEGF-C反义脱氧寡核苷酸（ASODN），体外实验观察其对VEGF-C基因表达的影响；建立乳腺癌裸鼠原位移植瘤模型并观察ASODN对肿瘤淋巴管生成及肿瘤生长转移的影响。结果： 加入前列腺癌细胞PC3(高表达VEGF-C)上清后，淋巴管内皮细胞增殖活跃；加入抗Flt-4抗体后各时段细胞计数均明显少于其它各组。体外实验RT-PCR及 Western blotting显示ASODN作用的MCF-7细胞组VEGF-C mRNA及蛋白表达均低于对照组。体内RT-PCR检测表明ASODN组移植瘤VEGF-C mRNA表达明显受抑制；5-Nase-ALPase双重酶组织化学法结果显示ASODN组移植瘤的淋巴管生成明显减少；ASODN组肿瘤生长速度较对照组缓慢，且肿瘤体积、淋巴结转移明显低于对照组。结论： VEGF-C/Flt-4调控系统与乳腺癌组织的淋巴管生成及肿瘤的淋巴道转移密切相关。阻断淋巴管内皮细胞Flt-4表达，可在一定程度上抑制肿瘤细胞诱导的淋巴管内皮细胞增殖；ASODN通过下调乳腺癌VEGF-C的表达，减少肿瘤淋巴管的生成及淋巴结转移。     

乳腺癌的靶向药物治疗

乳腺癌为女性人群中一种常见恶性肿瘤,发病率呈逐年上升及年轻化趋势,严重威胁患者的生命安全,随着分子生物研究的深入,靶向药物治疗已成为目前乳腺癌治疗的主要方向,靶向药物可直接作用于病灶,对正常组织与细胞的损害较小,可显著降低毒副作用。HER2阳性乳腺癌患者以HER2为靶点,常采用曲妥珠单克隆抗体、拉帕替尼治疗,可取得良好疗效,但其不良反应可对治疗效果产生制约作用;还可以血管内皮生长因子（VEGF）为靶点,贝伐单抗、索拉菲尼、舒尼替尼、雷莫卢单抗等均具有显著疗效;长链非编码RNA可作为三阴性乳腺肿瘤的新型靶点,通过β-阻断剂抑制三阴性乳腺肿瘤的生长;此外,HSP、COX-2、PD-1、PD-L1、miRNA亦可作用新型靶点的研究方向。本文就乳腺癌近况、乳腺癌靶向治疗药物、其他新型治疗靶点等内容综述如下。     

E-cadherin与乳腺癌分化程度及其淋巴结转移的关系研究

目的 探讨E-cadherin基因表达在乳腺癌侵袭和转移中的作用。方法 采用原位杂交技术检测30例正常乳腺组织和48例乳腺癌原发肿瘤及其淋巴结转移灶中E-cadherinmRNA表达情况。结果 乳腺癌原发肿瘤组织和淋巴结转移灶中，E-cadherin mRNA阴性表达率（分别为31．3％，46．7％）与正常乳腺组织之间的差异非常显著（P＜0．001）。E-cadherin mRNA表达强度在乳腺癌Ⅰ-Ⅲ级之间及有无淋巴结转移的原发肿瘤之间有显著性差异（P＜0．05）。结论 肿瘤抑制基因E-cadherin是一种有价值的反映乳腺癌恶性程度和预测淋巴结转移的指标。     

美国临床肿瘤学会评出2008年12项癌症防治重大进展

美国临床肿瘤学会（ASCO）评选m了2008年12项明显改善癌症治疗和预防的重大进展： 1西妥昔单抗治疗肺癌 研究发现，对于肿瘤表达表皮生长因子受体的患者，标准化疗联合西妥昔单抗能够使生存率提高达21％.     

小分子抑制剂JQ1抑制小鼠乳腺癌生长及转移

目的探讨FOS相关抗原-1(Fra1)特异性小分子抑制剂JQ1对肿瘤相关巨噬细胞表型以及小鼠乳腺癌生长和转移的影响。方法 CCK8检测JQ1的细胞毒性;Western blot检测RAW264.7细胞Fra1蛋白水平;RT-q PCR和流式细胞术检测JQ1处理巨噬细胞后M1/M2相关表型分子的变化;Transwell细胞迁移实验检测JQ1处理后的RAW264.7细胞对4T1乳腺癌细胞系迁移能力的影响;小鼠荷瘤实验检测JQ1联合紫杉醇对小鼠乳腺癌的治疗效果。结果 JQ1能够抑制巨噬细胞Fra1蛋白表达和向M2型极化,降低巨噬细胞促进乳腺癌细胞迁移的能力(P0.05);JQ1联合紫杉醇治疗明显降低小鼠乳腺癌的原位生长和肺转移(P0.05)。结论 JQ1通过抑制巨噬细胞Fra1蛋白表达来抑制巨噬细胞向M2型极化,降低肿瘤细胞迁移能力,进而减少小鼠乳腺癌肿瘤原位生长和肺转移。     

癌症干细胞的靶点MicroRNA分子-let-7

过去的几年间，干细胞研究已成为了癌症研究中最热门的研究领域之一。然而，在干细胞中，研究较多的并非胚胎干细胞，而是癌症干细胞（cancer stem cell；tumor stem cell；也有译作肿瘤干细胞）。这些突变的细胞，可以无限期地生长，同时还可引发新的肿瘤。癌症干细胞被认为是导致许多（如果不是全部的话）癌症发生的真正诱因。更为可怕的是，化疗或者其他现有的治疗手段在这些持续生长的细胞身上几乎毫无功效。它们的存在也解释了为何肿瘤在治疗后会复发或是转移。因此，越来越多的研究者将快速有效治疗癌症的希望寄托在如何彻底消灭这些干细胞上。然而，事情远远没有想象中的那么简单，因为这些癌症干细胞在肿瘤，即便是大肿瘤中，也是微乎其微，对于它们的研究也因此遇到了巨大障碍。
　　现在，研究者们开发出了一种在小鼠身上大量增殖人类乳腺癌干细胞的方法，并且还发现了一个调控癌症干细胞的遗传开关（genetic switch）。这个调控因子属于一个称作微小RNAs（microRNAs）的分子家族，它可以通过关闭一些特异性的基因，促使干细胞朝分化的方向发育。     

应用"decoy"技术靶向性阻断Stat3对乳腺癌细胞系MDA-MB-231增殖抑制的研究

目的：应用针对核转录信号子和激活子3（Stat3）的诱骗寡核苷酸序列（decoy—ODN）阻断乳腺癌细胞系的增殖及其机制研究。方法：阳离子聚合物介导ODN转染乳腺癌细胞系MDA—MB-231，通过细胞计数检测转染Stat3decoy-ODN及随机序列核苷酸（scrambleODN）后的细胞系增殖能力；流式细胞术（FCM）检测转染后细胞周期变化；荧光显微镜观察荧光标记的decoy—ODN转染效率；RT—PCR及Westernblot法分别检测Stat3下游抗凋亡基因在转录水平和蛋白水平的变化。结果：转染Stat3Decoy—ODN序列后MDA—MB-231细胞的增殖受到了明显抑制（P〈0．05）；Stat3下游基因Bcl—xl、c—myc和CylinD1在转录水平和蛋白表达水平均明显降低。结论：Stat3decoy—ODN通过抑制乳腺癌细胞系JAKs／STAT3通路从而抑制了细胞增殖，提示可以通过诱骗技术阻断肿瘤生长而达到基因治疗目的。     

阻断CLTA-4/PD-1联合化疗药物在肿瘤治疗中的应用

化学药物治疗（化疗）是目前治疗肿瘤最有效的手段之一，但单独应用化学药物存在肿瘤靶向能力差、副作用严重、容易导致肿瘤耐药等弊端。免疫治疗是通过重新启动并维持肿瘤-免疫循环，恢复机体正常抗肿瘤免疫反应，从而控制与清除肿瘤的治疗方法。免疫检查点抑制剂（ICIs）是免疫治疗中的一类常规药物，以抗程序性死亡蛋白1(PD-1)抗体和细胞毒性T淋巴细胞抗原4(CTLA-4)抑制剂为代表。研究者发现通过阻断CLTA-4或PD-1与化疗药物联用，不仅能发挥化疗药物对肿瘤的细胞毒作用，还可通过促进淋巴细胞的增殖与活化、弥补化学治疗抑制机体免疫的弊端、促进并维持记忆T细胞增殖等一系列促进免疫系统发挥作用的方式提高抗肿瘤效果。本文对联合治疗的实验室和临床研究模式，及其作用机制进行综述。     

内皮抑素基因转移对乳腺癌细胞生长影响的体内和离体研究

目的：探讨内皮抑素(ES)基因转移在乳腺癌抗血管新生中的作用。 方法: 通过建立逆转录病毒介导的ES基因转移系统，用ES病毒转染人乳腺癌细胞系MDA-MB-231。以聚合酶链反应（PCR）、MTT法和裸鼠成瘤实验分析ES的生物学特性及其功能。 结果： 脂质体转染与交互感染策略获得ES病毒生产细胞；以ES病毒转染MDA-MB-231细胞后，经PCR分析显示其内有ES基因整合并持续表达，其分泌的ES能明显抑制内皮细胞EA.hy926的增殖(P<0.05)，但对肿瘤细胞的离体生长无明显影响（P>0.05）；裸鼠皮下移植瘤模型表明，ES基因表达可明显抑制MDA-MB-231细胞的生长(P<0.01)；实验组的肿瘤微血管密度（MVD）和血管内皮生长因子(VEGF)表达低于对照组(P<0.05)。 结论: 逆转录病毒载体介导的ES基因在乳腺癌细胞中可有效表达，能明显抑制血管内皮细胞生长，并通过旁分泌方式抑制血管新生，具有显著的抗肿瘤生长的作用。     

抗人血管生长素单链抗体可变区基因的定向克隆及序列分析

血管生长素（ａｎｇｉｏｇｅｎｉｎ，ＡＮＧ）是一种存在于正常人血浆及实体肿瘤组织中的蛋白质，它具有很强的促血管生长作用。大量研究表明：ＡＮＧ与肿瘤的快速生长和转移有密切的关系＾〔１〕。ＡＮＧ单抗可以通过中和ＡＮＧ或阻断ＡＮＧ与血管内皮细胞受体的结合而实现其抑瘤作用＾〔１〕，但传统的杂交瘤技术制约了ＡＮＧ单抗的制备，而基因工程抗体技术具有克隆筛选简捷、抗体制备方便及易进行抗体基因修饰操作等优点。本文通过抗人ＡＮＧ单链抗体可变区基因的定向克隆和序列分析的研究，将为临床提供一种经济有效的新型抗体打下基础。     

通过基因工程的方法使一株人T细胞系分泌嵌合单抗

通过基因工程的方法使一株人Ｔ细胞系分泌嵌合单抗［英］／ＴｓａｎｇＫＹ…／／ＪＩｍｍｕｎｏｔｈｅｒ．－１９９３，１３－１４３～１５２肿瘤的被动免疫治疗主要有两种常用方法：单抗（ＭＡｂｓ）疗法和被动输入免疫效应细胞如ＬＡＫ细胞或肿瘤浸润淋巴细胞（ＴＩＬｓ...     

以血管为靶向的肿瘤显像和治疗的研究进展

血管是肿瘤生长的重要条件，是侵袭、转移的重要途径。与直接以肿瘤细胞为靶点相比，以血管内皮细胞上整合素和酪氨酸酶为靶点的显像和治疗有其独特之处。放射性核素显像及PET可以评价血管抑制剂治疗肿瘤的效果，并对治疗中的患者进行监测。目前以肿瘤血管为靶点的药物主要分为三个方面：①抑制血管内皮细胞生长；②抑制这些血管生成因子的活性；③防止细胞外基质降解。此外，纳米材料在该领域的运用，使有效并选择性地将基因或药物运输到肿瘤血管成为可能。     

凋亡调节蛋白FasL，Fas和P53在乳腺癌的表达及其意义

目的 观察人乳腺癌组织、癌旁相对正常乳腺组织中凋亡调节蛋白FasL，Fas、P53的表达，探讨FasL，Fas及P53与乳腺癌发生发展的关系。方法 收集手术切除的人乳腺癌组织和癌周相对正常乳腺组织，用免疫组织化学方法对21例乳腺癌标本进行检测。结果 乳腺癌组织中Fas蛋白表达的阳性率明显低于癌周正常乳腺组织（P〈0．01），有淋巴结转移者明显低于无淋巴结转移者（P〈0．05）。乳腺癌组织中FasL、P53蛋白表达的阳性率均明显高于癌周正常乳腺组织（P〈0．01），有淋巴结转移者明显高于无淋巴结转移者（P〈0．05）。结论 乳腺癌组织中Fas／FasL表达异常使肿瘤逃脱机体自身免疫攻击，促使肿瘤的发生发展，对预测乳腺癌的预后有重要参考价值。突变型P53在乳腺癌中过表达，可能抑制肿瘤凋亡的发生，促进肿瘤生长。     

基于抗PD-1/PD-L1单抗免疫阻断治疗以及疗效相关标志物的研究进展

肿瘤的免疫疗法是肿瘤治疗的重大突破,基于抗PD-1/PD-L1单抗的肿瘤免疫阻断治疗在临床上取得了越来越广泛的应用。在多种类型肿瘤治疗中,抗PD-1/PD-L1单抗药物在部分患者中获得了持续而明显的效果,多种药物相继上市。文章就抗PD-1/PD-L1单抗免疫阻断治疗以及疗效标志物的研究进展进行综述。     

RNA干扰Slug基因对HCT116细胞裸鼠移植瘤生长及转移的影响

目的：探讨通过靶向RNA干扰（RNA interference,RNAi）抑制Slug基因的表达,观测对荷瘤裸鼠结直肠癌生长及转移的影响。方法：利用结肠癌细胞株HCT116对24只5周龄裸鼠皮下种植,建立结肠癌裸鼠皮下移植瘤模型,设立空白对照组、阴性对照组及实验组三组,每组8只。分别注射生理盐水、阴性对照质粒及慢病毒载体,观察肿瘤生长情况,绘制肿瘤生长曲线,观察各组间肿瘤生长及淋巴结转移的变化,应用免疫组化、qRT-PCR和Western blot检测Slug基因和蛋白表达情况。结果：Slug基因shRNA实验组与空白对照组和阴性对照组相比,瘤体生长减缓,移植瘤质量明显减小（3.08±0.31 vs 7.37±1.18,7.46±1.16,P＜0.01）,Slug蛋白表达明显降低（P＜0.05）;实验组淋巴结阳性率为36.3％（4/11）,与阴性对照组77.8％（14/18）及空白对照组68.4％（13/19）相比较（P＜0.01）。结论：靶向Slug的RNA干扰可以显著抑制结肠癌裸鼠模型的生长、淋巴结转移以及癌组织中Slug基因蛋白的表达,可能成为结肠癌基因治疗的潜在分子靶点。