木犀草素对Aβ25-35损伤大鼠大脑微血管内皮细胞的保护作用

目的：研究木犀草素对Aβ25-35损伤大鼠大脑微血管内皮细胞的保护作用。方法：取3周龄Wistar大鼠制备大脑微血管内皮细胞,经过纯化,将细胞随机分为对照组、Aβ25-35损伤组、0.1、1.0及10μmol·L^-1不同浓度木犀草素实验组。采用MTS法、DCFH-DA染色法、SOD抑制率实验分别检测细胞存活率、细胞内活性氧含量及SOD活力。通过测定跨内皮细胞电阻抗、γ-谷氨酰转肽酶、碱性磷酸酶、TXA2及PGI2稳定代谢产物含量,观察微血管内皮细胞的功能及屏障特性。结果：木犀草素在0.1、1.0及10μmol·L^-1浓度时,可显著提高Aβ25-35作用后微血管内皮细胞存活率,并抑制细胞内活性氧产生,提高细胞内SOD活性。木犀草素亦可改善Aβ25-35作用后微血管内皮细胞的功能和屏障特性,表现为提高跨内皮细胞电阻抗,增加特征性酶含量,缓解TXA2及PGI2分泌失衡。结论：木犀草素对Aβ25-35损伤大鼠大脑微血管内皮细胞具有保护作用。     

木犀草素对H2O2诱导乳鼠心肌细胞损伤的保护作用

目的观察木犀草素(Luteolin)对H2O2诱导乳鼠心肌细胞损伤的保护作用.方法在培养的新生大鼠心肌细胞上建立H2O2损伤模型,观察不同浓度木犀草素(1×10-6、3×10-6、1×10-5mol/L)对乳酸脱氢酶(LDH)活力、超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量的影响.结果与正常组比较,模型组细胞LDH活性及MDA含量升高,SOD活性下降(P＜0.01);与模型组比较,不同浓度的木犀草素可以降低细胞LDH活性及MDA含量,增加SOD活性.结论木犀草素对H2O2诱导的乳鼠心肌细胞损伤有保护作用.     

木犀草素对ICR脾细胞和S180肉瘤细胞双向调节作用的实验研究

目的研究木犀草素对正常ICR小鼠脾细胞和S180肉瘤细胞活力的调节作用。方法木犀草素浓度为50、100、200、400 μmol/L作用于ICR小鼠脾细胞和S180肉瘤细胞后,采用MTT 法检测木犀草素对脾细胞和S180细胞增殖作用的影响;碘化丙啶单染流式检测细胞凋亡情况,流式细胞仪检测细胞内活性氧浓度,羟自由基、DPPH自由基清除实验测定木犀草素清除自由基活性。结果与溶媒对照组比较,200、400 μmol/L 木犀草素作用ICR小鼠脾细胞后细胞活力增加（P<0.05）,100、200、400 μmol/L木犀草素作用小鼠S180肉瘤细胞后细胞活力下降（P<0.01）;200、400 μmol/L木犀草素Sub-G1期脾细胞比例减少（P<0.05）,200、400 μmol/L木犀草素Sub-G1期S180细胞比例增加（P<0.05）。与溶媒对照组比较,50、100、200及400 μmol/L木犀草素作用ICR小鼠脾细胞后内活性氧水平均升高（P<0.05）,不同浓度木犀草素作用S180细胞后内活性氧水平均降低（P<0.05）。木犀草素有对羟自由基及DPPH自由基清除活性的作用,且成一定量效关系。结论木犀草素能促进小鼠脾细胞活力,抑制脾细胞凋亡和抑制S180细胞活力,促进S180细胞凋亡的双向调节作用,具有进一步研究开发价值。     

鱼腥草素对乳鼠心肌细胞肥大及成纤维细胞增殖的影响

目的:研究鱼腥草素对乳鼠离体培养的心肌细胞及成纤维细胞增殖及抗氧化作用的影响。方法:取新生SD乳鼠左心室,采用差速贴壁法分离心肌细胞及成纤维细胞,培养在96孔培养板中,在培养成功的心肌细胞及成纤维细胞培养液中加入异丙肾上腺素(ISO)造模,采用不同浓度的鱼腥草素干预,孵育培养2天,采用MTT法测定成纤维细胞的增殖,采用考马斯亮兰试剂测定心肌细胞中蛋白质含量,并测定其一氧化氮(NO)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的含量。结果:心肌细胞培养液中,10-5mol/L ISO能诱导心肌细胞肥大,SOD及GSH-Px活力明显降低(p<0.05);10-5～10-4mol/L鱼腥草素组蛋白含量则显著降低(p<0.05),SOD活力及GSH-Px均较模型组显著升高(p<0.05);成纤维细胞培养液中,10-5mol/L ISO能诱导成纤维细胞增殖,SOD、NO及GSH-Px含量明显降低(p<0.05);鱼腥草素对成纤维细胞的增殖有抑制作用,对SOD、NO及GSH-Px含量较模型组显著升高(p<0.05)。结论:10-5～10-4mol/L鱼腥草素对ISO诱导的乳鼠心肌细胞肥大及成纤维细胞的增殖有一定对抗作用,其抗心肌肥大作用可能与其抗氧化及影响NO水平有关。     

金银花有效成分木犀草素对UVB辐射致皮肤光老化保护作用研究

目的:研究金银花有效成分木犀草素对UVB辐射致人皮肤光老化保护的作用。方法:采用UVB照射成纤维细胞,MTT法检测照射后的细胞增殖活性,确定光老化人皮肤成纤维细胞模型的UVB照射剂量;将金银花有效成分木犀草素作用于人皮肤成纤维细胞,western-blot法检测细胞中Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白和MMP-1蛋白表达水平。结果:木犀草素在浓度(1、20、40μM)时,对细胞活力没有细胞毒性;木犀草素在浓度(1、20、40μM)促进I型和III型胶原蛋白的表达抑并呈浓度依赖性;浓度依赖性降低MMP-1的蛋白表达。结论:木犀草素能够通过抑制MMP-1基因和蛋白表达从而降低胶原蛋白的分解来保护皮肤,可能成为是一种有效的抗皮肤光老化治疗剂。     

虎杖苷对体外培养乳鼠心肌细胞肥大及成纤维细胞增殖的影响

目的研究虎杖苷对新生乳鼠离体培养心肌细胞和成纤维细胞增殖的影响及其抗氧化作用。方法剪取新生SD大鼠左心室,采用差速贴壁法分离并培养心肌细胞和成纤维细胞,将培养成功的成纤维细胞和心肌细胞均分为5组,即正常对照组、虎杖苷对照组(10-4mol/L)、模型组[10-6mol/L异丙肾上腺素(ISO)]、虎杖苷低浓度组(10-5mol/L+ISO 10-6mol/L)和虎杖苷高浓度组(10-4mol/L+ISO 10-6mol/L),进行相应干预。孵育2天后,采用考马斯亮兰法测定心肌细胞蛋白质含量,并测定其超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性;测定成纤维细胞增殖及其培养液中SOD和GSH-Px及NO浓度。结果与正常对照组比较,模型组可诱导心肌细胞蛋白含量增多,明显降低SOD及GSH-Px活力(P0.05);与模型组比较,虎杖苷高低浓度组心肌细胞蛋白含量明显降低,且SOD及GSH-Px活力明显升高(P0.05);虎杖苷高浓度对GSH-Px活性的升高明显较低浓度强,差异有统计学意义(P0.05)。与正常对照组比较,模型组可诱导成纤维细胞增殖,明显降低SOD及GSH-Px活力和NO含量(P0.05);与模型组比较,虎杖苷高浓度组能抑制成纤维细胞的增殖,显著升高NO含量和SOD及GSH-Px活力(P0.05)。结论虎杖苷对ISO诱导的乳鼠心肌细胞肥大和成纤维细胞增殖有一定对抗作用,其作用机制与其抗氧化作用以及影响NO生成有关。     

木犀草素对Aβ25-35诱导神经元损伤的保护作用

目的:研究木犀草素对β淀粉样肽(Aβ25-35)损伤神经元的保护作用及其机制。方法:从BALB/c乳鼠大脑皮层培养原代神经元,实验设计为对照组,模型组(7μmol·L-1Aβ25-35),不同木犀草素给药治疗组(10~90μmol·L-1),孵育12 h,水溶性四氢唑盐(WST-1)法检测细胞存活率,Hoechst 33258/碘化丙啶(PI)双染检测细胞凋亡,Western blot检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)蛋白的表达,荧光酶标仪检测细胞内活性氧簇(ROS)水平,ELISA法检测细胞上清中白介素(IL)-10和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)。结果:模型组细胞存活率为48.5%,与对照组相比显著降低(P0.05)。10,30,60,90μmol·L-1木犀草素给药组细胞存活率分别为60.8%,62.4%,71.7%,73.6%,选取60μmol·L-1木犀草素为后续实验浓度。60μmol·L-1木犀草素可以明显提高Aβ25-35损伤神经元的细胞活力,由48.5%增至71.7%(P0.01),并且能抑制神经元的凋亡。与模型组相比较,降低凋亡蛋白Caspase-3的过表达(P0.01);降低细胞内ROS,由模型组100.4%降至64.2%(P0.01)。与模型组相比,调节抗炎因子IL-10,给药组IL-10上调至634.8 ng·L-1,下调促炎因子TNF-α至176.7 ng·L-1(P0.01)。结论:木犀草素对Aβ25-35损伤神经元具有保护作用,其机制可能是抑制ROS水平,调节炎症因子从而达到抗凋亡作用。     

木犀草素和异荭草素对Caco-2细胞中α-葡萄糖苷酶及葡萄糖吸收的影响

目的:研究木犀草素和异荭草素对Caco-2细胞α-葡萄糖苷酶的抑制作用及对葡萄糖吸收的影响。方法:取对数生长期的Caco-2细胞,分别加入不同浓度的木犀草素和异荭草素孵育,CCK-8法检测细胞的存活率,酶标仪检测α-葡萄糖苷酶抑制率,RT-PCR法和Western blot法检测Caco-2细胞钠依赖性葡萄糖转运蛋白1(SGLT1)和葡萄糖转运蛋白2(GLUT2)的mRNA和蛋白表达。结果:100μmol/L木犀草素和异荭草素对α葡萄糖苷酶的抑制作用与阿卡波糖差异无统计学意义(P0.05);50、100μmol/L木犀草素和100μmol/L异荭草素能显著抑制SGLT1、GLUT2 mRNA及蛋白表达(P0.05或P0.01)。结论:木犀草素和异荭草素通过抑制Caco-2细胞的α-葡萄糖苷酶和SGLT1、GLUT2的mRNA和蛋白表达来延缓对碳水化合物水解和影响葡萄糖吸收,具有潜在的降血糖作用。在相同浓度下,木犀草素的效果要优于异荭草素。     

基于TLR4/NF-κB 信号通路研究木犀草素对幼鼠急性肺损伤的作用机制

目的研究木犀草素对幼鼠急性肺损伤（ALI）的保护作用,并探究其作用机制。方法将50 只SPF 级 SD 幼鼠随机分为5 组：正常组,模型组,地塞米松组,木犀草素高、低剂量组,每组10 只。除正常组外,其 余各组幼鼠雾化吸入脂多糖（LPS）建立急性肺损伤模型,正常组大鼠雾化吸入等量生理盐水。模型复制前3 d 起及模型复制后1 h,木犀草素高、低剂量组大鼠分别灌胃40、20 mg · kg-1 的木犀草素,地塞米松组于模型复 制前2 h 注射5 mg·kg-1 地塞米松,正常组和模型组大鼠灌胃等量0.5%羧甲基纤维素钠（CMC-Na）。模型复制 后12 h,采用ELISA 法检测血清及肺泡灌洗液（BALF）中白细胞介素1β（IL-1β）、白细胞介素6（IL-6）、肿瘤 坏死因子α（TNF-α）和肺组织超氧化物歧化酶（SOD）活力、丙二醛（MDA）含量;检测大鼠肺组织湿干质量 比（W/D）;HE 染色检测肺组织病理变化;Western Blot 法和qRT-PCR 法检测肺组织Toll 样受体4（TLR4）、核 因子κB（NF-κB）p65 蛋白和mRNA 的表达水平。结果与正常组比较,模型组血清及BALF 中IL-1β、IL-6、 TNF-α 的表达水平明显升高,W/D 值升高,肺组织SOD 活力降低,MDA 含量升高,肺损伤明显,TLR4、 NF-κB p65 蛋白和mRNA 的表达水平增加（P＜0.05）。与模型组比较,木犀草素降低了血清及BALF 中 IL-1β、IL-6、TNF-α 水平和W/D 值,提高了肺组织SOD 活力,降低了MDA 含量,肺损伤得到改善,同时也 降低了肺组织中TLR4、NF-κB p65 蛋白和mRNA 的表达水平（P＜0.05）。结论木犀草素对幼鼠急性肺损伤 具有保护作用,其作用机制与抑制TLR4/NF-κB 信号通路的活化有关。     

木犀草素诱导黑色素瘤细胞凋亡机制的探讨

目的:探讨了木犀草素对酪氨酸酶的抑制作用和诱导黑色素瘤细胞凋亡机制。方法:本文采用酶抑制动力学方法,对木犀草素诱导酪氨酸酶活性降低的机制进行了研究,并结合分子模拟和螯合铜离子实验初步探讨了木犀草素与酪氨酸酶的结合机理,最后进行了黑色素瘤细胞A375的生长抑制试验。结果:木犀草素对酪氨酸酶具有良好的抑制作用(半抑制浓度IC50为51.54±3.42μmol/L);通过螯合铜离子实验发现,木犀草素能够与酪氨酸酶的活性中心铜离子发生结合作用;分子模拟结果表明,木犀草素能够优先结合到酪氨酸酶的活性中心Cu离子附近,并与催化基团His85形成氢键;木犀草素能够明显的诱导A375的凋亡,且细胞中的酪氨酸酶活性和黑色素的合成量降低。结论:木犀草素作为一种酪氨酸酶抑制剂,诱导了酶活性的降低和黑色素瘤的凋亡,对调节黑色素水平起到重要作用。     

银杏内酯B衍生物抗血小板聚集作用和作用机制

目的：探讨银杏内酯B衍生物（XQ）抗血小板聚集的作用及其机制。方法：运用比浊法测定静脉给药后PAF诱导的家兔血小板聚集作用,采用放射配基结合试验观察[3H]PAF与兔血小板受体特异性结合的作用。结果：XQ1.95、3.90、7.80mg·kg^-1对家兔血小板聚集的抑制率分别为29.8%、43.5%和55.2%（P〈0.01）,PAF与家兔血小板膜上PAF受体结合的平衡解离常数（KD）=8.31×10^-5mmol·L^-1,最大结合容量（BMAX）=2.62×10^-9mmol/10^8血小板。XQ和银杏内酯B（GB）可抑制[3H]PAF与兔血小板受体的特异性结合,抑制常数（Ki）分别为8.72×10^-8、7.13×10^-7mol·L^-1。结论：XQ具有抗血小板聚集作用,Ki值接近,其拮抗PAF受体的能力与GB相似。     

润肺汤对肺癌患者放射性肺炎及放射性肺纤维化的影响

目的：探讨润肺汤对肺癌患者放射性肺炎及放射性肺纤维化的影响。方法：80例经病理学诊断为肺癌患者随机平均分为对照组与观察组。2组患者均接受胸部放疗,观察组在放疗过程中服用中药润肺汤,对照组单纯进行放射治疗。比较两组放射性肺炎及放射性肺纤维化发生率、血清TGF—β蛋白与白细胞介素-6（IL-6）的含量。结果：①治疗后,对照组放射性肺炎与放射性肺纤维发生率均显著大于观察组（分别为40．00％、15．00％,25．00％、10．00％）,两组差异具有显著统计学意义（P〈0．01）;②对照组治疗后第2周、第4周及第6周血清TGF—β蛋白含量分别为（0．35±0．10）mg·L^-1、（0．39±0．12）mg·L^-1及（0．37±0．11）mg·L^-1,均显著大于观察组的（0．20±0．09）mg·L^-1、（0．16±0．06）mg·L^-1及（0．11±0．02）mg·L^-1（P〈0．05）;对照组治疗后第2周、第4周及第6周血清IL-6含量分别为（45．52±10．11）ng·L^-1、（42．15±10．08）ng·L^-1及（41．70±9．56）ng·L^-1,均显著大于观察组的（37．12±9．59）ng·L^-1、（31．28±8．52）ng·L^-1及（27．55±7．17）ng·L^-1（P〈0．05）。结论：中药润肺汤用于肺癌患者放疗时,能显著降低放射性肺炎、放射性肺纤维化的发生率。     

纳米金/Nafion/多壁碳纳米管组装电化学传感器测定槐米中芦丁

目的:采用Nafion-多壁碳纳米管(MWNTs)修饰玻碳电极,通过恒电位法在其表面电沉积纳米Au,研制一种新型的、灵敏的芦丁电化学传感器,并用于实际样品中芦丁含量的测定。方法:运用电化学阻抗谱(EIS)和循环伏安法(CV)研究传感器在铁氰化钾-亚铁氰化钾体系中的电化学行为,以探究传感器的电化学性能。采用CV法研究芦丁在传感器表面的电化学行为,并优化影响传感器性能的多个因素。采用差分脉冲伏安法(DPV)对芦丁的含量进行测定。结果:当纳米Au的沉积电位为-0.25 V,沉积时间为20 s,缓冲溶液的pH为3.0,碳纳米管的用量为6μL时,芦丁检测的灵敏度最高。该条件下,芦丁浓度在5.0×10^-9~7.0×10^-7mol·L^-1与还原峰电流呈良好的线性关系,检出限为3.6×10^-9mol·L^-1。结论:该传感器制作简单,导电性能优良,稳定性好,对芦丁的检测具有较高的灵敏高和较低的检出限。将其用于槐米样品中芦丁含量的测定,回收率介于97.6%~104.4%,为芦丁含量的测定提供了一种新的方法,为中药材的质量控制提供了一种新的思路。     

淫羊藿苷干预核因子NF-κB抑制肝星状细胞活化的研究

目的:研究淫羊藿苷(ICA)对肝星状细胞(HSC)活化的作用,及其对HSC活化过程核因子NF-κB蛋白表达及核转位的影响。方法:肝脏原位灌流酶消化、Nycodenz密度梯度离心方法分离培养大鼠HSC,Alamar blue法观察10-4¹0-8M浓度ICA对4 d的HSC增殖的作用;传代培养的HSC分为对照组、转化生长因子β1(transforming growth factorβ1,TGFβ1)刺激组,ICA组,TGFβ1加ICA组,药物孵育24 h后,Alamar blue法检测HSC增殖,real-time PCR及蛋白印记法检测淫羊藿苷对TGFβ1刺激的HSC内Ⅰ型胶原(CollagenⅠ,ColⅠ)、平滑肌肌动蛋白-α(α-smooth muscle actin,α-SMA)、NF-κB表达的变化,高内涵药物筛选系统检测HSC内NF-κB核转位的变化特点。结果:10-410-8M浓度ICA对4 d的HSC增殖的作用;传代培养的HSC分为对照组、转化生长因子β1(transforming growth factorβ1,TGFβ1)刺激组,ICA组,TGFβ1加ICA组,药物孵育24 h后,Alamar blue法检测HSC增殖,real-time PCR及蛋白印记法检测淫羊藿苷对TGFβ1刺激的HSC内Ⅰ型胶原(CollagenⅠ,ColⅠ)、平滑肌肌动蛋白-α(α-smooth muscle actin,α-SMA)、NF-κB表达的变化,高内涵药物筛选系统检测HSC内NF-κB核转位的变化特点。结果:10-4¹0-8M ICA可一定程度抑制HSC的增殖,并且无明显细胞毒作用;10-6M ICA可抑制TGFβ1诱导的HSC增殖,减少HSC内ColⅠmRNA表达和α-SMA蛋白表达的增加,抑制NF-κB的蛋白表达;减少TGFβ1刺激的HSC内NF-κB核转位。结论:淫羊藿苷可抑制肝星状细胞活化,其机制可能与抑制核因子NF-κB蛋白表达及核转位有关。     

番茄红素对牛胸主动脉平滑肌细胞增殖的作用及作用机制

目的：研究番茄红素对牛胸主动脉平滑肌细胞增殖的作用及作用机制。方法：采用组织块法体外培养牛胸主动脉平滑肌细胞,以含10%小牛血清的培养基制备牛胸主动脉平滑肌细胞增殖模型。细胞分为正常组、阴性对照组、模型组及1、0.1和0.01μmol·L^-1三个不同浓度的番茄红素实验组。实验采用MTT法测定牛胸主动脉平滑肌细胞的增殖活性,采用流式细胞术测定细胞周期分布,并测定了细胞内的SOD活性和MDA含量。结果：番茄红素在三个实验浓度下都能显著抑制血管平滑肌细胞的增殖。一方面,番茄红素抑制了G1期细胞进入S期;另一方面,番茄红素在1和0.1μmol·L^-1的浓度下,能明显增强细胞中的SOD活性,同时,在三个给药浓度下,细胞内的MDA含量都显著降低。这些作用都具有浓度依赖性,并且与模型组比较均有统计学差异。结论：番茄红素对牛胸主动脉平滑肌细胞的增殖有抑制作用,并且这种抑制作用可能与它能够抑制细胞进程和它的强抗氧化性能够抑制细胞中的脂质过氧化和氧化型低密度脂蛋白（ox-LDL）的形成有关。它有望成为防治动脉粥样硬化的一种新的药物。     

茯苓酸性多糖分级提取及其抗肿瘤活性比较

目的：以不同碱度分级提取茯苓酸性多糖,进行抗肿瘤活性比较研究,以期探讨茯苓酸性多糖的构效关系。方法：将茯苓饮片分别用70％乙醇和水提取后的药渣,依次用0．1—1．0mol·L^-1 10个梯度氢氧化钠（NaOH）溶液分级提取,得到10种茯苓酸性多糖组分提取物;采用MTT法测定对HepG2肿瘤细胞抑制率,比较10种分级酸性多糖体外抗肿瘤活性大小。结果：0．9和1．0mol·L^-1 NaOH提取的茯苓酸性多糖对肿瘤细胞抑制率最高。结论：茯苓酸性多糖抗肿瘤活性与其酸性强弱相关。     

二氮嗪对软骨细胞氧化损伤的影响

目的:探讨二氮嗪对双氧水诱导的软骨细胞氧化损伤的影响。方法:取SD乳鼠膝关节软骨细胞进行原代培养,将对数生长期的软骨细胞分成5组,分别为阴性对照组(A组),双氧水组(B组),H2O2+0.1μmol·L-1二氮嗪组(C组),H2O2+1.0μmol·L-1二氮嗪组(D组),H2O2+10μmol·L-1二氮嗪组(E组);A组细胞不做特殊处理,B组用0.3 mmol·L-1双氧水在37℃恒温箱内孵育4 h,C、D、E、F组预先分别用0.1μmol·L-1DZ,1.0μmol·L-1DZ,10μmol·L-1DZ,100μmol·L-1在37℃的恒温箱孵育30分钟,PBS洗涤细胞,再用0.3 mmol·L-1双氧水在37℃恒温箱内孵育4小时。分别检测ABCDE各组细胞的细胞活性,ROS的量,细胞凋亡情况。结果:①MTT法检测各组细胞活性,细胞活性率从大至小依次为D组C组E组F组B组;②用活性氧探针DCFH-DA检测各组细胞中的ROS的量,ROS产量从多至少依次为B组E组D组C组A组;③流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况,各组细胞凋亡率由大至小依次为B组E组D组C组。④Western bolt检测各组软骨细胞中HIF-1α蛋白的表达,各组软骨细胞中HIF-1α蛋白表达量依次为C组D组E组A组B组。结论:二氮嗪可降低双氧水诱导的软骨细胞的凋亡率,同时也降低双氧水诱导的软骨细胞ROS的产生,并诱导软骨细胞产生HIF-1α蛋白,可能存在二氮嗪诱导HIF-1α的表达,引起下游相关基因的转录,总体提高软骨细胞对氧化损伤的耐受力,阻碍自由基诱导的软骨细胞的凋亡。     

刺老苞根皮黄酮类化合物对破骨细胞分化的影响

目的：研究刺老苞根皮黄酮类化合物对体外破骨细胞分化的影响。方法：建立由骨保护素配体（RANKL）和巨噬细胞集落刺激因子（M-CSF）共同细胞因子的小鼠破骨细胞骨髓诱导体系,将不同浓度的刺老苞根皮黄酮类化合物作用于破骨细胞。受试细胞分为对照组、刺老苞根皮黄酮类化合物低剂量组（10-8mol·L^-1）、刺老苞根皮黄酮类化合物中剂量组（10^-7mol·L^-1）和刺老苞根皮黄酮类化合物高剂量组（10^-6mol·L^-1）,并设立空白对照组。7天后取细胞玻片进行抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色,观察破骨细胞并计数;测量抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）活性以及破骨细胞表面NF—kB活化受体（RAVK）mRNA表达量。结果：诱导培养的破骨细胞形态特征明显;刺老苞根皮黄酮类化合物中、高剂量组在细胞数量、TRAP活性上与对照组相比有明显统计学差异（P〈0．05）;刺老苞根皮黄酮类化合物各剂量组在（RANK）mRNA表达量上与对照组相比有明显统计学差异（P〈0．05）,且呈量效关系。结论：刺老苞根皮黄酮类化合物可以抑制体外培养的破骨细胞分化。     

木犀草素通过调节上皮钠通道影响肺上皮离子转运

目的探究木犀草素(luteolin,Lut)对H441细胞和小鼠肺组织上皮钠通道(epithelial sodium channels,ENaC)的影响及相关机制。方法通过CCK-8毒性实验检测Lut对H441细胞的最佳处理浓度;将生长状态良好的H441细胞分为空白组、脂多糖(LPS)模型组(10μg·mL^-1)、Lut组(10μmol·L^-1)、Lut+LPS组,将各组进行对应处理后,以Western Blot法检测各组H441细胞α-、γ-ENaC蛋白表达情况;将16只雄性BALB/c小鼠随机分为空白组、LPS模型组(5 mg·kg^-1)、Lut组(20 mg·kg^-1)、Lut+LPS组,其中LPS模型组和Lut+LPS组用LPS复制急性肺损伤(acute lung injury,ALI)模型,模型复制前、后12 h Lut组及Lut+LPS组给予腹腔注射Lut治疗,模型复制24 h后,处死小鼠,取小鼠肺组织及血清,应用组织切片HE染色技术观测ALI小鼠肺组织病理变化以及Lut对其的治疗作用;以Western Blot法检测各组α-、γ-ENaC蛋白在小鼠肺组织中的表达;用ELISA技术检测各组小鼠血清中环磷酸鸟苷(cGMP)蛋白表达的变化。结果CCK-8实验结果表明,与空白组相比,5、10μmol·L^-1Lut能促进H441细胞增殖(P<0.05),但当Lut浓度达到25μmol·L^-1后,Lut抑制H441细胞增殖(P<0.01)。组织切片HE染色结果说明,LPS诱导小鼠ALI模型复制成功,Lut能改善ALI模型小鼠肺组织病理变化。Western Blot实验结果表明,与空白组比较,模型组的H441细胞以及小鼠肺组织α-、γ-ENaC蛋白表达均下降(P<0.01);与模型组比较,Lut+LPS组的H441细胞及小鼠肺组织α-、γ-ENaC蛋白表达水平升高(P<0.01)。ELISA结果表明,与空白组比较,LPS能降低小鼠血清中cGMP水平(P<0.01);与模型组比较,Lut+LPS组小鼠血清中cGMP表达水平升高(P<0.01)。结论木犀草素能通过提高急性肺损伤中肺ENaC蛋白表达来调节肺上皮离子转运,其机制可能与调节c GMP水平有关。