骨碎补总黄酮对去卵巢大鼠基因水平的影响

目的:应用cDNA array技术分析骨碎补总黄酮对去卵巢大鼠基因水平的影响。方法:制作去卵巢大鼠模型,24周后,活杀动物,腹主动脉取血6 mL,并取出脊髓4锄,抽提totalRNA,分离mRNA,进行检测。结果:空白对照组血样与模型组的差异为70个基因,空白对照组与骨碎补总黄酮组的差异为9个基因。骨碎补总黄酮灌服后大鼠模型基因过度表达基本恢复正常。该实验cDNA array分析中脊髓基因基本无差异。结论:骨碎补总黄酮灌服6 个月后大鼠模型基因过度表达能基本恢复正常。表明骨碎补总黄酮对去卵巢大鼠基因表达水平有一定的影响。     

骨碎补总黄酮治疗骨质疏松症作用机理实验研究进展

随着社会人口的老龄化,具有人体衰老特征的骨质疏松症的发病率越来越高,如何进行防治已成为当今医学领域研究的热点。从血生化、生物力学、形态学、细胞生物学、分子生物学等多角度说明骨碎补总黄酮对骨质疏松症的药理作用,从科学的角度探究其治疗机制,为该药临床推广应用提供一定的佐证。     

骨碎补总黄酮对悬尾实验性骨质疏松模型大鼠骨密度及BMP-2mRNA的影响

目的:探讨骨碎补总黄酮对悬尾实验性骨质疏松模型大鼠骨密度(BMD)及骨形成蛋白(BMP-2mRNA的影响。方法:将48只6个月龄SD大鼠随机分为中药组、西药组、阴性对照组和空白对照组,每组12只。中药组予悬尾、骨碎补总黄酮灌胃(6.75 mg/mL);西药组予悬尾、阿仑膦酸钠灌胃(0.09 mg/mL);阴性对照组予悬尾、饮用水灌胃(1 mL/100g);空白对照组自由活动,持续灌胃28 d。采用双能X线检测大鼠的BMD,采用RT-PCR法检测骨组织BMP-2 mRNA表达情况。结果:中药组、西药组、阴性对照组大鼠骨密度及BMP-2 mRNA表达均低于空白对照组,差异均有统计学意义(P0.05);中药组和西药组大鼠骨密度及BMP-2 mRNA表达高于阴性对照组,差异均有统计学意义(P0.05);中药组与西药组比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论:骨碎补总黄酮能上调悬尾实验性骨质疏松模型大鼠BMP-2m RNA的表达,提高大鼠骨密度。     

骨碎补总黄酮对去卵巢大鼠骨密度和细胞因子IL-6、IL-4、TNFα水平的影响

目的:通过去卵巢大鼠骨质疏松模型,研究骨碎补总黄酮对骨密度和血清IL-6、IL-4、TNFα水平的影响.方法:采用X线骨密度测量仪测定大鼠股骨、腰椎骨密度;应用放免法,通过自动酶免分析仪测定血清IL-6、IL-4、TNFα水平,在550nm光下读取OD值,应用标准曲线计算含量.结果:骨碎补总黄酮能显著提高大鼠股骨、腰椎骨密度,作用明显优于骨松宝对照组.骨碎补总黄酮能调节细胞因子IL-6、IL-4、TNFα的水平,其中中剂量组IL-6、TNFα较模型组明显降低,骨碎补总黄酮三个剂量组和阳性对照组IL-4含量明显高于模型组.结论:骨碎补总黄酮能明显提高去卵巢大鼠的骨密度,对血清TNFα、IL-6水平有抑制作用,对IL-4分泌有促进作用.     

骨碎补总黄酮治疗老年性骨质疏松症（低转换型）生命质量的评价

目的从生命质量角度评价骨碎补总黄酮治疗老年性骨质疏松症的效果。方法选择老年性骨质疏松症（低转换型）者70例。采用随机对照的方法,分为治疗组（口服骨碎补总黄酮）36例,对照组（口服钙尔奇D）34例,依据对腰背痛及腰痛综合评分进行动态观察;依据＂疼痛VAS线段分级法＂对腰背痛进行量化动态观察;依据＂Barthel指数评定法＂对老年性骨质疏松症日常生活活动能力（ADL）进行观察,评价骨碎补总黄酮治疗老年性骨质疏松症的临床效果。结果 ＂疼痛六点行为评分法（BRS-6）＂观察显示,治疗前患者的腰背痛及腰痛多在Ⅲ～Ⅴ级之间,疼痛无法忽视,对日常生活有一定的影响。运用骨碎补总黄酮治疗3个月后疼痛分级多降至Ⅰ～Ⅱ级,自觉疼痛基本消失。＂疼痛VAS线段分级法＂观察显示,治疗前静止时腰背痛、久坐时腰背痛、步行时腰背痛均呈现中度疼痛,翻身时腰背痛、起身时腰背痛、弯腰时腰背痛、腰背压痛与叩击痛多表现重度疼痛,而以弯腰时腰背痛、腰背叩击痛尤为显著,部分病人腰背痛对睡眠会有一定影响。运用骨碎补总黄酮治疗3个月后,各种行为方式引起的腰背痛均有不同程度的改善。＂Barthel指数评定法＂对日常生活活动能力（ADL）进行观察显示：治疗前多数病人Barthel指数评分为60～40分,表现中度残疾,有功能障碍,生活需要帮助;治疗3个月后积分可达到90分以上,生活基本自理,生活独立性有一定程度的改善,生活质量有很大提高。结论骨碎补总黄酮能够全面提高老年性骨质疏松症患者的生命质量,缓解腰背痛,提升独立性生活水准。     

骨碎补总黄酮的抗膝骨关节炎作用

目的：观察骨碎补总黄酮抗膝骨关节炎的作用．方法：兔膝关节腔内注入木瓜蛋白酶造成免膝骨关节炎模型；结扎大鼠双侧股静脉造成大鼠膝骨关节炎模型，结果：兔和大鼠膝骨关节炎实验模型中，骨碎补总黄酮减轻软骨病变，显著降低Mankin法软骨积分。病理检测结果表明骨碎补总黄酮组形态明显优于模型对照组。扫描电镜观察表明，骨碎补总黄酮组大鼠软骨表面光滑，似覆盖一层无定形物质，较模型对照组有明显的改善。结论：骨碎补总黄酮具有较强的抗膝骨关节炎作用.     

微波炮制对骨碎补中总黄酮及浸出物含量的影响

目的:考察不同炮制方法对骨碎补中有效成分总黄酮及水溶性浸出物含量的影响.方法:用聚酰胺层析-紫外分光光度法测定骨碎补不同炮制品中总黄酮含量;用浸提法测定浸出物的含量.结果:骨碎补经炮制去毛后可以提高总黄酮及浸出物的含量;经砂烫、恒温烘烤及微波炮制后并不影响总黄酮及浸出物的含量.结论:微波法优于其他方法.     

补骨脂中组织蛋白酶K抑制剂的虚拟筛选

目的:利用基于结构的虚拟筛选方法寻找中药补骨脂中组织蛋白酶K(Cathepsin K)的抑制剂。方法:采用DOCK6.0软件,将组织蛋白酶K(PDB代码:3KWZ)三维结构的活性位点和补骨脂中化合物进行对接。结果:补骨脂中补骨脂色烯查耳酮、双羟异补骨脂定、补骨脂查耳酮、异补骨脂查耳酮(补骨脂乙素)和葡萄糖苷B与组织蛋白酶K具有较高亲和力。结论:补骨脂可能通过抑制组织蛋白酶K来发挥壮骨作用。     

骨碎补总黄酮对成骨细胞体外培养作用的机制研究

目的:研究骨碎补总黄酮不同剂量组对成骨细胞体外培养的作用机理.方法:购买UMA-106-01成骨细胞株进行成骨细胞培养,观察碱性磷酸酶(ALP)活性和3H-TdR掺入的情况.结果:骨碎补总黄酮能提高用UMR-106细胞培养的细胞内ALP活性,并且在不同时间24、48、72h有相应变化,有一定的量效、时效关系,以48h最为理想.骨碎补总黄酮对3H-TdR的掺入48h比24h有明显增加,有时效关系.结论:骨碎补总黄酮对成骨细胞分化和增殖均有促进作用.     

骨碎补总黄酮对去卵巢大鼠骨密度和骨组织形态计量学影响

目的 :以卵巢切除雌性大鼠为模型 ,观察骨碎补总黄酮对骨质疏松模型大鼠的组织形态计量学的影响。方法 :去卵巢制作模型 ,制作不脱钙骨切片及染色 ,采用LeicaQwin图象分析系统进行骨组织形态计量。结果 :对胫骨骨小梁体积百分比 (TBV % )的影响 ,与模型组比较 ,骨碎补总黄酮小剂量组和中剂量组的TBV %明显增高 ;对胫骨骨小梁吸收表面百分比 (TRS % )的影响 ,与模型组比较 ,骨碎补总黄酮小剂量组、中剂量组的TRS %显著降低 ;对胫骨骨小梁形成表面百分比 (TFS % ) ,活性生成表面百分比 (AFS % ) ,骨小梁矿化率 (MAR)和骨小梁骨生成率(BFR)的影响 ,骨碎补总黄酮小剂量组、中剂量组的TFS % ,AFS % ,MAR ,BFR较模型组皆明显降低 ;对胫骨类骨质平均宽度 (OSW)和骨皮质矿化率 (mAR)的影响 ,骨碎补总黄酮中剂量组的OSW和mAR与模型组比较 ,明显降低 ;骨碎补总黄酮小剂量组与之相比 ,有下降的趋势 ,但无统计学意义。结论 :给去卵巢大鼠灌服骨碎补总黄酮 6个月后 ,TBV %明显增高 ,TRS %以及TFS % ,AFS % ,MAR ,BFR ,OSW ,mAR均明显降低 ,表明骨碎补总黄酮对卵巢切除所致的骨质疏松症具有明显的防治作用。     

骨碎补总黄酮含药血清对大鼠成骨细胞AR mRNA表达的影响

目的：探讨骨碎补总黄酮含药血清对大鼠成骨细胞中雄激素受（androgenreceptor,AR）mRNA表达的影响。方法：取1日龄SD大鼠分离原代成骨细胞培养后传代,进行细胞鉴定。细胞分为3组,分别进行骨碎补总黄酮合药血清、丙酸睾酮、空白血清干预,RT—PcR方法测定成骨细胞雄激素受体mRNA表达的结果。结果：雄激素干预组及骨碎补干预组的ARmRNA表达率差异无统计学意义（P〉0．05）,表明骨碎补总黄酮的效应类似于丙酸睾酮。结论：骨碎补总黄酮可促进ARmRNA表达,可能与拟雄激素效应有关,从而可抑制骨吸收和促进骨生成,最终达到治疗雄激素水平下降所致骨质疏松症的目的。     

基于系统药理学的骨碎补治疗骨质疏松的通路及靶标探讨

[目的]通过系统药理学相关生物信息学分析方法探讨中药材骨碎补治疗骨质疏松的的生物学通路及靶标。[方法]通过中药系统药理学分析平台（TCMSP）数据库提取骨碎补的活性成分和有关的靶标蛋白。通过运用软件Cytoscape 3.5.1构筑骨碎补有效成分与靶标关系网络进行拓扑学分析。使用STRING数据库进行蛋白之间相互作用（PPI）网络的构筑与分析。借助David数据库进行KEGG通路功能富集分析。[结果]表明骨碎补的核心化合物有柚皮苷、圣草酚、山奈酚等,重要的靶标有前列腺素G/H合成酶2（Prostaglandin G/H synthase 2）、Heat shock protein HSP 90、Caspase-3等,骨碎补发挥生物学效应作用于骨质疏松症的关键蛋白主要有JUN、TP53、MAPK1、白介素-6（IL-6）、雌激素受体1（ESR1）等。KEGG结果表明骨碎补主要作用于TNF signaling pathway、T cell receptor signaling pathway、HIF-1 signaling pathway、PI3K-Akt signaling pathway、Estrogen signaling pathway等相关信号通路。[结论]骨碎补主要通过多种途径,多种信号通路作用于多种靶点发挥抗骨质疏松的生物学效用。     

骨碎补总黄酮含药血清对成骨细胞增殖、分化、周期及调亡的影响

目的:观察含骨碎补总黄酮大鼠血清对体外培养SD大鼠成骨细胞增殖、分化、周期及凋亡的影响.方法:取新生的SD大鼠的颅骨,胶原酶法培养成骨细胞.应用MTT法、对硝基苯磷酸盐法(PNPP)及流式细胞术观察不同浓度的含骨碎补总黄酮大鼠血清在不同时段对体外培养成骨细胞的光密度D(λ)值、碱性磷酸酶(ALP)活性及细胞周期和凋亡的影响.结果:不同浓度的骨碎补总黄酮大鼠含药血清均可促进成骨细胞增殖、分化,使处于DNA合成期细胞比例增加,使早期和晚期凋亡细胞比例减少,与对照组比较均具有统计学意义(P＜0.05). 结论: 骨碎补总黄酮含药血清具有促进体外成骨细胞增殖、分化,抑制成骨细胞凋亡的作用,即具有抗骨质疏松活性.     

骨碎补总黄酮胶囊对实验性骨质疏松症和镇痛作用的影响

目的 :应用维甲酸所致大鼠的实验性骨质疏松模型 ,观察骨碎补总黄酮对动物骨密度的作用及对血钙、血磷水平的影响。方法 :维甲酸 (70mg·Kg- 1 ·d- 1 )给大鼠灌胃 14d ,可导致大鼠的实验性骨质疏松 ,然后观察药物对动物骨密度的影响 ;化学刺激疼痛试验采用小鼠腹腔注射醋酸所致小鼠扭体现象 ,观察各组动物的典型扭体发生次数 ;热传导刺激试验采用热板法 ,观察该药不同时间点的镇痛作用。结果 :骨碎补总黄酮三个剂量组均可明显提高大鼠骨密度 ,提高大鼠血钙水平 ,和模型组比较有显著差异 (P <0 0 5 ) ;同时骨碎补总黄酮胶囊对化学刺激 (醋酸 )有抑制作用 ,大剂量组和模型组比较有明显差异 (P <0 0 5 ) ;对热传导刺激引起的拟痛反应也有明显的拮抗作用 ,和模型组比较有显著差异 (P <0 0 1)。结论 :骨碎补总黄酮具有增加动物骨密度作用 ,提高血钙含量 ,促进骨的形成 ,对化学刺激引起的疼痛和对热传导刺激引起的疼痛反应有显著抑制作用     

骨碎补对卵巢切除所致大鼠骨质疏松症的治疗作用及其机理探讨

目的:探讨骨碎补对卵巢切除所致大鼠骨质疏松症的治疗作用及其机理。方法:将60只雌性Wistar大鼠随机分为空白对照组、假手术组、模型组、阳性对照组和骨碎补组5组,每组12只。摘除大鼠双侧卵巢1个月后,灌胃给予骨碎补水煎剂,给药3个月。采用骨组织形态计量学的方法对大鼠胫骨不脱钙骨切片进行形态计量;采用ELISA方法检测外周血清中IL-1、IL-6、BGP、CT含量。结果:与模型组比较,骨碎补组大鼠胫骨TBV%显著增高,TRS%、TFS%、MAR、mAR显著降低;外周血清中IL-1、IL-6、BGP显著降低,CT显著升高。结论:骨碎补对卵巢切除所致的大鼠骨质疏松症具有一定的治疗作用,具体体现在调节去卵巢所致的骨代谢高转换状态,能降低外周血清中IL-1、IL-6含量以及提高CT水平是其治疗机理之一。     

骨碎补总黄酮对骨质疏松大鼠Smad1 Smad5基因表达的影响

目的：通过手术切除SD大鼠的双侧卵巢,建立绝经后骨质疏松模型,研究骨碎补总黄酮对骨质疏松大鼠Smad1、Smad5 mRNA表达的影响,从而在基因水平说明其影响成骨的机制。方法：（1）动物造模：60只12周龄SD大鼠,随机分成正常组、空白组和倍美力组及骨碎补总黄酮高、中、低剂量6组,每组10只,正常组麻醉后仅切除腹部与卵巢等重量的脂肪,其余50只麻醉后从腹部入路切除双侧卵巢。（2）处理方法：①正常组、空白组标准饲料常规饲养24周。②骨碎补总黄酮3组在用标准饲料喂养12周后,第13周开始在继续用标准饲料喂养的同时每天灌服骨碎补浓缩剂12周。③倍美力组在标准饲料常规喂养12周后,第13周开始在标准饲料常规喂养的同时每天灌服倍美力悬剂12周。④24周后处死大鼠切取右侧股骨,测Smad1、Smad5 mRNA。结果：空白组Smad1 mRNA的表达是正常组的40%,有统计学意义（P〈0.05）,Smad5 mRNA的表达是正常组的59.5%,有统计学意义（P〈0.05）;与空白组比较,骨碎补总黄酮高、中、低剂量组的Smad1、Smad5 mRNA表达均有提高,空白组与骨碎补总黄酮高剂量、中、低剂量组比较均有统计学意义（P〈0.05）,其中以骨碎补总黄酮中剂量组最为有效,分别为Smad1 mRNA（P〈0.05）、Smad5 mRNA（P〈0.01）。结论：骨碎补总黄酮能够上调骨髓微环境中Smad1、Smad5 mRNA的表达水平,以中剂量组最明显,可能是其促进骨形成、修复骨损伤作用的机制之一。     

骨碎补抗骨质疏松作用机理的研究进展

骨质疏松症多见于中老年人群,患者主要症状为骨骼疼痛,严重影响患者生活质量。且近年来人口老龄化日益严重,骨质疏松症发病率呈不断上升趋势。本文通过综合近几年骨碎补研究的相关文献,从细胞、分子、动物学、生物力学、临床应用方面进行分析。通过骨碎补抗OP作用理论,为今后临床应用提供可靠依据。     

骨碎补、淫羊藿、菟丝子总黄酮对成骨细胞体外培养影响的比较研究

目的骨碎补总黄酮、淫羊藿总黄酮及菟丝子总黄酮对成骨细胞体外培养影响的比较研究。方法UMA-106-01成骨细胞株进行成骨细胞培养,观察ALP活性和3H-TdR掺入的情况。结果24h培养液中骨碎补总黄酮ALP活性高于对照组,P<0.05;细胞内骨碎补总黄酮、淫羊藿总黄酮ALP活性显著增加,与对照组比较,P<0.05或P<0.001。48h培养液中骨碎补总黄酮、淫羊藿总黄酮、菟丝子总黄酮ALP活性高于对照组,P<0.05或P<0.001;细胞内骨碎补总黄酮、淫羊藿总黄酮、菟丝子总黄酮ALP活性显著增加,与对照组比较,P<0.001。骨碎补总黄酮、淫羊藿总黄酮24h3H计数显著高于对照组,P<0.001。结论3种中药总黄酮对成骨细胞活性的促进作用,以骨碎补总黄酮最为广泛,淫羊藿总黄酮次之,菟丝子总黄酮最差。     

大孔吸附树脂纯化骨碎补总黄酮的研究

目的优选出分离纯化骨碎补总黄酮的最佳树脂。方法采用静态吸附的方法对5种不同的树脂进行筛选,并采用优选树脂对骨碎补总黄酮的分离工艺进行了优化,同时对优选树脂的吸附稳定性进行了检测。结果树脂Ⅱ(HPD-BJQH)在解吸液为50%乙醇液时所得到的干膏中总黄酮的量较高,并且具有较高的吸附稳定性。结论在室温及pH值约为4.0的条件下,分离纯化骨碎补总黄酮的最佳树脂为HPD-BJQH,最佳解吸液为50%乙醇溶液,最佳流量为10 mL/min。     

莪术油对人肺腺癌A549细胞中组织蛋白酶D,K表达的影响

目的:探讨莪术油对A549细胞中胶原及组织蛋白酶D,K表达的影响。方法:用不同浓度的莪术油(0,40,80,120 mg.L-1)作用A549细胞,苦味酸天狼猩红染色法观察莪术油对A549细胞层胶原分泌的动态变化;酶法测定细胞中可溶性羟脯氨酸的分泌;Western blot检测Cat D,Cat K的表达情况。结果:莪术油刺激细胞后A549细胞分泌的胶原含量随剂量和作用的时间增加而减少。Cat D,Cat K蛋白的表达随作用时间持续而增强。结论:莪术油减少肺腺癌A549细胞胶原沉积,其机制可能与上调Cat D,Cat K蛋白表达有关。