肾癌EGFR表达和DNA含量检测的临床意义

目的探讨表皮生长因子受体（ＥＧＦＲ）表达和ＤＮＡ倍体数与肾癌发生的关系。方法采用免疫荧光标记和流式细胞术双参数法,检测２５例肾癌瘤体及瘤旁组织胞膜ＥＧＦＲ表达和ＤＮＡ含量。结果瘤体组织ＥＧＦＲ为３６５±２３５,明显高于瘤旁组织的１９１±１５０,Ｐ＜００５;瘤体中ＤＮＡ指数（ＤＩ）异常组ＥＧＦＲ为４５１±２３９,正常组为２４３±１７８,Ｐ＜００５。肾癌组织中ＤＩ异常占６４％,而瘤旁组织仅占２３％,Ｐ＜００５。结论ＥＧＦＲ高表达和ＤＮＡ异常与肾癌的发生相关,肿瘤组织ＥＧＦＲ的表达与ＤＩ异常相关。     

胰腺良恶性疾患细胞凋亡及相关基因ICE表达的比较研究

目的　阐示胰腺良恶性疾患细胞凋亡的存在形式及凋亡介导基因ＩＣＥ在胰腺良恶性疾患中的表达水平。方法　由凋亡原位分析、免疫组化及Ｗｅｓｔｅｒｎ 印迹杂交，对３８ 例胰腺癌石蜡标本、２１ 例胰腺癌冰冻标本、２０ 例慢性胰腺炎冰冻标本进行凋亡及ＩＣＥ表达的半定量统计学分析。结果　肿瘤细胞凋亡原位分析结果为１－５５±０－８９，同组织非肿瘤细胞为２－３４±０－７１，二者差异有极显著意义（Ｐ＜０－０１） ；免疫组化示ＩＣＥ在胰腺癌组织中的表达为１－３３±０－７９，慢性胰腺炎组织为２－６０ ±０－８１，二者差异有极显著意义（Ｐ＜０－０１）；Ｗｅｓｔｅｒｎ 印迹示ＩＣＥ前体Ｐ４５ 及中间聚合体Ｐ３０ 在胰腺癌组织中的阳性率为９／２１（４２－９％ ），慢性胰腺炎组织为１６／２０（８０ ％） ，二者差异有极显著意义（Ｐ＜０－０１）。结论　肿瘤细胞凋亡状态的减弱及ＩＣＥ在胰腺良恶性疾患间的表达差异提示正常状态凋亡机制的被抑制是细胞癌变的可能途径。     

血管内皮生长因子在肾细胞癌中的表达及意义

研究肾细胞癌血管内皮生长因子（ＶＥＧＦ）的表达及其与肿瘤转移、分期、病理类型及预后的关系。采用抗ＶＥＧＦ的多克隆抗体免疫组织化学技术染色（ＬｓＡＢ法）研究６１例肾癌组织切片。结果显示：４５９％（２８／６１）的肾癌ＶＥＧＦ表达阳性，淋巴结和（或）血行转移的ＶＥＧＦ表达率（７７８％）明显高于非转移者（３２６％，Ｐ＜００１）；阳性表达者五年生存率（２９１％）明显低于阴性表达者（８４６％，Ｐ＜００１）；Ⅰ、Ⅱ期阳性表达低于Ⅲ、Ⅳ期（Ｐ＜００５）；但与性别、年龄及肿瘤的病理类型无关。ＶＥＧＦ除在癌细胞胞浆和胞膜表达外，尚表达于肿瘤基质血管和邻近肿瘤的正常肾小管胞浆、肾小球和血管内皮及血管平滑肌胞膜。认为ＶＥＧＦ除由肿瘤细胞合成外，可能尚表达于邻近肿瘤的正常肾小管胞浆，ＶＥＧＦ表达有助于肾癌预后判断及指导治疗，ＶＥＧＦ可能是肿瘤血管的良好标记物，设法抑制ＶＥＧＦ可望成为肾癌治疗的有效方法。     

Ki—67抗原在肾细胞癌中的表达

目的 探讨Ｋｉ－６７抗原表达与肾细胞癌临床病理的关系。方法 采用免疫组化方法，应用Ｋｉ－６７单克隆抗体ＭＩＢＩ研究肾癌组织中Ｋｉ－６７抗原表达及与肾癌临床病理的联系。结果 正常肾组织无Ｋｉ－６７抗原表达。肾癌组织Ｋｉ－６７抗原表达在肾癌临床分期，病理分级间有显著性差异（Ｐ〈０．０１），Ｋｉ－６７数〈９．５％者术后生存率明显高于Ｋｉ－６７指数〉９．５％者（Ｐ〈０．０１），结论Ｋｉ－６７抗原表达相关于     

Bcl－2／bax蛋白在肾癌组织中的表达意义

为探讨凋亡抑制基因ｂｃｌ－２和凋亡促进基因ｂａｘ蛋白在肾癌组织中的表达对肾癌发生和发展的影响，采用抗ｂｃｌ－２单克隆抗体和抗ｂａｘ多克隆抗体分别对４２例肾癌和２０例远离癌的正常肾组织的石蜡切片进行免疫组织化学染色。结果显示２０例正常肾组织有１１例ｂｃｌ－２蛋白呈弱阳性表达，阳性率５５．０％，表达部位在肾小管和集合管上皮细胞，４２例肾癌组织有３７例ｂｃｌ－２蛋白表达阳性，阳性率８８．１％，且染色强度明显增强。经统计学处理，肾癌组织阳性表达明显高于正常肾组织（Ｐ＜０．０１）。２０例正常肾组织有１９例ｂａｘ蛋白表达阳性，阳性率９５．０％，表达部位在肾小管和集合管上皮细胞。４２例肾癌组织有２２例ｂａｘ蛋白表达阳性，阳性率５２．４％。经统计学处理，肾癌组织阳性表达明显低于正常肾组织（Ｐ＜０．０１）。ｂｃｌ－２和ｂａｘ蛋白在肾癌组织中的异常表达，使肾癌细胞凋亡处于抑制状态，细胞寿命延长，可能参与了肾癌的发生和发展过程     

肾癌组织中细胞凋亡及相关基因bcl-2和bax表达的研究

目的探讨肾癌的发病机制。方法采用原位ＤＮＡ片断末端标记和免疫组织化学方法,检测４８例肾癌组织细胞凋亡状态及凋亡相关基因ｂｃｌ２和ｂａｘ蛋白的表达。结果４８例肾癌组织中ｂｃｌ２蛋白低表达２２例,凋亡指数（ＡＩ）均值为１３５;高表达２６例,ＡＩ均值为１０４。两组ＡＩ均值间统计学分析差异有显著意义（Ｐ＜００５）。ｂａｘ蛋白低表达３４例,ＡＩ均值为１０３;高表达１４例,ＡＩ均值为１６３。两组ＡＩ均值间统计学分析差异有非常显著意义（Ｐ＜００１）。ｂｃｌ２蛋白表达越强,ｂａｘ蛋白表达越弱,凋亡细胞数就越少。结论ｂｃｌ２和ｂａｘ蛋白均参与了肾癌组织中细胞凋亡的调节,并在肾癌的发生和发展中发挥着重要作用     

凋亡相关基因产物Fas/APO-1和bcl-2蛋白在肾癌组织中的表达及意义

目的研究凋亡相关基因Ｆａｓ／ＡＰＯ－１和ｂｃｌ－２在肾癌发生发展中的作用。方法采用免疫组织化学法对３５例肾癌组织和２６例远离肾癌的正常肾组织Ｆａｓ／ＡＰＯ－１和ｂｃｌ－２蛋白的表达进行检测。结果肾癌组织Ｆａｓ／ＡＰＯ－１蛋白表达率为５７．１４％，明显低于正常肾组织中的表达率（８４．６２％，Ｐ＜０．０５），且表达强度也明显低下；而ｂｃｌ－２蛋白表达率为８０．００％，明显高于正常肾组织中的表达率（５３．８５％，Ｐ＜０．０５）。结论Ｆａｓ／ＡＰＯ－１与ｂｃｌ－２基因共同参与了肾癌的发生和发展。     

慢性肾功能衰竭对大鼠红细胞生成素受体基因表达的影响

目的研究５／６肾切除引起大鼠慢性肾功能衰竭并出现贫血时骨髓细胞红细胞生成素（ＥＰＯ）受体基因表达的变化。方法用二步法切除５／６肾组织诱发大鼠肾功能衰竭并出现贫血，另以盐酸苯肼导致的急性贫血大鼠和正常大鼠为对照。用ＲＴＰＣＲ检测３组大鼠骨髓有核细胞ＥＰＯ受体ｍＲＮＡ表达，并经灰度扫描，与共扩增的β肌动蛋白基因相比，再用ＳｏｕｔｈｅｒｎＢｌｏｔｉｎｇ证实特异性。结果５／６肾切除后５周大鼠出现明显的肾功能衰竭和贫血。正常大鼠、急性贫血大鼠和肾性贫血大鼠骨髓有核细胞ＥＰＯ受体ｍＲＮＡ表达量分别为０２６±００６、０５１±０２４、０１５±００６，急性贫血大鼠ＥＰＯ受体ｍＲＮＡ表达量高于正常大鼠（Ｐ＜００５），而肾性贫血大鼠明显低于正常大鼠（Ｐ＜００１）。结论大鼠在出现慢性肾功能衰竭并出现贫血时，骨髓有核细胞ＥＰＯ受体ｍＲＮＡ表达明显减少，这可能在慢性肾功能衰竭并发贫血过程中起着一定作用。     

细胞凋亡和性激素环境与前列腺增生的关系

目的探讨雄雌激素、细胞凋亡在前列腺增长和前列腺增生（ＢＰＨ）发病中的作用。方法应用ＤＮＡ末端原位标记的方法对正常前列腺移行带（１０例）和周围带（１０例）以及ＢＰＨ组织（２０例）标本进行了细胞凋亡率的研究,并应用放射免疫学技术检测了相应组织的双氢睾酮（ＤＨＴ）和雌二醇（Ｅ２）含量。结果正常前列腺移行带,周围带ＤＨＴ和Ｅ２的差异无显著性,ＢＰＨ组织中的Ｅ２含量（平均６．６３ｎｇ／ｇ蛋白）虽高于正常前列腺的移行带含量３．１５ｎｇ／ｇ蛋白,但差异无显著性（Ｐ＝０．１）。正常前列腺周围带细胞凋亡率（４１．２±３．９）％显著高于移行带（２９．７±４．０）％,Ｐ＜０．０５,后者又非常显著地高于ＢＰＨ组织（３９±１．１）％,Ｐ＜０．００１。正常与增生前列腺组织内的ＤＨＴ及Ｅ２含量与细胞凋亡率之间无明显相关性。正常前列腺组织中,前列腺增生的起始部位移行带的细胞凋亡率已明显下降,随着年龄的增长,凋亡率进一步下降,导致ＢＰＨ。细胞凋亡率与其组织的ＤＨＴ、Ｅ２无明显相关性。结论前列腺导管系统的远、近端（周围带、移行带）上皮细胞结构形态不同,其周围的间质亦有差异,因此即使在接受相同量的雄、雌激素情况下,这些细胞的反应并不相同。     

TGFβ1及其I、II型受体在肾癌中的表达

目的探讨肾癌中转化生长因子β１（ＴＧＦβ１）及其Ｉ、Ｉ型受体（ＴＧＦβＲＩ、ＴＧＦβＲＩ）表达及其意义。方法采用免疫组化技术（ＳＰ法）对４６例肾癌,１１例正常肾组织ＴＧＦβ１、ＴＧＦβＲＩ、ＲＩ进行检测,结合临床资料进行分析。结果肾癌组ＴＧＦβ１表达量较正常肾组高（Ｐ＜０．０５）;ＴＧＦβＲＩ在肾癌组及正常肾组均表达;ＴＧＦβＲＩ在肾癌中阳性率较正常肾阳性率低（Ｐ＜０．０１）,ＴＧＦβＲＩ在高分期,高分级肾癌中表达阳性率较低分期、低分级肾癌低（Ｐ＜０．０５）;ＴＧＦβ１表达量低及ＴＧＦβＲＩ表达阴性肾癌者预后差。结论ＴＧＦβ１对肾癌是一种重要负性调节因子,可抑制肾癌进展,ＴＧＦβＲＩ缺失使ＴＧＦβ系统完整性受到破坏,ＴＧＦβ１失去负性调节作用。ＴＧＦβ１及ＴＧＦβＲＩ表达可做为判断肾癌预后的指标之一     

Fas配体诱导淋巴细胞凋亡与肾癌免疫攻击作用

目的　探讨Fas配体 (FasL)诱导淋巴细胞凋亡与肾癌免疫攻击作用的关系。　方法　采用免疫组化技术检测 4 4例肾癌组织FasL表达及肿瘤周围浸润淋巴细胞 (TIL)凋亡情况 ,并应用肾癌细胞株 786 0、GRC 1与JurkatT淋巴细胞共培养检测T细胞凋亡率。SP法检测Ki6 7表达 ,评价肾癌预后。　结果　 (1) 4 4例肾癌组织FasL表达阳性率 4 6 .5 % ,高于正常肾组织的 2 3.2 % ,差别有显著性意义 (P <0 .0 1)。随肾癌分期增加 ,FasL表达阳性率增加。肾癌FasL表达率与Ki6 7表达率呈显著正相关 (r =0 .93,P <0 .0 1)。 (2 )肾癌组织TIL凋亡率为 33.9% ,高于正常肾组织的3.5 % ,差别有显著性意义 (P <0 .0 1)。肾癌FasL表达率与TIL凋亡率呈显著正相关 (r =0 .96 ,P <0 .0 1)。 (3) 786 0FasL表达率 18.6 % ,GRC 1表达率 2 .3% ,二者差别有显著性意义 (P <0 .0 1)。Ju rkat细胞与 786 0细胞共培养的凋亡率 14 .9% ,与GRC 1共培养的凋亡率 1.3% ,二者差别有显著性意义 (P <0 .0 1)。中和抗体NOK 2中和 786 0细胞FasL后 ,与之共培养的Jurkat细胞凋亡率显著减少 (P <0 .0 1)。　结论　肾癌组织FasL表达增高 ,以此诱导淋巴细胞凋亡 ,实现对宿主的免疫攻击。     

偶发肾癌的临床探讨(附96例报告)

目的提高偶发肾癌的诊治水平。方法对９６例偶发肾癌进行回顾性总结并与２０２例非偶发肾癌进行对比分析。结果与非偶发肾癌相比,偶发肾癌均为Ｉ～Ｉ期肿瘤,病理分期低（Ｐ＜００１）;平均肿瘤体积小（４４ｃｍ,Ｐ＜００１）;术后５年生存率（８９．８％）高于非偶发组（４５６％）（Ｐ＜００１）。结论偶发肾癌病理分期低,肿瘤体积小,术后远期生存率高;偶发肾癌概念的提出,对肾癌的早期诊治及良好的预后有重要意义。     

肥厚性瘢痕细胞凋亡检测及其相关调控因素的研究

目的　探讨肥厚性瘢痕的发生与成纤维细胞和血管内皮细胞凋亡的关系，以及有关调控因素的影响。　方法　应用原位末端标记和免疫组织化学染色等技术，对61例烧伤后整形患者肥厚性瘢痕和20例其他手术患者非肥厚性瘢痕进行了细胞凋亡以及ICE、Bcl-2表达的检测。　结果肥厚性瘢痕增厚期、成熟期成纤维细胞以及血管内皮细胞凋亡阳性细胞指数分别为6.60±4.43和8.90±6.01，成熟期分别为25.60±5.70和26.60±6.02，两期同种细胞间相比，凋亡阳性细胞指数均有非常显著性差异（P＜0.01）。增厚期ICE阳性表达率较成熟期显著降低（P＜0.01），而Bcl-2阳性率却显著高于成熟期组（P＜0.01）。　结论　细胞凋亡减少可能与肥厚性瘢痕的形成有关，ICE和Bcl-2可能参与了肥厚性瘢痕成纤维细胞和血管内皮细胞凋亡的调控。     

Twist、E-钙粘蛋白在肾癌转移进展中的意义

目的探讨Twist蛋白和E-钙粘蛋白在人肾细胞癌(renal cell carcinoma,RCC)组织中的表达及其相关性。方法应用免疫组织化学SABC染色方法检测40例RCC及癌旁正常组织中Twist蛋白、E-钙粘蛋白的表达情况,分析二者相关性。结果 RCC组织中Twist蛋白的阳性表达率(87.5%)明显高于癌旁肾组织中Twist蛋白的阳性表达率(32.5%);RCC组织中E-钙粘蛋白的阳性表达率(12.5%)明显低于其在癌旁肾组织中的阳性表达率(95.0%),Twist蛋白和E-钙粘蛋白表达在肾癌组织和癌旁组织中的差异均有统计学意义(P<0.01)。其中Twist的异常表达与RCC病理分级、临床分期、淋巴结转移呈正相关(P<0.05),E-钙粘蛋白的异常表达与RCC病理分级、临床分期、淋巴结转移呈负相关(P<0.05),而两者与患者的性别、肿瘤直径、年龄无相关性(P>0.05)。结论 Twist蛋白可能是RCC发生、发展及浸润转移的重要因素之一。     

nucleostemin基因在肾癌中的表达及其意义

目的 观察nucleostemin基因在肾癌组织和正常肾组织中的表达,探讨其在肾癌发生中的意义.方法 收集肾癌组织标本62例,透明细胞型50例,颗粒细胞型12例.同时取10例癌旁非癌肾组织和10例非瘤正常肾组织作对照组.应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法,以GAPDH为内参照,检测上述组织nucleostemin基因mRNA的表达,统计学分析实验结果.结果 肾癌组织中,nucleostemin基因47例显示阳性表达,阳性率为75.81%.正常肾组织未见有nucleostemin基因阳性表达.nucleostemin基因在肾癌组织中的阳性表达显著高于正常肾组织(P<0.01).nucleostemin基因在透明细胞癌中阳性表达率为74.00%;颗粒细胞癌阳性表达率为83.33%,两者比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 nucleostemin基因在肾癌组织中呈高表达,而在正常肾组织中无表达;nucleostemin基因的表达可能与病理类型无关.提示nucleostemin基因的表达与肾癌的发生密切相关.     

凋亡抑制因子Survivin在肾癌中的表达及意义

目的探讨新的凋亡相关基因Survivin蛋白在人肾细胞癌中的表达及临床意义。方法采用免疫组化SABC法分别测定52例肾细胞癌组织和10例正常肾组织中Survivin蛋白的表达，并分析其与肾癌临床、病理因素的关系。结果Survivin蛋白在肾癌组织中表达，阳性率为92．31％（48／52），其中弱阳性为19例，中等阳性为12例，强阳性17例，而正常组织中未见表达，二者有统计学意义（P〈O．01）。肾癌中Survivin蛋白的表达与患者有无淋巴结转移、肾癌的病理分级呈正相关（P〈0．05），而和肾癌患者的年龄、性别、肿瘤大小及有无下腔静脉癌栓、肾癌患者的Robson分期及肿瘤的病理类型无显著相关性。结论肾癌的分化程度越低，越容易出现淋巴结转移，则Survivin阳性表达率越高，提示检测肾癌中Survivin蛋白的表达，可作为肾癌诊断的灵敏、特异的指标，并有助于肾癌的预后评估。     

Connexin32、VEGF在肾细胞癌中的表达及临床意义

目的 研究间隙连接蛋白32(connexin32,Cx32)及血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)在肾细胞癌(renal cell cancer,RCC)组织中的表达及其与肾细胞癌的相关性,探讨其在RCC发生和发展中的作用.方法 运用免疫组织化学方法 (SP法)检测44例RCC和10例正常肾脏组织中Cx32及VEGF的蛋白表达,观察其表达的定位和表达量的差异并比较它们之间的差异性及相关性.方法 (1)Cx32蛋白主要在肾癌细胞胞质中表达,而在正常肾组织中,主要表达在细胞膜上.它在RCC组中的阳性表达率为27.3%,对照组中阳性表达率为90%,差异具有显著性(p<0.05).(2)VEGF蛋白主要表达在肿瘤细胞膜,在胞质中也有表达.它在RCC组中的阳性表达率为79.5%,对照组中阳性表达率为20%,差异具有极显著性(p<0.01).(3)在不同临床分期及病理分级的肾细胞癌组织中Cx32与VEGF的表达均呈负相关(p<0.01).结论 肾细胞癌组织中Cx32表达水平的明显下调以及VEGF表达水平的显著上调,可能与肾细胞癌的发生、发展、转移有关,检测二者的表达有助于综合判断RCC的生物学行为.     

马兜铃酸I诱导的LLC—PK1细胞凋亡及其意义

目的探讨在体外条件下马兜铃酸Ｉ（ＡＡＩ）能否诱导肾小管上皮细胞发生凋亡及发生凋亡的条件。方法应用光镜、琼脂糖凝胶电泳、ＡｎｎｅｘｉｎＶＦｌｏｕｓ凋亡检测试剂盒鉴定细胞凋亡，应用流式细胞仪测定凋亡细胞比例。结果００２ｇ／Ｌ，００４ｇ／Ｌ，００８ｇ／Ｌ的ＡＡＩ作用２４小时可明显诱导ＬＬＣＰＫ１细胞凋亡，００１ｇ／Ｌ的ＡＡＩ无此作用。随ＡＡＩ浓度的增高，凋亡细胞比例增加。结论在体外条件下一定浓度的ＡＡＩ能诱导ＬＬＣＰＫ１细胞发生凋亡，其作用与浓度有关。     

肾细胞癌灌注CT表现与微血管密度及血管内皮生长因子表达的相关性

目的 探讨肾细胞癌的多层螺旋灌注CT表现及其与微血管密度(MVD)、血管内皮生长因子(VEGF)表达的相关性. 方法 经手术病理确诊的肾细胞癌73例,其中透明细胞癌65例、乳头状腺癌3例、嫌色细胞癌5例.术前行多层螺旋灌注CT扫描,分别测量肾癌病灶血容量(BV)、血流量(BF)、平均通过时间(MTT)和毛细血管表面通透性(PS).免疫组化染色检查肾癌组织中MVD及VEGF表达.并与灌注扫描各参数进行相关性分析. 结果 肾癌病灶BV、BF、MTT及PS分别为(17.2±8.3)ml/100g,(262±176)ml·min-1·100g-1、(7.1±3.4)s、(25±13)ml·min-1·100g-1.MVD为7.6～96.3(42.3±21.0);VEGF表达阳性38例(52.1%),其中Ⅰ级24例(32.9%)、Ⅱ级10例(13.7%)、Ⅲ级4例(5.5%).MVD与VEGF无相关性.肾癌病灶MVD与BV、BF、PS呈正相关(P<0.01),与MTT呈负相关(P<0.05);VEGF与所有灌注参数均不相关.结论肾癌灌注CT扫描参数可反映肿瘤组织中的血管生成情况.     

大肠癌中Caspase-8和Caspase-10的表达及其与细胞凋亡的关系

目的 探讨大肠肿瘤中Caspase-8和Caspase-10的表达及其与细胞凋亡的关系.方法 采用实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测121例大肠癌、52例腺瘤和121例癌旁组织中Caspase-8和Caspase-10 mRNA表达,原位末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡.结果 与癌旁组织比较,腺瘤中Caspase-8 mRNA表达上调,Caspase-10 mRNA表达下调(P<0.05);大肠癌中Caspase-10 mRNA表达下调(P<0.01),下调程度与肿瘤的分化程度有关(P<0.05).大肠癌、腺瘤和癌旁组织中的凋亡指数分别为1.63%、2.42%和2.98%,各组间差异有统计学意义(P<0.05).大肠癌中凋亡指数与Caspase-10 mRNA表达呈正相关(r=0.408,P<0.01),与Caspase-8mRNA表达无明显相关.结论 Caspase-8 mRNA在腺瘤中表达上调,与肿瘤细胞凋亡无明显相关.Caspase-10与大肠癌的凋亡相关,并与肿瘤恶性程度关系密切.