胃肠道平滑肌肿瘤ras p21及DNA与预后的关系

作者应用细胞免疫荧光染色技术及流式细胞术对５５例胃肠道平滑肌肿瘤石蜡包埋标本的ｒａｓｐ２１表达及ＤＮＡ含量同时进行定量分析。结果：１４例平滑肌瘤均为二倍体和ｒａｓｐ２１低表达；１２例潜在恶性平滑肌肿瘤出现４例异倍体（３３％），９例ｒａｓｐ２１过度表达（７５％），并且大多数出现在该组的二倍体肿瘤中；２９例平滑肌肉瘤全部为异倍体（１００％）（Ｐ＜０．００５），而ｒａｓｐ２１过度表达率未见继续增高（７２％）（Ｐ＜０．００５）。３３例异倍体肿瘤的ｒａｓｐ２１过度表达率（７３％）明显高于２２例二倍体肿瘤（２７％）（Ｐ＜０．００５）。ｒａｓｐ２１低表达的二倍体肿瘤预后最好，ｒａｓｐ２１过度表达的异倍体肿瘤预后最差（Ｐ＜０．００５）。作者认为，ＤＮＡ异倍体及ｒａｓｐ２１过度表达均是恶性肿瘤的标志；ｒａｓｐ２１过度表达主要出现在恶性肿瘤的早期，并且持续稳定的表达；ｒａｓｐ２１表达和ＤＮＡ含量可以互补作为判断胃肠道平滑肌肿瘤患者预后的客观指标。     

结直肠癌p21ras的计量分析与预后

应用ｒａｓ癌基因产物ｐ２１￣ｒａｓ免疫组化染色的图象分析技术、流式细胞分析技术分别测定８３例结直肠癌的ｐ２１￣ｒａｓ平均光密度值（ｐ２１Ｄ）和ＤＮＡ指数（ＤＩ），结合临床随访和病理学资料探讨其预后价值。结果提示：结直肠癌的ｐ２１Ｄ明显高于正常粘膜（Ｐ＜０．００１），术后生存≥５年组的ｐ２１Ｄ明显低于＜５年组（Ｐ＜０．００１）。高ｐ２１Ｄ组患者预后较低ｐ２１Ｄ组差。二倍体肿瘤及低ｐ２１Ｄ异倍体肿瘤患者预后较高异倍体肿瘤患者明显好。Ｄｕｋｅｓ′ｃ期的ｐ２１Ｄ高于Ｂ和Ａ期。表明ｒａｓ癌基因表达与结直肠癌病程进展及转归有关，测定结直肠癌的ｐ２１￣ｒａｓ的表达和ＤＮＡ倍体将有助于预后判断。     

大肠癌ras p21表达和DNA含量定量分析

应用流式细胞术和细胞免疫荧光染色技术，对４６例大肠肿瘤细胞ｒａｓ ｐ２１表达和ＤＮＡ含量进行了宣分析。结果：大肠部的ｒａｓ ｐ２１表达阳性率为６５．７％，ＤＮＡ异倍体率为７４．３％，大肠部细胞ｒａｓ ｐ２１表达明显高于腺癌和正常粘膜；ＤＮＡ倍体和细胞增殖指数值与ｒａｓ ｐ２１表达量密切相关。本实验结果提示：测定大肠癌的ｒａｓ ｐ２１表达和ＤＮＡ含量将有助于其预后判断。     

P21、P185、P53蛋白表达及ras、P53基因突变与膀胱癌的关系

为探讨癌基因及抑癌基因改变与膀胱癌生物学行为的关系，采用免疫组织化学方法及分子生物学技术，检测了８２例膀胱移行细胞癌Ｐ２１、Ｐ１８５、Ｐ５３蛋白表达及３８例ｒａｓ、Ｐ５３基因突变。结果表明：Ｐ２１、Ｐ１８５、Ｐ５３蛋白表达阳性分别为５１例（６２．２％）、４８例（５８．５％）、２６例（３１．７％）。Ｐ２１、Ｐ５３蛋白表达阳性率与膀胱移行细胞癌病理分级及临床分期呈正相关（Ｐ＜０．０１）；Ｐ１８５蛋白阳性率与膀胱移行细胞癌分级、分期呈负相关（Ｐ＜０．０５）。膀胱移行细胞癌组织中１５例（３９．５％）有Ｈａｒａｓ癌基因第１２位密码子突变；１２例（３１．６％）有Ｐ５３抑癌基因突变，其中全部有第２８０位密码子ＧＣ突变；３例合并有２４８密码子突变；１例有２４９密码子点突变。Ｈａｒａｓ癌基因及Ｐ５３抑癌基因点突变与膀胱癌病理分级和临床分期呈显著正相关（Ｐ＜０．０５）；与预后显著相关（Ｐ＜０．０５）；且死亡率高于点突变阴性者。６例既有Ｈａｒａｓ基因突变，又有Ｐ５３基因突变的病例中４例死亡。     

膀胱癌细胞P53基因蛋白表达的流式分析

采用流式细胞术和细胞免疫荧光染色技术，对４２例膀胱移行细胞癌细胞Ｐ５３蛋白表达和ＤＮＡ倍体进行定量分析，结果表明，Ｐ５３表达与肿瘤分级密切相关。结合Ｐ５３表达和ＤＮＡ倍体对预后作了综合分析，结果显示，Ｐ５３阳性异倍体肿瘤患者的生存率最低，Ｐ５３阳性肿瘤患者的生存率次之，而二倍体肿瘤患者的生存率最高。在复发的肿瘤中，Ｐ５３阳性表达（８１．３％）显著高于Ｐ５３阴性表达（１８．７％）。提示：测定膀胱肿瘤Ｐ５３表达，对预后可作出客观评价。     

ras突变和rasP21蛋白表达与尿路上皮肿瘤预后关系

应用聚合酶链式反应加单链多态性分析(PCR-SSCP)及流式细胞木和细胞免疫荧光技术检测52倒尿路上皮肿瘤K-ras基因突变及rasP21蛋白表达和DNA含量变化,研究ras突变和rasP21蛋白表达及DNA倍体异常与尿路上皮肿瘤预后关系。K-ras基因突变5例(9.65),rasP21蛋白阳性表达36例(69.2％);异倍体22例(42.3％),二倍体30例(57.7％);DNA倍体异常和rasP21蛋白表达随肿瘤病理分级和分期的上升而增加,与肿瘤预后呈正相关(P<0.01);异倍体肿瘤其rasP21蛋白表达率明显高于二倍体肿瘤(P<0.01)。DNA倍体异常和rasP21蛋白表达对尿路上皮肿瘤预后有预测意义。     

大肠癌细胞p53基因突变与细胞凋亡及细胞倍性的关系

目的　了解ｐ５３ 基因突变、细胞倍性、细胞凋亡三者的关系,探讨突变型ｐ５３ 基因在肿瘤发生中的作用机制。方法　采用 Ｐ Ｃ Ｒ Ｓ Ｓ Ｃ Ｐ（ 单链构象多态性） 检测ｐ５３ 基因突变,用流式细胞仪 Ｆａｃｓｃａｎ 检测大肠癌细胞染色体倍性、凋亡率及其在细胞周期各相中的分布情况。结果　大肠癌标本ｐ５３基因突变率为５０ ％ ;其中突变组肿瘤细胞凋亡率（２２ ．１１ ％ ） 明显低于未突变组细胞凋亡率（４０ ．５７ ％ ） ,（ Ｐ＜ ０ ．０５） ;突变组异倍体细胞百分率（ 占７６ ．９ ％ ） 明显高于未突变组（ 占４６ ．２ ％ ） ,（ Ｐ＜ ０ ．０５） ;异倍体肿瘤细胞凋亡率为３４ ．０ ％ ,二倍体肿瘤细胞凋亡率为４０ ．７ ％ ,二者差异无显著性（ Ｐ＞ ０ ．０５） 。结论　ｐ５３ 基因突变使肿瘤细胞凋亡率下降,进而促进肿瘤发生、发展。ｐ５３ 基因突变多见于异倍体细胞,细胞凋亡率与细胞倍性无关。     

rasp21和p53基因蛋白在乳腺癌和乳腺良性病变细胞表达的定量研究

ｒａｓｐ２１和ｐ５３基因蛋白在乳腺癌和乳腺良性病变细胞表达的定量研究左连富，齐风英，胡俊兰，郭建文，刘江惠本文应用流式免疫分析技术对乳腺良性病变和癌细胞ｐ２１蛋白和ｐ５３蛋白表达进行定量研究，探讨其与病理学分级、ＤＮＡ倍体和预后的关系。１．材料和方法...     

人乳头瘤病毒DNA相关序列与p53基因突变对大肠癌生物学行为的影响50例报告

目的探讨人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）ＤＮＡ相关序列与ｐ５３基因突变及ｐ５３蛋白表达的关系及其对大肠癌生物学行为的影响。方法采用ＰＣＲ方法检测大肠癌及癌旁组织、肝转移灶中ＨＰＶＤＮＡ相关序列。并应用ＰＣＲＳＳＣＰ及免疫组化技术分别检测ｐ５３基因突变及ｐ５３蛋白表达。结果在５０例大肠癌中,检出ＨＰＶ１６、１８ＤＮＡ相关序列２６例（５２０％）,其中ＨＰＶ１６ＤＮＡ４例（８０％）,ＨＰＶ１８ＤＮＡ２２例（４４０％）。ｐ５３基因突变率为５６０％。ｐ５３蛋白表达阳性率为４２０％。ＨＰＶＤＮＡ相关序列与ｐ５３基因突变及ｐ５３蛋白表达呈正比关系。结论ＨＰＶＤＮＡ相关序列可促进细胞转化、致ｐ５３基因突变、抑制细胞的凋亡,与大肠癌的发生发展有密切关系。     

胆汁中突变基因与大肠癌肝转移关系的研究

目的 探讨胆汁中的点突变基因对诊断大肠癌肝转移的价值。方法 采用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ及ＤＮＡ测序技术,检测大肠癌患者原发灶、肝转移灶、胆汁中相同突变位点的ｐ５３、ｋ－ｒａｓ基因。结果 在５０例大肠癌中,检出有ｐ５３、ｋ－ｒａｓ基因突变３８例（７６．０％）。其中有ｐ５３基因突变２８例（５６．０％）,ｋ－ｒａｓ基因突变１６例（３２．０％）。在１２例出现肝转移者的胆汁中检出有与原发灶相同的点突变基因者１０例     

影响胰腺癌预后的因素分析

目的　探讨影响胰腺癌预后的决定因素。 方法　应用流式细胞仪检测胰腺癌ＤＮＡ倍体６２ 例,采用免疫组织化学法检测ｐ２１ 、ｐ５３ 在胰腺癌中的表达,应用Ｃｏｘ 比例风险模型对其预后因素进行分析。 结果　本组共有６２ 例经手术和病理学检查证实的胰腺癌病人,其中胰腺癌患者二倍体２５ 例,四倍体１１ 例,预后较好,平均生存期分别为２８ 个月和３０ 个月,非四倍体异倍体者２６ 例平均生存期仅为５ 个月。胰腺癌组织ｐ２１ 阳性率为８９％ ,ｐ５３ 阳性率为５１％ 。二者表达均与临床分期密切相关;单因素分析发现,ＤＮＡ倍体、后腹膜浸润、手术方式、肝转移、临床分期、ｐ２１ 表达、十二指肠浸润等与预后密切相关,多因素分析中仅ＤＮＡ倍体和临床分期是独立预后决定因素。 结论　ＤＮＡ倍体和临床分期是胰腺癌独立预后的决定因素     

rasP21和P53在膀胱癌表达的临床意义

采用免疫组化方法（ＬＳＡＢ法）对５８例膀胱癌和６例非癌膀胱粘膜标本进行ｒａｓＰ２１及ｐ５３蛋白产物检测。结果：５８例膀胱癌标本中３７例Ｐ２１检测阳性（６３．８％），３３例Ｐ５３检测阳性（５６．９％），对照组６例膀胱粘膜均未见阳性着色。Ｐ２１阳性率在Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ级肿瘤中分别为２８．６％、４６．７％和７７．８％，在Ｔｉｓ～Ｔ１期和Ｔ２～Ｔ４期肿瘤中分别为４５．０％和７３．７％。Ｐ５３阳性率在Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ级肿瘤中分别为１４．３％、４０．０％和７２．２％，在Ｔｉｓ～Ｔ１期和Ｔ２～Ｔ４期肿瘤中分别为３０．０％和７１．１％，显示Ｐ２１和Ｐ５３表达阳性率均随着膀胱癌病理分级、临床分期上升而升高，表达强度也随之增强。Ｐ２１和Ｐ５３阳性者的复发率和死亡率均明显高于阴性表达者。认为Ｐ２１和Ｐ５３可作为膀胱癌的生物学瘤标。     

胰腺肿瘤DNA含量检测及生存分析

作者对本院１９７９～１９９１年手术和病理证实的３２例胰腺癌、１０例邻近癌的胰腺组织、８例胰腺炎以及１６例胰岛细胞瘤石蜡包埋组织，用流式细胞仪（ＦＣＭ）检测其细胞核ＤＮＡ含量。结果发现：胰腺癌的异倍体率及ＤＮＡ指数明显高于胰腺非肿瘤病变者（Ｐ＜０．０１）；ＤＮＡ异倍体胰腺癌的Ｓ期比例亦明显高于二倍体胰腺癌（Ｐ＜０．０５）；胰腺癌细胞核ＤＮＡ含量的变化是一个相对独立的反映胰腺癌生物学行为的指标。ＤＮＡ二倍体胰腺癌患者的手术可切除率明显高于异倍体肿瘤患者（Ｐ＜０．０５）。采用Ｋａｐｌａｎ－Ｍｅｉｅｒ生存分析法显示，ＤＮＡ异倍体胰腺癌较二倍体者生存时间短，预后差（Ｐ＜０．０５％）。     

ras P21和P53的共同表达与泌尿系移行细胞癌生物学行为的关系

ｒａｓＰ２１和Ｐ５３的共同表达与泌尿系移行细胞癌生物学行为的关系涂响安，彭轼平应用高敏鼠抗人ｒａｓＰ２１和Ｐ５３单克隆抗体，ＡＢＣ免疫组化染色，检测ｒａｓｐ２１和Ｐ５３在６６例泌尿系移行细胞癌（包括３例肾盂癌术后膀胱内复发癌的标本）中的共同表达。探讨...     

乳腺癌中p53基因DNA水平突变与核蛋白水平突变的比较

目的研究ｐ５３基因ＤＮＡ水平和蛋白水平的突变。方法分别采用多聚酶链反应单链构象多态分析银染方法和链酶亲和素生物素过氧化物酶复合物（ｓｔｒｅｐａｖｉｄｉｎｂｉｏｔｉｎｐｅｒｏｘｉｄａｓｅｃｏｍｐｌｅｘ,ＳＡＢＣ）免疫组化方法,检测了５４例乳腺浸润性导管癌标本。结果２２例在ＤＮＡ水平突变阳性,突变率为４１％;３２例在核蛋白水平突变,突变率５７％。其中２２例ＤＮＡ突变阳性者,核蛋白突变均阳性;而３２例ＤＮＡ水平突变阴性者,核蛋白突变阳性者９例,占２８％。ｐ５３ＤＮＡ突变与核蛋白突变之间有显著相关性,并且两者都与患者的淋巴结转移以及雌、孕激素受体表达有关（Ｐ＜００１）。结论免疫组化是一种快速检测ｐ５３是否存在异常的有效方法。但是在蛋白水平突变阳性者中存在一定的假阳性。ｐ５３突变阳性患者预后较差     

图像细胞分析与癌基因检测辅助诊断直肠癌

目的提高直肠癌术前活检的诊断率。方法对１７例术前活检未证实为直肠癌的患者的活检标本（实验组）和１５例正常肠粘膜活检标本（对照组）的石蜡包埋块进行常规病理检查、细胞图像分析（ＩＣＭ）、ｐ５３与ｒａｓ癌基因产物检测。结果实验组ＩＣＭ结果５３％为异倍体,癌基因检测结果ｐ５３与ｒａｓ基因表达阳性率分别为７１％、４７％。对照组的ＩＣＭ与癌基因检测结果均阴性。实验组中,常规病理检查１１例为不典型增生,５例为慢性炎症。常规病理检查为不典型增生的病例中经ＩＣＭ、癌基因检测８例为异倍体,ｐ５３与ｒａｓ基因表达阳性分别为１１和７例;慢性炎症病例中则既无异倍体,又无ｐ５３与ｒａｓ基因表达,二者之间,异倍体和两种基因表达阳性率差异均有显著意义（Ｐ＜００５）。ＩＣＭ与癌基因检测结果有较好的一致性。结论ＩＣＭ与癌基因检测,可以作为常规病理的补充,提高直肠良恶性病变的鉴别力。     

癌基基ras产物P21在胰腺癌,胰腺导管上皮不典型增生及胰腺…

采用免疫组织化学方法对５３例胰腺癌，５例癌旁胰腺导管上皮不典型增生，１１例胰腺内分中瘤进行癌基因产物Ｐ２１表达的研究。结果发现，Ｐ２１阳性表达率分别为８８．７％，１００％和９％，胰腺癌中Ｐ２１弥漫阳性表达者较局限或片状阳性表达及阴性表达者预后好（Ｐ〈０．０１），结果提示ｒａｓ癌基因突变性胰腺癌早期发生起重要作用，Ｐ２１表达与否及表达类型可作为胰腺癌预后的指标。     

甲状腺癌中p53基因248位密码子突变及其蛋白过度表达的临…

对５４例甲状腺癌标本分别用ＤＮＡ聚合酶链反应－限制性片段长度多态性分析（ＰＣＲ－ＲＦＬＰ）法检测ｐ５３基因第２４８位密码子的突变及免疫组化法检测ｐ５３蛋白，并用时序检验分析ｐ５３基因突变和ｐ５３蛋白表达与甲状腺癌的关系。结果发现，甲状腺癌中１５例（２７．８％）有ｐ５３基因突变和３０例（５５．６％）有ｐ５３蛋白过度表达，临床分期晚、分化程度低的甲状腺癌突变率较高，ｐ５３抑癌基因突变和ｐ５３蛋白阳性病     

甲状腺癌中p53基因248位密码子突变及其蛋白过度表达的临床意义

对５４例甲状腺癌标本分别用ＤＮＡ聚合酶链反应－限制性片段长度多态性分析（ＰＣＲ－ＲＦＬＰ）法检测ｐ５３基因第２４８位密码子的突变及免疫组化法检测ｐ５３蛋白，并用时序检验分析ｐ５３基因突变和ｐ５３蛋白表达与甲状腺癌的关系。结果发现，甲状腺癌中１５例（２７８％）有ｐ５３基因突变和３０例（５５６％）有ｐ５３蛋白过度表达，临床分期晚、分化程度低的甲状腺癌突变率较高，ｐ５３抑癌基因突变和ｐ５３蛋白阳性的病例有较高的复发率和死亡率。表明ｐ５３基因突变及其蛋白过度表达在甲状腺癌的发生和发展过程中起重要作用，是预后不良的标志。     

膀胱移行细胞癌生物学行为与细胞DNA含量,ras P21和P53表达的关系

膀胱移行细胞癌生物学行为与细胞ＤＮＡ含量、ｒａｓＰ２１和Ｐ５３表达的关系张杰英蔡文清张祥宏张玉敏左连富吕贵华本研究以免疫流式细胞光度术与病理形态学相结合的研究对５６例膀胱移行细胞癌细胞ＤＮＡ含量、ｒａｓＰ２１和Ｐ５３蛋白表达与生物学行为的关系进行了定...