长征-1号多器官保存液低温保存大鼠肺脏并移植的实验研究

目的 通过大鼠原位肺移模型,研究长征－１号多器官保存液保存肺的效果。方法 将大鼠随机分为３组;对组照;以平衡液灌洗供肺,并立即移植;ＣＺ－１液组;以ＣＺ－１液灌洗供肺,保存８小时后移植;Ｅｕｒｏ－Ｃｏｌｌｉｎｓ液组,以Ｅｕｒｏ－Ｃｏｌｌｉｎｓ液灌洗供肺,保存８小时后移植。     

自制多器官保存液对肾皮质能量代谢的影响

目的寻找理想的器官保存液，以提高器官移植的长期疗效。方法应用高效液相系统（HPLC），检测自制多器官保存液（SMO液）和对照组（HC-A液和UW液）对犬肾低温保存中皮质腺苷酸含量改变的影响。取皮质标本匀浆、沉淀蛋白、离心，HPLC检测上清中腺苷酸含量，根据标准曲线方程和加样回收率计算ATP、ADP、AMP含量、比值和能荷（EC）。结果随保存时间延长，各组皮质腺苷酸含量下降；保存12、36、72h后SMO组皮质ATP含量（3．7±0．5、3．1±0．3、2．3±0．5nmol／mg蛋白）高于HC—A组（2．8±0．2、2．0±0．2、1．5±0．2nmol／mg蛋白），P〈0．05，SMO组EC（0．38±0．04、0．37±0．05、0．35±0．04）高于HCfA组（0．32±0．03、0．30±0．04、0．28±0．03），P〈0．05，在多数保存时点SMO组ADP、ATP／AMP高于HC—A组（P〈0．05），但2组间AMP、ATP／ADP比值差异无统计学意义（P〉0．05）；犬肾保存期间SMO组腺苷酸含量及EC与UW组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论低温保存期间SMO液能够维持皮质内较高的ATP和EC水平，减轻肾脏低温缺血损伤。     

多器官保存液组成探讨

本文综述了器官保存的原理及要求，指出一种成功的器官保存液的组成应满足五个要求：１、减少由于低温保存导致的细胞水肿；２、防止细胞的酸化作用；３、防止灌洗保存过程中的细胞间隙膨胀；４、防止氧自由基损伤；５、提供再生高能磷酸化合物的底物。并对ＵＷ、ＨＴＫ液的各个组成部分进行了分析和探讨。     

不同保存液保存小肠的效果评估

目的 评价乳酸林格（ＬＲ）液、Ｅｕｒｏ－Ｃｏｌｌｉｎｓ（ＥＣ）液、高渗枸橼酸嘌呤（ＨＣ－Ａ）液和武汉医学院器官１号（ＭＷＯ－１）液保存猪小肠的效果。方法 根据不同保存液将动物随机分成４组,每组又根据保存时间不同分成３个亚组,供肠保存２后行自体移植。结果 小肠保存１０小时后移植,术后３周各组受体的存活率均为１００％;保存１８小时,ＬＲ液组、ＥＣ液组、ＨＣ＝Ａ液组和ＷＭＯ－１液组受体的存活率分别为６０     

新型器官保存液低温保存猪小肠的实验研究

探讨Lifor器官保存液对猪小肠的低温保存效果.方法 24只白色杂种猪,随机分成Lifor液组和威斯康星大学保存液(University of Wisconsin solution,UW液)组,分别采用4 ℃的Lifor液和UW液灌洗并低温保存移植小肠,每组再根据供肠保存时间的不同随机分成两个亚组,分别为保存6 h、9 h组,每个亚组6只动物.建立猪自体节段性小肠移植模型.比较低温保存小肠结束时Lifor液组和UW液组小肠黏膜的组织病理学及三磷腺苷(ATP)含量的改变,并测定移植小肠造口输注麦芽糖后各时间点的血糖水平,观察移植后小肠吸收功能情况.结果 供肠保存6 h和9 h后,Lifor液组与UW液组的小肠组织病理学改变基本一致,比较差异无统计学意义(均为P>0.05),保存9 h的小肠黏膜形态异常,损伤较保存6 h的小肠黏膜严重.供肠保存6 h和9 h后,Lifor液组与UW液组的小肠黏膜ATP含量比较差异无统计学意义(均为P>0.05),小肠黏膜的ATP含量随保存时间的延长逐渐降低.移植后7、14 d两组小肠吸收功能差异亦无统计学意义(P>0.05).结论 Lifor液低温保存小肠的效果与UW液相当,且成本低廉,具有一定的临床应用前景.     

自制多器官保存液对大鼠肝脏保存的效果

目的 探讨自制多器官保存液(self-designed multi-organ preservation solution,SMO)对大鼠肝脏低温保存的效果.方法 使用SMO液、UW液和肾脏保存液保存大鼠肝脏6、12和24 h后进行肝移植,观察移植后12 h肝功能改变和移植后14 d大鼠存活情况.结果 SMO液保存24 h之内,肝脏的形态学观测无明显改变.SMO液组与UW液组TB、ALT和血清透明质酸同步升高;肾脏保存液组显著升高,与SMO液组比较差异有统计学意义(F=49.027,70.280,34.349,71.532,446.544,303.408,P＜0.05).SMO液组肝移植后14 d大鼠存活情况良好.结论 大鼠原位肝移植模型证实,SMO液与UW液在保护肝脏功能方面作用相当,优于肾脏保存液.     

器官保存及保存液的研究

正器官移植是治疗各种器官终末期疾病的唯一有效治疗方案。随着器官移植医学的快速发展,尤其是手术技术的进步及新型免疫抑制剂、器官保存方式的应用,器官移植病人的生存率得到显著提高。器官移植也在世界范围内广泛开展。移植等待病人数量不断增加,远远超过器官捐献的数量,器官供应严重不足,而高质量的供体是器官移植成功的先决条件和基本保障[1]。     

自制多器官保存液对草犬肾脏低温保存的实验研究

目的 研究自制上海多器官(SMO)液对草犬肾脏低温保存的效果。方法 采用草犬肾脏非循环离体灌注模型，比较SMO液、Uw液和高渗枸椽酸盐嘌呤溶液(HC-A)对草犬肾脏保存后，其形态学及生物化学的改变，并进行肾脏移植，观察移植后肾功能恢复情况。结果 SMO液保存72h之内，肾脏的形态学无明显改变，其各项生化功能SMO组明显优于HC-A组(P＜0．05)；与Uw液组比较，肾脏线粒体呼吸控制率(RCR)、皮质ATP含量两组间差异有显著性(P＜0．05)；保存48、72h后保存液PH值，SMO组明显高于Uw组(P＜0.05)。结论 SMO液保存犬肾72h效果明显优于HC-A液，与UW液相当。     

长征－1号多器官保存液对兔肾脏冷冻保存的连续形态学观察

自１９９２年始研制成功长征－１号多器官保存液（简称ＣＺ－１液）。在完成对兔心脏及肝脏的冷冻保存后的形态学变化观察后，又做了对兔肾脏冷冻保存的形态学改变观察，并与ＵＷ液和ＨＣ－Ａ液作了比较。结果表明：冷冻保存７２小时以内ＣＺ－１液组肾脏组织光镜和电镜下形态学改变与ＵＷ组相比无明显区别，而且ＣＺ－１液组冷冻保存肾脏组织的变化以及细胞和细胞器的变性均缓于ＨＣ－Ａ组。由于ＨＣ－Ａ液已被证实能有效地保存犬肾在７２小时内，临床保存供肾在５７小时以内，ＵＷ液已经被证实能有效地保存供肾在７２小时以内，因此认为：从光镜和电镜下肾脏组织观察来看，ＣＺ－１液能保存兔肾脏在７２小时之内。     

SMO保存液对犬肾低温保存期间线粒体功能的保护作用

目 的研究SMO保存液对犬肾低温保存期间线粒体功能的保护作用。方法 建立犬离体肾脏单纯低温保存模型，分别采用0～4℃的SMO保存液、HTK保存液和UW保存液对犬肾进行灌注和保存，并根据所用保存液的不同分为SMO组、HTK组和UW组。分别于低温保存2、24、48和72h后取各组的肾组织皮质标本，进行病理学观察并应用氧电极（Clark）法测定肾组织细胞线粒体的呼吸控制率（RCR）和磷／氧比（P／O）。结果 犬肾在保存48h和72h后，SMO组肾组织病理学改变较HTK组轻；保存24h内肾组织RCR与HTK组无明显差异，但其余时间点均高于HTK组（P〈0．05），保存72h时差异最为明显（P〈0．01）。SMO组犬肾保存2h后，肾组织的P／O比值与HTK组无明显差异（P〉0．05），但在保存24h后则明显高于HTK组（P〈0．05）。SMO组与UW组各项观察指标比较，差异无统计学意义（P〉0.05）。结论 SMO保存液在减轻细胞形态学改变和保持线粒体整体功能方面显著优于HTK保存液，与UW保存液效果相当。     

含饱和氢气肾保存液对大鼠肾脏冷缺血再灌注损伤的影响

目的 评价含饱和氢气肾保存液对大鼠肾脏冷缺血再灌注损伤的影响.方法 健康雄性Wistar大鼠24只,周龄8～10周,体重200～ 250 g,采用随机数字表法,将其随机分为3组(n=8):对照组(H1组)大鼠仅切除右肾;普通肾保存液组(H2组)大鼠采用冷缺血再灌注模型,用4℃普通HC-A肾保存液对左肾行冷灌注和冷保存;含饱和氢气肾保存液组(H3组)大鼠操作同H2组,灌注液及保存液换用自制的4℃含饱和氢气HC-A肾保存液.于再灌注24 h时抽取下腔静脉血样,测定血清BUN、Cr、TNF-α和IL-6浓度;切取左肾,测定肾组织MDA和8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)含量,光镜下观察肾组织病理学结果.结果 与H1组相比,H2组和H3组大鼠血清BUN、Cr、TNF-α和IL-6浓度及肾组织MDA和8-OHdG含量均升高(P＜ 0.05);与H2组相比,H3组血清BUN、Cr、TNF-α和IL-6浓度及肾组织MDA和8-OHdG的含量均降低(P＜0.05).H1组肾组织形态结构未见明显异常,H2组肾小管损伤明显,H3组肾小管损伤较H2组减轻.结论 含饱和氢气肾保存液可明显减轻大鼠肾脏冷缺血再灌注损伤.     

Improved renal preservation with PB-3 flush solution during 72 h of cold storage

Abstract Previously, PB-2 flush solution has been found to be superior to Collins 2 solution (C-2) in extending renal viability in the dog. To further characterize preservation mechanisms, we studied mitochondrial oxidative function during 72 h of cold storage comparing PB-3, UW-1, and C-2 flush storage solutions. Complex 1 dependent mitochondrial oxidative phosphorylation (MOP) was found to be significantly less ( P < 0.001) at 5 h and 72 h of cold storage ( P < 0.001) for the C-2 compared to the other flush groups. Complex 2 dependent MOP had parallel results, having significantly less function ( P < 0.002) at 5 h and 72 h ( P < 0.02) of cold storage in the C-2 group compared to the other groups. PB-3 and UW-1 solutions were noted to be comparable, suggesting possible equivalent preservation efficacy. Nevertheless the components of PB-3 at the level of MOP contributed significantly to better preservation compared to C-2 solution.     

腺苷与单磷酯A联合预处理对供心保存的实验研究

目的　探讨腺苷与单磷酯A联合预处理对供心保存的效果。方法　健康大白兔 39只 ,随机分为 4组。A、B组以单磷酯A预处理 2 4h后 ,制成离体心脏 ,A组再用腺苷预处理 ;C组用腺苷作经典预处理 ;D组仅注射生理盐水作对照。各组预处理后 ,用 4℃改良St.Thomas液诱导心脏停搏 ,低温保存 4h ,复灌 1h。观察心功能恢复率、心肌三磷酸腺苷 (ATP)和丙二醛 (MDA)含量、心肌磷酸肌酸激酶 (CK mb)释放量等。结果　A、B、C、D组心功能恢复率 (+dp/dtmax ,% )分别为 :70 .97± 17.92 ,6 5 .5 4± 2 2 .6 2 ,6 4 .36± 16 .10 ,39.0 7± 13.78;A组高于B、C、D组 ,并与D组的差异有显著性 (P <0 .0 1)。A、B、C、D组心肌组织ATP含量 (10 -3 μmol/g湿重 )分别为 :5 .4 6± 1.37,3.97± 1.0 4 ,4 .4 5± 1.2 9,2 .0 7± 0 .74 ;A组高于B、C、D组 ,差异有显著性 (P <0 .0 5orP <0 .0 1)。结论　用单磷酯A和腺苷联合预处理 ,对供心有一定的保护效果。     

保存液中添加谷氨酰胺对移植小肠结构与功能的影响

目的 观察谷氨酰胺在小肠保存中的作用。方法 12只杂种猪随机分成2组，供肠分别采用含有22g/L甘氨酸（对照组，n=6)或20g/L谷氨酰胺（实验组，n=6)的Euro-Collins液保存24h，然后行自体节段小肠移植，测定保存后及再灌注30min时肠粘膜损伤Parks评分，肠粘膜谷氨酰胺含量，双糖酶活性，门静脉血中内毒素浓度和移植小肠的通透性。结果 保存24h，肠粘膜谷氨酰胺含量明显高于对照组；再灌注后30min。实验组肠粘膜的损伤明显轻于对照组，双糖酶活性明显高于对照组，而门静脉血中内毒素浓度明显低于对照组；两个组移植术后24h肠粘膜通透性均明显增加，但对照组较实验组增加更明显。结论 保存液中添加谷氨酰胺能有效地改善移植小肠的功能，降低肠粘膜的通透性，减轻肠粘膜的组织损伤程度。     

体外持续肝脏灌注常温保存和HTK液低温保存无心跳供肝效果的比较

目的 比较应用组氨酸-色氨酸-酮戊二酸(HTK)液低温保存和体外持续肝脏灌注(ECLP)系统常温保存无心跳供肝的效果.方法 按保存方法不同将供肝随机分为A组和B组:供肝切取后,A组用HTK液在低温下保存10 h;B组用ECLP系统在常温下用稀释的自体血液持续灌注10 h.两组供肝再经过60 min冷缺血期后,连接ECLP系统用稀释的自体血液再灌注4 h.观察再灌注后1、2、3、4 h四个时间点的胆汁分泌量,门静脉和肝动脉的压力,肝脏耗氧率的变化,灌注液中丙氨酸转氨酶(ALT)、乳酸脱氢酶(LDH)、葡萄糖水平以及灌注后供肝的常规病理和超微病理变化.结果 B组再灌注后1、2、3、4 h时间点的胆汁分泌量,门静脉和肝动脉的压力,灌注液中ALT、LDH和葡萄糖水平,以及2、3、4 h时间点的耗氧率与A组比较,差异均有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01);B组供肝的病理损害程度较A组轻.结论 供肝切取后10 h内,利用ECLP系统持续灌注常温保存比用HTK液单纯低温保存在维持无心跳供肝的功能和生理活性方面效果更好.     

自制CZ—1液对兔心肌组织低温延时保存的生化学指标观察

研制出我国自制的多种改良的ＵＷ液，是摆在移植界的一大课题。我院于１９９２年开始研制成长征－１号多器官保存液（简称ＣＺ－１液），同时对心肌组织０、６、１２、１８、２４小时冷冻保存后的生化学指标作了观察。结果表明：与ＵＷ液比较，ＣＺ－１液０、１２、１８、２４小时冷冻保存兔心肌组织ＡＴＰ含量无明显差别。而ＣＺ－１液冷冻保存心肌线粒体Ｃａ＾２＋超载明显缓于ＵＷ液。文章认为从生化指标变化来说，我们自的ＣＺ－     

腺苷A1受体诱导预处理延迟效应对供心保存的影响及机制探讨

目的　探讨腺苷A1受体激动剂预处理延迟效应对保存大鼠心脏的影响及其机制。方法　Wistar大鼠随机分为 8组 ,A、C组以高选择性腺苷A1受体激动剂 (CCPA)预处理 ;D、E、F组在CCPA预处理前分别注射锰 超氧化物歧化酶 (Mn SOD)反义、有意义、错配寡核苷酸 (ODN) ;B、G组注射生理盐水 ,H组只注射反义寡核苷酸。 2 4h后 ,A、B组用 4℃St.Thomas液保存 4h ,复灌 1h ,而另 6组采取低温缺血 3h ,复灌 1h。观测心功能、磷酸肌酸激酶 (CK mb)、三磷酸腺苷 (ATP)含量等。结果　A组左室内压上升与下降最大速率恢复率 (±dp/dtmax,% )为 6 2 .83± 17.2 7,6 6 .81± 18.99,心肌ATP含量 (10 3 μmol/g)为3.6 7± 1.4 2 ;而B组分别为 4 0 .4 1± 18.2 9,4 4 .70± 2 5 .14 ,1.4 6± 0 .5 4 ;A组均明显高于B组 ,差异均有显著性 (P <0 .0 1orP <0 .0 5 )。C组±dp/dtmax恢复率、ATP、Mn SOD活性均明显高于D、G、H组 (P <0 .0 1orP <0 .0 5 ) ,而与E、F组比较 ,差异无显著性。结论　腺苷A1受体激动剂能诱导预处理的延迟效应 ,改善离体大鼠心脏的保存效果 ,而该效应与Mn SOD的高表达有关。