CsA、MPA和RPM对CD_(28)通路共刺激后淋巴细IL-4 mRNA表达的影响

目的　观察环孢素Ａ（ＣｓＡ） 、霉酚酸（ ＭＰＡ） 和雷帕霉素（ＲＰＭ） 对ＣＤ２８ 通路共刺激后淋巴细胞ＩＬ４ ｍ ＲＮＡ 表达的影响。　方法　以ＰＣＲ 扩增方法获得ＩＬ４ 特异的ｃＤＮＡ 片段,并将其克隆至ＰＧＥＭ３Ｚ 载体中。以此作为探针对ＲＴＰＣＲ 产物进行杂交定量,比较三种免疫抑制剂对ＣＤ２８通路共刺激后淋巴细胞ＩＬ４ ｍ ＲＮＡ 表达的影响。　结果　以抗ＣＤ３ ｍ Ａｂ ＋ 抗ＣＤ２８ ｍ Ａｂ 共刺激后,发现淋巴细胞稳定地表达ＩＬ４ ｍ ＲＮＡ;ＣｓＡ 和ＭＰＡ 未能抑制淋巴细胞ＩＬ４ ｍ ＲＮＡ 的表达,而ＲＰＭ则能产生显著抑制。　结论　ＲＰＭ 能抑制ＣＤ２８ 通路共刺激后ＩＬ４ ｍ ＲＮＡ 的表达,而ＣｓＡ 和ＭＰＡ对这一过程无抑制作用。     

淋巴细胞CD28通路活化后Th1/Th2细胞因子mRNA表达及CsA的抑制作用

采用ＲＴＰＣＲ方法，观察ＣＤ２８通路活化后淋巴细胞Ｔｈ１／Ｔｈ２细胞因子ｍＲＮＡ表达水平及ＣｓＡ的抑制作用。取正常人外周血淋巴细胞，培养过程中分别给予抗ＣＤ３ｍＡｂ单独刺激或抗ＣＤ３ｍＡｂ＋抗ＣＤ２８ｍＡｂ共同刺激。提取细胞总ＲＮＡ并逆转录成ｃＤＮＡ，对Ｔｈ１细胞因子（ＩＦＮγ、ＩＬ２）和Ｔｈ２细胞因子（ＩＬ４、ＩＬ１０）ｃＤＮＡ进行扩增。结果显示：共刺激信号可使Ｔｈ１细胞因子基因ｍＲＮＡ转录增加，且对ＣｓＡ的抑制作用产生抵抗；而对Ｔｈ２细胞因子则不产生明显影响。研究表明：ＣＤ２８共刺激信号主要增强淋巴细胞Ｔｈ１细胞因子基因ｍＲＮＡ表达，并可能参与其分化调节；这一活化通路不被ＣｓＡ阻断。     

淋巴细胞CD28通路活化后Th1／Th2细胞因子mRNA表达及CsA的 …

采用ＲＴ－ＰＣＲ方法，观察ＣＤ２８通路活化后淋巴细胞Ｔｈ１／Ｔｈ２细胞因子ｍＲＮＡ表达水平及ＣｓＡ的抑制作用。取正常人外周血淋巴细胞，培养过程中分别给予抗ＣＤ３ｍＡｂ单独刺激或抗ＣＤ３ｍＡｂ＋抗ＣＤ２８ｍＡｂ共同刺激。提取细胞总ＲＮＡ并逆转录成ｃＤＮＡ，对Ｔｈ１细胞因子基因ｍＲＮＡ转录增加，且对ＣｓＡ的抑制作用产生抵抗；而对Ｔｈ２细胞因子则不产生明显影响。研究表明：ＣＤ２８共刺激信号主要增强淋巴细     

抗CD3与抗CD28单克隆抗体共刺激对淋巴细胞免疫活化基因mRNA表达的影响

目的　观察ＣＤ２８ 共刺激信号对淋巴细胞免疫活化基因表达的影响及环孢素Ａ（ＣｓＡ）对它们的抑制作用。方法　分离健康人外周血单个核细胞, 分别给予抗ＣＤ３ 单克隆抗体（ 抗ＣＤ３ｍＡｂ） 单刺激或抗ＣＤ３ ｍＡｂ＋ 抗ＣＤ２８ 单克隆抗体（抗ＣＤ２８ ｍＡｂ）共刺激培养; 加或不加入ＣｓＡ。于培养后６ ｈ 和２４ ｈ 收集细胞。以逆转录聚合酶链反应（ＲＴＰＣＲ） 检测βＡｃｔｉｎ、ＣＤ４０Ｌ、ｂｃｌｘＬ、ＴＧＦβ１ 、Ｆａｓ、ＦａｓＬ、穿孔素和颗粒酶ＢｍＲＮＡ 表达水平。结果　ＣＤ２８ 共刺激信号能显著增强免疫活化基因ｍＲＮＡ 的表达;ＣｓＡ 对ＦａｓＬ和颗粒酶Ｂ的ｍ ＲＮＡ表达能产生抑制, 而对共刺激后其余免疫活化基因的表达无明显抑制。结论　ＣＤ２８ 共刺激信号通过提高多种Ｔ 淋巴细胞相关的免疫活化基因的表达水平, 而使免疫反应的活化、增殖和效应过程均得到增强;ＣｓＡ 对这一过程并非完全无效, 仍可能具有调节作用。     

抗CD3与抗CD28单克隆抗体共刺激对淋巴细胞免疫活化基因m …

目的 观察ＣＤ２８共刺激信号对淋巴细胞免疫活化基因表达的影响及环孢素Ａ（ＣｓＡ）对它们的抑制作用。方法 分离健康人外周血单个核细胞,分别给予抗ＣＤ３单克隆抗体（抗ＣＤ３ｍＡｂ）单刺激或抗ＣＤ３ｍＡｂ＋抗ＣＤＷ２８单克隆抗体（抗ＣＤ２８ｍＡｂ）共刺激培养;加或不加入ＣｓＡ。于培养后６ｈ和２４ｈ收集细胞。以逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测β－Ａｃｔｉｎ、ＣＤ４０Ｌ、ｂｃｌ－ｘＬ、ＴＧＦ－β１、Ｆ     

LFA-1共刺激诱导狼疮性肾炎外周血单个核细胞IL-10表达的研究

目的：探讨淋巴细胞功能相关抗原－１（ＬＦＡ－１）对活动性狼疮肾炎（ＬＮ）外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）白介素 １０（ＩＬ－１０）的调节作用。方法：利用半定量 ＲＴ－ＰＣＲ技术观察 ＬＦＡ－ １共刺激对活动性 ＬＮ患者 ＰＢＭＣ ＩＬ－１０ ｍＲＮＡ表达的影响。结果：单独抗ＣＤ３抗体（３０ ｎｇ／ｍｌ）能诱导ＬＮ 患者ＰＢＭＣ ＩＬ－１０ ｍＲＮＡ轻微表达（０．４３＋０．０３ｖｓ ０．５５±０．４４,Ｐ＜０．０５）而在抗ＣＤ３抗体（３０ ｎｇ／ｍｌ）存在的情况下,抗ＬＦＡ－１抗体（２ μｇ／ｍｌ,相当于ＬＦＡ－１配体）共刺激时明显增加了ＰＢＭＣ ＩＬ—１０ ｍＲＮＡ表达（１．３１±０．０８ｖｓ ０．５５＋０,０４,Ｐ＜０．０１）。ＬＦＡ－１中和抗体明显抑制了这种共刺激诱导的ＩＬ—１０ ｍＲＮＡ表达（１．３１±０．０８ｖｓ ０．６４ ±０．０３,Ｐ＜０．０１）。抗ＬＦＡ－１抗体单独刺激时并不引起 ＩＬ－１０ ｍＲＮＡ表达变化（Ｐ＞０．０５）。结论：ＬＦＡ－１作为共刺激分子诱导 ＩＬ－ １０ ｍＲＮＡ表达可能是其参与 ＬＮ发病的机制之一。     

抗CD3McAb和IL—2培养的肝癌TIL的表型变化

目的 研究抗ＣＤ３单克隆抗体对肝癌肿瘤浸润淋巴细胞的表型变化的影响。方法 应用间接免疫荧光法检测肝癌ＴＩＬ的ＣＤ３,ＣＤ４,ＣＤ８,Ｔａｃ表达。结果 初始分离的ＴＩＬ的ＣＤ＾＋３为主,经ＩＬ－２培养４周后,ＣＤ３,ＣＤ４,ＣＤ８,Ｔａｃ表达均升高,１μｇ／ｍｌ抗ＣＤ３ＭｃＡｂ与ＩＬ－２共同培养ＴＩＬ的ＣＤ３,ＣＤ４,ＣＤ８,Ｔａｃ的表达升高明显,尤以ＣＤ８,Ｔａｃ表达升高显著。结论抗ＣＤ３ＭｃＡｂ     

多药耐药基因在泌尿系统肿瘤细胞系中的表达

目的检测泌尿系统肿瘤多药耐药基因及其产物的表达。方法对肾颗粒细胞癌细胞系ＧＲＣ１，肾透明细胞癌细胞系ＲＣＣ９４９，膀胱移行细胞癌细胞系ＢＩＵ８７、Ｔ２４、ＥＪ，前列腺癌细胞系ＰＣ３ｍ和对照的白血病细胞系ＨＬ６０进行免疫细胞化学和逆转录聚合酶链反应（ＲＴＰＣＲ）检测。结果只有ＧＲＣ１同时表达Ｐ糖蛋白（ＰＧＰ）和ＭＤＲ１基因ｍＲＮＡ，其他肿瘤细胞系均无表达。结论泌尿系肿瘤细胞系多数无ＰＧＰ也没有ＭＤＲ１基因ｍＲＮＡ水平的表达，只有ＧＲＣ１例外     

梗阻性黄疸时胆道内压力和门静脉血流与IL-2、sIL-2R及T淋巴细胞亚群变化的关系探讨

为探讨梗阻性黄疸患者败血症的发生机理，研究了３７例梗阻性黄疸（Ａ组）和９０例胆囊结石（Ｂ组）患者的胆道内压力、门静脉血流速度与白细胞介素－２（ＩＬ－２）、可溶性白细胞介素－２受体（ｓＩＬ－２Ｒ）及Ｔ淋巴细胞亚群的关系。Ａ组又分为急诊手术组（Ａ１）、择期手术组（Ａ２）、＞６０岁组（Ａ３）和＜６０岁组（Ａ４）４个亚组。结果显示：Ａ及Ａ１～４各组术前ＣＤ３＋、ＣＤ４＋、ＣＤ８＋值均显著低于术后１０天值（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１），ｓＩＬ－２Ｒ显著高于术后１０天值（Ｐ＜０．０１）。Ａ１组术前ｓＩＬ－２Ｒ极显著高于Ａ及Ａ２～４组（Ｐ＜０．０１）。相关分析显示胆道内压力与ＩＬ－２、ＣＤ３＋、ＣＤ４＋及ＣＤ８＋呈负相关，与ｓＩＬ－２Ｒ呈正相关（Ｐ＜０．０１），门静脉血流速度与ＩＬ－２呈正相关（Ｐ＜０．０１）。由此表明梗阻性黄疸感染与宿主细胞免疫功能降低密切相关。     

重组合异种骨移植对IL—2生成影响的研究

采用重组合异种骨移植建立ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠股后肌袋模型，以研究对Ｔ淋巴细胞分泌Ｉ－２的功能变化及对细胞免疫的影响。结果显示：（１）ＲＢＸ移植后２天ＩＬ－２升高是由于手术他伤刺激所致的应激反应。（２）术后７￣１４天ＲＢＸ，ｂＢＭＰ对ＩＬ－２ 显著的抑制作用，２８￣４２天回升。（３）对Ｔ淋巴细胞功能的抑制作用主要是ＢＭＰ所致，经处理的牛板质骨泣不具免疫源性。提示：ＲＢＸ移植无明显免疫排异反应。ＢＭＰ能抑     

InterleuKin-6与前列腺癌的发生发展

内分泌治疗前列腺癌（ＰＣＡ），通常会导致其复发，且复发后，ＰＣＡ不再对雌激素治疗敏感，甚至对化疗物ＣＤＤＰ、ＶＰ－１６也相对耐药。本文探讨了ＰＣＡ从激素依赖向非激素依赖过渡的分子机理，认为细胞因子ＩＬ－６和癌基因ｂｃｌ－２扮演了重要角色，ＩＬ－６和ｂｃｌ－２的表达呈正相关。抗ＩＬ－６的单抗或ＩＬ－６的嵌合毒素可为治疗ＰＣＡ开辟一辅助治疗新领域。     

地塞米松对创伤性急性肺损伤家兔肿瘤坏死因子-α的干预作用

目的 探讨地塞米松（Ｄｅｘ）对创伤性急性肺损伤（ＡＬＩ）治疗作用的可能机制。方法 采用逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）、酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）检测２４只大耳白兔肺组织肿瘤坏死因子－α基因（ＴＮＦ－αｍＲＮＡ）表达及肺泡巨噬细胞（ＡＭ）培养上清液中肿瘤坏死因子－α（ＴＮＦ－α）、白细胞介素（ＩＬ）－６水平。结果 创伤性ＡＬＩ兔肺组织ＴＮＦ－αｍＲＮＡ表达及ＡＭ培养上清液中ＴＮＦ－α,ＩＬ－６含量较正常对照组比较明显升高（Ｐ〈０．０１）。Ｄｅｘ治疗后能显著下调ＴＮＦ－αｍＲＮＡ的表达（６８％,Ｐ〈０．０１）,降低ＡＭ分泌ＴＮＦ－α（Ｐ〈０．０５）及ＩＬ－６水平（Ｐ〈０．０１）。结论 Ｄｅｘ能缓解创伤性ＡＬＩ的发生、发展。其机制与其对ＴＮＦ－α、ＩＬ－６等炎性介质的调节作用密切相关。     

地塞米松和川芎嗪对狼疮肾炎外周血单个核细胞白细胞介素—1 …

目的 探讨地塞米松、川芎嗪对活动期,静止期狼疮肾炎（ＬＮ）外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）白细胞介素－１２（ＩＬ－１２）表达的影响。方法 应用地塞米松,川芎嗪对ＬＮ患者ＰＢＭＣ培养,以正常人为对照,分别采用ＥＬＩＳＡ法和半定量ＲＴ－ＰＣＲ法检测细胞上清液及细胞ＩＬ－２和ＩＬ－１２ Ｐ４０ｍＲＮＡ表达。结果ＬＮ活动期,静止期较正常对照组ＩＬ－１２蛋白,基因水平明显增高（Ｐ〈０．０１）。地塞米松明显抑制狼     

环孢素A对T细胞活化CD28通路的影响

Ｔ细胞需两种以上刺激信号才能充分活化。环孢素Ａ通过阻断ＣＤ３经通路而产生免疫抑制效应，本文研究ＣｓＡ对ＣＤ２８活化通路的影响。研究发现以抗ＣＤ２单抗和抗ＣＤ２８单抗共刺激后，淋巴细胞增殖比以ＣＤ３单抗单独刺激时显著增强，且对ＣｓＡ不敏感，ＩＤ５０较单独刺激时高４－５倍，研究表明．：ＣＤ２８通路能提供共刺激信号，使ＴＸ以分活化增殖，并且这一活化通路能对ＣｓＡ产生抵抗 。     

环孢素A联合雷公藤单体T4对人系膜细胞增殖及其表达、合成白细胞介素-6的影响

目的探讨环孢素Ａ（ＣｓＡ）和雷公藤单体Ｔ４（Ｔ４）的免疫抑制机制以及两药联合使用的效应，特别是小剂量ＣｓＡ、Ｔ４联合获得较强免疫抑制效应的可能性。方法用３Ｈ－ＴｄＲ掺入率法测定人系膜细胞（ＭｓＣ）增殖，用逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）和ＥＬＩＳＡ法测定细胞ＩＬ－６ｍＲＮＡ表达及培养上清ＩＬ－６含量。结果ＣｓＡ和Ｔ４均剂量依赖性抑制系膜细胞增殖及ＩＬ－６合成，两药联合产生明显的协同作用，小剂量ＣｓＡ、Ｔ４联合与大剂量ＣｓＡ作用相当。结论ＣｓＡ和Ｔ４具有协同免疫抑制作用     

共刺激分子B7 mRNA在大鼠热缺血再灌注损伤肾组织中的表达

目的：进一步验证Ｂ７－ＣＤ２８共刺激通路在肾缺血再灌注损伤中的作用。方法：在大鼠单肾热缺血再灌注损伤模型的基础上,将６０只雄性ＳＤ大鼠均分为假手术组,缺血３０ｍｉｎ再灌注组和缺血６０ｍｉｎ再灌注组,利用多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）半定量技术检测不同损伤程度的肾组织中共刺激分子Ｂ７的ｍＲＮＡ表达水平。结果：正常和缺血肾组织中Ｂ７ｍＲＮＡ的表达处于极低水平,再灌注后肾组织中Ｂ７ｍＲＮＡ的表达开始逐渐升     

胃癌患者手术前后外周血白细胞介素—2mRNA的表达

观察胃癌患者手术前后外周血淋巴细胞（ＰＢＬ）白细胞介素－２（ＩＬ－２）ｍＲＮＡ表达的变化，以探讨肿瘤切除对其ＰＢＬ ＩＬ－２表达及ＩＬ－２分泌水平的影响。结果：（１）术前ＩＬ－２ｍＲＮＡ表达明显低于正常对照组（Ｐ〈０．０５），ＩＬ－２分泌减少（Ｐ〈０．０１），而术后４周，ＩＬ－２ｍＲＮＡ表达明显恢复，但仍低于正常对照组（Ｐ〈０．０５）ＩＬ－２分泌接近正常。ＰＢＬ经植物血弟素活化后，其手术前后ＰＢＬ     

胆管癌神经浸润转移与DPC4神经细胞粘附分子表达偶联的关系

目的 研究ＤＰＣ４基因和神经细胞粘附分子分子表达的偶联性与胆客癌神经浸润转移的关系。方法 以ＲＴ－ＰＣＲ技术扩增１８例新鲜胆管癌标本ＲＮＡ,＾３２Ｐ标记ＤＰＣ４,ＮＣＡＭ作探针,和斑点杂交,一影图像分析确定３种分子表达强度,建立ＤＰＣ４和ＮＣＡＭ表达关系的数学模型。结果 ＤＰＣ４基因表达强度随胆管癌恶性程度的增加厕 降低,ＮＣＡＭ则升高。数学关系模型为Ｙ＝０．５９５５／（－０．０３３９＋Ｘ）,显示     

大肠癌组织中结直肠癌缺失基因mRNA及增殖细胞核抗原的表达

目的 探讨结直肠癌缺失基因（ＤＣＣＧ）及增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）与大肠癌的临床病理特征关系，方法 用逆转录ＰＣＲ及免疫组织化学染色方法，分别检测ＤＣＣＧｍＲＮＡ及ＰＣＮＡ在３３例大肠腺癌及正常粘膜组织中的表达状况。结果 （１）ＤＣＣＧｍＲＮＡ表达缺失率为６１％，ＰＣＮＡ指数为３％～９７％。（２）大肠癌组织ＤＣＣＧｍＲＮＡ表达缺失及及ＰＣＮＡ指数与肿瘤分化程度，浸润深度和转移情况有显著相关性（Ｐ〉     

共刺激分子B7在泌尿系肿瘤的表达

目的探讨Ｂ７与ＣＤ２８和ＣＴＬＡ４作为共刺激信号在抗肿瘤免疫中的作用。方法应用逆转录聚合酶链反应（ＲＴＰＣＲ）和免疫组织化学方法，检测４５例泌尿系肿瘤Ｂ７基因在ｍＲＮＡ和蛋白水平的表达情况。结果ＲＴＰＣＲ１１例阳性，免疫组化６例阳性，ＲＴＰＣＲ与免疫组化的检测结果有所不同。病理切片观察Ｂ７阳性肿瘤有明显的淋巴细胞浸润，肿瘤内有坏死。结论某些肿瘤细胞表达Ｂ７基因，肿瘤内有抗肿瘤免疫反应，提示Ｂ７基因表达可能与预后有关