改良大鼠脊髓损伤模型椎管开窗方法的应用研究

目的 探讨新型改良大鼠脊髓损伤模型椎管开窗方法的实用性。 方法 将40只普通级成年SD大鼠按照随机数字表法分为2组：传统组（20只,采用传统蚕食法椎管开窗进行造模）、改良组（20只,采用椎板揭盖开窗法进行造模）,比较2组切口长度、手术时间、术中出血量及术后死亡率,并于术后不同时间点评价2组大鼠运动功能（basso beattie bresnahan,BBB）评分及HE染色结果判定脊髓功能障碍及造模成功与否。 结果 切口长度、手术时间、出血量及术后28 d死亡率的比较,改良组明显优于传统组,差异具有统计学意义（P<0.05）。2组大鼠术后BBB评分及HE染色结果提示以椎板揭盖开窗法制备大鼠脊髓损伤模型成功率与传统方法比较,差异无统计学意义（P>0.05）。 结论 改良大鼠脊髓损伤模型椎板开窗相较传统椎管开窗方法有明显的优势,可广泛运用于脊髓损伤基础研究的模型制作。     

椎管损伤与脊髓损伤相关性研究的现状

椎管的完整性对保护脊髓及马尾神经免受损伤起到重要的作用,而目前的研究表明椎管损伤是造成脊髓神经组织损伤及阻止神经功能恢复的主要因素.现就目前对在脊柱爆裂型骨折中椎管损伤与脊髓损伤相关性研究的现状及进展综述如下:     

一种改良的大鼠脊髓半横断模型制备

为了更好地观察和治疗脊髓损伤 ,制备动物损伤模型非常必要。目前多用Ramberg[1] 和Borgens[2 ] 建立的大鼠半横断脊髓损伤模型 ,本研究主要进一步改进脊髓半横断损伤模型 ,克服缺点 ,使其操作简单、实用 ,从而提高实验效率。一、材料与方法1.制备旋切损伤针 :取 1.0ml注射器针头 ,用尖嘴钳子将针尖向两侧掰开 ,使针尖呈一平面 ,将左侧角磨平 ,右侧角外缘磨锐利 ,将针尖向原针孔的背侧弯曲 90° ,弯曲部分的长度等于所做大鼠半侧脊髓的半径。此时旋切损伤针制备完成。2 .旋切脊髓半横断损伤模型的制备 :( 1)取 2 5 0 g左右大鼠 10只 ,10 %…     

一种改良方法构建大鼠脊髓损伤体外细胞模型

目的 探讨大鼠脊髓神经细胞原代培养、鉴定的方法并构建大鼠脊髓损伤体外细胞模型.方法 取孕15dSD大鼠胚胎,分离脊髓组织并采用改良的胰酶消化联合机械分离法进行脊髓神经细胞的原代培养;采用免疫荧光三标染色鉴定脊髓神经细胞;应用H2O2干预构建大鼠脊髓损伤体外细胞模型.结果 取孕15d大鼠胚胎采用改良的胰酶消化联合机械分离...     

大鼠脊髓腹侧压迫损伤模型的研制

目的：研制一个理想的脊髓损伤动物模型。方法：利用杠杆原理设计了大鼠Ｔ１３ 脊髓腹侧压迫模型,为了验证其稳定性,本研究将４０ 只大鼠随机分为６ 组：对照组、假手术组、３４－５ｇ 压迫１ ｍｉｎ 组、３４－５ｇ 压迫４ ｍｉｎ 组、３４－５ｇ 压迫８ ｍｉｎ 组、固定脊柱再以３４－５ｇ 压迫４ ｍｉｎ 组,于伤后每天观察倾斜平面临界角,２ 周观察神经功能评分,并观察了３４－５ｇ压迫８ ｍｉｎ 组伤后３０ ｍｉｎ 、１ｈ 、４ｈ 、２４ｈ 、２ 周的组织学特点。结果和结论：该模型具有可重复性、可定量、模拟临床、简便易行、经济易取等优点。     

腺苷治疗大鼠脊髓损伤的初步研究

目的 通过观察大鼠脊髓损伤后内源性细胞外腺苷含量的变化以及外源性腺苷对脊髓损伤后脊髓组织细胞外钙离子和神经功能的影响,探讨腺苷在脊髓继发性损伤中的作用。 方法 ＳＤ大鼠５８只,制作成Ｔ１３脊髓腹侧压迫模型,用微透析技术每２０ｍｉｎ连续收集脊髓损伤后脊髓组织细胞外液,用高效液相色谱法仪紫外检测法检测细胞外液腺苷的含量;伤前１５ｍｉｎ蛛网膜下给予非特异性腺苷受体激动剂２－氯腺苷,伤后立即开始每１０ｍｉ     

实验动物脊髓的损伤模型

随着工农业、建筑业及交通的发展,脊髓损伤的发病率有逐渐升高的趋势.由于脊髓是许多神经功能的中介通路,脊髓损伤及其继发性病理生理反应可直接导致神经功能损伤,从而引起组织、器官功能障碍;加之脊髓损伤治疗困难,因而致残率与死亡率非常高,不仅患者本人要受功能废损带来的不便和痛苦,也给社会和家庭带来了沉重的负担.     

大鼠脊髓全横断损伤模型的建立及相关问题

近年来,随着脊髓损伤（spinal cord injury,SCI）发生率的不断增加和人类对疾病认识的不断深入,在SCI的基础研究领域和临床治疗方面取得了一定的进展。但由于疾病的复杂性和神经科学的特殊性,对于人类SCI的治疗研究至今尚未取得突破性的成果。     

大鼠脊髓损伤致截瘫后肠道细菌移位的实验研究

目的：探讨大鼠脊髓损伤致截瘫后是否发生肠道细菌移位。方法：建立大鼠脊髓损伤性截瘫模型，以脊髓损伤性截瘫后12h、24h、48h大白鼠为实验组，未损伤脊髓的正常大白鼠为对照组。在无菌条件下，采集动物下腔静脉血进行内毒素定量测定和细菌培养，采集肝、脾、肠系膜淋巴结、肠腔内容物作细菌培养并进行菌种鉴定。取实验组和对照组各动物的肝、脾、肠系膜淋巴结、空肠、回肠进行病理切片HE染色检查，取空、回肠进行电镜检查。结果：大鼠脊髓损伤致截瘫后24h开始出现内毒素血症，截瘫后48h出现细菌移位。结论：大鼠脊髓损伤致截瘫后将发生肠道细菌移位，提示脊髓损伤截瘫的病人应尽早给予抗生素治疗。     

大鼠脊髓慢性压迫性损伤动物模型的建立

目的 建立一种大鼠脊髓慢性压迫性损伤模型。方法 应用平头不锈钢螺钉从大鼠C4椎体前侧钻入压迫脊髓腹侧，术后保留螺钉30d，并用联合行为评分(CBS)、神经电生理、光镜、电镜检查进行综合评判。结果 模型动物脊髓慢性压迫随着螺钉轻、中、重程度的不同，其术后行为学、运动诱发电位(MEP)及组织学观察符合脊髓慢性压迫症病理改变的特点。结论 建立了大鼠脊髓慢性压迫性损伤模型，此模型制作简便，可重复性强，脊髓损伤能表现出不同的压迫深度，为进一步研究脊髓慢性压迫损伤病理机制奠定了基础。     

Effect of naloxone on functional recovery after experimental spinal cord injury in the rat

The effect of the opiate antagonist naloxone on the functional recovery of rats injured with a 10 g-cm impact to the spinal cord at the T-3 level is studied. Sixteen rats were treated with 0.8 mg of naloxone in an intraperitoneal bolus 45 and 120 minutes after injury, 16 rats were given 4 mL of saline instead of naloxone, and 16 rats were neither injured nor treated. To asses weekly the motor recovery of the injured animals, the inclined plane method was employed. After the 10-week assessment period, naloxone-treated animals showed a significantly better performance on the inclined plane than saline-treated animals. Naloxone may be useful for the treatment of spinal cord injury although its mechanism of action remains unknown.     

淫羊藿苷在大鼠脊髓损伤中的神经保护作用

目的:研究淫羊藿苷在大鼠脊髓损伤中的神经保护作用。方法:108只SPF级雄性3月龄SD大鼠按随机数字表法分为实验组、对照组及假手术组3组,每组36只。对照组和实验组采用改良Allen法制作脊髓损伤模型,假手术组仅切开椎板不损伤脊髓。术后即刻实验组给予淫羊藿苷(100 mg/kg)灌胃,对照组和假手术组给予等量生理盐水灌胃,每日2次。术后1、2、3 d采用BBB评分法评定大鼠运动功能;术后72 h采用分光光度法检测髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)的活性,酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α、白介素(interleukin,IL)-1β的含量,免疫组化染色检测MPO、TNF-α、IL-1β的表达;采用硫代巴比妥酸法检测丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量,黄嘌呤氧化酶法检测超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性;采用TUNEL法检测细胞凋亡并计算细胞凋亡指数(apoptosis index,AI);光镜观察脊髓损伤后组织病理学的改变并行组织病理学评分。结果:术后各时间点对照组和实验组大鼠BBB评分均显著低于假手术组(P0.05);术后2、3 d实验组大鼠BBB评分均显著高于对照组(P0.05)。术后72 h,对照组和实验组MPO活性和TNF-α、IL-1β的含量显著高于假手术组(P0.05);实验组显著低于对照组(P0.05)。对照组和实验组MPO、TNF-α、IL-1β的表达显著高于假手术组(P0.05);实验组显著低于对照组(P0.05)。对照组和实验组MDA含量显著高于假手术组,实验组显著低于对照组(P0.05);对照组和实验组SOD活性显著低于假手术组,实验组显著高于对照组(P0.05)。对照组和实验组脊髓组织中AI显著高于假手术组,实验组显著低于对照组(P0.05)。对照组和实验组脊髓组织病理学评分均显著高于假手术组,实验组均显著低于对照组(P0.05)。结论:淫羊藿苷能够抑制脊髓损伤后的炎症、脂质过氧化和细胞凋亡,减轻脊髓组织病理学损伤,改善脊髓损伤大鼠的运动功能,有效保护脊髓组织,具有明显的神经保护作用。     

油红O染色在大鼠脊髓损伤中的应用

目的:探讨油红O染色在评价大鼠脊髓损伤中的应用价值。方法:选取体重220～260 g的SD雄鼠24只,编号后简单随机抽样分为正常对照组与脊髓横断组,正常对照组6只,脊髓横断组18只。脊髓横断组于T₁₀节段横断脊髓。于术后1、2、4周在脊髓横断组分别随机各抽取6只处死,以横断部位为中心取脊髓组织标本。正常组取相同部位脊髓组织标本,行冰冻切片,进行油红O染色观察。结果:正常对照组大鼠脊髓白质均匀着色,与灰质有较明显的区分。脊髓横断组在术后1、2、4周时白质着色不均匀,断端液化坏死灶呈进行性扩大,油红O染色逐渐明显。结论:油红O染色能够较明显的区分白质及灰质,在一定程度上反映了白质的完整程度。断端坏死灶内油红O染色随脊髓损伤时间的延长逐渐明显反映了脂质在脊髓损伤过程中起着重要作用。     

An ovine model of spinal cord injury

Objective: To develop a large animal model of spinal cord injury (SCI), for use in translational studies of spinal cord stimulation (SCS) in the treatment of spasticity. We seek to establish thresholds for the SCS parameters associated with reduction of post-SCI spasticity in the pelvic limbs, with implications for patients.

Study Design: The weight-drop method was used to create a moderate SCI in adult sheep, leading to mild spasticity in the pelvic limbs. Electrodes for electromyography (EMG) and an epidural spinal cord stimulator were then implanted. Behavioral and electrophysiological data were taken during treadmill ambulation in six animals, and in one animal with and without SCS at 0.1, 0.3, 0.5, and 0.9?V.

Setting: All surgical procedures were carried out at the University of Iowa. The gait measurements were made at Iowa State University.

Material and Methods: Nine adult female sheep were used in these institutionally approved protocols. Six of them were trained in treadmill ambulation prior to SCI surgeries, and underwent gait analysis pre- and post-SCI. Stretch reflex and H-reflex measurements were also made in conscious animals.

Results: Gait analysis revealed repeatable quantitative differences in 20% of the key kinematic parameters of the sheep, pre- and post-SCI. Hock joint angular velocity increased toward the normal pre-injury baseline in the animal with SCS at 0.9?V.

Conclusion: The ovine model is workable as a large animal surrogate suitable for translational studies of novel SCS therapies aimed at relieving spasticity in patients with SCI.     

胸腰段骨折椎管内骨折块与脊髓损伤的关系

目的：探索胸腰段椎管内骨折块对脊髓损伤的影响程度,确定脊髓受压的临界椎管狭窄率,为临床治疗的选择提供参考标准。方法：对121例不稳定性胸腰骨折进行改良Frankel分级法脊髓功能评估和CT椎管面积测量,作统计学分析。结果：56例有不同程度的脊髓功能损伤,其截瘫程度与椎管内骨块占位显著相关,相关程度以T12最高,L2最低。脊髓受压的椎管占位临界值为T1230％,T1135％,L140％,L255％。结论：胸腰段椎管内骨块占位程度与脊髓损伤有显著相关性。     

脊髓牵拉性损伤动物模型的建立

目的：建立大鼠脊髓牵拉性损伤的模型,探讨实验性脊髓牵拉性损伤的病理生理改变及临床意义。方法：双侧椎板切除显露大鼠脊髓的全宽、用模拟神经拉钩特制的牵开器由侧方牵拉脊髓,实现水平方向的脊髓牵拉性损伤,并用磁刺激运动诱发电位和行为学功能试验指标进行综合评价。结果：选用不同的牵拉比率（２０％、３０％和４０％）可以稳定地复制出不同程度的牵拉性脊髓损伤,其神经电生理的改变与行为学功能的改变有相关性。结论：此模     

成年小鼠颈5脊髓钳夹损伤模型的制备与评价

目的 :制备小鼠C5脊髓背侧及背外侧束钳夹损伤模型,评价损伤后动物的行为学和组织学表现。方法:采用C57/BL成年小鼠为实验对象,将16只动物随机分为损伤组和对照组,每组8只。动物麻醉后,切开背侧颈部皮肤,显露并切除小鼠C5椎板,损伤组采用自制改良FST DUMONT 5号手术钳分别钳夹背侧皮质脊髓束(dCST)和脊髓背外侧束两次;对照组仅切除椎板不做脊髓钳夹损伤。分别在术前和术后3d、2周、4周、6周、8周时采用圆筒实验、水平楼梯实验和食物抓取实验评价动物的行为学表现;术后8周时采用BDA顺行示踪观察皮质脊髓束(CST)和红核脊髓束(RST)在损伤后的情况。结果:钳夹损伤后,小鼠后肢步行功能正常但肢体的精细活动能力受到明显影响。在圆筒实验中,损伤组小鼠伤侧前肢的使用频率下降,前肢梳洗动作幅度受限,伤后各时间点与对照组相比差异均有统计学意义(P0.05);在水平楼梯实验中,损伤组小鼠对横梁的抓握精确性降低,伤后各时间点与对照组相比差异有统计学意义(P0.05);在食物抓取实验中,损伤组小鼠的食物抓取能力也出现了明显受限,伤后各时间点与对照组相比差异有统计学意义(P0.05)。以上行为学结果在伤后3d达高峰,2周后逐渐恢复,但直至8周仍不达正常水平。术后8周顺行示踪结果显示对照组小鼠CST和RST均显露清晰,纤维束呈纵行排列;损伤组小鼠CST和RST在损伤处大量断裂、逆向崩解,且无再生迹象。结论:成年小鼠C5脊髓钳夹损伤模型能够方便观察动物随意运动的控制情况及评价轴突的再生状况,适合作为轴突再生的研究模型。     

钙蛋白酶抑制剂对缺血再灌注损伤脊髓的保护作用

目的 观察大鼠脊髓缺血再灌注损伤后应用钙蛋白酶特异性抑制剂E-64-D,对脊髓神经细胞组织学改变和凋亡的影响及对大鼠后肢运动功能的保护作用.方法 选用纯种雄性成年SD大鼠106只,夹闭右肾动脉分支下腹主动脉30 min,再灌注即刻静脉应用钙蛋白酶特异性抑制剂E-64-D,观察再灌注后3、24、72 h和7 d脊髓损伤节段神经细胞的凋亡及再灌注后24、72h组织病理学改变;对再灌注后72 h的大鼠后肢功能进行评分.结果 脊髓缺血再灌注24 h开始出现神经细胞凋亡现象,脊髓组织出现病理学改变,神经元死亡,胶质细胞增生.应用E-64-D后,凋亡现象和细胞坏死得到抑制,差异有统计学意义(P<0.01).再灌注后72 h后肢功能也得到一定程度的保护.结论 脊髓再灌注损伤后静脉应用E-64-D治疗,可以明显抑制脊髓神经细胞的凋亡,有利于神经元的存活,损伤后3 d大鼠后肢运动功能得到一定程度的改善.     

一种可控性脊髓爆震伤模型的建立

目的建立实验室条件下的脊髓爆震伤模型,探讨脊髓爆震伤的致伤特点。方法采用单质锰炸药黑索金(RDX)纸壳雷管为爆源,随机取12只家兔,按爆距2、4、8 cm分为3组致伤,同时检测冲击波压强、正压作用时间。另将12只家兔随机分为致伤组和对照组,致伤组家兔按已选定的标准爆距致伤,观察伤后组织学变化。结果爆距2、4、8 cm测得冲击波压强分别为93.4、50.4、33.5 MPa,爆距4 cm时可造成双后肢运动诱发电位(MEP)潜伏期延长1.0 ms或波幅下降50%,而不致家兔死亡。病理学显示脊髓脊髓前角神经元出现明显坏死,髓鞘板层结构紊乱。结论本方法建立的可控性脊髓爆震伤模型简单、安全、有效,适用于实验室条件下的爆震伤研究。