实时荧光定量PCR技术检测儿童HBV-DNA载量

目的:研究儿童HBV-DNA及血清学标志物与乙肝病毒复制的关系,探讨其应用在儿童乙型肝炎患者的临床价值.方法:实时荧光定量PCR测定HBV-DNA;ELISA法酶联免疫吸附法检测血清标志物;速率法检测丙氨酸转氨酶(ALT),综合分析并评价其相互关系及临床联合检测的价值.结果:HBsAg+、HBeAg+、抗HBc+阳性组125例, 检出125例,检出率100%,含量为5.26×106～2.19×108拷贝/ml,ALT 35例增高,占28%;HBsAg+、抗HBe+、抗HBc+阳性组55例,15例被检出,检出率为27.3%,含量范围2.53×103～1.29×106拷贝/ml,ALT 10例增高,占18%;HBsAg+、抗HBc+阳性组10例,检出1例,检出率10%,含量3.19×103拷贝/ml.结论:儿童乙型肝炎患者HBeAg阳性组HBV-DNA载量较高,是否与其生理发育不够完善,机体免疫力低下,对病毒的抵抗力较弱有关.抗HBe阳性组相对复制水平较低,与成人差异无显著,HBV-DNA载量与ALT水平高低无相关性,乙肝病毒含量的高低与肝功能受损程度不呈正相关.     

乙型肝炎病毒DNA检测与其血清标志物的相关性

目的探讨实时荧光聚合酶链反应（FIQ—PCR）检测HBV—DNA与乙型肝炎病毒五项血清标志物（HBV—M）的关系。方法采用FO—PCR技术和酶联免疫吸附法（ELISA）分别检测637例患者血清中的HBV—DNA拷贝数和乙肝五项血清标志物。结果HBV—DNA在“大三阳”组（HBsAg＋HBeAg＋抗HBc＋和HBsAg＋HBeAg＋）和“小三阳”组（HBsAg＋抗HBe＋抗HBc＋和HBsAg＋抗LHBc＋）可检出,在“单纯抗体阳性”组（抗HBs＋抗HBe＋抗HBc＋、抗HBs＋抗HBc＋、抗HBs＋抗HBe＋、抗HBs＋、抗HBe＋抗HBc＋及抗HBc＋）未捡出。“大三阳”组患者血清中HBV—DNA检出率为92．13％。且82．68％的患者HBV—DNA拷贝数在105copies／ml以上;“小三阳”组患者血清中HBV—DNA检出率为44．39％,HBV—DNA拷贝数分布范围广。结论HBeAg的存在可间接反映HBV在体内的复制状态,而HBV—DNA的检测更客观地反映了HBV复制的程度和传染性。     

老年慢性乙型肝炎乙肝标志物及乙肝病毒DNA的检测

目的：了解老年慢性乙型肝炎患者体内乙型肝炎病毒（HBV）复制与血清标志物之间的关系。方法：分别用血清斑点杂交、PCR和PCR产物斑点杂交方法对100例老年慢性乙型肝炎标本进行检测。结果：在HBsAg、HBeAg及抗－HBc阳性的老年慢性乙肝中，三种方法的HBV－DNA检出率分别为66.67%、96.67%、100%；在HBsAg、抗－HBc及抗－HBe阳性患者中，三种方法的HBV－DNA检出率分别为27.78%、46.30%、51.85%；在抗－HBs、抗－HBc或抗－HBe阳性患者中三种方法的HBV－DNA检出率分别为0％、12．50％、18．75％。结论：在HBsAg、HBeAg同时阳性时，HBV复制最为活跃；在HBsAg、抗－HBc、抗－HBe同时阳性时，HBV受到一定程度的抑制；抗－HBs并伴有其它抗体阳性时HBV仍有复制。用杂交方法来判断PCR产物的结果更为准确。     

HBV-DNA与HBV血清标志物的关系

对312例HBV感染者进行HBV血清标志物检测,并同时以PCR法检测HBV—DNA,部分病人同期进行ALT检测.HBsAg、HBeAg抗HBC同时阳性者, HBV—DNA的检出率达92.7％,二者有较好的一致性.抗HBs阳性及抗HBc与抗HBe双阳性者,未检出 HBV—DNA,但单项抗HBc阳性者有20％(2/10)HBV—DNA阳性.分析HBeAg阴性,抗HBe阳性病例,HBV—DNA的检出与ALT改变无明显关系,但与临床分型有关.急性肝炎的检出率仅6.3％,而慢性活动型肝炎和肝硬化的检出率均达到50％以上.     

前S1蛋白与乙肝两对半各模式的相关性及其临床意义

目的 探讨PreS1与乙肝两对半(HBV免疫标志物)的相互关系、评价其临床义.方法 我们采用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法对247例携带乙型肝炎病毒不同标志物的急慢性乙型肝炎患者PreS1与HBV血清标志物进行比较.结果 乙肝病毒表面抗原(HBsAg)乙肝病毒e抗原(HBeAg)乙肝病毒核心抗体(HBcAb)阳性组PreS1的阳性率为87.1%,HBsAg和HBeAg阳性组PreS1的阳性率为77.7%,HBsAg抗HBe抗HBc阳性组中PreS1阳性率为52.8%,说明部分HBeAg阴性患者仍有病毒复制.结论 前S1蛋白在HBV感染早期就可检出,它能敏感地反映乙型肝炎病毒的复制情况,有助于乙型肝炎的诊断.     

重型乙型肝炎HBV表达模式的分析

目的　探讨乙肝病毒标志物 (HBV M )表达模式与重建乙型肝炎的关系 ,有利于重型肝炎的早期诊断。方法　采用酶联免疫吸附试验 (ELISA)检测 95例重型乙肝患者血清HBsAg、抗 HBs、HBeAg、抗 HBe、抗 HBc、抗 HBcIgM。 结果　 95例患者HBV M表达模式以HBsAg、抗 HBc阳性率最高 ,为 4 2 .1% ;其次为HBsAg、抗 HBe、抗 HBc,阳性率为 2 8.4 %。HBV M中HBSAg、HBeAg、抗 HBe、抗 HBc各项阳性率分别为 95 .8%、15 .8%、34.7%、98.9% ,HBeAg阳性存活组与未存活组的S/N值分别为 2 5 .0 2± 15 .87、2 8.5 1± 15 .2 5 ,两者比较无显著性差异 (P>0 .0 5 )。结论　患者感染HBV后其标志物表达模式HBeAg阴性与重型肝炎有密切相关性 ;HBV复制指标HBeAg阳性值高低并不影响重型乙型肝炎的预后。     

荧光定量PCR检测HBV-DNA与ELISA方法测定乙型肝炎五项指标相关性分析

目的:检测乙型肝炎(乙肝)患者血清中HBV DNA的含量,了解其与免疫学指标的关系。方法:采用荧光定量PCR技术和ELISA方法,分别检测3 120例乙型肝炎患者血清中HBV DNA含量和免疫学指标。结果:HBsAg、HBeAg、抗HBc阳性组HBV DNA检出率为96.8%,HBsAg、抗HBe、抗HBc阳性组HBV DNA检出率为51.5%,HBsAg、抗HBc阳性组HBV DNA检出率为48.5%,另抗HBs阳性组阳性率为3.1%,全阴组阳性率为5.0%。不同乙肝五项指标患者血清HBV DNA的检出率差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:荧光定量PCR技术在乙肝诊断、治疗过程监测及药效评价方面有应用价值。     

乙型肝炎患者血清中HBVDNA载量与肝功能改变的相关性研究

目的 探讨乙型肝炎患血清中乙肝病毒标志物与HBVDNA载量的关系，以及MBVDNA载量与肝功能改变的关系；方法 对460名HBV血清标志物阳性患进行了HBVDNA定量检测，采用罗氏公司Lightcycler荧光定量PCR法；HBV血清病毒标志物检测应用ELISA法。结果 HBsAg( )抗HBeAg( )抗HBc( )组患HBVDNA复制率为98．8％；HBeAg( )抗HBe( )抗HBc( )组复制率为48．6％；抗HBs( )抗HBe( )抗HBc( )组复制率21．4％；抗HBs( )抗HBc( )组复制率为8．3％抗HBe( )抗HBc( )组复制率为23．5％。29名血清ALT明显增高的乙肝患，其血清中HBVDNA载量与血清ALT的增高程度无明显相关性。结论 HBV感染的不同血清标志物产生形式，均可能有不同程度的HBVDNA复制。而乙肝患血清中ALT升高的程度与病毒复制程度无明显相关性。     

慢性乙型肝炎病毒标志物145例相关性分析

用敏感的检测方法检测145例慢性乙型肝炎的血清乙型肝炎病毒标志物(HBVM),结果HBsAg阳性125例中HBeAg阳性56例,抗—HBe阳性55例,HBeAg和抗—HBe均阴性14例;HBV—DNA阳性80例。HBeAg阳性者中合并HBV—DNA阳性40例(71.4%);抗—HBe阳性的70例中有HBV—DNA阳性32例(45.7％)。说明HBV—DNA是更能反映体內HBV复制的指标;HBsAg滴度增加与HBeAg和HBV—DNA阳性例数呈平行关系,与抗一HBe呈反向关系。作者认为慢性乙型肝炎发病与HBV感染有密切关系,抗病毒治疗是十分必要的。     

荧光定量PCR检测乙型肝炎患者血清中HBV DNA的临床意义

目的检测乙型肝炎患者血清中乙型肝炎病毒(HBV)DNA的含量,了解其与免疫学指标的关系。方法采用荧光定量PCR技术和ELISA法,分别检测287例乙型肝炎患者血清中HBVDNA含量和免疫学指标。结果287例乙型肝炎患者血清中检出HBVDNA199例,阳性率为69.34%(199/287);144例HBsAg、HBeAg、抗HBc三项阳性的血清,其血清中HBVDNA也全部阳性;而HBsAg、抗HBe、抗HBc三项阳性和HBsAg、抗HBc二项阳性的标本,HBVDNA的检出率分别38.9%(42/108)和37.1%(13/35)。结论乙型肝炎患者血清中HBVDNA的拷贝数与HBeAg密切相关,但系统转换不能说明HBV停止复制,而只是复制水平的降低而已。     

乙型肝炎与肝炎后肝硬化血清HBVM和HBV DNA测定分析

目的：探讨乙型肝炎与肝炎后肝硬化患者中血清乙型肝炎标志物HBVM与HBV DNA的阳性表现及其对临床诊断及治疗的意义。方法：对我院收治的214例有乙型肝炎及肝炎后肝硬化患者同时进行HBVM与HBV DNA检测,对HBVM用ELISA方法进行定性分析。结果：HBV DNA定性检测结果表明,急慢性肝炎患者中HBV DNA阳性率与肝炎后肝硬化患者血清中HBV DNA阳性率比较有显著性差异（P〈0.01）;乙型肝炎和肝炎后肝硬化患者HBsAg、HBeAg,抗HBc阳性患者中,HBV DNA阳性率为94.16%,HBsAg、抗HBe、抗HBc阳性患者中HBV DNA阳性率为61.64%,两者比较有显著性差异（P〈0.01）。其中,3例HBV DNA阳性,但HBVM全阴性,7例抗HBsAb、抗HBe、抗HBc阳性,1例HBV DNA呈阳性。肝功能检测提示患者有肝细胞损伤。结论：HBVM的检测不能作为HBV感染及HBV活动的唯一指标;HBV DNA能准确地反映HBV感染及HBV活动的情况。     

乙型肝炎病毒前S1抗原及HBV-M和HBV-DNA的关系

目的：探讨血清乙型肝炎病毒前S1抗原（PreS1）与HBV其他标志物及其DNA的关系。方法：对620例血清标本进行Presl、乙肝病毒标志物和HBV—DNA检测。结果：在HBsAg、HBeAg、抗HBc与HBsAg、抗HBe、抗HBc和HBsAg、抗HBc三种阳性模式组，PreS1阳性率为84．8％、41，9％、51％。差异有显著性（P均〈0．005）。在PreS1（＋）病例组，PreS1与HBeAg及HBV—DNA阳性率分别为58．87％、48．39％和51．61％，结果符合率达82．19％和87．67％。结论：血清PreS1主要存在于HBsAg携带者，且与HBeAg和HBV-DNA关系密切，是反映HBV复制及传染性的又一可靠血清学指标，PreS1联合HBV标志物同步检测具有重要的临床意义。     

乙型肝炎病毒血清学标志物与乙肝DNA相关性探讨

目的探讨乙肝病毒DNA（HBV-DNA）病毒载量与各型乙型肝炎血清标志物之间的关系。方法运用酶联免疫吸附测定法、荧光定量聚合酶链反应（PCR）技术对857例各型乙型肝炎患者进行HBV-DNA含量及血清学标志物检测（两对半）。结果血清学检测乙肝表面抗原（HBaAg）＋乙肝病毒e抗原（HBeAg）＋乙肝病毒核心抗体（抗HBc）阳性（大三阳）患者HBV-DNA阳性率明显高于其他类型（阳性率97．9％）,且其病毒载量显著高于其他组。HBsAg＋乙肝病毒e抗体（HBeAb）＋抗HBc阳性（小三阳）阳性检出率也较高（阳性率51．3％）其病毒载量高于其他组。结论HBV-DNA与HBeAg的存在明显正相关。在临床工作中,不仅要应用乙肝血清标志物来判断HBV是否在体内复制,更要结合PCR检测技术来测定HBV-DNA含量。     

乙型肝炎HBV-DNA检出阳性率及病毒复制水平与乙型肝炎两对半模式间的关系分析

探讨并分析乙型肝炎HBV-DNA检出阳性率及病毒复制水平与乙型肝炎两对半模式间的关系。方法使用荧光定量PCR法对200例乙肝患者进行标记检测,并将其HBV血清标志物用时间分辨免疫荧光分析法检测,并将检测结果进行分析。结果经HBV-DNA荧光定量法检测有126例HBV-DNA定量为阳性,阳性检出率为60.6%,最高的是HBsAg、HBeAg、抗HBc标志物阳性的HBV-DNA检验率,HBsAg、抗HBc少点,抗HBc最低。乙型肝炎“两对半”血清标志物检验结果：阳性标记物HBsAg、HbeAg、抗-HBc 92.4%;HBsAg、抗-HBe、抗-HBc 62.5%;HBsAg、抗-HBc 66.7%;抗-HBs、抗-HBe、抗-HBc21.0%;抗-HBc 13.4%,两者比较差异有统计学意义（P〈0.01）。结论 HBV-DNA的检测是反映病毒是否复制的指标,与乙型肝炎两对半模式检测联合,可以提高检测效果,有助于临床判断及治疗。     

前S1蛋白与HBV血清标志物检测结果对比分析与临床意义

目的 对乙肝前S1抗原与HBV血清标志物的对比分析,进而对乙肝病毒前S1抗原临床意义的探讨.方法 采用酶联免疫吸附试验ELISA法,严格按说明书操作,对乙肝病毒血清标志物和乙肝病毒前S1抗原测定,并与HBV-DNA做对比分析.结果 对HBV血清标志物不同组合模式进行分析发现,乙型肝炎表面抗原(HBsAg)乙肝病毒e抗原(HBeAg)、乙肝病毒核心抗体(HBcAb)阳性的模式中,乙肝病毒前S1抗原检出率高,与HBVDNA符合率也高,分别为86%与88%,HBsAg抗HBe抗HBc阳性的模式中与前S1抗原和HBV-DNA符合率分别为39%和41%,HBSAg抗HBC阳性组中与前S1抗原和HBVDNA符合率分别为26%和28%.结论 前S1抗原较HBV血清标志物更为敏感,尤其可反映HBeAg阴性的乙型肝炎患者是否有病毒复制,可作为一种新的HBV血清标志物和监测指标.     

巢式聚合酶链反应检测血清中HBV—DNA的临床意义

为了探讨乙肝病毒血清标志物ELISA测定法与定性PCR法测定结果的关系,对106例连续住院的患者通过采集空腹静脉血液3ml,分离血清,分别做ELISA法测定及PCR法检测。结果显示,HBeAg阳性血清标本、HBsAg/HBeAg/抗HBc—IgG三项阳性血清标本、HBsAg/抗HBe/抗HBc—IgG三项阳性血清标本中HBV—DNA阳性率分别为100％(20/20,18/18,16/16),HBsAg阳性血清标本中HBV—DNA阳性率75％(12/16),抗HBs阳性血清标本中HBV—DNA阳性率33.33％(4/12),HBVM全部阴性血清标本中HBV—DNA阳性率18.18％(4/22)。提示了PCR法检测乙肝病毒的方法比血清标志物ELISA法有更高的临床检出率,是检测乙肝病毒最灵敏的实验指标。     

乙型病毒性肝炎病毒表面抗原大蛋白检测的临床价值

目的探讨乙型病毒性肝炎病毒表面抗原大蛋白(LHBs)检测乙型肝炎病毒的临床价值。方法对124例乙型病毒性肝炎患者血液标本分别采用荧光定量PCR方法及酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测血中乙型肝炎病毒(HBV)DNA及LHBs,比较两种方法检测结果;HBV标志物模式测定采用时间分辨荧光免疫法。结果24例乙型病毒性肝炎患者标本中LHBs阳性符合率为87.10%(108/124),HBV DNA阳性符合率为90.32%(110/124),差异无显著性。HBV标志物模式为HBsAg、HBeAg及抗HBc阳性共96例,LHBs检出率为93.75%(90/96),HBV DNA检出率为97.91%(94/96),差异无显著性;HBsAg、抗HBe、抗HBc阳性共28例,LHBs检出率为64.29%(18/28),HBV DNA检出率为57.14%(16/28),差异无显著性。结论LHBs和HBV DNA两种方法检出阳性符合率一致。LHBs检测是一种酶联免疫方法,仪器设备要求低、操作简单,多数医疗机构都能开展,特别是对于不能开展HBV DNA检测的基层医院更有应用价值。     

PCR法检测HBVDNA及其与乙肝病毒标志物关系探讨

采用聚合酶链反应 (PCR)法检测 2 56例乙型肝炎患者血清中乙肝病毒 DNA(HBVDNA) ,同时用 EL ISA法检测乙肝病毒标志物 ,即 HBs Ag,抗 - HBs、抗 - HBc、HBe Ag、抗 -HBe。结果表明 HBVDNA的检出率与肝病临床类型无明显关系 ,而与乙肝病毒标志物的存在状态有关。乙肝五项病毒标志物不同组合状态 ,血清 HBVDNA检出率不同 ,以 HBs Ag(+)、抗 - HBc(+)、HBe Ag(+)的组合形式检出率最高 (94 .34% ) ,乙肝病毒标志物中出现抗体及乙肝病毒标志物全阴者仍有 HBVDNA检出     

208例乙型肝炎表面抗体与其他乙型肝炎病毒血清标志物同时阳性结果分析

目的:对比ELISA检测结果与HBV- DNA定量结果,分析乙型肝炎表面抗体(抗HBs)与其他乙型肝炎病毒血清标志物(HBV M)同时阳性的几种模式。方法:采用ELISA方法检测HBV M,荧光定量PCR(FQ PCR)检测HBV DNA含量。结果:HBsAg、HBeAg、抗HBc、抗HBs(+)模式30例,HBV- DNA阳性28例(93.33%)。HB -sAg、抗HBe、抗HBc、抗HBs(+)模式28例,HBV -DNA阳性3例(10.71%)。HBsAg、抗HBc、抗HBs(+)模式22例,HBV- DNA阳性11例(50.0%)。结论:同时检测HBV- M和HBV- DNA对乙型肝炎的诊断,治疗有重要意义。     

乙肝病毒血清标志物与HBV DNA定量检测的相关性分析

目的探讨乙肝病毒血清标志物与HBV DNA定量检测的相关性。方法对510例临床乙肝血清标本采用荧光定量PCR法进行HBV DNA检测,同时采用ELISA法进行乙肝病毒血清免疫学检测。结果血清HBV DNA水平与乙肝血清标志物的模式有关。在检测的510例乙肝血清标本中有352例HBV DNA阳性,阳性率为69%,其中在HBsAg、HBeAg、抗-HBc阳性的血清中,HBV DNA阳性率为92.3%;在HBsAg、抗-HBe、抗HBc阳性的血清中,HBV DNA阳性率为35.6%。结论乙肝病毒血清标志物与HBV DNA定量检测有密切的相关性,联合检测对早期诊断乙肝病毒感染以及了解病毒的复制情况、疗效观察和预后判断等方面具有极其重要的临床意义。