分泌小鼠抗人甲胎蛋白单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

采用活体内生长ＳＰ２／０骨髓细胞为融合伙伴,用ＳＰ２／０细胞与甲胎蛋白免疫的ＢＡＬＡ／Ｃ小鼠脾细胞进行融合,建立了２株稳定分泌抗ＡＦＰ单克隆抗体的小鼠杂交瘤株。冻存两年后复苏,仍稳定地分泌特异抗体。培养上清的抗体效价达１０＾－３,腹水效价达１０＾－６,ＨＭＡ２１５和ＨＭＡ６４识别抗原表位不同,ＨＭＡ２１５和ＨＭＡ６４均属于小鼠ＩｇＧ１亚类。     

分泌抗人甲胎蛋白单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

用人甲胎蛋白(AFP)免疫BALB/c小鼠的脾细胞与SP2/O骨髓瘤细胞融合,获得两株分泌抗人AFP单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞株(G2和G10)。用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞培养上清液和小鼠腹水的特异性抗体效价,分别为2～4×10~(-3)和10~(-6)～10~(-7)。两株杂交瘤细胞染色体的众数为104～108条。经体外连续传代及冻存半年复苏后,仍具有分泌抗体能力,说明其性能稳定。两株所分泌的抗体,均属IgGl型。     

抗人SOCS3单克隆抗体的制备及其生物学特性鉴定

目的 制备高效价的抗人SOCS3单克隆抗体并对其生物学特性进行鉴定.方法 以重组GST-SOCS3融合蛋白免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与Sp2/0细胞融合,经多次筛选及克隆化,建立可稳定分泌抗SOCS3单克隆抗体的杂交瘤细胞株.用ELISA及Western blot鉴定单克隆抗体的特性,并测定其效价、Ig亚类及相对亲和力.结果 筛选到一株可稳定分泌抗人SOCS3单克隆抗体的杂交瘤细胞株.Western blotting显示在相对分子质量为6.3×104处出现特异性反应带.杂交瘤细胞培养上清效价为1:640,腹水效价为1:25600,Ig亚类为IgG2a,相对亲和力达4.84×106 L/mol.结论 成功制备能特异性识别人SOCS3的单克隆抗体,为进一步研究人体细胞因子信号传导的负反馈调节及SOCS3在微生物感染中的免疫调节作用奠定了基础.     

抗人胰腺癌单克隆抗体的制备和应用

本文报告应用杂交瘤技术，制备出鼠抗人胰腺癌单克隆抗体（ｍＡｂ）ＹＰＣ３。ＡＢＣ免疫组织化学检查结果表明，ＹＰＣ３ｍＡｂ与３２例被检胰腺癌组织中的２８例（２８／３２），８７．５％有反应，而与１１例正常胰腺组织全部无反应。ＹＰＣ３ｍＡｂ尚与１９种其它肿瘤中的５种（５／１９，２６．３％）和１７种非肿瘤组织中的５种（５／１７，２９．４％）有反应，但多数反应较弱。ＹＰＣ３ｍＡｂ结合抑制性ＥＬＩＳＡ法测定１３     

抗人SOCS1单克隆抗体的制备及其生物学特性的鉴定

目的锏备高效价的抗人SOCS1单克隆抗体并对其生物学特性进行鉴定。方法以重组GST-SOCS1融合蛋白免疫BALB／c小鼠,取其脾细胞与Sp2／0细胞融合,经多次筛选及克隆化,建立可稳定分泌抗SOCS1单克隆抗体的杂交瘤细胞株。用ELISA及Westernb1ot鉴定单克隆抗体的特性,并测定其效价、Ig亚类及相对亲和力。结果筛选到一株可稳定分泌抗人SOCS1单克隆抗体的杂交瘤细胞株。Westernb1ot显示在相对分子量为6．0×10^4处出现特异性反应带。杂交瘤细胞培养上清效价为1：1280,腹水效价为1;102400,Ig亚类为IgG1,相对亲和力达1．17×10^7L／mol。结论成功制备出能特异性识别人SOCS1的单克隆抗体,为进一步研究人体细胞因子信号传导的负反馈调节及SOCS1在微生物感染中的免疫调节作用奠定了基础。     

抗重组人白细胞介素12单克隆抗体的制备及其生物学特性

以纯化的重组人白细胞介素12（rhIL-12）蛋白为抗原,制备具有生物活性的rhIL-12单克隆抗体（McAb）,并对其特性进行研究鉴定,为肿瘤及免疫相关性疾病的诊断与治疗提供具有实用价值的研究工具。方法： 以纯化的rhIL-12p70免疫BALB/C小鼠,采用杂交瘤技术,用间接ELISA法筛选抗体阳性的杂交瘤细胞及多次克隆化,培养制备杂交瘤细胞系,用clutathione sepharose 4B进行纯化。采用间接ELISA及Western blotting等方法对McAb的Ig亚类（型）腹水效价及特异性进行鉴定。结果：建立了3株持续分泌rhIL-12p70　McAb的杂交瘤细胞株,3株细胞染色体数目均为100条左右,证实为杂交瘤细胞,所分泌的抗体为2株IgG1亚类及1株IgG2a亚类,轻链属k型,小鼠腹水效价测定分别为1∶5.9×106、1∶2.9×10⁷、1∶3.6×10⁷,亲和力依次为EM5>EM6>EV9。结论：成功地制备了3株能稳定分泌抗rhIL-12p70的杂交瘤细胞株,产生的McAb特异性好,亲和力高。     

分泌抗人原发性肝癌单克隆抗体杂交瘤的制备及专一性分析

研制抗人原发性肝癌特异性单抗，为肝癌的导向诊断与治疗奠定基础。用人ＰＨＣ细胞系ＨｅｐＧ２免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，聚其脾细胞与同源骨髓瘤细胞ＳＰ２／０融合，经间接免疫荧光染色加流式细胞仪筛选及专一性鉴定，单抗经ＰｒｏｔｅｉｎＡ法纯化。用ＳＤＳ聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度测定。     

抗人肺癌单克隆抗体的制备及其生物特征的研究

目的制备抗人肺癌细胞的单克隆抗体（McAb）,鉴定其生物学特征。方法用人肺癌细胞株A549作为抗原,采用杂交瘤技术制备抗人肺癌细胞McAb,用ELISA进行筛选和鉴定其亚类,并用细胞扒片免疫化学方法检测其特异性。结果获得了1株分泌抗人肺癌细胞McAb杂交瘤细胞（命名为1D11）,其染色体呈双亲特点,该McAb与人卵巢癌细胞株SKOV3有交叉反应,与肝癌细胞株SMMC7721,宫颈癌细胞株Hela.表皮癌细胞株A431,正常肝细胞株L02无交叉反应。结论该McAb对肺癌和卵巢癌具有特异性。     

风疹病毒单克隆抗体的制备

目的 制备用于研究风疹病毒（ＲＶ）生物学特性及血清学应用的特异性ＭｃＡｂ。方法 ＨＶ抗原免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠,无菌取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞ＳＰ２／０融合建立杂交瘤细胞,并对杂交瘤细胞产生抗体特性及相应ＭｃＡｂ进行了分析。结果 成功建立了三株稳定分泌ＭｃＡｂ的杂交瘤细胞５Ｄ５、５Ｇ５、２Ｆ７,染色体数目均大于９８条;相应ＭｃＡｂｓ均属ＩｇＧ１。与纯化ＲＶ抗原有强阳性反应。结论 该法可产出高特异性、高亲和力ＲＶ特异性ＭｃＡｂ。     

抗钙调素单克隆抗体的制备及鉴定

目的 制备及鉴定抗钙调素单克隆抗体。方法 以碳化二亚胺法将钙调素—卵清蛋白偶联物作为免疫原，采用常规免疫方法免疫BALB／C小鼠，杂交瘤技术制备抗牛脑钙调素单克隆抗体。酶联免疫吸附法(ELISA)检测，应用硫酸铵盐析法和离子交换层析法进行抗体纯化。分别采用免疫印迹、免疫酶斑点法鉴定抗钙调素单克隆抗体的性质。结果 脾细胞与骨髓瘤细胞的融合率为85％。阳性克隆率为0．35％，获得两株动物钙调素单克隆抗体，抗体效价为1：1000，对钙调素有较强的专一性。结论 此研究制备出了高特异性、高亲和力及高效价的抗牛脑钙调素单克隆抗体。     

抗人精子单克隆抗体的制备及特性研究

用杂交瘤技术制备了两株分泌抗人精子单克隆抗体的细胞株，经酶联免疫吸附试验证明两株细胞株所分泌的单克隆抗体均能与人精子产生特异反应，并有明显的精子凝集和制动作用     

抗淋球菌单克隆抗体的制备及其生物学特性研究

目的：研制抗淋球菌单克隆抗体,为建立新的淋病诊断方法奠定基础。方法：以淋球菌２９１０６－５株作抗原,按常规淋巴细胞杂交瘤技术制备单克隆抗体。并采用ＥＬＩＳＡ双抗体夹心法研究单抗的特异性和敏感性。结果：建立了５个持续分泌抗淋球菌单抗的杂交瘤细胞株。他们所分泌的抗体效价可达１∶８１９２～１∶３２７８６。５株单抗均能与淋球菌发生特异性结合,但对脑膜炎球菌、葡萄球菌、大肠杆菌等１５种其他微生物不起反应。淋球菌的最小检测量为１×１０４个／ｍｌ。结论：本研究建立的单抗在检测淋球菌时有高度特异性和敏感性     

抗人甲状腺球蛋白单克隆抗体的制备

目的：制备抗人甲状腺球蛋白（Ｔｇ）单克隆抗体，为建立高灵敏度的Ｔｇ检测方法做准备。方法：从人的甲状腺组织中提取Ｔｇ做抗原，经腹腔免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞系ＳＰ２／ｏ融合，筛选及克隆化。结果：获得２株分泌抗人Ｔｇ单克隆抗体的杂交瘤细胞株。鼠腹水抗体效价达１．０２×１０６。经免疫球蛋白类别及亚类的鉴定，２株单克隆抗体均为ＩｇＧ１亚类，轻链为Ｋ型。结论：我们制备的抗Ｔｇ单克隆抗体具有良好的免疫反应特性，符合Ｔｇ酶联免疫分析法（ＥＬＩＳＡ）的要求