CD_4~+CD_(25)~+调节性T细胞在儿科临床的实用价值

CD4+CD25+Treg细胞可分为天然性Treg细胞和获得性/诱导性Treg细胞。在病毒感染过程中,CD4+CD2+5Treg细胞维持机体对病毒的免疫耐受状态,促进病毒感染并导致其慢性化。CD4+CD2+5Treg细胞在幼年特发性关节炎的发病过程中发挥重要作用。哮喘患儿血CD4+T淋巴细胞表面的烟碱样乙酰胆碱受体(nAChRα7)表达增加,CD4+CD2+5FoxP3+Treg细胞明显减少。特发性血小板减少性紫癜患儿体内存在自身反应性T细胞的活动及细胞因子的紊乱,CD4+CD25highFoxP3+Treg细胞数量减少。体内外有效诱导、扩增和控制CD4+CD2+5Treg细胞的技术将会为相关儿科疾病的治疗提供崭新思路和有效方法。     

CD4^＋T细胞在慢性ITP中的作用

特发性血小板减少性紫癜（idiopathic thrombocytopenic pur-pura，ITP）是临床上最常见的一种血小板减少性紫癜，分别约有24％和43％儿童和成人急性ITP患者发展成为慢性ITP。ITP为抗体介导性疾病，CD4^＋T细胞的异常可直接影响自身反应性B细胞的分化和自身抗体的分泌。在慢性ITP中，CD4^＋T细胞的功能紊乱特别是Th1／Th2和CD4^＋CD25^＋Treg细胞及细胞因子改变可能是导致疾病发生的原因之一。     

CD4+CD25+T细胞在特发性血小板减少性紫癜中的研究

特发性血小板减少性紫癜(ITP)是一种以血小板破坏加速为特征的慢性获得性器官特异性自身免疫性出血性疾病.ITP的发病机制涉及体液免疫和细胞免疫的异常,CD4+CD25+Treg细胞是具有免疫抑制和免疫无能特性的调节性T细胞亚群,既能抑制不恰当的免疫反应,又能限定免疫应答的范围、程度及作用时间,在机体的外周免疫耐受中起着重要的作用.近年来研究发现,CD4+CD25+Treg细胞与ITP间存在密切关系,但其作用机制目前尚不清楚,本研究通过检测ITP患者治疗前后及其中难治性ITP患者外周血Treg细胞的比例,探究Treg细胞在ITP发病中的可能作用.     

靛玉红诱导免疫性血小板减少性紫癜小鼠免疫耐受机制的研究

目的 探讨靛玉红对免疫性血小板减少性紫癜(ITP)小鼠模型的治疗作用.方法 Wistar大鼠血小板免疫CBA小鼠20只,建立ITP动物模型,随机分为两组,实验组给予靛玉红腹腔注射,对照组给予PBS腹腔注射,在建模第4周分离小鼠脾细胞,MIT检测脾细胞增殖,流式细胞仪检测小鼠脾中淋巴细胞表型(CD4、CD8、CD25、Foxp3),并以MACS分离CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞(Treg)进行混合淋巴细胞培养(MLR),评价调节性T细胞的抑制功能.结果 靛玉红通过抑制ITP小鼠脾细胞增殖,减少CD4细胞的数量,提高CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞的相对比例,有效改善ITP的血小板减少程度,而MLR显示靛玉红并不抑制Treg的抑制功能.结论 靛玉红可通过影响调节性T细胞诱导ITP免疫耐受.     

CD4~+T细胞亚群失衡在慢性阻塞性肺疾病中的临床意义

目的探讨慢性阻塞性肺疾病(COPD)不同时期CD4+T细胞亚群的变化及临床意义。方法用流式细胞仪检测COPD急性加重期组、COPD缓解期组和健康组外周血中T细胞总量及调节性T细胞(Treg)、Th17、Th1和Th2占CD4+T细胞的比例。结果 COPD急性加重期组相对于COPD缓解期组T细胞总量、Th1、Th2、Th17和Th17/Treg均升高(P<0.05),但Treg和Th1/Th2的比值下降(P<0.05);缓解期组与对照组相比较,Th1、Th17、Treg、Th1/Th2和Th17/Treg的比值升高(P<0.05),Th2降低(P<0.05),T细胞总量略升高,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论 Th 17/Treg和Th1/Th2失衡在COPD的发病中起着重要作用。     

调节性T细胞及Th17细胞在重型再生障碍性贫血中的表达及意义

目的：：观察重型再生障碍性贫血(severe aplastic anenia,SAA)患者调节性 T 细胞(Treg 细胞)、Th17及Treg/Th17比值的变化,以探讨其在SAA 发病中的作用及其机制。方法：用流式细胞仪测定29例SAA患者外周血CD4+CD25highFoxp3+T细胞(Treg细胞)、CD3+CD8-IL-17A+(Th17)及比值的变化并与15名正常对照者相比较。结果：SAA 患者 Treg 细胞(2.15±0.26)%较正常对照(5.61±0.32)%降低,差异具有统计学意义(P <0.01)。Th17比率(1.96±0.25)%较正常对照(0.91±0.12)%升高,差异具有统计学意义(P <0.01)。Treg/Th17比值(2.88±0.78)较正常对照(6.95±0.75)降低(P<0.01),Treg细胞比率和Th17细胞比率呈负相关(r=-0.7229,P <0.01),差异具有统计学意义。结论：SAA患者Treg细胞比例减低和Th1 7细胞比例的增加所致的Treg/Th1 7细胞失衡,在SAA的免疫机制中起着重要作用。     

29例免疫性血小板减少性紫癜中调节性T细胞/Th17细胞的改变

目的探讨调节性T细胞/Th17细胞在免疫性血小板减少性紫癜(ITP)患者中的表达及意义。方法应用流式细胞术检测29例ITP患者和28例正常人外周血中的CD4+CD25+T细胞、CD4+CD25highT细胞(Treg)、CD4+IL-17A+T细胞(Th17)占总CD4+T细胞的比例,并评价其与血小板计数的相关性;酶联免疫吸附(ELISA)法测定血浆中IL-10I、L-17水平;RT-PCR法检测外周血Foxp3 mRNA、RORc mRNA的表达水平。结果与正常对照组比较,ITP患者组外周血CD4+CD25+T/CD4+T细胞比例升高(P<0.05)、Treg/CD4+T细胞比例明显下降(P<0.05),Th17/CD4+T细胞比例组间比较差异无统计学意义(P>0.05),Treg/Th17细胞比值明显降低(P<0.05)。ITP患者血浆中IL-10水平明显低于正常对照组(P<0.05),而IL-17水平与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。ITP患者组较正常对照组外周血中转录因子Foxp3 mRNA水平明显降低(P<0.05),而RORc mRNA表达则较对照组明显升高(P<0.05)。Treg/CD4+T细胞比例及Treg/Th17细胞比值在效佳组显著高于效差组(P<0.05),Th17/CD4+T细胞比例效佳组显著低于效差组(P<0.05)。治疗前血小板计数与Treg/CD4+T细胞比例、Treg/Th17细胞比值成正相关(P<0.05),而与Th17/CD4+T细胞比例则无显著相关性(P>0.05)。结论 ITP患者存在Treg/Th17细胞平衡紊乱,T细胞亚群的功能失调可能与ITP免疫发病机制有关,并与糖皮质激素治疗效果有关。     

不同类型HBV感染者外周血Treg/Th17细胞的变化及意义

目的:探讨不同类型HBV感染者外周血中CD4+Foxp3+Treg/Th17细胞的变化及意义。方法:分别采用流式细胞术、实时定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和酶联免疫吸附法(ELISA)法检测15例急性乙型肝炎(AHB)患者、40例慢性乙型肝炎(CHB)患者、40例无症状携带者(AsC)及30例健康对照者外周血外周血Treg/Th17细胞百分率、核转录因3(Foxp3)/(RORγt)mRNA的表达以及血浆转化生长因子-β1(TGF-β1)/白细胞介素17(IL-17)的水平。结果:AHB组患者CD4+Foxp3+Treg/CD4+T细胞百分率、Foxp3mRNA及TGF-β1水平与正常对照组相比无明显差异;而CD4+IL-17+/CD4+T细胞百分率、RORγt mRNA及IL-17水平与正常对照组相比明显升高,差异有统计学意义。CHB组患者CD4+Foxp3+Treg/CD4+T细胞百分率、Foxp3mRNA、TGF-β1水平及CD4+IL-17+/CD4+T细胞百分率、RORγt mRNA、IL-17水平与正常对照组相比均明显升高,差异有统计学意义;与正常对照组相比,AsC组患者CD4+Foxp3+Treg/CD4+T细胞百分率、Foxp3 mRNA、TGF-β1水平及CD4+IL-17+/CD4+T细胞百分率、RORγt mRNA、IL-17水平无明显差异。结论:在不同类型HBV感染者外周血中Treg/Th17细胞失衡,Treg/Th17细胞失衡可能与HBV感染的状态、结局有关。     

儿童特发性血小板减少性紫癜患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞水平的检测及其意义

目的: 探讨特发性血小板减少性紫癜(ITP)患者外周血CD4 CD25 调节性T细胞(Treg)水平及意义.方法: 采用流式细胞分析法,检测30例ITP患者(ITP组)治疗前后和15例正常对照者(对照组)外周血CD4 CD25 Treg/CD4 T细胞比例.结果: ITP患儿治疗前CD4 T、CD4 CD25 Treg细胞的表达值明显低于正常对照值(P＜0.001),治疗后CD4 T、CD4 CD25 Treg细胞表达值分别较治疗前显著升高,但仍低于正常对照组(P＜0.001).ITP患儿治疗显效组显著高于良效和进步组及无效组(P＜0.001),良效和进步组与治疗无效组比较亦有显著性差异(P＜0.05).结论: ITP患儿外周血Treg细胞表达值较正常对照明显降低提示Treg细胞可能参与了疾病的发病机制.     

Th17/CD4+CD25+Treg细胞与自身免疫病

CD4+ CD25+ 调节T 细胞(CD4+ CD25+ Treg) 是调节性T 细胞的一个重要亚类,Treg 可以通过IL-2 、TGF-β1等促炎症细胞因子调节Th17 / Treg平衡, 调控Th17 细胞介导的炎症反应、自身免疫反应.本文将Th17细胞/CD4+ CD25+ Treg 细胞与自身免疫性疾病的关系作一综述.     

儿童急性特发性血小板减少性紫癜转录因子的表达

目的：分析儿童急性特发性血小板减少性紫癜（ITP）血中Thl／Th2特异性转录因子T-bet／GATA3mRNA的表达,可望揭示其部分发病机理。方法：选择急性ITP患儿发作期组30例,对照组20例。引入RT-PCR技术,测定血中T-bet和GATA3mRNA的表达。结果：①T-betmRNA的表达发作期组明显高于缓解期组和对照组,且缓解期组亦高于对照组,差异均有统计学意义（P〈0．01）。②GATA3mR-NA的表达发作期组明显低于缓解期组和对照组,且缓解期组亦低于对照组,差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论：血中T-betmRNA增高,而GATA3mRNA降低,显示儿童急性ITP存在明显的Thl优势分化现象,且可能与转录因子T-bet和GATA3的调控作用有关;T-bet／GATA3与儿童急性ITP的发病有一定的关系。     

慢性ITP患者外周血T细胞亚型的分析

目的探讨慢性特发性血小板减少性紫癜（CITP）患者外周血Th1/Th2、Tc1/Tc2的平衡状态。方法收集CITP患者外周抗凝静脉血,分离纯化得T细胞,用抗IFN-γ及IL-4单抗结合患者外周血T细胞,流式细胞术分析Th1、Th2、Tc1、Tc2细胞数以及Th1/Th2、Tc1/Tc2比值。结果 CITP患者与健康对照组比较,外周血CD3＋细胞和CD8＋细胞明显增加（分别为P〈0.01和P〈0.05）,CD4＋/CD8＋比例倒置（P〈0.05）;Th1细胞数显著升高（P〈0.05）,Th2细胞下降明显（P〈0.05）,Th1/Th2比值上升（P〈0.05）。Tc1和Tc2较正常对照无明显变化（P〉0.05）,但Tc1/Tc2显著增加（P〈0.05）。结论 CITP患者外周血细胞免疫功能低下,Th1及Tc1/Tc2细胞比例升高,呈Th1类细胞优势。     

过敏性紫癜患者外周血CD8^＋ CD28^- Treg细胞表达及意义

目的研究CD4^＋、CD8^＋、CD8^＋CD28^-Treg细胞在过敏性紫癜中的表达及临床意义。方法 78例确诊的过敏性紫癜患者在入院时各采静脉血2 ml,予肝素抗凝后行流式细胞术（flow cytometry,FCM）检测CD4^＋、CD8^＋、CD8^＋CD28^-Treg细胞的表达水平。78例患者给予抗组胺药物、维生素C、芦丁片、钙剂治疗,对于紫癜型肾炎组病情严重者给予丙球蛋白治疗以缓解症状;治疗2周后治愈或好转后再次采取外周血样,流式细胞仪检测外周血CD4^＋、CD8^＋、CD8^＋CD28^-Treg细胞的表达水平。结果治疗后患者外周血中CD4^＋上升、CD8^＋下降、CD8＋CD28^-Treg细胞上升明显。结论外周血CD8^＋CD28^-Treg细胞的表达水平对过敏性紫癜的诊断和治疗具有一定的指导作用。     

慢性免疫性血小板减少症患者外周血淋巴细胞亚群及相关细胞因子的研究

目的本研究检测慢性免疫性血小板减少症(CITP)患者淋巴细胞亚群数量以及相关细胞因子的变化,初步探讨它们在CITP发病机制中的可能作用。方法选择40例CITP患者,正常健康体检者20例,检测外周血单个核细胞T淋巴细胞,Th细胞、Ts细胞、B淋巴细胞和NK细胞的表达率,测定CD~(4+)细胞中Th17细胞、Th22细胞、T-reg和Th1细胞的表达率;应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血浆中IL-17、IL-22、IL-6、TNF-α的水平。结果与正常对照组相比,T淋巴细胞总数、Th细胞、Ts细胞、B淋巴细胞、NK细胞,Th17细胞,Th22细胞表达率,IL-17、IL-22水平、IL-6、TNFα的表达水平差别均无统计学意义(P0.05),Th1表达率上升,T-reg表达率下降,差别均有统计学意义(P0.05)。结论慢性ITP患者免疫自稳能力下降和Th1功能亢进可能在其发病过程中起主导作用,而Th17,Th22可能与慢性ITP的发生无关。     

多巴胺D1样受体在介导调节CD4^＋T淋巴细胞功能中的作用

目的：从分子水平揭示CD4^＋ T淋巴细胞表达D1受体和D5受体mRNA的现象,探讨这些受体在调节CD4^＋ T淋巴细胞功能中的作用.方法：采用免疫磁珠分离和纯化小鼠淋巴结CD4^＋ T淋巴细胞.用抗CD3/CD28抗体刺激活化CD4^＋ T淋巴细胞,并用D1样受体激动剂SKF38393、拮抗剂SCH23390分别作用于CD4^＋ T淋巴细胞,然后采用real-time PCR法检测CD4^＋ T淋巴细胞上D1受体和D5受体mRNA的表达,Th1细胞特异性转录因子（T-box expressed in T cells,T-bet）和细胞因子干扰素γ（interferon-γ,IFN-γ）的表达,Th2细胞特异性转录因子GATA binding protein 3（GATA 3）和细胞因子白细胞介素-4（interleukin-4,IL-4）的表达,Th17细胞特异性转录因子（retinoid acid-related orphan receptor gammat,RoR γt）和细胞因子IL-17、IL-22的表达.结果：D1样受体激动剂SKF38393（10^-8和10^-7 mol/L）作用于CD4^＋ T淋巴细胞后,CD4^＋ T淋巴细胞表达D1样受体mRNA增高,IFN-γ的表达降低,GATA 3、IL-4的表达增高,但T-bet、RoR γt、IL-17和IL-22的表达没有变化,SCH23390（10^-7 mol/L）能阻断SKF38393的这些作用.结论：CD4^＋ T淋巴细胞能表达多巴胺D1样受体,CD4^＋ T淋巴细胞上D1样受体的激活可促进CD4^＋ T淋巴细胞向Th2细胞分化、抑制Th1细胞功能及增强Th2细胞功能.     

特发性血小板减少性紫瘢患者外周血淋巴细胞亚群和调节性T细胞的变化及临床意义

 Objective To study the changes and clinical significance of lymphocyte subsets and regulatory T cells in peripheral blood of patients with idiopathic thrombocytopenic purpura （PITP）. Methods Peripheral blood lymphocyte subsets and regulatory T cells of 40 ITP patients and 40 normal controls were measured with flow cytometry. Results Compared with the normal group,the percentage of CD3+ T lymphocyte,CD4+T lymphocyte and CD16+ /56+ NK cell and ratio of CD4+ /CD8+ decreased markedly in ITP group （P < 0.01）,while the percentage of CD8+T lymphocyte increased slightly（P > 0.05）and CD19+B lymphocyte increased significantly（P < 0.01）. In ITP patients,the proportion of CD4+ CD25+ T cells in CD4+T cells was higher than that of the control group （P < 0.05）and the proportion of CD4+CD25high T cells was slightly higher（P > 0.05）,while the proportion of CD4+ CD25+ Foxp3+ regulatory T cells was lower（P < 0.05）. Con-clusion Cellular immune function in patients with ITP is obviously abnormal and the decreased proportion of CD4+CD25+ Foxp3+ regulatory T cells may be related to the immune pathogenesis of ITP. Detection of lymphocyte subsets and regulatory T cells is of some clinical value in evaluation of therapeutic effect and prognosis of ITP.     

多种儿科疾病外周血T淋巴细胞亚群的检测

①目的　探讨T淋巴细胞亚群异常与相关疾病的关系。②方法　采用单克隆抗体间接免疫荧光法对 1171例受检者进行外周血T细胞亚群检测 ,并与正常健康人进行对照。③结果　除缺铁性贫血 (IDA)外 ,再生障碍性贫血 (AA)、原发性血小板减少性紫癜 (ITP)、自身免疫性溶血性贫血 (AIHA)、多数呼吸系统疾病、结缔组织疾病以及单纯性肾病综合征都存在T淋巴细胞亚群异常。④结论　小儿常见疾病大多存在T淋巴细胞亚群异常。     

急性ITP患者T细胞亚群及血小板凋亡相关蛋白的检测

目的 检测凋亡相关蛋白Fas、FasL在急性特发性血小板减少性紫癜（ITP）患儿T细胞亚群及血小板中的表达，分析其在ITP发病机制中的作用。方法 收集ITP患儿及健康儿童外周抗凝静脉血，分离纯化得T细胞和血小板。以PE标记的CD30 mAb和Cy5标记的CD4、CD8 mAb及FITC标记的Fas、FasL mAb作三色流式细胞术，分析ITP患儿Th／Tc、Thl／Th2、Tc1／Tc2细胞Fas、FasL表达的变化；以FITC标记的Fas、FasL mAb作单色流武细胞术，分析ITP患儿血小板Fas、FasL表达的变化。结果 与健康儿童相比，ITP患儿Th、Th1、Th2及Tc、Tc1、Tc2细胞Fas、FasL表达均显著性升高（P〈O．05）；同时，111P患儿血小板Fas的表达显著性升高（P〈0．05）而FasL的表达无明显变化（P〉0.05）。结论 ITP患儿存在免疫功能失调，T细胞亚群及血小板Fas、FasL表达异常可能与ITP免疫病理机制有关。     

复发性生殖器疱疹患者外周血T细胞亚群及Th1/Th2型细胞因子的模式

目的分析复发性生殖器疱疹 ( RGH)患者外周血中 T细胞亚群及 Th1/Th2型细胞因子网络的偏移及其在发病机理中的作用。方法采用三色和双色荧光抗体染色技术经流式细胞仪检测 2 0例 RG H患者和正常对照组外周血 T细胞亚群及 CD4 + T、CD8+ T细胞内 4种细胞因子染色阳性细胞百分率。结果 RGH患者 CD3+ T细胞、CD4 + T细胞、CD4 + T/CD8+ T明显低于正常对照水平 ( P<0 .0 0 1) ;IL- 2、IFN- r、IL- 12阳性细胞百分率均显著降低 (分别为 CD4 + T:P<0 .0 0 1,CD8+ T:P<0 .0 5) ;IL- 4阳性细胞则明显升高 ( CD4 + T:P<0 .0 5,CD8+ T:P<0 .0 0 1)。结论 RGH患者存在 T细胞亚群和 Th1、Th2细胞分泌细胞因子交互作用失衡 ,后者表现为 Th2型细胞因子( IL - 4)产生过多 ,而 Th1型细胞因子 ( IL - 2、IL - 12、IFN - r)产生过少 ,Th1/Th2失衡在 RGH的发病机制中可能具有重要的作用。     

热休克蛋白70－hom基因多态性与儿童过敏性紫癜的相关性

目的:探讨热休克蛋白70-hom(heat shock protein 70-hom,HSP70-hom)基因多态性与儿童过敏性紫癜发病的相关性?方法:应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法检测131例过敏性紫癜患儿和66例正常儿童的HSP70-hom基因的+2437位核苷酸的Nco Ⅰ限制性内切酶位点的多态性?结果:HSP70-hom各基因型频率在过敏性紫癜组中分别为1.5%(TT)?34.4%(TC)和64.1%(CC),在对照组中分别为19.7%(TT)?19.7%(TC)和60.6%(CC),两组之间基因型分布频率的差异具有统计学意义(χ2 = 22.318,P < 0.05);T和C等位基因频率在过敏性紫癜组中分别为18.7%(T)和81.3%(C),在对照组中为29.5%(T)和70.5%(C),差别亦具有统计学意义(χ2 = 5.949,P < 0.05)?与携带TT基因型者比较,携带至少1个C等位基因(即TC和CC基因型)的个体患过敏性紫癜的风险增加18.83倍(95%CI:3.95~89.75)?过敏性紫癜非肾脏损害组与肾损害组TT?TC?CC基因型频率分别为2.4%?32.1%?65.5%和0%?38.3%?61.7%,差异不具有统计学意义(χ2 = 0.379,P > 0.05)?结论:HSP70-hom +2437T/C基因多态性是儿童过敏性紫癜发病的遗传易感因素,但与肾脏损害发生无显著相关性?