肝素单独应用及与红比霉素、阿霉素联合应用抑制结膜成纤维细胞增殖

我们测定了肝素单独应用及肝素分别与红比霉素、阿霉素联合应用在体外对兔结膜成纤维细胞的影响。证实肝素单独应用可明显抑制结膜成纤维细胞增殖,肝素的ID_(50)值为1.93mg/ml,肝素单独应用抑制成纤维细胞生长的效力比其与红比霉素或阿霉素联合应用的效力更大。肝素无明显副作用,有希望成为提高青光眼手术成功率的理想药物。     

阿霉素联合地塞米松防治增殖性玻璃体视网膜病变的研究

研究体外细胞培养中阿霉素、地塞米松对兔成纤维细胞生长的抑制作用及有效浓度。为增殖性玻璃体视网膜病变（ＰＶＲ）的药物预防提供新线索。 方法将传代培养的细胞，在加药培养后４８ｈ，应用噻唑兰比色法（ＭＴＴ法）对阿霉素、地塞米松抑制成纤维细胞的作用进行检测，分别求得２种药物５０％抑制率浓度（ＩＤ５０）及 ２种药物半数抑制率浓度（ＩＤ５０）联合应用对细胞的增殖抑制率（％）。 结果阿霉素对细胞生长有明显的抑制作用，并呈浓度依赖性改变，其５０％抑制率浓度（ＩＤ５０）为０．５７ｍｇ·Ｌ－１；地塞米松对细胞增殖作用呈双重性，低浓度刺激细胞增生，高浓度则抑制细胞生长，其５０％抑制率浓度为１５４ｍｇ·Ｌ－１。上述２种药物５０％抑制率浓度联合应用，其细胞增殖抑制率为６６．３％，与２种药物半数抑制率浓度单用时细胞增殖抑制率相比，差异非常显著（Ｐ＜０．０１）。 结论阿霉素、地塞米松在一定浓度下能有效抑制体外成纤维细胞的生长，并提示二者合用可能是一种有价值的防治 ＰＶＲ的用药方式。     

防治增殖性玻璃体视网膜病变的研究──榄香烯联合地塞米松对成纤维细胞抑制作用的实验研究

本文对兔皮肤成纤维细胞进行了体外培养，应用噻唑兰比色法（ＭＴＴ法）对榄香烯和地塞米松进行药物筛选，结果发现：榄香烯对培养的成纤维细胞的增殖具有明显的抑制作用，并使细胞形态发生显著变化，其５０％抑制率浓度（ＩＤ５０）为０．００８ｍｇ／ｍｌ；地塞米松对该细胞增殖的作用呈双重性，低浓度刺激细胞增生，高浓度抑制细胞增殖，其５０％抑制率浓度为１６８ｍｇ／ｍｌ。此两种药物５０％抑制率浓度联合应用，对培养的成纤维细胞增殖的抑制作用（抑制率：６２．８％）较单用榄香烯（抑制率：５２．４％，Ｐ＜０．０１）或单用地塞米松（抑制率：５５．２％ｐ＜０．０１）明显增强。并对此两种药物抗增殖的作用机理进行初步探讨。     

几丁聚糖对兔结膜上皮细胞和结膜成纤维细胞增殖的影响

目的　研究几丁聚糖对兔结膜上皮细胞和结膜成纤维细胞增殖的影响。方法　采用消化法培养结膜上皮细胞 ,组织块法培养结膜成纤维细胞。通过MTT比色法和细胞计数法测定几丁聚糖对两种细胞增殖的影响。结果　几丁聚糖在浓度 >0 0 3 %时能促进结膜上皮细胞的增殖 ,浓度为 0 12 %时促进作用最明显。结膜成纤维细胞在几丁聚糖浓度 >0 0 3 %时其增殖即受到抑制 ,抑制作用呈浓度依赖性。结论　几丁聚糖有望用于预防睑球粘连     

Ge—132对兔结膜成纤维细胞增殖的影响

用ＭＴＴ比色法和细胞计数法测定细胞增殖。观察了Ｇｅ－１３２（羧乙基锗倍半氧化物）在体外对兔结膜成纤维细胞增殖的影响。结果显示：Ｇｅ－１３２药物最终浓度在０．００１６—５ｍｇ／ｍｌ范围有剂量依从性的抑制成纤维细胞增殖的作用，其半数有效浓度（ＩＣ５０）为０．１４７ｍｇ／ｍｌ。它有可能用于控制成纤维细胞的过度增殖。     

r—干扰素和地塞米松抑制成纤维细胞的实验研究

成纤维细胞的增殖与许多眼病有关，作者采用ＭＴＴ比色法检测，ｒ－干扰素和地塞米松对成纤维细胞的抑制作用。结果表明，ｒ－干扰素在０．１－１００００μ／ｍｌ剂量时对成纤维细胞增殖没有直接抑制作用，地塞米松在０．０１－１０００μｇ／ｍｌ剂量对成纤维细胞有明显抑制作用。     

r－干扰素和地塞米松抑制成纤维细胞的实验研究

成纤维细胞的增殖与许多眼病有关，作者采用ＭＴＴ比色法检测，ｒ－干扰素和地塞米松对成纤维细胞的抑制作用。结果表明，ｒ－干扰素在０．１─１００００μ／ｍｌ剂量时对成纤维细胞增殖没有直接抑制作用，地塞米松在０．０１─１０００μｇ／ｍｌ剂量时对成纤维细胞有明显抑制作用。     

兔角膜成纤维细胞培养及其生长抑制的实验研究

目的 了解丝裂霉素Ｃ（ＭＭＣ）及透明质酸（ＨＡ）对准分子激光屈光性角膜切削术后及正常兔角膜成纤维细胞增殖的影响。方法 对兔角膜成纤维细胞体外培养，观察ＭＭＣ及ＨＡ对细胞生长的影响。结果 ＭＭＣ及ＨＡ对兔２有膜成纤维细胞生长具有明显的抑制作用。     

MMC、5-Fu和地塞米松对Tenon囊成纤维细胞抑制作用的比较研究

28mg/L、5.9946mg/L、123.936mg/L.结论 三种药物均对兔眼Tenon囊成纤维细胞增殖具有抑制作用,三种药物对成纤维细胞抗增殖的效应是MMC＞5-Fu＞地塞米松.     

秋水仙碱在兔眼滤过伤口愈合中的作用

观察滴眼及结膜下注射秋水仙碱对兔眼滤过手术后伤口纤维母细胞增殖的抑制作用,发现秋水仙碱有抑制滤过切口纤维增生的能力,结膜下给药效果更好,副作用少。     

细胞因子对角膜成纤维细胞生长的作用

目的,研究细胞团子对角膜成纤维细胞的生长作用,为细胞因子治疗角膜疾病的机制研究提供实验依据。方法：用MTF法测定细胞因子EGF、GTFF－β_1、FN等对角膜成纤维细胞生长的影响作用,结果：EGF对角膜成纤维细胞具有生长调节作用,在0.01~1.0μg/ml浓度下,具有明显促生长作用（与0浓度组比较P＜0．001）,其最佳浓度为0．1μg/ml,但浓度在10.0μg／ml时却对其具有明显抑制作用（与0浓度组比较P＜0005）,TGF－β_1（0.01－10.0ng/ml）、FM（0.01－10．0mg/ml）对角膜成纤维细胞未见明显促生长或抑制作用（P＞0.05）结论：EGF能调节角膜成纤维细胞生长,而TGF、FN对角膜成纤维细胞生长无影响,     

复方中药制剂抑制成纤维化增生作用的实验研究

目的观察复方中药制剂对结膜成纤维细胞增生的抑制作用,为临床防治增生性玻璃体视网膜病变提供新的治疗方法.方法以体外培养的兔结膜成纤维细胞作为研究对象,对照组用地塞米松、5-氟尿嘧啶、氢化可的松处理,实验组用丹苓(颗粒)冲剂及其君药(丹参、石决明)处理.48 h后,用MTT法观察成纤维细胞增生情况及其细胞形态变化特点.结果丹苓(颗粒)冲剂和丹参在一定浓度范围内可抑制成纤维细胞增生,且成剂量依赖关系;石决明对成纤维细胞增生未见明显抑制作用.5-氟尿嘧啶、氢化可的松在一定浓度范围内可明显抑制成纤维细胞增生;地塞米松在低浓度时轻度刺激成纤维细胞增生,但在高浓度时抑制成纤维细胞的增生.丹苓(颗粒)冲剂和丹参作用48 h后,部分成纤维细胞未能贴壁且收缩成圆形.结论丹苓(颗粒)冲剂可有效抑制成纤维细胞增生,有望成为防治增生性玻璃体视网膜病变的新药物.     

丹参干预成纤维细胞增生及其机制

目的观察丹参对结膜成纤维细胞增生的抑制作用并探讨其作用机制,为临床防治PVR提供新的治疗方法。方法以体外培养的兔结膜成纤维细胞为研究对象,以地塞米松、5-氟尿嘧啶、氢化可的松作为处理对照组,用MTT法测定不同浓度丹参作用48h后成纤维细胞增生情况。AnnexinV-FITC和碘化丙啶双染法,在流式细胞仪下测定不同浓度丹参作用不同时间后成纤维细胞的早期凋亡率。用末端脱氧核糖核酸酶介导的dUTP末端标记法(TUNEL法)观察丹参作用48h后的细胞凋亡情况。结果丹参在一定浓度范围内(1.74～111.00g·L-1)可抑制成纤维细胞增生,且呈剂量依赖关系(0.91%～79.28%)。3.47g·L-1、27.75g·L-1及111.00g·L-1丹参作用6h时细胞凋亡率分别为(8.67±0.97)%、(11.04±1·04)%、(20.83±1.74)%,作用24h时分别为(13.06±1.41)%、(25.68±1.21)%、(39.65±0.23)%,细胞早期凋亡率与正常对照组(4.40±0·08)%相比差异均有统计学意义(均为P<0.01)。丹参作用48h后,成纤维细胞核出现阳性着色。结论丹参可以通过诱导成纤维细胞凋亡的方式来抑制成纤维细胞的增生,有望成为新的防治PVR药物。     

增殖性玻璃体视网膜病变的药物防治研究

在体外应用培养的兔皮成纤维细胞，对三尖杉酯碱、冬凌草甲素、氟尿嘧啶及地塞米松5种中、西药物进行了筛选。结果三尖杉酯碱抑制成纤维细胞增殖的作用最强；三尖杉酯碱与地塞米松合用的效果，比单用三尖杉酯碱的抑制作用明显增强。提示两者合用可能是一种有价值的防治PVR的用药方式。 （中华眼底病杂志，1992，8：1-5）     

类肝素、甘糖酯对体外培养的晶状体上皮细胞的影响

目的　观察类肝素及甘糖酯 (PGMS)对体外培养的大鼠晶状体上皮细胞 (LECs)增殖的影响。方法　将质量浓度为 0 .2 ,0 .4,0 .8mg/ml的类肝素和PGMS作用于培养细胞 ,72h后行结晶紫染色比色测定 ,并对 2 4h内的 3H TdR掺入率进行测定。结果　类肝素、PGMS可使LECs增殖明显降低 (P <0 .0 5 ) ,DNA合成明显受抑 (P <0 .0 1) ,相同质量浓度下类肝素的作用强于肝素。结论　类肝素、甘糖酯对体外培养的大鼠晶状体上皮细胞有明显抑制作用     

Tryptase increases proliferative activity of human conjunctival fibroblasts through protease-activated receptor-2

PURPOSE: Tryptase that is released by mast cell degranulation has recently been thought to play a key role in wound healing in allergic bronchitis. Conjunctival fibroblasts secrete mediators and extracellular matrices that could exacerbate inflammation and papillary formation in allergic conjunctivitis. This study was conducted to investigate the effect of tryptase on the proliferation of conjunctival fibroblasts and studied whether this effect was mediated by protease-activated receptor (PAR)-2. METHODS: Conjunctival fibroblasts were cultured with or without tryptase (0.1 ng/mL to 1.0 microg/mL), and the proliferation rate was assessed after 48 hours. The effects of tryptase inhibitors (leupeptin, benzamidine) and a PAR-2 agonist (SLIGKV) were examined. The existence of PAR-2 mRNA and protein in conjunctival fibroblasts was examined by RT-PCR and Western blot analysis, respectively. The existence of PAR-2 in cultured conjunctival fibroblasts and conjunctival papillae from patients with vernal keratoconjunctivitis, as well as conjunctival tissue from normal subjects was examined by immunohistochemistry. RESULTS: Conjunctival fibroblast proliferation was upregulated by tryptase in a dose-dependent manner (P < 0.001). Leupeptin and benzamidine inhibited tryptase-induced fibroblast proliferation (P < 0.05), and SLIGKV mimicked tryptase's effect. PAR-2 mRNA and protein were detected in cultured conjunctival fibroblasts using RT-PCR and Western blot analysis. PAR-2 immunoreactivity in both the cultured conjunctival fibroblasts and in stromal cells in excised conjunctival tissues was observed. CONCLUSIONS: Tryptase increased conjunctival fibroblast proliferation and this response appeared to be mediated by PAR-2. Mast cells are the most likely source of tryptase in the conjunctiva and may play an important role in chronic exacerbations with conjunctival papillary formation in allergic conjunctivitis.     

阿霉素联合地塞米松抑制成纤维细胞增生的实验研究

研究阿霉素、地塞米松对成纤维细胞生长的抑制作用及有效浓度。为药物防治ＰＶＲ提供新线索。方法应用噻唑兰比色法检测二者联合应用对成纤维细胞的作用。结论阿霉素、地塞米松能有效抑制成纤维细胞生长，二者合用可能有实用价值。     

LY294002联合奥曲肽对bFGF诱导的兔晶状体上皮细胞增殖的影响

目的　探讨ＬＹ２９４００２联合奥曲肽对碱性成纤维细胞生长因子（ｂａｓｉｃｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ,ｂＦＧＦ）诱导的兔晶状体上皮细胞（ｌｅｎｓｅｐｉｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌｓ,ＬＥＣｓ）增殖的影响。方法　兔眼ＬＥＣｓ经原代和传代培养后,共分为４组:空白对照组、增殖对照组、实验药物组、增殖药物组。空白对照组使用仅含无血清ＤＭＥＭ培养;增殖对照组使用加ｂＦＧＦ（１０ｍｇ·Ｌ－１）的无血清ＤＭＥＭ;实验药物组培养时在不加ｂＦＧＦ增殖的情况下分别单独应用１０－５ｍｏｌ·Ｌ－１ＬＹ２９４００２、单独应用１０－９ｍｏｌ·Ｌ－１奥曲肽和联合应用１０－５ｍｏｌ·Ｌ－１ＬＹ２９４００２与１０－９ｍｏｌ·Ｌ－１奥曲肽来培养;增殖药物组在加ｂＦＧＦ增殖的情况下分别单独应用１０－５ｍｏｌ·Ｌ－１ＬＹ２９４００２、单独应用１０－９ｍｏｌ·Ｌ－１奥曲肽和联合应用１０－５ｍｏｌ·Ｌ－１ＬＹ２９４００２和１０－９ｍｏｌ·Ｌ－１奥曲肽进行细胞培养,每组重复５次。各组分别培养４８ｈ。ＭＴＴ比色法测定吸光度（Ａ值）分析各组细胞的生长抑制率,流式细胞仪检测各周期细胞的百分率。结果　增殖对照组与空白对照组相比,吸光度Ａ值升高（Ｐ＜０．０５）;实验药物组中各组分别与空白对照组相比,吸光度Ａ值均有不同程度下降（均为Ｐ＜０．０５）;增殖药物组中各组分别与增殖对照组相比,吸光度Ａ值明显下降（均为Ｐ＜０．０５）;生长抑制率与吸光度Ａ值趋势相同。经流式细胞仪分析,实验药物组中联合用药组与两个单独用药组相比Ｇ０／Ｇ１期细胞比例增高,Ｓ期细胞比例降低（均为Ｐ＜０．０５）;增殖药物组中,联合用药组与两个单独用药组相比也出现Ｇ０／Ｇ１期细胞比例增高,Ｓ期细胞比例降低（均为Ｐ＜０．０５）。结论　ＬＹ２９４００２联合奥曲肽较单独用药对ＬＥＣｓ的增殖抑制作用更强。这为临床筛选药物防治后发性白内障提供依据。