促进前交叉韧带重建后腱骨愈合方法的研究进展

前交叉韧带(anterior cruciate ligament,ACL)损伤是骨科常见的损伤性疾病,在美国,前交叉韧带损伤年发病率约为1/3000,每年约有100 000到200 000的病例发生[1]。ACL损伤后导致膝关节活动功能受限,外科手术进行重建是临床常用的手段。目前,用自体腘绳肌肌腱进行ACL重建是临床最常用的方法,而重建后腱骨界面愈合情况是重建能否达到良好效果的重要决定因素[2]。与骨与骨之间的愈合相比,     

促进腱-骨界面修复重建愈合的研究进展

随着镜下交叉韧带及肩袖损伤修复的增加,腱-骨界面移植物的转归与愈合成为重建交叉韧带及肩袖损伤修复成功与否的关键,牢固的腱-骨界面愈合是韧带重建、肩袖修复术后发挥其生理功能的先决条件,但腱-骨界面愈合困难,如何促进腱-骨界面愈合逐渐成为了近年来国内外学者关注的热点。本文重点就移植腱-骨界面愈合的研究现状作一综述。     

金葡素促进兔前交叉韧带重建后腱骨愈合的实验研究

目的 :探讨兔膝关节前交叉韧带(ACL)重建后,金黄色葡萄球菌滤液制剂(金葡素)对移植肌腱与骨隧道愈合的作用。方法:将3月龄新西兰大白兔24只(体重平均2.56 kg,雌雄不限)随机分为实验组和空白对照组,每组12只。采用兔自体趾长伸肌腱建立膝前交叉韧带重建后的腱骨愈合模型。实验组分别于术中及术后第2天向胫骨端腱骨界面处缓慢均匀注射金葡素0.1 ml,对照组以相同时间和方法注射等量0.9%Na Cl注射液。术后双膝不予制动,以青霉素注射液80万U/d连续肌肉注射3 d。分别于术后4、8和12周各处死动物8只,完整获取腱骨愈合标本并分别进行组织学分析,肉眼观察判断ACL重建大体情况,苏木精-伊红染色进行Yamakado腱骨界面组织形态分型评价,苦味酸-天狼猩红染色观察腱骨界面胶原纤维情况,血管内皮生长因子免疫组化染色定量评价腱骨界面再血管化情况,甲苯胺蓝染色定量评价腱骨界面新骨生成情况。结果:大体观察显示全部动物术后伤口Ⅰ期愈合,关节功能恢复良好,未见感染、死亡及金葡素注射不良反应。腱骨界面形态学分型结果显示术后各时间点实验组腱骨界面愈合质量均优于对照组(P0.05))。苦味酸-天狼猩红染色显示实验组胶原纤维术后4周生成少,8周大量生成,12周Sharpey纤维有序排列,集结成束,各时间点胶原纤维生成情况均优于对照组。基于血管内皮生长因子免疫组化染色和甲苯胺蓝染色的定量分析显示实验组术后4、8和12周腱骨界面新生血管面积和新骨生成面积均高于对照组(P0.05)。结论:金葡素能够在葡萄球菌肠毒素C等多种明确成分的协同作用下,通过局部启动无菌性炎症反应,加快腱骨界面血管生成和血液供应,激活骨细胞和纤维细胞大量增殖,有效促进兔ACL重建后腱骨愈合,有望成为促进ACL重建后腱骨愈合的新的临床方法。     

关节滑液对重建韧带腱-骨愈合的影响

[目的]观察关节滑液对关节内韧带重建术后腱-骨愈合的影响。[方法]6个月龄健康雌性新西兰大白兔40只,体重2.5～3.5kg/只,随机分为4组。采用自体带血供半腱肌转移建立胫骨隧道-肌腱界面模型。右侧胫骨隧道不与关节腔相通,无关节滑液浸入;左侧胫骨隧道与关节腔相通,有关节滑液浸入。1组于术后8周取材行生物力学测试,其余3组分别于术后2、4、8周取材,行HE、Masson染色,观察组织形态学改变及界面组织愈合情况。[结果]术后2周,无关节滑液组和有关节滑液组腱骨界面无显著差异,被肉芽组织填充。术后4周,无关节滑液组成纤维细胞和成软骨细胞增生明显,胶原纤维合成明显增多,明显优于有关节滑液组。术后8周,有关节滑液组腱骨界面由结缔组织连接,但连接仍不够紧密,胶原纤维大量合成,不规则排列。无关节滑液组腱骨界面连接紧密,胶原纤维致密,排列规则。界面组织细胞计数比较结果显示各时间组和各组内时间段无关节滑液组与有关节滑液组比较均有显著差异(P0.05)。生物力学测试无关节滑液组抗拉力强度显著高于有关节滑液组(P0.05)。[结论]关节滑液对重建韧带腱骨愈合有负面影响,不利于重建韧带的腱骨愈合,提示阻止关节滑液进入骨隧道可能对改进前交叉韧带重建的临床效果有益。     

促进前交叉韧带重建术后腱-骨愈合的方法学进展

近年来,应用肌腱移植物（如腘绳肌腱）行前交叉韧带重建术越来越普遍。手术的远期疗效关键取决于肌腱移植物能否在骨隧道内获得可靠的腱-骨愈合,腱-骨界面开始仅通过一些Sharpey样纤维连接,其在力学上逊于正常的纤维软骨连接,之后肌腱移植物在骨隧道内需要相当长时间才能获得可靠的腱-骨愈合。因此,在没有获得可靠的腱-骨愈合前,腱-骨界面被认为是＂弱点＂,肌腱移植物容易产生滑移甚至从骨隧道内拔出,最终导致手术失败。因此,如何促进腱-骨愈合是目前研究的热点。本文对相关文献做一综述,重点关注应用于骨隧道局部的一些方法学进展。其中干细胞技术、生长因子的局部应用、基因转染技术以及炎症反应的生物调控技术等均已获得令人振奋的研究成果。生物活性骨水泥的应用以及物理治疗方法也取得可喜的成果。组织工程技术可能成为降低供区并发症的方法 ,尽管目前的研究成果令人鼓舞,但仅基于动物实验,应用于临床实践尚需进一步随机对照临床研究。     

生长因子对前交叉韧带重建后腱-骨愈合影响的研究现状

前交叉韧带(anterior cruciate ligament,ACL)是稳定膝关节的重要结构.运动及日常生活中多种因素可导致其损伤.ACL损伤后,会造成关节不稳、关节其他韧带松弛、关节软骨退变、半月板损伤等并发症,严重影响膝关节功能.关节镜下ACL重建术是恢复关节稳定、延缓膝关节退变的重要方法.骨-髌腱-骨(B-PT-B)一直是ACL重建移植物选择的金标准,虽然末端属于骨-骨愈合,愈合时间短,但由于切取移植物创伤大、术后并发症多,现已很少应用.     

前交叉韧带重建术后腱-骨界面愈合研究

前交叉韧带损伤后自身修复的能力极差,重建前交叉韧带主要依赖肌腱移植替代手术。肌腱与骨隧道内壁固定界面之间的愈合是修复重建的关键。腱-骨界面之间的固定方法对重建韧带止点的愈合速度和愈合方式均有影响,骨隧道内固定可增加移植肌腱固定的早期稳定性并减少术后骨隧道扩大,易于形成直接止点;骨隧道外固定容易引起骨隧道扩大,并倾向于形成间接止点。腱-骨界面间的微动和创伤后产生的炎性介质是引起骨隧道扩大的重要原因,一些细胞因子、生理刺激因素以及骨髓基质干细胞和骨膜的使用,可促进移植肌腱的腱-骨界面愈合。     

前交叉韧带重建术后腱-骨和骨-骨界面愈合的比较研究

目的 探讨并比较两种移植物重建前交叉韧带(anterior cruciate ligament,ACL)后早期移植物隧道界面愈合的生物学机制. 方法 55只成年新西兰大白兔,体重2.0～2.8 kg.左膝关节切取带胫骨.骨块的髌韧带作为供区,右膝关节作为自体移植重建ACL受区.移植物骨块端为骨.骨界面愈合模型,韧带端为腱.骨界面愈合模型.术后观察实验动物一般情况,术后第2、4和8周取材(n=5)行大体及组织学观察,并于第4、8周取材(n=20)进行生物力学检测. 结果 术后动物肢体活动情况良好,实验过程中ACL连续性完整,张力适中.组织学观察:术后2周骨.骨界面大部分区域为纤维组织连接,腱一骨界面主要为肉芽组织填充;术后4周骨.骨界面大部分区域骨性愈合,腱.骨界面可见成骨反应及大量成纤维细胞;术后8周骨.骨界面已完全骨性愈合,腱.骨界面部分区域可见Sharpey纤维,形成间接止点.生物力学观察:术后4周腱-骨界面拔出率为85%,骨.骨界面为15%;术后8周腱.骨界面拔出率为95%,骨.骨界面为5%;各时间点骨.骨界面拔出率与腱一骨界面拔出率比较差异均有统计学意义(P<0.001). 结论 ACL重建术后早期骨一骨界面较腱.骨界面在愈合强度和速度上具有优势.     

前交叉韧带重建术后腱骨愈合的生物学干预研究进展

前交叉韧带重建术后腱骨愈合是影响手术效果和患者转归的重要因素。本文从生物学干预角度对腱骨愈合的相关研究进行综述,主要分为生长因子、干细胞、基因治疗、自体组织、生物材料和药物6个方面。目前已进行临床研究的有富血小板血浆、骨髓间充质干细胞、脂肪源性干细胞、自体骨膜包裹、纳米羟基磷灰石、磷酸钙,其中自体骨膜包裹、纳米羟基磷灰石和磷酸钙的临床疗效比较明确。应用生物学干预方法可促进腱骨愈合,若想更好地服务于临床尚需进一步临床研究。     

关节内环境对前交叉韧带重建后腱-骨愈合的影响

目的：探讨兔前交叉韧带（anterior eruciate ligament,ACL）重建术后早期关节腔内冲洗对腱-骨愈合过程中组织学和生物力学的影响。方法：取24只新西兰大白兔,建立双侧ACL重建模型,一侧膝作为实验组,并取对侧作为对照组。实验组术后5d内定期行关节腔内冲洗,对照组不做处理。在术后4、8、12周行生物力学测定和腱-骨愈合部位组织学观察,比较韧带断裂时所需拉力大小以及腱-骨界面处组织学变化。结果：发现实验组韧带强度及组织学转归明显优于对照组,差别有显著的统计学意义（P〈0．01）。结论：早期关节腔冲洗对ACL重建后韧带强度和腱-骨愈合有着积极的作用,提示可以通过关节腔冲洗的方法来改善ACL重建后早期关节内环境以改善重建后手术效果。     

富血小板血浆复合物促进兔前交叉韧带重建后腱骨愈合的组织学研究

目的探讨富血小板血浆(PRP)复合小牛脱蛋白松质骨(DPB)对兔前交叉韧带(ACL)重建术后腱骨愈合的影响。 方法取36只成年新西兰大白兔,随机分为3组：PRP+ DPB组,PRP组,空白对照组,每组12只。建立右侧膝关节ACL完全断裂模型,行白体半腱肌重建ACL。于PRP+ DPB组和PRP组骨隧道内分别植入PRP凝胶结合DPB和PRP凝胶,空白对照组骨隧道内单纯植入肌腱。术后6、12、18周行大体观察、组织学、免疫组化评价腱骨愈合情况。 结果大体观察术后各个时间点,与其他2组比较,PRP+ DPB组移植肌腱与骨隧道壁纤维组织连接更为致密。HE染色显示PRP+DPB组在各时间点腱骨界面的胶原纤维连接及纤维组织分级结果均优于其他2组。PRP+ DPB组、PRP组及空白对照组标本术后6周时TGF-β1表达量平均分别为119.5±9.3、93.0±7.3、73.3±5.4,12周时平均分别为76.8±5.7、48.0±6.7、26.8±4.7;术后6周时VEGF的表达量平均分别为117.5±8.4、90.5±8.2、69.8±5.8,12周时平均分别为76.6±5.7、48.0±6.7、26.8±4.7,以上指标3组之间两两比较差异均有统计学意义(P＜0.05),PRP+DPB组优于其他2组。术后18周时3组标本TGF-β1及VEGF的表达量差异均无统计学意义(P＞0.05)。 结论在兔膝关节ACL重建模型中,PRP复合DPB能促进术后的腱骨愈合。     

脱蛋白骨复合骨形态发生蛋白对前交叉韧带重建术后腱-骨愈合的影响

目的 探讨兔异体脱蛋白松质骨(DPB)复合骨形态发生蛋白(BMP)对前交叉韧带(ACL)重建术后腱-骨愈合的影响. 方法取96只成年新西兰大白兔,分为四组,每组24只:DPB+BMP组、DPB组、BMP组及空白对照组,分别用自体半腱肌腱进行膝关节ACL重建,DPB+BMP组在股骨隧道内植入DPB-BMP复合体,DPB组和BMP组分别在股骨隧道内植入DPB、BMP,空白对照组的骨隧道内不植入其他材料.于术后2、4、6、8周时分别处死各组中的6只动物,切取骨隧道内标本,通过大体观察及组织学观察分析腱-骨愈合进程. 结果术后2周时BMP+DBP组的骨隧道内新骨生成活跃,肌腱周围出现较多纤维软骨组织;4周时骨隧道内出现钙化的纤维软骨,肌腱末端与钙化软骨融合为一体,并见Sharpey's纤维形成;6周时隧道内出现了更多的钙化软骨,肌腱与骨的结合区出现潮线,具有正常ACL止点的结构特点;8周时肌腱与骨的连接更加成熟,钙化软骨增多.其他三组的腱-骨愈合过程均迟于DPB+BMP组.结论 DPB复合BMP能促进ACL重建术后的腱-骨愈合.     

生物骨传导性骨水泥促进前交叉韧带重建术腱骨愈合的研究进展(英文)

近10年来,应用软组织移植物行前交叉韧带重建术越来越普遍。手术的远期疗效主要取决于肌腱移植物能否在骨隧道内达到坚强的腱-骨愈合。但是,目前面临的问题是肌腱移植物在骨隧道内获得腱-骨愈合所需要的时间相当长。研究发现,在腱-骨界面局部应用生物骨传导性的骨水泥能有效地促进肌腱移植物的骨愈合。这类骨水泥主要是磷酸钙。本文就生物骨传导性骨水泥促进前交叉韧带重建术腱-骨愈合的研究进展作一综述。     

Bone-patellar tendon-bone reconstruction of the anterior cruciate ligament

Ninety-one patients were assessed 5-9 years after an anterior cruciate ligament reconstruction (bone patella-tendon bone autograft). Forty-eight patients had been treated within 6 weeks of the injury (Group I) and 43 patients more than 3 months after the injury (Group II). 73 patients had either a normal or nearly normal final outcome. The mean Lysholm score was 82 and the mean Marshall score was 42. Eighty nine patients had normal or nearly normal stability in the operated knee when compared to the contralateral joint. In none of these results was there any significant difference between the groups. Results of functional and of isokinetic strength tests, as well as the presence of anterior knee pain, were also similar in both groups. However, patients with early reconstruction had fewer degenerative changes in the tibio-femoral joint and were more satisfied with the result. They also returned to their pre-injury level of sports activity more often than those patients in the late reconstruction group.     

PRP明胶海绵复合物在前交叉韧带重建术后腱骨愈合的作用

[目的]观察复合有富血小板血浆(platlet rich plasma,PRP)明胶海绵复合物的自体肌腱移植物对前交叉韧带重建术后骨隧道与肌腱间愈合过程的影响,探讨其在腱与骨愈合中发挥的效果。[方法]新西兰大白兔36只,无菌条件下获取自体PRP,制备PRP明胶海绵复合物,左下肢行自体跟腱移植前交叉韧带重建术。A组(实验组)使用PRP明胶海绵复合物;B组(对照组1)使用PRP;C组(对照组2)仅为肌腱。植入2、4、8、12周后,制作标本,进行大体及HE、Masson染色和TGF-β1免疫组化观察。[结果]A组标本大体观察:前交叉韧带连续性及张力良好,术后2周骨隧道口见少量瘢痕组织;4周骨道口见小部分骨样组织,8周骨道口较多瘢痕呈现,12周骨道口现较多骨样成分。组织学观察:HE染色显示,A组出现Sharpey样纤维和软骨细胞明显早于B组和C组;同样在Masson结果中,A组出现有规则的胶原纤维也明显多于B组和C组。TGF-β1免疫组织化学观察:2、4、8周,A组阳性率明显高于B、C组,差异具有统计学意义(P<0.05)。而在术后12周时,各组之间的表达无明显差异(P>0.05)。[结论]PRP明胶海绵复合物可促进前交叉韧带重建后腱骨的早期愈合。     

保留残迹对前交叉韧带移植物腱骨愈合影响的实验研究

目的探讨保留残迹重建前交叉韧带对移植物腱骨愈合的影响。方法 32只新西兰兔一期行双侧前交叉韧带重建术,一侧保留残端纤维,对侧切除残端纤维。重建术后6、12、18及24周时,采用HE染色、甲苯胺蓝染色观测,分析移植物腱骨愈合变化情况。结果重建术后各观察时间点上,保留残迹组移植物腱骨界面组织构建更接近正常,术后24周时保留残迹组腱骨界面软骨细胞含量明显高于切除残迹组[（56.5±2.4）vs（45.7±2.7）,P〈0.05]。结论保留残迹重建前交叉韧带有助于移植物腱骨愈合。     

Histological findings of tendon-bone healing following anterior cruciate ligament reconstruction with hamstring grafts

BACKGROUND: The purpose of the study was the histological examination of tendon-bone healing of hamstring grafts after anterior cruciate ligament (ACL) reconstruction. METHODS: During five arthroscopies done 6-14 months after ACL reconstructions, biopsies of the wall of the former drilled femoral canal were obtained. Four patients were primarily operated on using a suspending device (Endobutton, Acufex Microsurgical, Mansfield, MA, USA, and Transfix, Arthrex, Naples, FL, USA) for femoral fixation, one patient was reconstructed with a biodegradable interference screw directly inserted between the tendon and the wall of the canal. Biopsies were obtained using a tube harvester during re-arthroscopy. Three grafts were stable, two grafts were unstable, and revision of the ACL was performed. RESULTS: Histologically, in the four cases of reconstruction with a button or a rectangular pin, biopsies resembled granulation tissue without insertion of fibers between the tendon tissue and the bony wall. A wide area of woven bone was noted adjacent to the pre-existing lamellar bone. In contrast, the tendon-bone junction in the knee reconstructed with a biodegradable interference screw resembled a zone of metaplastic fibrous cartilage between the tendon graft and the lamellar bone. Collagen fibers connecting the tendon-bone interface occurred under polarized light microscopy. CONCLUSION: We conclude that the use of hamstring grafts for ACL reconstruction can lead to different histological pattern of tendon-bone healing. Micromotion of the hamstring graft inside the drilled canal can be play a role in tendon-bone healing.     

The effect of osteoprotegerin on tendon-bone healing after reconstruction of the anterior cruciate ligament: a histomorphological and radiographical study in the rabbit

AIM: Improvement of the bony incorporation of a soft-tissue graft after ACL reconstruction by local administration of Osteoprotegerin between the bone and tendon graft. METHOD: Fifteen New Zealand White rabbits underwent unilateral anterior cruciate ligament (ACL) reconstruction using an autologous semitendinosis tendon graft. We compared the effect of three OPG doses (5 microg, 50 microg, or 100 microg) at the tendon-bone interface to the controls (OPG carrier) and ACL reconstruction only. Specimens were analyzed at 3 weeks using radiology, histology and histomorphometry to investigate the effect of OPG on the bony incorporation of the tendon graft. RESULTS: Animals treated with OPG 100 microg had a significant (p = 0.007) increase in newly-formed bone around the graft compared to the control group (0.16 +/- 0.01 mm(2); 0.06 +/- 0.02 mm(2)). No significant differences were found between the controls and the other groups (tendon graft only, OPG 5 microg, and 50 microg) (p > 0.05). Bone mineral density, measured in image-pixel brightness (IPB; reference range: 0-255), along the edge of the bone tunnel was greater in the OPG 100 microg group (169.5 +/- 5.9 IPB) compared to the control group (150.3 +/- 4.3 IPB) but this was not statistically significant (p = 0.083). There was a significant decrease in the number of osteoclasts per high-power microscopic fields (HPF) lining the bone tunnel in the OPG 100 microg group compared to the control group (4.4 +/- 2.5 cells/HPF; 6.4 +/- 1.8 cells/HPF) (p = 0.022). No significant differences were found between the control group and the other groups in osteoclast numbers (p > 0.05). CONCLUSION: Since tendon-bone healing requires new bone formation and bone ingrowth around a tendon graft, OPG may improve biologic graft fixation. A potential implication could be earlier return to function or better conditions in revision surgery.     

富血小板血浆与异体脱蛋白骨复合物颗粒促进前交叉韧带重建术后腱骨愈合的临床研究

目的观察富血小板血浆(PRP)与异体脱蛋白骨(DPB)复合物颗粒促进前交叉韧带(ACL)重建术后腱骨愈合的临床效果。方法将42例接受ACL重建术的患者随机分为实验组及对照组,对照组按常规方法行ACL重建术,实验组在两端骨隧道中填充入PRP+DPB复合物颗粒,术后6个月行CT检查,通过计算机图像分析软件测量出骨隧道扩大数值,并行Lysholm评分及IKDC评分。结果随访时间6～21个月,平均11.8个月。末次随访时,两组Lysholm评分及IKDC评分与术前比较,差异均有统计学意义(P<0.05);但两组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。两组间术后CT测量的骨隧道直径扩大的数值差异具有统计学意义(P<0.05)。结论与对照组相比,PRP+DPB复合物颗粒可促进ACL重建术后骨腱愈合,减少骨隧道扩大,临床效果满意。