无菌培养的溶组织内阿米巴和蓝氏贾第鞭毛虫对多种抗菌药物的耐受性

要使新建的虫株无菌化,或清除已建立的培养物中的污染细菌,首先要确定所使用的抗菌药物对所培养的虫株确无任何毒性。作者等用12种抗菌药物对溶组织内阿米巴HM-1:IMSS株和蓝氏贾第鞭毛虫WB株进行筛选试验。两种虫种均在TYI-S-33培养基中保种。实验时将蓝氏贾第鞭毛虫(10～25,000个/ml)或溶组织内阿米巴(5～     

小鼠对溶组织内阿米巴敏感性的遗传控制

作者用纯净的溶组织内阿米巴感染小鼠,首创性地建立了肠道阿米巴病的小鼠模型。在此基础上,作者用9个纯系和1个远交系的不同品系小鼠作材料,研究了遗传控制小鼠感染溶组织内阿米巴的易感性。建立动物模型所用的无菌溶组织内阿米巴为HM-1-L_3亚株,是将HM-1株阿米巴3次通过仓鼠肝脏而分离出来的一个毒性亚株。在盛有FYI-S-33培养液的250ml培养瓶中,于37℃培养3天后,取瓶中的阿米巴悬液,于400g离心10分钟,计数后用培养液稀释到所需浓度,即可用于接种。接种的具体步骤如下:先将不带鼠内阿米巴(E.     

我国某些地区溶组织内阿米巴酶株群的分布

对来源于北京、天津、福建等地急性阿米巴痢疾患者和包囊携带者粪便中的5株溶组织内阿米巴的磷酸葡萄糖变位酶(PGM)、葡萄糖磷酸异构酶(GPI)、己糖激酶(HK)和L-苹果酸:辅酶Ⅱ氧化还原酶(ME)的同工酶谱进行比较分析。结果表明:5株溶组织内阿米巴均属于致病性的酶株群ⅩⅣ。提示,我国主要的致病性溶组织内阿米巴的酶株群是酶株群ⅩⅣ。     

溶组织内阿米巴带虫者和病者虫株的单虫合并培养与纯培养

溶组织内阿米巴带虫者虫株10株,从精神病院分离获得病者虫株5株,4株是从阿米巴痢疾患者(其中PNH_5株是PN株感染田鼠肝5次以增强毒性),1株从皮肤阿米巴病患者分离而得。从包囊分离虫体是将含包囊的粪便分两部分,一部分用蒸馏水,另一部分用0.1N HCl制成悬液,经一小时,用Ringer液清洗2次,各取少量悬液接种到Jones培养基4管,2管还按每毫升加2毫克链霉素和1,000单位青霉素,在37℃温育3天后,选择生长最好而没有人酵母菌或真菌之类的干扰性伴合物的培养管移种入新鲜培养管内。     

溶组织内阿米巴同工酶的初步研究

本文对3株溶组织内阿米巴(Entamoeba histo-lytica)和1株侵入内阿米巴(Entamoeba invadens)的匀浆液用琼脂糖凝胶电泳法进行同工酶谱分析研究。这4株阿米巴分别多菌培养72h和2wk后收集离心浓缩,加入酶稳定液,冻融数次,高速离心,提取阿米巴细胞匀浆液。并以各株伴随细菌作对照。分别检测阿米巴4种酶的同工酶,即L-苹果酸:辅酶I     

应用单克隆抗体作酶联免疫吸附试验测定粪便中溶组织内阿米巴

采用培养的溶组织内阿米巴HK-9株制备高度免疫的兔血清,从加尼福利亚获取针对HK-9株分泌的单克隆抗体,贮于-70℃。将6株溶组织内阿米巴滋养体置入含维生素和牛血清的Diamond's TYI-S-33培养基生长48小时,粪内寄生物以pH7.4 PBS洗涤2次,450g离心5分钟2次,沉淀微粒悬浮于2ml PBS中,实验前置于-70℃ 5分钟。分别收集粪检溶组织内阿米巴阳性和阴性的大便标本,测定前先置于冰上或4℃,渐至-20～-70℃,最长达7个月,用于ELISA试验。结果:6株溶组织内,阿米巴滋养体以PBS连续10倍稀释,每种稀释度取25μl作     

用双相免疫电泳法作二株无菌的溶组织内阿米巴抗原分析

一般免疫电泳法曾用于研究溶组织内阿米巴抗原结构,但未能对抗原进行定性或定量分析,故有局限性。本文则用双相免疫电泳法(2D-IEP)对无菌培养的2株溶组织内阿米巴抗原成分进行分析比较。实验选用2株无菌培养的溶组织内阿米巴;HT-31株是从台湾省1个阿米巴肝脓肿病人分离所得;HK-9株是从朝鲜的1例直肠镜检材料分离来的。这两株阿米巴都经过多年无菌培养。现取72小时的培养物,经离心、清洗、声波处理、最后透析制成抗原。用HT-31株和HK-9株提取物免疫家兔,经     

多聚酶链反应分析溶组织内阿米巴的致病性

从急性阿米巴痢疾患者粪便中分离所得的溶组织内阿米巴虫株SH-3、SH-6、SH-8的DNA和包囊携带者粪便中分离所得的溶组织内阿米巴 SH-5、SH-7的 DNA应用多聚酶链反应技术扩增30个周期后作琼脂糖凝胶电泳分析,发现致病性引物 P_(11)、P_(12)可使SH-8虫株的DNA增殖;而非致病性引物P_(13)、P_(14)可使SH-3、SH-5、SH-6和SH-7虫株的DNA增殖。另外,酶株群分析和单克隆抗体反应也显示SH-8为致病性虫株,而另4株虫株均属于非致病性虫株,与多聚酶链反应的结果相一致。提示,致病性虫株与非致病性虫株的基因有区别,多聚酶链反应对溶组织内阿米巴进行基因分析是一种敏感和特异的新方法。     

用死的卡氏棘阿米巴抗原及阿米巴培养物上清液抗原对实验性棘阿米巴脑膜脑炎的免疫

供实验用的阿米巴为棘阿米巴A-1,A-5,HN-3株及棘阿米巴A.polyphage MRA1A株,用胰蛋白酶大豆肉汤培养基置于底面积为75cm~2的组织培养瓶内进行无菌培养。每6天收集一次。收集时,摇匀培养瓶,吸出上层液,残留的阿米巴加新鲜培养基继续培养。吸出的上层液在生理盐水中以400g离心3次,每次10分钟,最后校正为5×10~6阿米巴/ml,超声粉碎3次,每次15秒钟,间隔1分钟,贮于-70℃。另取培养6天的A-1     

内阿米巴和有关的阿米巴在低温下存活情况:内阿米巴包囊在4℃的活力

将阿米巴成熟包囊贮存冰箱中,经过不同时间后,将冰箱中的包囊移种到新鲜培养基上进行培养是保存各种内阿米巴培养物的方法之一。EA和RD两株溶组织内阿米巴包囊是用Dobell和Laidlaw(1926)方法保存的。阿米巴生长于不加米粉而用稀释的马血清覆盖的整个鸡蛋(Ehs)斜面上,经用加有少量(10     

溶组织内阿米巴:吞噬红细胞作用、溶胶原作用和肝脓肿产生作为毒力的标志

在离体试验中,高度吞噬红细胞作用和溶胶原作用可作为溶组织内阿米巴滋养体在体内的毒力指标。本研究用3个溶组织内阿米巴HMI:IMSS株细胞系虫体(A系是被克隆并经仓鼠肝3次;B系未克隆仅经仓鼠肝1次;C系是原先HMI:IMSS虫株,无克隆也未经肝)。以BI-S-33无菌培养基培养,在对数生长期取各系虫体试验,用作吞噬红细胞作用体外试验的虫数为2×10~5/ml;作为胶原酶分析的虫数为1×10~6/ml;腹腔内接种仓鼠的虫数为2.5×10~6/ml。同工酶分     

从溶组织内阿米巴分离一种细胞毒素--肠毒素

本文是从无菌培养的阿米巴滋养体分离一种毒素、并研究其特性。实验用3株溶组织内阿米巴,其毒力 HK-9株较弱、HM-1株较强,HM-1:HL-3λ更强。收集培养管内滋养体经过清洗、使其达到10~7个/毫升 PSF 液,超声击碎、离心取上清液作为阿米巴蛋白质溶解液。对照用小鼠新鲜肝组织。并以牛血清白蛋白为标准、以Lowry 氏法定蛋白质量。另取超声击碎后液     

阿米巴病血清学诊断中EUSA和其它血清学方法的比较

本文比较了在阿米巴病血清学诊断中ELISA和其它三种血清学方法(IHA、IFA、CIEP)的敏感性和特异性。用于ELISA和CIEP的可溶性抗原来自无共生物培养的溶组织内阿米巴HK-9株,制备方法如Goh等(1989)所述。IFA所需抗原取培养获得的阿米巴洗涤固定后,悬浮于含15％牛血清白蛋白,pH7.2的PBS液中,并分装于安瓿中干燥冷藏。 78例溶组织内阿米巴感染者阳性血清样本有四个来源:53例由吉隆坡医学研究所提供,其中39例阿米巴肝脓肿病人(ALA),13例肠阿米巴病人(INT),1例疑似病例;5例ALA病人来自巴基斯坦;新加坡国立大学     

溶组织内阿米巴和入侵内阿米巴的分子染色体核型

用脉冲梯度电泳法(PFGE)测定溶组织内阿米巴和入侵内阿米巴DNA的大小分层。溶组织内阿米巴HMI:IMSS株滋养体和由此株获取的克隆A,以及入侵内阿米巴IP-1株以有限稀释法获取的克隆IP-IV,分别在TYI-S-33培养基培养,收集对数生长期虫体作研究,并与以往分别报告的布氏锥虫和酿酒酵母染色体的大小作对照。三种     

CG-10213 GO和其它硝基咪唑类药物对无菌培养的溶组织内阿米巴原虫的杀灭作用

CG-10213 GO(Satranidazole)为一新合成的、第三代抗原虫药物,对无菌培养的溶组织内阿米巴(HK-9株)具有直接杀灭作用。该药属于硝基咪唑类衍生物,在2位上具有咪唑啉酮结构,不同于其他硝基咪唑类的是,在硝基咪唑模板的2位上连有氮原子而不是碳原子。用TYI-S-33培养基,pH6.8。在具有螺旋帽的试管中加入完全灭菌的培养液8.5ml,将培养了4—5天正处于活跃的对数生长期的原虫接种液吸取1ml加到试管中。     

溶组织内阿米巴和结肠内阿米巴同功酶的电泳酶谱

作者用薄层淀粉凝胶电泳法比较了14株溶组织内阿米巴和1株结肠内阿米巴的葡糖磷酸变位酶(PGM)、磷酸葡糖异构酶(GPI)和苯果酸二烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADP)氧化还原酶(ME)的电泳酶谱的差别。除 Devonport Labs/23539/64株系从1964年分离,以后保种于培养物中及 NIH/200/2株系从1949年分离,1968年以后转种     

痢疾阿米巴与短膜虫的联合培养物和痢疾阿米巴的纯培养物用液氮保存后的存活情况

痢疾阿米巴在液氮中保存,还存在一些问题。目前所知只有痢疾阿米巴和一种短膜虫的联合培养物(简称A-C培养物)是能够低温保存的。本文报道了继续研究的结果,并已发展成为纯粹的痢疾阿米巴株。此种纯培养物的重要意义,在于可用来作为血清学试验的抗原。 A-C培养物及纯的痢疾阿米巴培养物,于加入5％(V/V)二甲亚砜以后,用半自动     

甲氟喹、糠酰胺及其它常用杀阿米巴药物的抗痢疾阿米巴的作用比较

作者比较了9种药物体外抗痢疾阿米巴(HK_9株和200 NIH株)的作用。在TPS-1培养基中,甲硝唑抑制阿米巴滋养体生长的作用最强,吐根碱对痢疾阿米巴滋养体的生长亦有明显的抑制作用。甲氟喹与氯喹相比,是一个较有效的生长抑制剂,组织阿米巴杀灭剂氯喹在浓度为1000μg/ml时,不能完全抑制痢疾阿米巴的生长,但浓度为52.5μg/ml时,可使2株痢疾阿米巴处于静止期。Neocuproine有抑制阿米巴生长的作     

溶组织内阿米巴的半乳糖特异性粘连凝集素对长爪沙鼠阿米巴肝脓肿的保护作用

以长爪沙鼠为阿米巴肝脓肿实验动物模型,取7～9wk龄的雄性长爪沙鼠,用无菌培养的溶组织内阿米巴、以抗溶组织内阿米巴的单克隆抗体作亲和层析纯化其半乳糖特异性凝集素抗原,用10μg凝集素乳化于福氏完全佐剂中,作腹腔内或皮内注射进行免疫,继于2wk和4wk用10μg加福氏不完全佐剂各加强免疫1次,另设对照,只注射福氏完全佐剂或不完全佐剂。免疫后6wk,免疫组与对照组长爪沙鼠肝内注射5×10~5个无菌培养的溶组织内阿米巴(HMI-IMSS株)滋养体,攻击后2wk剖杀沙鼠检查肝脓肿。     

特定培养基中溶组织内阿米巴的附着与短期保持动力和活力

溶组织内阿米巴以其附着、伸展和运动为基本特性,这些特性在致病过程中是重要的,为了研究这些特性,确定其最低的生理要求,因而作此体外培养观察。实验用的虫株有溶组织内阿米巴的HM-1株、200:NIH株和HK-9株。作者设计一种保存培养基(MM-1培养基)以保持