NOTCH1调控 PTEN/PI3K/AKT信号通路促进肾透明细胞癌发病

研究NOTCH1在肾透明细胞癌中的表达及其对PTEN/PI3K/AKT信号通路的调控。 方法 收集36对肾透明细胞癌及其邻近非肿瘤肾组织,Western blotting和qrt-PCR检测NOTCH1、HES1、PTEN、AKT(p-S473)蛋白及其mRNA的表达,分析NOTCH1表达与肿瘤临床特征之间的关系。在肾透明细胞癌细胞系786-O及人肾小管上皮细胞系HKC中沉默或过表达NOTCH1,Western blotting和qrt-PCR检测HES1、PTEN、AKT(p-S473)蛋白及其mRNA变化,MTS法检测细胞增殖,流式细胞术检测其对细胞周期及凋亡的影响。 结果 肾透明细胞癌组织中NOTCH1的表达明显高于癌旁组织,其表达与患者年龄、肿瘤大小、核分级及肿瘤TNM分期无明显关系（P>0.05）。在两株细胞中,沉默NOTCH1均能抑制细胞生长,引起HES1与AKT(p-S473)蛋白下降,PTEN的蛋白及mRNA水平明显升高。过表达NOTCH1则促进细胞生长,HES1、AKT(p-S473)及PTEN的变化方向同转染siRNA相反。沉默或过表达NOTCH1均对细胞的凋亡无明显影响。 结论 在肾透明细胞癌中,过度活化的NOTCH1信号通路起促癌作用,其机制可能通过调节PTEN/PI3K/AKT信号通路参与发病过程,这为肾透明细胞癌的治疗提供了新思路。     

结肠癌组织中PTEN蛋白表达与PI3K/AKT信号通路的关系

目的 探讨抑癌基因PTEN与结肠癌发生发展的关系及其与PI3K/AKT信号传导通路的相关性.方法 应用Western blot蛋白印迹技术和免疫组织化学方法检测 32例结肠癌及癌旁正常组织中 PTEN和p-AKT蛋白的表达.结果 PTEN蛋白在结肠癌中表达的阳性率 (31.25%)低于癌旁正常组织 (96.87%) (P＜0.01);而p-AKT蛋白在结肠癌中表达的阳性率(87.5%)高于癌旁正常组织 (15.62%) (P＜0.01);两种蛋白的表达呈负相关(r=-0.872,P＜0.01),且表达水平与肿瘤的分化程度、Duke's分期、有无淋巴结转移及远处器官转移有关(P＜0. 05).结论 PTEN蛋白表达缺失导致AKT信号传导通路持续活化可能在结肠癌的发生发展过程中起着重要作用.     

Akt和mTOR蛋白在肾透明细胞癌中的表达及意义

目的探讨Akt和mTOR蛋白是否可作为一种新的诊断肾透明细胞癌标志和药物靶向治疗的靶点。方法采用免疫组化和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术对60例肾透明细胞癌组织和30例癌旁正常肾组织中的Akt和mTOR的蛋白及mRNA表达进行检测分析。结果 Akt和mTOR蛋白及mRNA在肾透明细胞癌组织中均呈高表达,在癌旁正常组织中均呈低表达(P<0.05);mTOR和Akt蛋白在肾细胞癌组织中的阳性表达率呈正相关。结论 Akt、mTOR蛋白在肾透明细胞癌中的高表达与肾细胞癌的发生有关,可作为一种新的肾细胞癌诊断标志物。     

PTEN、PI3K和Akt蛋白在胃癌组织中的表达及其临床意义

目的:探讨PTEN、PI3K和Akt在胃癌中的蛋白表达及其与胃癌临床病理特征的关系,以及PTEN、PI3K和Akt三者之间的相关性。方法:采用免疫组织化学Elivision法检测68例胃癌组织和10例正常胃黏膜组织中PTEN、PI3K和Akt的蛋白表达。结果:胃癌组织中PTEN、PI3K、Akt蛋白的阳性表达率分别为48.53%(33/68)、85.29%(58/68)和89.71%(61/68)。早期胃癌、中晚期胃癌中PTEN、PI3K、Akt蛋白的阳性表达率与正常胃黏膜组织相比,差异均有显著性(P<0.05)。PTEN、PI3K、Akt蛋白的表达均与胃癌癌细胞的分化程度、淋巴结转移显著相关(P<0.05),且PTEN蛋白表达与胃癌Lauren分型显著相关(P<0.05),但PI3K、Akt蛋白表达与胃癌的Lauren分型无关(P>0.05)。在68例胃癌组织中,PTEN分别与PI3K、Akt的蛋白表达之间均呈显著负相关(P<0.05),PI3K与Akt蛋白表达呈显著正相关(P=0.001)。结论:PTEN、PI3K、Akt蛋白的表达均与胃癌发生发展及侵袭转移有关,但PTEN与弥漫型胃癌发生发展的关系更加密切。在胃癌的发生发展中PI3K、PTEN的作用可能互相拮抗;PTEN蛋白的表达缺失可能与Akt过表达有关;PI3K和Akt协同促进胃癌的恶性进展。     

胃肠道间质瘤中PI3K、Akt及PTEN的表达及意义

目的 通过对胃肠道间质瘤(GIST)中PI3K、Akt和PTEN的蛋白表达变化的检测,探讨其表达与GIST临床病理特征及预后的相关性,并探讨它们间的相互关系.方法 选择临床病理资料完整、随访结果确切的中国医科大学附属盛京医院1990年～2007年2月手术切除、病理证实的GIST新鲜组织标本124例.应用Western blitting检测PI3K、Akt及PTEN在GIST及对照组的表达.结果 在124例GIST中,随NIH分级PI3K和Akt表达增强,PTEN下调,但Akt蛋白在GIST中的表达水平明显增高.PI3K、Akt蛋白阳性表达之间呈显著正相关(r =0.292,P=0.031);PI3K与PTEN蛋白阳性表达之间呈显著负相关(r=-0.412,P=0.036);PTEN与Akt蛋白阳性表达之间呈显著负相关(r=-0.386,P=0.024).结论 在GIST中,随NIH分级PI3K、AKt表达上调,而抑癌基因PTEN的表达下调,PI3K/Akt与PTEN在GIST的发生发展中可能互相拮抗共同作用.     

人神经母细胞瘤株SY5Y细胞PI3’K信号转导通路的研究

目的利用磷酸腺肌醇-3蛋白激酶(PI3’K)的特异性抑制剂Wortmannin阻断体外培养的人神经母细胞瘤株SY5Y细胞的信号转导通路,通过观察胰岛素对SY5Y生长的影响,研究其作用机制。方法体外培养SY5Y细胞,分为2大组,第1组包括:对照组、5mmol/L葡萄糖组、5mmol/L葡萄糖加胰岛素0.01U/mL组、5mmol/L葡萄糖加Wortmannin加胰岛素组;第2组包括:对照组、11.5mmol/L葡萄糖组、11.5mmol/L葡萄糖加胰岛素0.01U/mL组、11.5mmol/L葡萄糖加Wortmannin加胰岛素组。观察每组细胞的噻唑蓝(MTT)代谢率、乳酸脱氢酶(LDH)漏出率、细胞轴突长度和胞体面积,并进行统计学分析。结果胰岛素可使正常和高糖环境下SY5Y细胞MTT代谢率升高、LDH漏出率降低、SY5Y细胞轴突长度和胞体面积增加,但经Wortmannin作用后,其作用减弱。结论SY5Y细胞表面存在胰岛素受体,胰岛素通过激活SY5Y细胞的PI3’K信号转导通路发挥其神经保护作用。     

Caspase-3与Caspase-6蛋白在肾透明细胞癌中的表达及意义

目的 检测Caspase-3、Caspase-6蛋白在肾透明细胞癌(RCCC)、癌旁、正常肾组织中的表达,探讨两者在不同临床分期、病理分级的表达及与预后的关系,并分析两者的相关性.方法 采用免疫组化的方法 检测75例RCCC及其癌旁组织、15例正常肾组织标本中的Caspase-3和Caspase-6蛋白表达水平.结果 Caspase-3和Caspase-6蛋白在RCCC中的阳性表达率(74.67%,76.00%)低于癌旁组织(92.00%,90.67%)和正常肾组织(93.33%,86.67%),差异有统计学意义(P<0.05).Caspase-3病理G3期阳性表达率(53.58%)低于G1期(87.50%),P<0.05;临床Ⅲ、Ⅳ期阳性表达率(63.64%)低于Ⅰ期(87.97%),P<0.05;淋巴结转移阳性组中阳性表达率(55.56%)低于阴性组(80.70%).Caspase-6在不同病理分级和临床分期以及是否有淋巴结转移申阳性表率无显著性差异.两者在RCCC中的阳性表达率无相关性(C=0.0921,P>0.05).结论 Caspase-3和Caspase-6表达减少导致细胞凋亡减少、与肾细胞癌发病有密切关系,但不是肾细胞癌有价值的标记物.且两者的表达降低并不存在相关性.     

PTEN基因对子宫内膜癌细胞PI3K/AKT通路的影响

 【目的】探讨PTEN基因在子宫内膜癌PI3K/AKT通路中的作用,评估PTEN基因在抗肿瘤治疗中的意义。【方法】利用慢病毒载体系统, 构建人PTEN基因RNA干扰慢病毒载体和PTEN基因过表达慢病毒载体,分别转染PTEN野生型的HEC-1A细胞和PTEN突变型的Ishikawa细胞, 建立PTEN 基因敲减及过表达的细胞模型,Western Blot方法检测PTEN基因敲减或过表达前后PTEN蛋白的表达和AKT通路的活化情况, MTT法检测慢病毒转染前后细胞增殖的变化,流式细胞术检测慢病毒转染前后细胞周期及细胞凋亡率的变化。【结果】1. HEC-1A细胞转染PTEN基因干扰慢病毒载体后,细胞的增殖曲线和细胞凋亡率与对照组比较无明显变化。但Ishikawa细胞转染PTEN基因过表达慢病毒载体后,增殖曲线和细胞凋亡率显示其生长呈明显抑制状态。2.当HEC-1A细胞转染了RNA干扰病毒后（HEC-1A-RNAi）,Western Blot 结果显示PTEN蛋白表达下调,其EGFR, p-EGFR, mTOR, p-mTOR, AKT, p-AKT蛋白表达增强,当Ishikawa细胞转染了过表达载体病毒后（Ishikawa-PTEN）,Western Blot 结果显示其PTEN蛋白表达上调,p-EGFR,p-mTOR,AKT,p-AKT蛋白表达减弱。3.HEC-1A-RNAi细胞周期中G1期细胞比例减少,S期细胞比例增加,Ishikawa-PTEN细胞周期中G1期细胞比例增加,S期细胞比例减少。【结论】PTEN 基因可以抑制细胞增殖过程, 有可能成为子宫内膜癌患者基因治疗的选择之一。     

PTEN与肾透明细胞癌预后的关系

目的探讨PTEN在肾透明细胞癌中的表达情况与生物学意义。方法应用免疫组织化学S-P法检测84例肾透明细胞癌(TNM病理分期:Ⅰ期45例,Ⅱ期29例,Ⅲ期8例,Ⅳ期2例;细胞核分级:1级49例,2级21例,3级11例,4级3例)中PTEN的表达情况,分析PTEN的表达与肾透明细胞癌TNM病理分期、细胞核分级之间的关系。结果 PTEN的表达与肾透明细胞癌的TNM病理分期、细胞核分级呈负相关(r=-0.354,P=0.001;r=-0.402,P=0.000 1),即PTEN的表达随着TNM病理分期和细胞核分级的增高逐步降低。结论肾透明细胞癌中PTEN的表达是了解其预后的重要指标。     

PI3K/Akt/mTOR信号通路在肾细胞癌中的研究进展

磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/雷帕霉素靶蛋白(PI3K/Akt/mTOR)信号通路是细胞内重要的信号转导通路之一,在多种恶性肿瘤的发生、发展中发挥了重要作用。近年来,随着肿瘤分子生物学的发展,恶性肿瘤靶向生物治疗逐渐成为研究的热点。由于肾细胞癌发病率较高,并且对放化疗具有明显的耐受性,PI3K/Akt/mTOR信号通路与肾细胞癌的关系成为研究热点之一。研究表明,PI3K/Akt/mTOR信号通路与肾细胞癌发生、发展关系密切,采用多种抑制剂联合治疗及新一代的信号通路抑制剂治疗效果比较显著。PI3K、mTOR双重抑制剂正处于临床试验阶段,并且双重抑制剂在肾癌治疗的研究中表现出高度活跃性。     

miR-190b通过PTEN/PI3K/AKT信号通路对肾母细胞瘤细胞SK-NEP-1增殖、迁移和凋亡的影响

目的:探讨miR-190b通过PTEN/PI3K/AKT信号通路对肾母细胞瘤细胞SK-NEP-1增殖、迁移和凋亡的影响.方法:采用qRT-PCR法检测miR-190b在肾母细胞瘤和相应的癌旁正常组织(n=20)中的表达,免疫组化法检测组织中PTEN、PI3K、p-AKT蛋白的表达.TargetScan预测miR-190...     

PI3K/Akt信号通路及PTEN与糖尿病肾病研究进展

糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)是糖尿病发展过程中最常见的微血管病变,也是糖尿病严重的慢性并发症之一,其最终导致的终末期肾功能衰竭(ESRD)是糖尿病高病死率的主要原因,严重威胁着人类的健康[1-2].DN的致病因素复杂多变,具体的分子机制尚不明确.近年来,国内外学者认为,DN的发生发展与PI3K/Akt的过度激活关系密切.PI3K/Akt信号转导通路在细胞生长、增殖、凋亡、分化及葡萄糖代谢过程中发挥重要作用[3],它受到上游多种分子的调节以维持细胞和生命的稳态,例如胰岛素、生长因子的正向调节及PTEN的负向调节[4-5].     

FBXO11蛋白在透明细胞性肾细胞癌中表达的意义

目的 探讨FBXO11在透明细胞性肾细胞癌（clear cell renal cell carcinoma,CCRCC）中表达的意义。方法 采用免疫组织化学方法检测77例CCRCC患者肿瘤及35例癌旁组织FBXO11蛋白的表达,分析FBXO11蛋白表达与患者临床病理特征的关系。将CCRCC患者临床病理特征及FBXO11蛋白表达进行COX单因素分析。将单因素分析中有统计学意义的因素引入COX多因素模型,分析影响CCRCC患者总生存期（overall survival,OS）缩短的独立危险因素。结果 FBXO11蛋白阳性表达率在CCRCC中为48.1%,明显高于癌旁组织的25.7%（P<0.05）。FBXO11蛋白阳性表达率在无静脉内癌栓组明显低于有静脉内癌栓组（P<0.05）。COX单因素分析显示高组织学分级、伴有远处转移和高表达FBXO11蛋白是CCRCC患者OS缩短的危险因素（P<0.05）。COX多因素分析显示高表达FBXO11蛋白是CCRCC患者OS缩短的独立预后因素。结论 FBXO11蛋白的高表达可能与CCRCC进展快及患者生存时间短密切相关,检测FBXO11蛋白对CCRCC患者的预后判断有参考价值。     

PI3K/Akt/mTOR信号转导通路在鼻息肉中的表达

目的:研究磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(Akt)与哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)在鼻息肉中的表达及相关性,探讨PI3K/Akt/mTOR信号转导通路在鼻息肉发病过程中的作用.方法:鼻息肉组织28例和正常下鼻甲组织12例,用免疫组化Elivison二步法及Western blot检测鼻息肉组与对照组组织中PI3K、Akt与mTOR的表达,比较两组之间的表达差异.结果:鼻息肉组PI3K、Akt与mTOR免疫阳性细胞数及着色强度均明显高于对照组,图像分析显示鼻息肉组PI3K、Akt、mTOR的积分光密度(IOD,103/HP)分别为30.36±3.78、32.70±2.30、35.67±1.26,与对照组3.63 ±1.55、2.38±1.36、2.79±0.78相比有显著性差异(P值均＜0.01);Spearman等级相关分析显示,鼻息肉组PI3K、Akt、mTOR表达密切相关(P＜0.01);Western blot检测发现PI3K、Akt与mTOR在鼻息肉组织中特异性表达强度高于对照组(P＜0.01).结论:鼻息肉组织中PI3K、Akt和mTOR表达均上调,三者有协同表达关系,提示可能是通过PI3K/Akt/mTOR信号转导通路使炎性细胞凋亡受到抑制,导致慢性炎症反应,最终形成鼻息肉.     

HHV-8感染与PI3K/Akt/mTOR信号转导通路研究进展

近年研究表明,PI3K-Akt/PKB/mTOR信号转导通路是细胞内重要的信号转导通路,脂类激酶PI3K和它的下游靶点Akt,即蛋白激酶B,在各种酪氨酸激酶受体诱导的致癌信号通路中发挥了重要的作用。PI3K/Akt信号通路的成分在人类大多数恶性肿瘤中都发生了改变,尤其在卡波肉瘤的增殖、存活和抵抗凋亡、血管发生中发挥了重要作用。人类8型疱疹病毒(HHV-8)可通过激活PI3K-Akt/PKB/mTOR信号转导通路抑制感染细胞的凋亡,从而维持病毒在人体内的感染和生存。本文就HHV-8与PI3K-Akt/PKB信号转导通路的关系及在卡波肉瘤发生、发展中的可能机制作一综述。     

PI3 K／Akt信号转导通路与肿瘤细胞增殖

恶性肿瘤最突出的特征是细胞的异常增殖,细胞增殖的调控与肿瘤发生的密切关系已经为人们所认识。肿瘤的增殖与多条信号通路相关。近几年研究发现,一些因素引起的肿瘤细胞的增殖与磷脂酰肌醇-3-羟基激酶（phosphatidylinositol 3-kinase, PI3 K）／丝氨酸蛋白激酶（serine-threonine kinase, Akt）信号通路密切相关［1－2］。现就 PI3 K、Akt的结构、信号通路的组成及其与肿瘤细胞增殖关系的机制进行综述。     

MXD3基因在肾透明细胞癌中的表达及临床意义

目的 研究MXD3基因在肾透明细胞癌(clear cell renal cell carcinoma,ccRCC)中的表达情况,初步评价其与临床病理学参数之间的关系及对患者预后的影响。方法 从癌症基因组图谱数据库(The Cancer Genome Atlas,TCGA)和基因表达汇编数据库(Gene Expression Omnibus,GEO)下载ccRCC中MXD3表达数据和临床病理参数,分析MXD3表达与肾透明细胞癌临床病理学参数之间的相关性及对预后的影响。结果 在TCGA数据库(P=0.000)与GEO数据库(P=0.000)中,MXD3在ccRCC组织中的表达量较癌旁组织显著增加,其差异表达可以作为ccRCC的潜在诊断标志物。同时,MXD3表达与T分期(P=0.001)、M分期(P=0.001)、TNM分期(P=0.000)以及病理分级(P=0.001)均密切相关。除此之外,MXD3高表达患者总生存率(overall survival,OS)较低表达患者明显缩短(P=0.000)。单因素(HR=2.287,95%CI:1.670~3.132,P=0.000)和多因素(HR=2.249,95%CI:1.387~3.648,P=0.000)COX回归分析表明MXD3表达是ccRCC患者的独立预后指标。结论 在肾透明细胞癌中,MXD3高表达与肿瘤的恶性程度呈正相关,是一个预后不良因素,有望作为判断患者预后的潜在生物学标志物。     

抑制剂PI-103对786-O细胞株PI3K/Akt/mTOR信号通路的影响

目的:探讨抑制剂PI-103对786-O细胞株PI3K/Akt/mTOR信号通路的影响。方法:本文建立PI3K抑制剂作用786-O细胞模型,CCK-8法检测PI-103的IC50值,Western blot法检测PI-103作用后细胞内pAkt蛋白表达水平。结果:786-O细胞72 h的IC50为(9.06±0.06)μmol/L,在此浓度下,细胞内p-Akt蛋白的表达水平显著降低(P<0.01)。结论:PI-103通过抑制PI3K来调控PI3K/Akt/mTOR信号通路下游分子,此信号通路在肾细胞癌发生发展中起着重要作用,为肾细胞癌的分子靶向治疗提供理论依据。     

透明细胞肾细胞癌信号转导及转录活化因子3表达及其与临床病理特征、免疫浸润的关系

目的 探讨透明细胞肾细胞癌（ccRCC）信号转导及转录活化因子3（STAT3）表达及其与临床病理特征和免疫浸润的相关性。 方法 收集2017年3月至2022年1月于东部战区总医院泌尿外科进行手术切除治疗的105例ccRCC患者的癌组织及43例癌旁组织样本,应用苏木精-伊红染色、组织微阵列（TMA）及免疫组织化学（IHC）染色检测组织中STAT3表达,根据其染色评分将ccRCC患者分为STAT3高表达（≥2分）和STAT3低表达患者（＜2分）,分析其表达与临床病理特征的关系。通过TIMER、TISDB数据库分析STAT3基因表达与ccRCC的肿瘤免疫浸润之间的关系。 结果 苏木精-伊红染色显示,免疫细胞在ccRCC组织中呈分散状态。STAT3表达与ccRCC患者肿瘤大小、Fuhrman分级、T分期、淋巴结转移情况有关（P＜0.05）。TMA-IHC分析显示,ccRCC癌组织中STAT3蛋白阳性表达率高于癌旁组织,差异有统计学意义（P＜0.05）。TIMER数据库分析显示,STAT3表达与B细胞、CD8+T细胞、CD4+T细胞、巨噬细胞、中性粒细胞和树突状细胞的浸润水平呈正相关（偏回归系数＞0,P＜0.05）。TISIDB数据库分析显示,STAT3表达自然杀伤细胞、调节性T细胞丰度呈正相关（rs＞0,P＜0.05）,并且与CD56bright、CD56dim自然杀伤细胞丰度呈负相关（rs＜0,P＜0.05）。 结论 STAT3高表达与ccRCC临床病理特征有关,且STAT3与肿瘤免疫浸润相关,对调节ccRCC的发生和发展具有重要意义。