健康妇女和外阴阴道假丝酵母菌病患者阴道乳杆菌对阴道假丝酵母菌抑制作用的实验研究

目的:探讨正常健康和外阴阴道假丝酵母菌病(VVC)妇女阴道分泌物中分离的乳杆菌对假丝酵母菌生长的抑制。方法:健康正常(正常组)和VVC初发(VVC组)妇女各30名,通过定量采集阴道分泌物培养乳杆菌,观察阴道乳杆菌数量及菌种分布情况,并将获得的乳杆菌及VVC患者阴道分泌物中假丝酵母菌分离纯化及鉴定后,采用牛津杯法观察乳杆菌对假丝酵母菌生长的抑制作用,同时比较VVC组和正常组乳杆菌产H2O2能力的差异。结果:①乳杆菌检出率及菌种分布组间无统计学差异(P>0.05);②VVC组阴道乳杆菌数量的平均对数值与正常组相比显著减少(P<0.01);③阴道内乳杆菌BV试剂盒检测为阴性者,正常组显著高于VVC组(P<0.01);④正常组阴道分离的乳杆菌与VVC组比较,对白色和热带假丝酵母菌的生长抑制有统计学差异(P<0.05),对克柔假丝酵母菌的抑制无统计学差异(P>0.05);正常组分离的嗜酸乳杆菌与VVC组的比较,对白色和热带假丝酵母菌的生长抑制均有统计学差异(P<0.01,P<0.05),对克柔假丝酵母菌的生长抑制无统计学差异(P>0.05);但是正常组和VVC组分离的詹氏乳杆菌对上述3种假丝酵母菌的生长抑制均无统计学差异(P>0.05)。结论:①正常妇女与VVC患者阴道内乳杆菌检出率、菌种分布相似,均以嗜酸、詹氏乳杆菌为优势菌种;②VVC患者阴道乳杆菌的数量显著减少;③VVC组产生H2O2的能力下降,可能与VVC发生相关;④正常状态下阴道乳杆菌对假丝酵母菌抑制作用优于VVC感染状态,其中以嗜酸乳杆菌的抑菌作用最为明显。     

复发性外阴阴道假丝酵母菌病药物敏感性与耐药基因表达的相关性分析

目的:探讨复发性外阴阴道假丝酵母菌病(RVVC)患者的致病白假丝酵母菌对6种抗真菌药物(两性霉素B、制霉菌素、咪康唑、益康唑、伊曲康唑、氟康唑)敏感性与耐药基因MDR1、CDR1、CDR2和PDR1表达水平的关系。方法:菌株取自昆明医科大学第一附属医院妇产科门诊外阴阴道假丝酵母菌病患者,经菌种鉴定取白假丝酵母菌213株(RVVC 76株,VVC 137株)后做体外药敏试验;荧光定量PCR对已确定敏感、中敏或耐药的菌株进行耐药基因表达检测。结果:PDR1基因仅在部分菌株中有表达,RVVC组的PDR1基因表达率明显低于VVC组(P<0.05);两性霉素B的VVC-耐药组高于VVC-中敏组(P<0.05),伊曲康唑的RVVC-耐药组高于VVC-敏感组、VVC-耐药组和RVVC-敏感组(P<0.05),即对两性霉素B耐药的VVC菌株、对伊曲康唑耐药的RVVC菌株PDR1表达均升高;CDR1、CDR2、MDR1在所有白假丝酵母菌中均有表达,仅CDR1基因表达量存在差异咪康唑VVC-中敏+耐药组高于VVC-敏感组(P<0.05),氟康唑VVC-中敏组表达高于VVC-敏感组和VVC-耐药组(P<0.05),即对咪康唑耐药的VVC菌株表达高于其敏感菌株,对氟康唑中敏菌株表达高于其敏感和耐药组。结论:RVVC的治疗可优选制霉菌素。致RVVC菌株对伊曲康唑明显耐药,且与PDR1基因高表达有关。致VVC菌株对咪康唑、氟康唑产生耐药可能与CDR1高表达有关。PDR1和CDR1可能同时参与RVVC的耐药机制,而与CDR2和MDR1关系不大。     

外阴阴道假丝酵母菌病临床分离株的基因型和药物敏感性分析

目的:探讨外阴阴道假丝酵母菌病(VVC)患者阴道白假丝酵母菌分离株的基因型别特征及不同基因型别的阴道白假丝酵母菌的药物敏感情况。方法:(1)对211株阴道白假丝酵母菌进行25S rDNA基因分型;(2)采用NCCLS推荐的M27-A微量法测定阴道白假丝酵母菌对5-氟胞嘧啶、咪康唑、伊曲康唑、克霉唑、氟康唑和制菌霉素等6种药物的敏感性。结果:(1)211株阴道白假丝酵母菌分为3种基因型,A型189株(89.6%),B型19株(9.0%),C型3株(1.4%);(2)不含内含子组(A型)白假丝酵母菌对5-氟胞嘧啶、咪康唑、伊曲康唑、克霉唑和氟康唑的最低抑菌浓度值(MIC)高于含内含子组(B、C型)(P0.05);不含内含子组(A型)与含内含子组(B、C型)白假丝酵母菌对5-氟胞嘧啶和咪康唑的敏感率有显著差异(P0.01),前者显著低于后者。结论:不同基因型别的白假丝酵母菌在阴道内的分布具有独特性,A型为主要基因型;VVC白假丝酵母菌基因型别对不同药物的敏感率和MIC有影响。     

克霉唑阴道片和硝酸咪康唑栓治疗SVVC阴道乳杆菌的变化

目的探讨重度外阴阴道假丝酵母菌病(serious vulvovaginal candidiasis,SVVC)患者使用克霉唑和硝酸咪康唑对阴道乳杆菌的影响。方法将2008年11月至2009年6月北京大学第一医院妇科门诊就诊的SVVC患者112例,根据随机表分为克霉唑组(55例)和咪康唑组(57例),采用MRS选择培养基培养法观察用药前、用药后第7~14天和第24~30天阴道乳杆菌数量。结果用药后第7~14天克霉唑组和咪康唑组有效率分别为94.55%和89.47%,差异无统计学意义(P0.05)。用药后第7~14天,阴道乳杆菌取自然对数后与用药前相比,两组均有增加,但差异无统计学意义(P0.05)。用药后第24~30天与用药后第7~14天相比,克霉唑组有所增加,咪康唑组有所减少,但差异无统计学意义(P0.05)。咪康唑组发生4例不良反应,均为外阴阴道瘙痒疼痛,停药后自行缓解。结论克霉唑和咪康唑对SVVC治疗效果相近。克霉唑用药后第24~30天对阴道乳杆菌有辅助生长的作用。     

快速青春发育期女性外阴阴道感染特征分析

目的:探讨9~13岁快速青春发育期女性外阴阴道感染特征。方法:回顾性分析390例2015年7月至2018年6月在四川大学华西第二医院就诊的9~13岁快速青春发育期女性外阴阴道感染状况,并按年龄分为9岁、10岁、11岁、12岁、13岁5个年龄组。采用χ^2检验分析其假丝酵母菌外阴阴道病(VVC)总发生率、细菌性阴道病(BV)发生率、炎症反应率、优势菌异常率,及不同年龄组上述四者的差异。结果:研究对象中BV发生率、VVC总发生率、炎症反应率、优势菌异常率分别为:37.95%、19.24%、16.15%、8.21%,BV发生率显著高于VVC总发生率,差异有统计学意义(P<0.05)。VVC中白假丝酵母菌和非白假丝酵母菌阳性检出率分别为:15.39%、3.85%,两者比较差异有统计学意义(P<0.05)。5组间经两两比较,发现不同年龄组BV发生率和炎症反应率差异无统计学意义(P>0.05);9岁组VVC总发生率(7.56%)显著低于其他年龄段组(分别为20.75%、29.51%、25.42%、24.44%),差异有统计学意义(P<0.05);10岁组优势菌异常率(12.26%)显著高于13岁组(4.44%),差异有统计学意义(P<0.05)。乳杆菌数量1+/油镜随年龄增长呈下降趋势,而乳杆菌3+~4+/油镜随年龄增长呈上升趋势。结论:快速青春发育期女性外阴阴道感染好发BV和VVC,且BV比VVC更易感,而VVC中以白假丝酵母菌感染为主;9岁女性VVC总发生率最低;10岁女性优势菌异常率高于13岁,波动尚无规律。乳杆菌数量随年龄增长呈规律性增加。     

阴道乳杆菌对常见阴道假丝酵母菌抑制作用的体外试验研究

目的:观察阴道乳杆菌菌株在体外实验中对假丝酵母菌生长的抑制作用。方法:分离健康妇女阴道中常见的乳杆菌和外阴、阴道假丝酵母菌病(vulvovaginal candidiasis,VVC)患者阴道中的常见假丝酵母菌,采用96孔板混合生长抑制法观察处于生长对数期的乳杆菌对假丝酵母菌生长的抑制作用。结果:23例健康妇女阴道分泌物中分离出3种乳杆菌:嗜酸乳杆菌(La)、干酪乳杆菌(Lca)和卷曲乳杆菌(Lcr),15例VVC初发患者阴道分泌物中分离出3种假丝酵母菌:白色假丝酵母菌(Ca)、热带假丝酵母菌(Ct)和克柔假丝酵母菌(Ck)。各种乳杆菌均表现出对假丝酵母菌生长的抑制能力,La对各种假丝酵母菌的抑制能力均优于Lcr;与Lca相比,La对Ct的抑制更为明显;产H2O2的Lcr与不产H2O2的Lca对假丝酵母菌的抑制能力无显著差异。结论:各种乳杆菌表现出对假丝酵母菌生长的不同抑制能力,La对研究的3种假丝酵母菌的抑制能力均优于Lcr;与Lca相比,La的唯一优势体现在对Ct的抑制上;乳杆菌对假丝酵母菌的抑制可能不仅仅与产生H2O2能力有关。     

544例外阴阴道假丝酵母菌病患者阴道微生态和菌种药物敏感性分析

目的:探讨外阴阴道假丝酵母菌病(VVC)患者阴道微生态状况以及不同菌种菌株对临床常用药物的敏感性,为临床治疗提供参考。方法:采集2019年1月～12月于首都医科大学附属北京妇产医院妇科门诊确诊为VVC患者的阴道分泌物,沙堡弱琼脂培养基分离培养及科玛嘉假丝酵母菌培养基进行真菌种类鉴定。分析比较白假丝酵母菌和非白假丝酵母菌组患者的阴道微生态状况,并分析不同组真菌对临床常用药物(氟康唑、克霉唑、咪康唑、伊曲康唑和制霉菌素)的敏感性。结果:VVC患者阴道分泌物共分离得到544株假丝酵母菌菌株,其中白假丝酵母菌417株(76.65%),127株非白假丝酵母菌中光滑假丝酵母菌95株。与非白假丝酵母菌组患者相比,白假丝酵母菌组患者的白细胞数目增加、优势菌群中阴道加德纳菌比例及Nugent评分升高,且菌群密集度和菌群多样性增加,差异均有统计学意义(P0.001)。所有菌株对制霉菌素均敏感,白假丝酵母菌对克霉唑和氟康唑更加敏感,敏感率分别为96.40%和80.34%,而非白假丝酵母菌则对咪康唑和伊曲康唑更加敏感,敏感率分别为77.17%和42.52%,差异均有统计学意义(P0.005)。结论:白假丝酵母菌组和非白假丝酵母菌组VVC患者的阴道微生态状况不同,各组菌株对克霉唑、氟康唑、咪康唑和伊曲康唑的敏感性具有差异。     

恢复阴道微生态在细菌性阴道病个体化治疗中的价值分析

目的:探讨在个体化对症治疗细菌性阴道病(BV)中积极恢复阴道微生态,以降低BV复发的效果.方法:147例BV患者,其中复发性BV(RBV) 50例,被随机分成A、B两组.A组67例,其中RBV 21例;B组80例,其中RBV 29例.两组均接受个体化治疗并维持3个月.A组治疗至临床症状消失、Amsel正常后,继续调节阴道微生态至Nugent评分≤3分、AV评分≤2分、阴道茵群密集度Ⅱ～Ⅲ度且乳杆菌占明显优势、H2O2 ≥2 μmol/L时停药;B组治疗至临床症状消失、Amsel正常时即停药.两组停药后均随访3个月.统计两组3个月后复发率及A组在治疗过程中继发外阴阴道假丝酵母茵病(VVC)、需氧菌性阴道炎(AV)及阴道微生态恢复情况.结果:A组5例因治疗不规范被剔除.A组随访3个月复发率16.13％、B组46.25％,差异有统计学意义(P＜0.05).个体化治疗过程中,A组继发AV 17例(27.42％)、继发VVC24例(38.71％).A组BV患者经甲硝唑、奥硝唑及克林霉素个体化治疗,继发VVC及AV的患者经唛咪康帕、克林霉素个体化治疗9疗程后,阴道微生态均得到完全恢复.结论:个体化对症治疗中动态监测并消除继发感染和积极恢复阴道微生态,可明显降低BV复发率.     

外阴阴道假丝酵母菌病的致病菌研究

目的　了解中国外阴阴道假丝酵母菌病(VVC)的致病菌种,并评价阴道应用硝酸咪康唑 400mg3日疗法与 200mg7日疗法对VVC的疗效。方法　采用多中心大样本开放性研究,对 2003年 1月至 7月全国 6家医院 250例VVC患者进行阴道假丝酵母菌的培养,并比较硝酸咪康唑 400mg3日疗法与 200mg7日疗法的疗效及副反应。结果　 (1)白色假丝酵母菌仍是造成VVC最常见的致病菌,占 88.4%,而其他一些非白色假丝酵母菌依次为光滑假丝酵母菌 ( 5. 2% )、伪热带假丝酵母菌 ( 1.6% )、星型假丝酵母菌 ( 1.2% )、近平滑假丝酵母菌(1.2% )、平滑假丝酵母菌(0.8% )及季也蒙假丝酵母菌 (0.8% )等。(2)停药 10 ~14d时, 400mg组真菌阴转率为 89 9%, 200mg组真菌阴转率为 89 7% (P>0.05)。停药 28~35d时, 400mg组真菌阴转率为 96.1%, 200mg组真菌阴转率为 93 1% (P>0.05)。结论　(1)VVC的最常见致病菌是白色假丝酵母菌,机体的免疫异常及阴道环境的改变是VVC发生的重要原因。(2)硝酸咪康唑 400mg3日疗法与 200mg7日疗法在治疗效果上差异无显著意义。     

保妇康栓治疗单纯性外阴阴道假丝酵母菌病临床疗效研究

目的 探讨保妇康栓在恢复单纯性外阴阴道假丝酵母菌病（VVC）患者阴道pH值和阴道微生态平衡,改善其临床症状和体征、阴道清洁度及真菌清除方面的疗效。方法 选择2018年4月至2019年10月在山东省9家医院经妇科检查后确诊为单纯性VVC的患者195例,采用随机方法分为保妇康栓组140例（研究组）和硝酸咪康唑栓组55例（对照组）,随访2次[第1次随访时间：停药后第3～5天;第2次随访时间：停药后第（30±5）天]观察两组治疗后真菌清除率、VVC症状和体征改善情况、阴道p H值及清洁度改善情况、乳杆菌恢复情况。结果 两次随访：研究组与对照组真菌清除率分别为（82.14%vs. 89.09%）和（88.79%vs. 86.79%）,两组比较差异无统计学意义（P>0.05）;阴道分泌物p H值、清洁度、乳杆菌恢复正常的比例两组比较差异无统计学意义（P>0.05）;研究组与对照组临床症状和体征积分减分率改善总有效率分别为（72.14%vs. 49.09%）和（90.65%vs. 67.92%）,两组比较差异均具有统计学意义（P<0.01）。第1次随访充血和水肿,第2次随访瘙痒、充...     

Hydrogen peroxide-producing Lactobacilli in the vaginal flora of pregnant women with preterm labor with intact membranes.

OBJECTIVES: To investigate the role of vaginal infection in preterm delivery, we studied characteristics of vaginal discharge related to hydrogen peroxide-producing Lactobacilli. METHODS: Vaginal specimens were obtained from 66 women with normal pregnancy and 30 women with preterm labor with intact membranes. pH, leukocyte counts on wet smear, and scores by Nugent criteria on Gram stain were measured. Lactobacilli were tested for their production of hydrogen peroxide. RESULTS: Leukocyte levels in wet smears and Nugent scores of Gram-stained smear of women with preterm labor with intact membranes were significantly higher than those of normal pregnant women (P<0.01, P<0.05). Hydrogen peroxide-producing Lactobacilli levels in the vaginal flora of women with preterm labor with intact membranes were significantly lower (P<0.01). CONCLUSION: Distribution of hydrogen peroxide-producing Lactobacilli in vaginal flora as defense factors for infection may have an important role in the pathophysiology of preterm labor.     

大鼠外阴阴道假丝酵母菌病模型感染及治疗后的透射电镜和局部免疫研究

目的探讨外阴阴道假丝酵母菌病(VVC)大鼠模型中感染及治疗后阴道超微结构及局部免疫应答的变化。方法建立VVC大鼠模型,将40只雌性SD大鼠随机分为正常组、模型对照组、制霉菌素组、空白凝胶组及中药组,每组8只。VVC建模成功后,根据分组连续阴道灌注给药14天,停药后计算病原体清除率,阴道组织行HE染色、免疫组化及透射电镜检测阴道组织变化。结果与模型组和空白凝胶组比较,制霉菌素和中药组的病原体转阴率显著升高(P<0.05)。制霉菌素及中药苦参凝胶治疗后,阴道上皮微绒毛及糖萼恢复正常形态,线粒体肿胀程度降低。真菌感染后IL-17表达显著上调(P=0.017),制霉菌素及中药苦参凝胶治疗后IL-17蛋白表达水平较模型组无明显变化(P=0.620,P=0.324)。而各组间IFN-γ、IL-4、IL-21无显著改变(P>0.05)。结论真菌感染后大鼠阴道上皮组织显著破坏,而制霉菌素及中药苦参凝胶能在体内发挥抗白假丝酵母菌活性,促进受损阴道上皮超微结构尤其是糖萼的修复。     

478例复发性外阴阴道假丝酵母菌病的病原菌分布及耐药情况分析

Objective?To investigate the pathogen flora and drug resistance of recurrent vulvovaginal candidiasis (RVVC). Methods?Fungal culture and drug sensitivity tests of vaginal secretion for 478 RVVC patients were performed in Beijing Tsinghua Changgung Hospital from April 2015 to March 2020. Results?According to the proportion of 5 fungal strains in the total number of isolates, candida albicans, Candida glabricis, Candida croce, Candida tropicalis and other candida accounting for 74.48%, 14.64%, 2.30%, 1.46% and 7.11% respectively, the difference was statistically significant (P<0.001). Through drug sensitivity test, it was found that the resistance rate of these five Candida species to to clotrimazole, flucanazole, miconazole, itraconazole and nystatin were 14.85%, 35.56%, 40.59%, 53.14% and 0.42% respectively (P<0.0001). Drug resistance rates of Candida albicans to to 5 kinds of drugswere 9.27%, 21.07%, 45.51%, 45.51% and 0.28% respectively. Drug resistance rates of Candida glabrata to these drugs were 40.00%, 91.43%, 25.71%, 85.71% and 1.43% respectively. Conclusion?The main pathogen of RVVC is Candida albicans. Among which, Candida glabrata accounted for the highest proportion. The drug resistance rates of different RVVC species to clotrimazole, flucanazole, miconazole, itraconazole and nystatin varies significantly. In the treatment of RVVC cases, the rational choice of antifungal agents according to the drug resistance situation can help improving the clinical efficacy.     

外阴阴道念珠菌病的临床特征和硝酸咪康唑治疗的效果观察

目的探讨外阴阴道念珠菌病（VVC）的临床特征及应用不同剂量的硝酸咪康唑治疗VVC不同时间后的效果。方法根据Sobel分类,将300例VVC患者,随机分为3组,即硝酸咪康唑400mg／d、治疗3d（3日组）,硝酸咪康唑400mg／d、治疗6d（6日组）,硝酸咪康唑200mg／d、治疗7d（7日组）,于治疗后第14、35天进行疗效评价。结果300例患者中,单纯型VVC 168例（56．0％）,复杂型VVC 132例（44．0％）。由白念珠菌所致的复杂型VVC患者严重临床症状和体征的发生率,较由非白念珠菌所致的复杂型VVC患者高,两者比较,差异统计学意义（P〈0．01）。VVC致病菌为白念珠菌者271例（90．3％,271／300）,非白念珠菌者29例（9．7％,29／300）。300例VVC患者中,完成全部治疗和随诊者275例,其中治愈234例,治愈率为85．1％（234／275）。治疗后第14天,3日组、6日组和7日组单纯型VVC的治愈率分别为96．0％、93．5％和98．0％,复杂型VVC的治愈率分别为86．7％、92．5％和86．4％;3组单纯型VVC的治愈率比较,及3组复杂型VVC的治愈率比较,差异均无统计学意义（P〉0．05）。治疗后第35天,3日组、6日组和7日组单纯型VVC的治愈率分别为93．8％、95．3％和89．8％,复杂型VVC的治愈率分别为89．7％、97．3％和86．8％;3组单纯型VVC的治愈率比较,及3组复杂型VVC的治愈率比较,差异均无统计学意义（P〉0．05）。275例中治疗失败4l例,失败率为14．9％（41／275）。结论单纯型VVC及复杂型VVC的临床特征、致病菌种类均不同;对复杂型VVC,采用硝酸咪康唑400mg/d、治疗6d的效果最好。     

时间、二相性、pH环境对白色假丝酵母菌药物敏感性的影响

目的:研究孵育时间、二相性、pH环境对白色假丝酵母菌药物敏感性的影响。方法:参照美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)推荐的M27-A方案的微量液基稀释法,测量5种常用抗真菌药物抗102株白色假丝酵母菌24h、48h的最低抑菌浓度(MIC)及在pH7.0和pH4.0环境下特比奈芬抗60株白色假丝酵母菌孢子相和菌丝相的MIC值。结果:(1)pH7.0环境下的孢子相液基中,咪康唑、伊曲康唑、克霉唑、氟康唑和制霉菌素24h与48h的MIC值基本符合率为91.2%～100%;(2)5种抗真菌药的药敏符合率均达80%以上。伊曲康唑24h与48h的药敏符合率稍低,为81.4%,其他4种药物药敏符合率为96.1%～100%;(3)pH7.0环境下,特比奈芬抗白色假丝酵母菌孢子相和菌丝相的MIC值差异无统计学意义(P=0.792),pH4.0环境下,孢子相液基的MIC值比菌丝相高,差异有统计学意义(P<0.001);(4)无论孢子相还是菌丝相液基,特比奈芬在pH4.0环境下的MIC值高于pH7.0环境,差异有统计学意义(P<0.001)。结论:孵育时间、二相性、pH环境对白色假丝酵母菌药物敏感性有影响。     

Clinical characteristics of vulvovaginal candidiasis and antifungal susceptibilities of Candida species isolates among patients in southern China from 2003 to 2006

Aim:  To determine the clinical characteristics of vulvovaginal candidiasis (VVC), the Candida species involved and the antifungal susceptibility of Candida species isolated from patients with VVC.
Methods:  Candida organisms were cultured from samples obtained from patients who presented with VVC to the Gynecology Department, Peking University Shenzhen Hospital. Antifungal susceptibility testing was performed using a commercial agar diffusion test.
Results:  Of the 1070 cases of VVC reported in this study, 36.5% were uncomplicated VVC, and 63.5% were complicated VVC. Twenty-four patients were identified as having two species of Candida . Candid albicans alone was isolated from 89.5% of cases ( n  = 958). Candida glabrata was isolated from 85 cases (7.9%), Candida tropicalis from 10 (0.9%), Saccharomyces cerevisiae from eight (0.7%), Candida parapsilosis from six (0.6%), Candida famata from two (0.2%), and Candida krusei from one case (0.1%). All isolates of Candida albicans were susceptible to nystatin. The resistant rate of Candida albicans to azole agents was 0–4.9%.
Conclusion:  Candida albicans was the predominant Candida species isolated from this series of patients with VVC. Resistance of vaginal Candida albicans isolates to antifungal agents was infrequent.