二氢青蒿素体外抑制胃癌细胞的黏附、迁移和侵袭

目的 探讨二氢青蒿素(DHA)对人胃癌SGC7901细胞体外黏附、迁移和侵袭的影响及其可能机制.方法 1.25、2.5、5、10、20 μmoL/LDHA作用体外培养的人胃癌SGC7901细胞24 h后,MTT法检测细胞活力;1.25、2.5、5 μmol/L DHA作用人胃癌SGC7901细胞24 h后,细胞黏附分析检测细胞黏附率;细胞划痕实验观察其对细胞迁移能力的影响;Transwell小室侵袭实验观察其对细胞侵袭能力的影响;RT-PCR和Western印迹分别检测ICAM-1、MMP-2、MMP-9、TIMP-2 mRNA和蛋白的表达水平.结果 与对照组相比,1.25、2.5、5μmoL/L DHA对SGC7901细胞增殖没有影响,但显著抑制SGC7901细胞黏附、迁移和侵袭能力,且抑制作用具有剂量依赖性.RT-PCR和Western印迹结果显示,与对照组相比,5 μmol/L DHA作用人胃癌SGC7901细胞24 h,细胞内ICAM-1、MMP-2、MMP-9 mRNA和蛋白表达显著降低(P＜0.05),TIMP-2 mRNA和蛋白表达显著增加(P＜0.05).结论 DHA可体外抑制胃癌SGC7901细胞的黏附、迁移和侵袭能力,其机制可能与上调TIMP-2的表达,下调ICAM-1、MMP-2、MMP-9的表达有关.     

COX-2抑制剂对胃癌细胞生长及其15-PGDH表达的影响

背景:15-羟基前列腺素脱氢酶(15-PGDH)是前列腺素生物降解的关键酶,环氧合酶-2(COX-2)是前列腺素合成的重要限速酶,目前两者间的关系尚不明确。目的:观察非选择性和选择性COX-2抑制剂对胃癌细胞生长、凋亡以及15-PGDH、COX-2表达的影响,探讨胃癌中15-PGDH与COX-2的关系。方法:以不同浓度吲哚美辛和塞来昔布干预人胃癌细胞株SGC-7901,MTF法检测细胞生长抑制情况,RT-PCR检测凋亡相关基因survivin、bax、bcl-xL表达,RT-PCR和蛋白质印迹法检测15-PGDH、COX-2表达。结果:吲哚美辛和塞来昔布均能抑制SGC-7901细胞生长,抑制作用呈时间/浓度依赖性。药物干预后,SGC-7901细胞的15-PGDH mRNA和蛋白表达显著升高,COX-2 mRNA和蛋白表达显著降低;同时抗凋亡基因survivin、bcl-xL mRNA表达降低,促凋亡基因bax mRNA表达升高。结论:非选择性和选择性COX-2抑制剂均可诱导胃癌细胞15-PGDH表达,抑制COX-2表达,提示胃癌中15-PGDH低表达与COX-2过表达相关。COX-2抑制剂可能通过促进15-PGDH表达、下调抗凋亡基因表达、上调促凋亡基因表达而抑制胃癌细胞生长。     

塞来昔布对胃癌细胞株LRP表达的影响

目的探讨塞来昔布对胃癌细胞株LRP表达的影响。方法采用MTT法检测塞来昔布不同剂量对胃腺癌细胞株SGC-7901生长的影响,在此基础上采用免疫组化及ELISA方法检测塞来昔布在一定剂量范围内某一时间点对SGC-7901细胞COX-2、LRP表达的影响。结果不同浓度的塞来昔布均对胃腺癌细胞株SGC-7901有抑制作用,并且这种影响呈时间和剂量依赖性;胃癌细胞株LRP的表达也随着塞来昔布浓度的增加而减少。结论选择性COX-2抑制剂塞来昔布可以下调胃癌细胞株中耐药基因LRP的表达,逆转多药耐药作用。     

塞来昔布对胰腺癌的放疗增敏作用及其机制研究

目的研究环氧合酶-2选择性抑制剂塞来昔布联合放射治疗对胰腺癌的作用，并探讨其作用机制。方法克隆形成实验和裸鼠移植瘤模型观察塞来昔布、放疗和两者联合对胰腺癌细胞SW1990体内外增殖的影响。Western印迹法检测细胞增殖相关蛋白表达。原位缺口末端标记法（TUNEL）研究胰腺癌细胞凋亡。RT-PCR检测凋亡相关基因表达的变化。体外血管生成和体外侵袭力测定方法检测塞来昔布、放疗及两者联合对胰腺癌细胞新生血管生成和细胞侵袭力的影响，RT-PCR、明胶酶谱和反式酶谱方法检测基质金属蛋白酶（MMP）-2、MMP-9及其组织抑制剂（TIMP）-1、TIMP-2的表达。结果塞来昔布在体内外均有放射增敏作用。胰腺癌细胞增殖细胞核抗原（PCNA）蛋白表达水平在塞来昔布组和联合放疗组均降低，联合组较塞来昔布组有进一步降低。塞来昔布诱导胰腺癌细胞凋亡，单独放疗并不能诱导SW1990细胞发生凋亡，两者联合凋亡细胞数明显增加。塞来昔布下调bel-2 mRNA表达，而放疗诱导bel-2 mRNA表达上调，联合组bel-2的表达最低。单剂量放疗时，裸鼠胰腺癌移植瘤的生长延迟时间为22d，联合塞来昔布为38d。单独放疗并不能抑制体外胰腺癌细胞的新生血管生成和侵袭，塞来昔布在体外抑制胰腺癌新生血管形成和侵袭，塞来昔布与放疗联合其抑制作用较单用塞来昔布无明显增强。塞来昔布抑制胰腺癌细胞合成、分泌和激活MMP-2、MMP-9，但对TIMP-1、TIMP-2的合成、分泌和激活无明显影响。结论COX-2选择性抑制剂塞来昔布对胰腺癌放疗有增敏作用，其机制涉及诱导细胞凋亡，并通过抑制胰腺癌细胞新生血管生成和细胞侵袭，间接对胰腺癌的放疗起增敏作用。     

塞来昔布对胃癌MGC-803细胞RECK、MMP-2、MMP-9基因表达的影响

目的:研究非甾体类抗炎药(NSAID)塞来昔布对胃癌细胞MGC-803的抑制作用和对RECK、MMP-2、MMP-9基因表达的影响,以探讨塞来昔布的抗肿瘤机制.方法:培养胃癌MGC-803细胞,实验用不同浓度的塞来昔布(25、50、100μg/L)分别处理MGC-803细胞不同时间(12、24 h、48 h),无血清培养基饥饿24 h达同步化后,MTT(噻唑蓝比色法)观察MGC-803细胞增殖;RT-PCR法检测细胞周期调控因子MMP-9、MMP-2、RECK mRNA的表达;Western blot法检测MMP-9、MMP-2、RECK mRNA蛋白的表达.结果:M T T法显示塞来昔布能抑制胃癌MGC-803细胞增殖,作用12 h时,随着塞来昔布处理浓度的增高,其抑制作用不明显,组间比较差异不显著(P>0.05),在作用24、48 h时呈浓度依赖性(25-100μg/L),在25、50、100μg/L作用浓度呈时间依赖性(24-48 h).塞来昔布在100μg/L浓度作用细胞48 h时抑制.RT-PCR法检测结果显示,在12 h的作用时间点,随着塞来昔布处理浓度的增高,RECK基因及MMP-2、MMP-9 mRNA变化不是很明显,组间比较无显著差异(P>0.05),在12 h后,塞来昔布能增加胃癌细胞RECK mRNA和蛋白表达,作用呈浓度(25-100μg/L)和时间依赖性(24-48h),MMP-2、MMP-9表达则下降.Western blot法检测结果显示,作用12 h时,随着塞来昔布处理浓度的增高,其RECK蛋白及MMP-2,MMP-9蛋白改变不明显,组间比较差异不显著(P>0.05),在12 h以后,塞来昔布能增加RECKmRNA和蛋白表达并减少MMP-2、MMP-9表达,且作用呈浓度依赖性和时间依赖.结论:塞来昔布可抑制人胃癌MGC-803细胞增殖与转移;其可能是通过上调RECK基因,进而下调MMP-2、MMP-9来抑制胃癌细胞MGC-803的增殖与转移.     

胃泌素受体拮抗剂丙谷胺和选择性COX2抑制剂塞来昔布对人胃癌细胞株BGC-823增殖和PGE2分泌的影响

目的:探讨胃泌素受体拮抗剂丙谷胺和选择性环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)抑制剂塞来昔布对人胃癌细胞株BGC-823增殖的抑制作用及其对COX-2、15-羟基前列腺素脱氢酶(15-hydroxyprostaglandin dehydrogenase,15-PGDH)和前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2)的影响.方法:采用M T T法分别检测丙谷胺和塞来昔布单独及联合应用对人胃癌细胞株BGC-823增殖的影响;RT-PCR法检测COX-2和15-PGDH m RNA的表达;Western blot检测COX-2和15-PGDH蛋白质的表达;ELISA检测细胞培养液中PGE2含量变化.结果:丙谷胺和塞来昔布呈剂量和时间依赖性地抑制胃癌BGC-823细胞的增殖.采用低于细胞增殖半数抑制浓度(the half maximal inhibitory concentration,IC50)的丙谷胺(6mmol/L)和塞来昔布(50μm o l/L)联合应用,48 h时对胃癌细胞B G C-823的增殖抑制率为65.1%±7.7%,显著高于单独应用丙谷胺(6 mmol/L,38.1%±7.1%)和塞来昔布(50μmol/L,32.6%±3.3%)时的抑制率(P值均0.05).丙谷胺和塞来昔布两药均能下调胃癌BGC-823细胞中COX-2及上调15-PGDH m RNA和蛋白的表达,联合应用比单独用药更为显著(P值分别0.05,0.01).同时,两药也能降低BGC-823细胞分泌PGE2,联合用药作用更加明显(P值分别0.05,0.01).结论:丙谷胺、塞来昔布均呈时间和剂量依赖性抑制胃癌细胞株BGC-823的增殖,其可能机制之一为通过下调COX-2 m RNA和蛋白的表达,同时上调15-PGDH mRNA和蛋白的表达,进而减少PGE2合成与分泌而实现.两药联合应用可能具有协同抗癌作用.     

乳香通过PTEN/Akt/COX-2通路诱导胃癌细胞SGC7901凋亡

目的研究乳香对人胃癌细胞SGC7901增殖、凋亡和迁移的影响及其可能的作用机制。方法不同浓度乳香处理SGC7901细胞不同时间,噻唑兰比色法检测乳香对SGC7901细胞增殖的影响,流式细胞术分析乳香对SGC7901细胞凋亡的影响,蛋白质印迹法(Western blotting)分析乳香对SGC7901细胞中同源性磷酸张力蛋白(PTEN)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、蛋白激酶B(PKB,亦称Akt)和环氧化酶2(COX-2)蛋白表达影响,划痕实验检测细胞迁移能力,裸鼠移植瘤实验验证乳香在裸鼠体内抑制肿瘤的效果。采用Graphpad Prism 6.0统计软件对数据进行分析。结果乳香能够抑制SGC7901细胞的增殖和迁移能力,呈现剂量依赖和时间依赖性。乳香诱导SGC7901细胞的凋亡,呈现剂量依赖性。乳香能够诱导SGC7901细胞中PTEN的表达,抑制p-Akt和COX-2的蛋白表达。此外,乳香能够抑制裸鼠体内胃癌移植瘤的生长。结论乳香可以抑制胃癌细胞SGC7901的增殖和迁移,诱导细胞凋亡,这可能与PTEN/Akt/COX-2信号通路相关。     

胃癌成纤维细胞中HAS2对胃癌细胞转移的影响

目的探讨胃癌成纤维细胞中透明质酸合成酶(HAS2)对胃癌细胞转移的影响。方法从手术切除的胃癌组织及癌旁正常组织中分别分离及培养胃成纤维细胞(CAFs)及正常成纤维细胞(NFs)。蛋白质免疫印迹(Western blot)及免疫荧光染色检测CAFs与NFs中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、波形蛋白(vimentin)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)及HAS2的表达。利用siRNA下调CAFs中HAS2的表达,Western blot及免疫荧光染色检测CAFs中HAS2的表达,细胞迁移(Transwell)及划痕闭合实验检测胃癌细胞SGC7901的侵袭及迁移能力,Western blot检测SGC7901细胞上皮-间质转化相关蛋白E-cadherin、vimentin及N-钙黏蛋白(N-cadherin)的表达。结果α-SMA与HAS2在CAFs中高表达,vimentin在CAFs与NFs中均表达,而E-cadherin在CAFs与NFs中不表达。与si-NC组相比,si-HAS2组CAFs中HAS2表达降低,SGC7901细胞的侵袭及迁移能力降低,SGC7901细胞中上皮-间质转化相关蛋白E-cadherin表达升高,而Vimentin及N-cadherin表达降低。结论下调胃癌CAFs中HAS2的表达,可抑制胃癌细胞的侵袭、迁移及上皮-间质转化。     

氯化两面针碱对人胃癌细胞增殖、迁移的抑制作用

目的探讨氯化两面针碱(NC)对人胃癌SGC-7901细胞增殖、迁移的作用及其机制。方法 MTT实验检测NC对SGC-7901细胞的增殖作用;Transwell小室实验检测NC对SGC-7901细胞迁移和侵袭的影响;Western印迹检测NC对人胃癌SGC-7901细胞中Bax,Bcl-2,PCNA,MMP2,MMP1和GAPDH表达的影响。结果 MTT实验表明NC抑制人胃癌SGC-7901细胞增殖,并且呈时间、剂量依赖性(P<0.05);此外,NC显著抑制SGC-7901细胞中PCNA表达,呈剂量依赖性(P<0.05);Transwell小室实验表明NC显著抑制SGC7901细胞迁移和侵袭,呈剂量、时间依赖性(P<0.05);Western印迹表明NC上调凋亡蛋白Bax的表达,下调抗凋亡蛋白Bcl-2表达,抑制MMP1以及MMP2的表达(均P<0.05)。结论 NC通过诱导细胞凋亡抑制SGC-7901细胞增殖,通过降解MMP1和MMP2从而抑制SGC-7901细胞侵袭和迁移。     

长链非编码RNA核仁小分子RNA宿主基因1对胃癌细胞增殖和侵袭的影响

目的探讨长链非编码(lnc)RNA核仁小分子RNA宿主基因(SNHG)1在胃癌中的表达水平及其对胃癌细胞增殖和侵袭过程的影响。方法实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)检测SNHG1在胃癌细胞SGC7901、BGC823和正常胃上皮细胞NGEC中的表达水平及采用SUHG1的小干扰RNA(si-SNHG1)干扰后SNHG1的表达水平;噻唑蓝(MTT)法检测沉默SNHG1对SGC7901、BGC823细胞增殖的影响,Transwell小室检测沉默SNHG1对SGC7901、BGC823细胞侵袭能力的影响。Western印迹法检测沉默SNHG1前后增殖标志物Ki67和侵袭相关蛋白基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9在SGC7901、BGC823中的表达变化。结果 SNHG1在胃癌细胞株中的表达显著高于正常胃上皮细胞株(P0.05);沉默SNHG1能显著抑制Ki67、MMP-2、MMP-9的表达。结论 lncRNA SNHG1在胃癌细胞中高表达,沉默SNHG1对胃癌细胞的增殖、侵袭起抑制作用,SNHG1可能成为治疗胃癌的一个有效靶点。     

Interaction between cyclooxygenase-2,Snail,and E-cadherin in gastric cancer cells

AIM:To investigate the mechanisms of how cyclooxygenase-2(COX-2)regulates E-cadherin in gastric cancer cells.METHODS:COX-2 expression in human gastric cancer cell lines SGC-7901,BGC-823,MGC-803 and AGS were measured at the mRNA and protein level.COX-2 rich cell line SGC-7901 was chosen for subsequent experiments.siRNA mediated gene knockdown was used to investigate the impact of COX-2 on nuclear factor-κB (NF-κB),Snail,and E-cadherin in gastric cancer cells.Gene expression was determined by Western blot and real-time polymerase chain reaction.To analyze whether NF-κB inhibition could interrupt the modulatory effect of COX-2 or prostaglandin E2(PGE2)on E-cadherin,gastric cancer cells were treated with celecoxib or PGE2,in the presence of NF-κB specific siRNA.RESULTS:Highest expression level of COX-2 was found in SGC-7901 cells,both at mRNA and protein levels.siRNA mediated down-regulation of COX-2 led to a reduced expression of NF-κB and Snail,but an increased expression of E-cadherin in SGC-7901 cells.siRNA mediated down-regulation of NF-κB also led to a reduced expression of E-cadherin and Snail in SGC-7901 cells.However,COX-2 expression did not alter after cells were treated with NF-κB specific siRNA in SGC-7901 cells.Treatment of SGC-7901 cells with celecoxib led to a reduced expression of Snail but an increased expression of E-cadherin.In contrast,treatment of SGC-7901 cells with PGE2 led to an increased Snail and a decreased E-cadherin.However,siRNAmediated knockdown of NF-κB partially abolished the effect of celecoxib and PGE2 on the regulation of E-cadherin and Snail in SGC-7901 cells.CONCLUSION:COX-2 likely functions upstream of NF-κB and regulates the expression of E-cadherin via NF-κB/Snail signaling pathway in gastric cancer cells.     

Anticancer Effect of Celecoxib via COX-2 Dependent and Independent Mechanisms in Human Gastric Cancers Cells

Cyclooxygenase-2 (COX-2) inhibitors cause growth inhibition of human gastric carcinoma cells, but it remains unclear whether this is both COX-2 dependent and independent. The related mechanisms remain to be determined. Both low COX-2 expressing gastric carcinoma and high COX-2 expressing gastric carcinoma cells were used to study the effect and mechanisms of celecoxib on gastric carcinoma cell growth. Celecoxib resulted in comparable growth inhibition in AGS cells with stable transfections of small interfering RNA (siRNA) against COX-2 (SAC) and negative control vector (NC) cells. Simultaneously, celecoxib resulted in significant reduction of Bcl-2 and significant increase of p21^WAF1 and p27^KIP1 in SAC and NC cells. The present study shows that celecoxib causes growth inhibition of gastric carcinoma cells by decreasing Bcl-2 of cyclooxygenase-2-dependent pathway, and by increasing p21^WAF1 and p27^KIP1 of cyclooxygenase-2-independent pathway. These data extend our knowledge on the effect and mechanisms of celecoxib-induced inhibition of gastric carcinoma cell growth.     

选择性环氧合酶-2抑制剂塞来昔布对胃癌治疗作用的体内实验研究

目的探讨选择性环氧合酶-2(COX-2)抑制剂塞来昔布对体内胃癌生长的影响及作用机制。方法建立裸鼠胃癌模型,20只裸小鼠随机分为2组,对照组隔日腹腔注射生理盐水,塞来昔布组隔日腹腔注射塞来昔布30mg/kg,采用免疫组化法检测微血管密度(MVD),采用半定量-TRAP银染法检测端粒酶活性,流式细胞仪检测细胞周期、细胞凋亡率。结果塞来昔布组肿瘤生长明显受抑制,抑瘤率为61.3%,与对照组相比,差异有显著性(P<0.05);流式细胞仪检测到凋亡峰,细胞阻滞于G0/G1期。同时它也显著抑制胃癌细胞的端粒酶活性,肿瘤组织中的MVD较对照组显著降低。结论塞来昔布通过诱导细胞凋亡,降低端粒酶活性,减少血管生成,从而抑制胃癌生长。这可能是COX-2抑制剂塞来昔布体内抗胃癌的机制。     

COX-2与MMP-2蛋白在胃癌组织中的表达及意义

目的　探讨COX 2和MMP 2蛋白在胃癌组织中的表达、相互关系及意义。方法　应用免疫组化S P法检测 45例胃癌及 2 0例正常胃组织MMP 2、COX 2蛋白的表达情况。结果　 45例胃癌组织COX 2的表达阳性率为 60 % ( 2 7/ 45 ) ,2 0例正常胃组织COX 2的表达阳性率为 15 %O( 3 / 2 0 ) ,COX 2在胃癌组织中的表达阳性率显著高于正常胃组织中的表达阳性率 (P <0 0 1) ;45例胃癌组织中MMP 2的表达阳性率为 64 4% ( 2 9/ 45 ) ,2 0例正常胃组织MMP 2表达阳性率为 2 5 % ( 5 / 2 0 ) ,MMP 2在胃癌组织中的表达阳性率显著高于在正常胃组织中的表达阳性率 (P <0 0 1) ;在胃癌组织中MMP 2、COX 2蛋白的表达之间存在显著正相关 (rs=0 5 69,P <0 0 1)。结论　胃癌组织中存在COX 2、MMP 2的高表达 ,且两者之间的表达强度具有等级相关性。COX 2蛋白可通过诱导MMP 2蛋白的表达上调 ,增加胃癌细胞的侵袭力 ,从而成为其促进胃癌浸润、转移的途径之一     

Nicotine enhances migration and invasion of human esophageal squamous carcinoma cells which is inhibited by nimesulide

AIM： To study the effect of nicotine on the migration and invasion of human esophageal squamous carcinoma cells and to investigate whether nimesulide can inhibit the effect of nicotine.METHODS： The esophageal squamous carcinoma cell line （TE-13） was treated with different concentrations of nicotine （100 μg/mL and 200 μg/mL） or 200 μg/mL nicotine plus 100 μmol/L nimesulide. Cell migration and invasion were measured using migration and invasion chamber systems. COX-2 expression was determined by Western blotting. Matrix metalloproteinase-2 （MMP-2） was analyzed by zymography and ELISA.RESULTS： Nicotine （100 μg/mL, 200 μg/mL） enhanced TE-13 cells migration and invasion, and increased the protein expression of COX-2 and the activity of MMP-2. Nicotine （200 μ/mL） stimulated TE-13 cells migration and invasion which were partly blocked by nimesulide. This was associated with decreased protein expression of COX-2 and decreased activity and protein expression of MMP-2. CONCLUSION： Nicotine enhances the migration and invasion of the esophageal squamous carcinoma cell line, and nimesulide partly blocks the effect ofnicotine-enhanced esophageal squamous carcinoma cell migration and invasion.     

槲皮素对人胃癌细胞侵袭和MMP-2表达的影响

目的:观察槲皮素(Quercetin,Que)对人胃癌细胞侵袭的影响,并探讨其可能机制.方法:采用不同浓度的槲皮素处理胃癌BGC-823细胞后,以软琼脂集落培养试验检测癌细胞锚着不依赖性增殖,以Boyden小室模型方法检测癌细胞侵袭能力,采用荧光实时定量PCR检测癌细胞基质金属蛋白酶-2(matrix metallopeptidase-2,MMP-2)基因mRNA水平,以Western blot方法检测癌细胞MMP-2基因蛋白水平变化.结果:不同浓度的胃癌BGC-823细胞经槲皮素处理后,恶性增殖和侵袭能力均明显下降,且呈剂量依赖性(P<0.005,P<0.005).槲皮素处理组MMP-2基因mRNA和蛋白水平均明显下调,且呈时间和浓度依赖性,即随着作用时间的延长和槲皮素作用浓度的增加,MMP-2的mRNA和蛋白水平逐渐下降,差异均有统计学意义(P<0.001,P<0.001).结论:槲皮素可明显抑制胃癌BGC-823细胞侵袭能力,其机制可能与下调MMP-2基因表达有关.     

miR-302a靶向E2F1抑制胃癌BGC-823细胞EMT并降低细胞侵袭和迁移能力的实验研究

目的探讨miR-302a对胃癌BGC-823细胞上皮间质转化(EMT)、侵袭和迁移能力的影响和机制。方法在胃癌BGC-823细胞中转染miR-302a mimics,CCK-8测定细胞增殖变化,Transwell小室测定迁移和侵袭,Western blotting检测E-cadherin、Vimentin、N-cadherin蛋白表达。靶基因预测软件预测E2F1可能为miR-302a的靶基因,荧光素酶报告系统鉴定靶向关系。在胃癌BGC-823细胞中共转染pcDNA 3.1-E2F1和miR-302a mimics,按照上述方法测定细胞增殖、侵袭、迁移和E-cadherin、Vimentin、N-cadherin、E2F1蛋白表达水平。结果miR-302a mimics降低胃癌BGC-823细胞增殖、侵袭和迁移能力,下调细胞中Vimentin、N-cadherin蛋白表达水平,促进细胞中E-cadherin蛋白表达。miR-302a靶向负调控E2F1表达。pcDNA 3.1-E2F1能够提高miR-302a mimics条件下胃癌BGC-823细胞中E2F1蛋白表达水平,促进细胞增殖、侵袭和迁移,促进细胞中Vimentin、N-cadherin蛋白表达,减少细胞中E-cadherin蛋白表达。结论miR-302a靶向E2F1抑制胃癌BGC-823细胞EMT并降低细胞侵袭和迁移能力。     

胃癌患者术后血清中TGFBI与复发转移的关系及其机制

目的探讨术后血清细胞外基质蛋白转化生长因子β诱导(TGFBI)对胃癌复发转移的影响及其作用机制。方法利用shRNA结合慢病毒技术稳定敲低胃癌细胞SGC-7901中TGFBI的表达,并通过Western blot对其在细胞内及培养上清中的表达进行验证;MTT法检测TGFBI下调对胃癌细胞SGC-7901增殖的影响,Transwell法检测其对细胞侵袭与迁移的影响;通过检测E-cadherin、Snail和ZEB1等转录因子的表达,探究TGFBI是否通过上皮间质转化促进胃癌的转移复发。结果胃癌患者血清样本中TGFBI表达水平显著高于正常样本,RNA干扰后TGFBI在胃癌细胞SGC-7901内及其培养上清中的表达水平均发生显著下降;TGFBI下调后胃癌细胞SGC-7901的增殖、侵袭与迁移能力均受到显著抑制,同时上皮间质转化标志物E-cadherin的表达发生上调,而Snail和ZEB1的表达发生下调。结论胃癌细胞SGC-7901中TGFBI表达下调时可能通过抑制上皮间质转化,抑制胃癌细胞增殖、侵袭与迁移,最终抑制胃癌的转移复发。     

环氧合酶-2反义核酸抑制胃癌细胞的恶性表型

目的　通过环氧合酶 2 (COX 2 )反义核酸基因转染 ,逆转COX 2高表达的人胃癌细胞系中其表达水平 ,观察细胞生物学行为的变化情况 ,以初步探讨COX 2表达在胃癌发生中的某些具体机制。方法　使用脂质体介导的方法 ,用反义重组质粒及空载体分别转染COX 2异常高表达的人胃癌细胞系SGC 790 1(转染细胞分别命名为 790 1 AS及 790 1 P细胞 )。通过免疫细胞化学及RNA斑点杂交试验检测反义核酸转染的细胞中COX 2的蛋白及mRNA表达水平。四唑盐 (MTT)比色试验检测转染细胞的体外增殖速度。应用裸鼠成瘤试验比较转染前后细胞体内成瘤能力的差别。结果　免疫细胞化学及RNA斑点杂交试验证实 :在反义核酸转染的 790 1 AS细胞中COX 2的蛋白及mRNA水平均显著下调。MTT比色试验显示 790 1 AS细胞的增殖速度低于亲本SGC 790 1细胞。裸鼠成瘤试验表明 ,反义核酸转染细胞成瘤潜伏期延长 ,成瘤体积减小。 3组细胞接种裸鼠 30d后 ,瘤体的平均重量( x±s)分别为 (82 6 6 7± 77 6 7)mg(SGC 790 1细胞 ) ,(776 6 7± 30 0 0 6 )mg(790 1 P细胞 )和 (486 6 7±15 2 8)mg (790 1 AS细胞 )。转染反义核酸的细胞成瘤性显著低于未转染细胞及转染载体对照细胞(P <0 0 1)。结论　胃癌细胞中过表达的COX 2与细胞的恶性表型相关。用