丹参及其易伪品中次生代谢物(活性成分)的指纹图谱的研究

目的:以超高效液相色谱-电喷雾-质谱联用(UPLC-ESI-MS)进行指纹图谱和代谢物指纹图谱的研究,探讨和研究鼠尾草属植物丹参、白花丹参、鼠尾草和药用鼠尾草等4种药用植物中水溶性、脂溶性等次生代谢物的确切分布部位以及分布、积累规律,直观、科学的评价丹参药材的产品质量.方法:以乙腈-甲酸-水为流动相,采用梯度洗提方式洗脱:流速0.4mL/min;柱温20℃~40℃;检测波长286nm;质谱检测采用负离子模式:电压2.5kV;柱后分流,分流比为1:50,柱温30℃,离子源温度100℃,雾化温度300℃,雾化气600L/h;电喷雾离子源(ESI),帘气(CUR):16Psi,去簇电势(DP):-20V,聚焦电势(FP):-80V,去簇电势2(DP2):-20V.质荷比(m/z)100~800.结果:在该指纹图谱中,27个色谱峰被选为特征峰.通过比较对照品相对保留时间(TR),紫外光谱(UV)和超高效液相色谱-电喷雾-质谱联用(UPLC-ESI-MS)数据,参考相关文献,确定了27个色谱峰的归属、样品真伪的鉴别方法、特征峰的相对保留时间比以及样品质量评价.结论:本方法在75min内完成丹参及其易伪品(白花丹参、鼠尾草和药用鼠尾草)次生代谢物的指纹图谱分析,各主要成分峰分离度良好,方法稳定性、重现性均小于2.0%.本UPLC-ESI-MS法对于鉴别易伪品及对正品丹参的质量评价简单、实用,可以作为丹参质量评价的重要方法使用.     

丹参饮片HPLC指纹图谱研究

目的：建立丹参饮片的高效液相色谱指纹图谱,研究不同产地丹参饮片的质量,建立评价丹参饮片质量优劣的指纹图谱分析方法。方法运用Waters 2695 DAD-HPLC高效液相色谱仪,采用Thermo C18（4．6 mm ×250 mm ,5μm）色谱柱,以乙腈-4 mL · L -1甲酸水进行梯度洗脱,流速为1．0 mL · min-1,检测波长为270 nm ,柱温30℃,通过聚类分析和相似度分析建立10批丹参饮片的指纹图谱。结果10批丹参饮片中获得19个色谱共有峰,不同来源丹参饮片指纹图谱相似度有一定差别。结论采用HPLC方法建立丹参饮片指纹图谱,方法稳定、可靠、简便,色谱图展现的各峰分离度较好,特征明显,可作为丹参饮片真伪鉴别的标准,为丹参饮片的质量评价提供参考依据。     

加味丹参饮高效液相色谱指纹图谱研究

目的建立加味丹参饮的HPLC指纹图谱。方法色谱柱:C18(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相:甲醇-甲酸-乙腈梯度洗脱,检测波长为270 nm,流速1 mL·min-1,柱温30℃。结果确定了14个共有峰,10批加味丹参饮指纹图谱的相似度均>0.9。结论该方法简单、准确、重复性好,可为加味丹参饮的质量评价提供依据。     

丹参胶囊水溶性成分的高效液相色谱指纹图谱分析

目的 建立丹参胶囊水溶性成分的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱.方法 利用HPLC法分析丹参胶囊的水溶性成分,色谱柱为Thermo Syncronis C18(250 mm×4.6 mm,5μm),甲醇-乙腈-磷酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,检测波长286 nm,柱温30℃;流速1 mL·min-1.结果 确定两个厂家丹参胶囊水溶性成分HPLC指纹图谱中的共有峰分别为9和22个,建立了两个厂家丹参胶囊水溶性成分的标准指纹图谱.结论 建立的丹参胶囊水溶性成分的HPLC指纹图谱重复性和稳定性良好,可适用于丹参胶囊水溶性成分的质量控制.     

丹参多酚酸HPLC指纹图谱研究

目的:建立丹参多酚酸原料的指纹图谱研究方法。方法:以丹酚酸B为参照物,采用高效液相色谱法,色谱柱为Luna C18(2)100A(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-0.026%磷酸水溶液(梯度洗脱),检测波长为286nm,柱温为30℃,流速为1mL.min-1。结果:从所建指纹图谱中确定了5个共有峰,建立了丹参多酚酸的共有模式;在10批丹参多酚酸中有6批样品的指纹图谱相似度在0.90以上。结论:本方法简便、准确、重现性好,可为评价丹参多酚酸原料药的质量提供依据。     

HPLC—UV／ESI—MS法分析丹参不同提取组分

目的对丹参4种不同组分进行HPLC-UV-MS分析，获得各组分的HPLC特征图谱并对各特征峰进行初步MS鉴定，同时定量测定指标成分丹参素、丹酚酸B、丹参酮ⅡA和隐丹参酮的含量，以便更深入的探讨其在抗动脉粥样硬化作用的物质基础及谱效关系。方法采用Hedera ODS-2色谱柱（4．6min×250mm，5μm），0．5％甲酸水溶液-乙腈（0min，80：20；50min，15：85）梯度洗脱，流速：1．0mL·min^-1，检测波长：280nm，建立以上各组分的HPCL指纹图谱，同时对各特征峰进行离子范围为150-750正负源ESI-MS总离子扫描，对相应特征峰的特征离子进行鉴定，用分子离子检测模式（SIR）分别对丹参素、丹酚酸B、丹参酮ⅡA和隐丹参酮进行定量测定。结果所得HPLC特征图的特征峰峰形尖锐、对称，均达到基线分离；14个特征峰经质谱鉴定，对照有关文献可初步确定其成分；丹参素、丹酚酸B、丹参酮ⅡA和隐丹参酮分别在0．05-10．0、0．05-20．0、0．05-20、0．05-20μg·mL^-1与峰面积呈良好的线性关系（r≥0．9998），平均加样回收率分别为98．1％、99．0％、98．9％、99．5％。结论所得4种组分的HPLC特征图谱适合下一步的译效学及相关药理活性成分筛选研究；定量测定方法准确可靠，适合丹参药材中上述成分的含量测定；所建立的HPLC特征图谱能为丹参药材指纹图谱的建立提供依据。     

调经益母片的高效液相色谱指纹图谱及成分定量研究

目的 研究调经益母片的高效液相色谱(HPLC)法指纹图谱,并测定丹参素、益母草碱、迷迭香酸与丹酚酸B的含量.方法 采用HPLC法,色谱条件:阿克苏诺贝尔Kromasil C18柱(250 mm× 4.6 mm,5.0μm);流动相为乙腈-5.0 g·L-1磷酸水溶液,梯度洗脱;流速为0.8mL·min-1;柱温为30℃;检测波长为270 nm.结果通过中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2004A),确定了调经益母片的HPLC指纹图谱共有模式,标定了43个共有峰,相似度为0.938 ～ 0.985;并测定了10批制剂中丹参素、益母草碱、迷迭香酸与丹酚酸B的平均含量分别为2.39、3.61、5.98、60.11 mg-g-1,RSD(％)分别为1.30、0.91、1.46、0.92％.结论 HPLC指纹图谱测定方法及其丹参素、益母草碱、迷迭香酸与丹酚酸B的定量方法简便易行、稳定可靠,可作为调经益母片制剂的质量控制方法.     

丹参药材中活性成分的测定及其聚类分析

目的 建立测定不同产地丹参药材中主要活性成分的方法,根据含量水平对丹参药材进行聚类分析.方法 采用HPLC指纹图谱法,分析柱为C18柱(150 mm×4.6 mm,10μm),用甲醇-1%四氢呋喃的1%甲酸水溶液进行梯度洗脱;测定波长286 nm,进行丹参活性成分的指纹图谱分析,以指纹图谱评价软件结合SPSS 13.0统计软件进行聚类分析.结果 定量分析了丹参药材的8个主要活性成分,所分析的丹参大致划分为两类.结论 所建方法分离度好、准确度高,适宜于丹参药材活性成分的测定;不同产地丹参药材之间活性成分的差异较大,其分布无明显的规律性;丹参药材在地理上的分布无明显的区域界限.     

HPLC测定冠心七味片中丹参素的含量

目的:建立HPLC测定冠心七味片中丹参素含量的方法。方法:采用Shim-pack CLC-ODS(4．6 mm×150 mm)色谱柱;流动相为甲醇-乙腈-磷酸三乙胺水溶液(5:2:93),检测波长为281 nm,流速为1．0 ml·min-1。结果:丹参素在0．08-0．73μg范围内呈良好的线性关系(r=0．999 7),平均回收率为97．22％,RSD为1．66％。结论:方法较简单、快速、分离度好,结果稳定,可作为本品的质量控制方法。     

丹参药材的综合质量评价研究

目的建立丹参药材HPLC方法同时用于指纹图谱和多指标测定。方法采用Diamonsil C18柱(250mm×4.6mm,5μm),在280nm波长下,以乙腈-0.05%磷酸水溶液梯度洗脱,测定了19批丹参药材的指纹图谱和丹参素、迷迭香酸、丹酚酸B及丹参酮ⅡA4个指标成分,对指纹图谱共有峰和相似度进行分析,并进行聚类分析和主成分分析。结果在选定的色谱条件下,得到19批丹参药材的指纹图谱,标定了12个共有峰,并建立了丹参药材的指纹图谱共有模式,相似度在0.808～0.997。聚类分析结果将19批丹参药材分为两大类,与主成分分析结果及药材测定结果相一致。结论不同产地丹参药材色谱峰的数目差别不大,但各指标成分量差别较大。该方法准确、可靠,为有效地评价丹参药材的综合质量提供了参考依据。     

丹参、红花药材与丹红注射液指纹图谱相关性研究

目的 探讨丹参、红花药材与丹红注射液指纹图谱的相关性.方法 采用反相高效液相色谱(RP-HPLC)法,以Kromasil C 18柱(4.6 mm×250 mm,5μm)为色谱柱,乙腈-0.1%甲酸为流动相梯度洗脱,柱温30℃,检测波长263 nm.结果 丹红注射液标示26个共有指纹峰,有11个指纹峰来自丹参,14个指纹峰来自红花,表明丹红注射液与丹参、红花药材有良好的相关性.结论 所建立的高效液相色谱指纹图谱方法重复性好,可作为丹红注射液工艺与质量的控制标准之一.     

HPLC法测定养精胶囊中淫羊藿苷的含量

目的:建立通脉灵片中丹参素的含量测定方法。方法:采用Kromasil~(TM) C_(18)柱(200 mm×4．6 mm,5μm ),流动相为甲醇-乙腈-0．045 mol/L磷酸溶液(10:4:86),检测波长281 nm。结果:丹参素的线性范围为0．194～2．129μg,r=0．999 8。平均加样回收率为99．56％,RSD为0．84％(n=5)。结论:该方法灵敏、简便、重现性好,可用于该制剂的质量控制。     

白花败酱HPLC指纹图谱研究

目的:建立白花败酱高效液相色谱(HPLC)指纹图谱,为白花败酱的品种鉴别和质量控制提供参考依据。方法:色谱柱为Kromasil-C18(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸(梯度洗脱),流速为0.8mL·min-1,柱温为25℃,检测波长为320nm。结果:确定由15个峰构成白花败酱的指纹特征,10批样品相似度较好。结论:本方法精密度、稳定性、重复性良好,可为白花败酱的鉴别和质量评价提供参考。     

丹参饮水提液絮凝纯化产物HPLC指纹图谱分析

目的建立丹参饮水提液絮凝纯化产物的HPLC指纹图谱。方法采用HPLC法,色谱柱为Inertsil ODS-SP Extend C18(250 mm×4.6 mm,5.0μm)。乙腈为流动相A,0.5%冰醋酸溶液为流动相B,进行梯度洗脱,0~20 min,5%~15%A;20~60 min,15%~45%A。检测波长为281 nm,流速1.0 m L/min,柱温25℃。结果丹参饮水提液絮凝纯化物HPLC指纹图谱标定了9个共有峰,指认8号峰为丹酚酸B,18批样品的相似度均>0.990。结论建立的丹参饮絮凝纯化物指纹图谱特征性及专属性强,可为其质量控制提供参考。     

丹参脂溶性成分指纹图谱标准的对照品对照法研究

目的:建立丹参脂溶性成分 HPLC 指纹图谱标准及指纹对照品,为丹参质量控制提供可靠方法。方法:以乙醚为溶剂提取丹参药材脂溶性特征成分,制备对照品溶液及供试品溶液。以甲醇-水为流动相梯度洗脱,在不同品牌的 ODS 柱上,考察色谱分离系统及适用性,制备指纹图谱标准,并计算供试品的相似度。结果:建立的各 HPLC 指纹图谱测定条件分离良好,以指纹对照品为参比,测得各产地道地丹参药材的相似度一致性良好。结论:利用中药特征指纹对照品,可使以指纹图谱标准法进行中药质量控制更为实用。     

高效液相色谱法测定通脉颗粒中丹参素的含量

目的:建立高效液相色谱法(HPLX法)测定通脉颗粒含量的方法。方法:色谱柱为Packed ODS-A C18柱(250mm×4．6mm),以甲醇-1％冰醋酸(12:88)为流动相,流速为1ml／min,检测波长为280mm。结果:丹参素进样量在0．72-2．88μg范围内与峰面积线性关系良好(r=0．9999),方法的平均回收率为99．42％,RSD为0．93％(n=6)。结论:高效液相色谱法简便,准确,重现性好,可作为通脉颗拉的含量测定方法。     

基于指纹图谱和成分定量的丹参化瘀颗粒质量评价研究

目的:建立丹参化瘀颗粒的HPLC指纹图谱及多成分定量分析方法,为其质量评价提供依据。方法:采用Agilent 5TC-C₁₈(2)色谱柱(250 mm×4.6 mm, 5.0μm),以0.05%磷酸水溶液(A)-乙腈(B)作为流动相进行梯度洗脱,体积流量1.0 mL·min^-1,柱温30℃,进样量20μL,检测波长403 nm、230 nm及302 nm,测定12批次丹参化瘀颗粒指纹图谱,标定共有峰并进行归属分析及相似度评价,对采用对照品比对确认的成分进行含量测定。结果:12批丹参化瘀颗粒指纹图谱标定共有峰29个,其中8个来源于丹参、1个来源于天麻、2个来源于当归川芎药对、1个来源于红花、1个来源于芍药。通过对照品比对确认其中7个成分,分别为天麻素、羟基红花黄色素A、芍药苷、阿魏酸、丹酚酸B、隐丹参酮、丹参酮ⅡA。各批样品相似度均在0.99以上。结论:所建立的方法灵敏度高,专属性强,HPLC指纹图谱结合多成分定量测定能全面反映丹参化瘀颗粒内在质量,可用于其质量控制。     

含量测定与特定（指纹）图谱分析相结合方法用于枳壳药材质量分析

目的:以枳壳为对象,研究准确反映药材内在整体质量的分析方法。方法:采用色谱分析法建立枳壳的化学特定(指纹)图谱,同时选择关键成分柚皮苷建立含量测定方法,从特定(指纹)图谱相似度与关键成分含量限度两方面同时入手,评价枳壳药材质量。色谱特定(指纹)图谱条件为:Agilent Hypersil ODS柱(4.0 mm×250 mm,5μm),0.5％醋酸-甲醇为流动相,线性梯度洗脱程序:0 min,流动相比例为80:20;10 min,60:40;35 min,30:70;50 min,0:100;55 min,0:100。流速1 mL·min-1,柱温30℃,检测波长320 nm。柚皮苷含量测定色谱条件为:Agilent Hypersil ODS柱(4.0 mm×150 mm,5μm),流动相为0.3％醋酸-甲醇(65:35),流速1 mL·min-1,柱温30℃,检测波长280 am。结果:不同产地及同产地不同批次枳壳药材柚皮苷的含量在3.19％-5.50％之间,有一定差异;相同产地枳壳的特定(指纹)图谱相似度较高,不同产地枳壳的特定(指纹)图谱相似度较低。结论:特定(指纹)图谱与关键成分含量测定相结合的分析方法能更全面反映枳壳药材整体质量,是一种有效的中药材质量分析方法。     

丹参药材脂溶性有效成分的快速指纹图谱研究

目的建立丹参药材脂溶性有效成分的高效液相指纹图谱,为丹参药材质量控制提供可靠方法。方法选取10个产地的丹参生药材。色谱柱：AgilentSB—C18（2．1mm×50mln,1．8μm）,流动相：甲醇-水（80：20）,检测波长：254nm;进样量：20μl,流速：1．0ml／min。结果时间窗宽度为0．3min,共标定了11个共有色谱峰,各产地丹参药材的相似度一致性良好。结论本方法准确可靠,可为提高丹参药材质量控制标准提供参考。     

丹参药材HPLC指纹图谱研究

目的：采用高效液相色谱法,建立丹参药材指纹图谱分析方法。方法：采用phenomenex Luna（4.6mm×250mm）色谱柱,0.5%冰醋酸水甲醇为流动相,梯度洗脱。结果：建立丹参药材HPLC指纹图谱,标定8个共有指纹峰。结论：该方法准确、可靠,为有效地评价丹参药材提供了重要依据。