灰树花菌丝体中几种多糖的分离及结构表征

目的从灰树花菌丝体中分离多糖 ,并进行结构分析。方法灰树花菌丝体经 85 %乙醇脱脂后 ,依次用热水、冷碱和热碱对其进行提取。所得多糖采用气相色谱、高效液相色谱、红外光谱、高碘酸氧化、Smith降解等方法分析。结果热水提取得到了 1种水溶性杂多糖 ,相对分子质量为 85 0 0 0 ,含岩藻糖 甘露糖 葡萄糖 (0 .0 3∶0 .74∶1)和少量糖醛酸 ;碱提取得到 2种含β (1,6 / 1,3)连接的水溶性葡聚糖 ,相对分子质量分别为 95 0 0 0和 14 0 0 0 0。结论灰树花菌丝体水提取可得到杂多糖 ;碱提取可得到具有超螺旋结构的水溶性 β (1,6 / 1,3) 葡聚糖     

螺旋藻中性多糖硫酸化及性质研究

采用氯磺酸-吡啶法对螺旋藻中性多糖进行硫酸化修饰；玫瑰酸钠法测定修饰前后的多糖SO4^2-含量分别为0．17％、20．0％；取代度Ds=0．429；利用琼脂糖凝胶电泳对多糖硫酸酯修饰物进行研究。结果表明多糖硫酸酯修饰物的琼脂糖凝胶电泳呈一均一斑点．与其他几种硫酸化多糖相比迁移率有较大差异；红外光谱法确定硫酸酯键在1270～1200cm^-1．1000～800cm^-1处存在强的特征吸收峰；HPLC显示出一个主要的单峰，说明此制备方法可行。     

NaHSO3/NaNO2法修饰海带多糖及抗肿瘤活性研究

目的:对海带多糖进行硫酸酯化修饰,考察修饰前后多糖结构及抗肿瘤活性的变化.方法:采用三磺酸钠胺水相法对海带多糖进行硫酸化修饰,对反应条件进行单因素分析,红外光谱核磁共振谱分析海带多糖以及硫酸酯结构,BaSO4-明胶分光光度法测定产物硫酸基,采用苯酚-浓硫酸法测定海带及其硫酸酯多糖含量,高效液相色谱法测定分子量,MTT法进行抗肿瘤活性评价.结果:海带多糖硫酸酯化后,硫酸根含量为38.34％,多糖含量为55.65％.海带多糖及硫酸酯的分子量分别为5000和14,000.硫酸基在红外光谱出现特征吸收峰.海带多糖是β-吡喃型葡萄糖以1,3-糖苷键为主链,海带多糖硫酸酯的硫酸基团取代位置为C2-OH.海带多糖及其硫酸酯对人乳腺癌MCF-7细胞、人结肠癌细胞LOVO增殖的抑制作用.结论:海带多糖经过硫酸化修饰后,其对抗肿瘤细胞的作用高于未经修饰的海带多糖,且海带多糖硫酸酯对LOVO细胞的敏感性优于对MCF-7细胞.     

低分子螺旋藻多糖的制备及其硫酸酯化物体外抗肿瘤活性的初步研究

运用盐酸控制解聚的方法,通过单因素考察和正交试验优化,得到了平均相对分子质量约为10 000的低分子螺旋藻多糖（LNPSP）,用硫酸化试剂氯磺酸-吡啶合成3种不同取代度的LNPSP硫酸酯（SLNPSP1,SLNPSP2,SLNPSP3）,采用体外抗肿瘤实验测定3种硫酸酯化物对人肝癌细胞SMMC7721的活性.结果显示：低分子螺旋藻多糖的硫酸酯化物具有良好的体外抗肿瘤活性,与未修饰的LNPSP相比有显著性差异,且随着硫酸化程度的增高抗肿瘤活性也相应提高.     

乙酰化海带褐藻多糖硫酸酯的制备及其抗氧化活性研究

目的 优选乙酰化海带褐藻多糖硫酸酯的制备方法,并测定不同条件下制备得到的乙酰化衍生物的体外抗氧化活性.方法 以甲酰胺为溶剂;乙酸酐为酰化试荆,N-溴代琥珀酰亚胺(NBS)为催化剂,采用正交设计法,考察反应时间、反应温度及酰化剂用量对海带褐藻多糖硫酸酯酰化反应的影响,测定不同条件下乙酰化衍生物的清除超氧阴离子、羟自由基和有机自由基DPPH的能力,及还原能力.结果 酰化荆用量和反应温度对海带褐藻多糖硫酸酯乙酰化有显著影响(P＜0.05).不同条件下制备的乙酰化衍生物的清除超氧阴离子、羟自由基和有机自由基DPPH的能力,及还原能力不同.结论 NBS作为催化荆对海带褐藻多糖硫酸酯进行乙酰化是可行的,可以代替传统毒性较强的吡啶对海带褐藻多糖硫酸酯的羟基进行乙酰化.乙酰化后多糖的抗氧化活性明显增强,对其进行深入研究有重要意义.     

灰树花多糖脂质体的制备方法研究

目的:制备灰树花多糖脂质体。方法:用反向蒸发法、乙醚注入法、乙醇注入法、薄膜分散法制备灰树花多糖脂质体,根据包封率的高低确定制备方法;用葡聚糖凝胶层析法对灰树花多糖脂质体进行分离,硫酸-苯酚比色法测定游离灰树花多糖含量,负染色法观察其形态。结果:反向蒸发法、乙醚注入法、乙醇注入法、薄膜分散法制备灰树花多糖脂质体的包封率分别为20.15%、16.32%、10.26%、7.99%,形态为圆形或椭圆形,平均粒径为200nm。结论:采用反向蒸发法制备的灰树花多糖脂质体包封率较高,是多糖类药物制备脂质体较好的方法;葡聚糖凝胶层析法对灰树花多糖脂质体的分离效果较好。     

山豆根多糖硫酸化修饰及其体外抗HBV活性测定

目的对山豆根多糖进行硫酸化修饰并对其抗HBV活性进行测定。方法提取山豆根多糖,采用氯磺酸-吡啶法对山豆根多糖进行硫酸化修饰,产物经红外光谱鉴定。用MTF法测定该修饰物的抗HBV活性。结果通过山豆根多糖硫酸化前后的红外图谱分析,表明硫酸基与多糖已结合成酯,并且有抗HBV的作用。结论山豆根多糖硫酸化修饰能提高对乙型肝炎病毒细胞转染的2215细胞培养液中HBeAg、HBsAg的抑制作用。     

玉足海参酸性多糖的研究

干燥玉足海参体壁经碱法消化、钾盐和季铵盐分级,可获得两种含岩藻糖的酸性多糖HL-P和HL-S。两者经电泳、凝胶过滤及超离心分析均证明为纯一成分。理化分析表明,HL-S系聚岩藻糖硫酸酯,此类多糖在多种海参中存在;HL-P系一硫酸粘多糖,其组成中,氨基半乳糖:葡萄糖醛酸:岩藻糖:硫酸基的分子比值为1:0.94:0.84:3.60。本文报告了两种多糖的比旋度、特性粘度、沉降系数及分子量。生物活性测定表明,HL-P对牛凝血酶有较强抑制作用(体外),同时抑制多种小鼠移植瘤的生长。     

褐藻多糖硫酸酯的药理学研究进展

目的 介绍褐藻多糖硫酸酯在药理学上的研究进展.方法 查阅国内外有关文献进行分析和综述.结果 褐藻多糖硫酸酯具有抗凝血作用、抑制平滑肌增殖、抗血管成形术后的再狭窄、对血管形成的影响、抗炎症反应、抗缺血、对肾脏胃黏膜的保护作用等.结论 褐藻多糖硫酸酯可能成为治疗人类许多疾病的重要药物.     

褐藻多糖硫酸酯化学研究的进展

褐藻多糖硫酸酯是一类硫酸化多糖,存在于褐藻中,首先由Kylin在1913年用稀酸从掌状海带中提取出来。Kylin将提取物水解后分离出L-岩藻糖,他将这种多糖命名为fucoidin,现根据多糖的命名原则一般定名为fucoidan。中文名称以前一直称为墨角藻多糖、岩藻多糖或褐藻糖胶,但这一名称并不规范,本文称之为褐藻多糖硫酸酯。以后随着海藻化学和海藻工业的发展,陆续在褐藻多糖硫酸酯的分离纯化、组分、结构、理化性质、应用等方面进行了大量的工作。     

人骨髓来源内皮前体细胞体外培养和鉴定的研究

目的:明确人骨髓单个核细胞中是否存在内皮前体细胞(EPCs),探讨从人骨髓中分离、培养EPCs的方法及体外进行EPCs的鉴定。方法:采集正常人骨髓单个核细胞进行体外培养,应用流式细胞术进行内皮细胞表面标记物检测,应用免疫荧光术对培养细胞进行内皮细胞功能特性检测。结果:人骨髓单个核细胞经体外培养,收获细胞可以表达内皮细胞的特异性抗原,包括CD34、VWF、KDR等,并显示出能摄取乙酰化低密度脂蛋白(ac-LDL),结合荆豆凝集素(UEA-1)等内皮细胞的特性。结论:人骨髓中存在具有内皮细胞潜能的EPCs,其具有内皮细胞的表型特征和功能,有希望作为种子细胞用于冠心病的血管新生治疗。     

Immunological changes in the intestines and skin after senna administration

Abstract

Context: It has been reported that chronic sennoside use is associated with the development of melanosis coli, colonic adenoma, and/or carcinomas.

Objectives: In this study, we investigated the immunological changes in the colon and skin after the administration of senna.

Materials and methods: In this study, we investigated the colon and epidermis of C57/BL6j mice after a single administration of 10?mg/kg of senna [Cassia angustifolia (Caesalpiniaceae); 3, 6, 12, and 24?h after administration] and after repeated once per week administrations (on days 3, 5, 7, 14, and 21 of administration). The LD₅₀ and ED₅₀ of senna used in this experiment were 165?mg/kg and 13?g/kg, respectively.

Results: We demonstrated that the DOPA-positive cells in the colon increased at 12?h after single administration and were further increased from at 5–28?d after repeated administration. We also studied the physiological changes of the small intestine using the charcoal meal test. We found that there was a tendency for peristalsis to be inhibited after repeated senna administration. In the epidermis, we investigated the number of Langerhans cells, because they are important immune cells of the skin. The number of these cells decreased, especially after repeated administration.

Discussion and conclusion: The present findings suggested that it is necessary to pay attention to not only the intestine but also the skin, during long-term senna treatment.     

干细胞样SP细胞研究进展

摘要： 干细胞样 SP 细胞是近年来在很多正常组织和恶性肿瘤组织及细胞系中发现的一种具有不同程度分化潜能和自我更新能力的细胞群体。虽然 SP 细胞在总体细胞中所占比例很低, 但这部分具有干细胞特性的细胞在干细胞以及肿瘤干细胞研究方面起着越来越重要的作用。本文综述了 SP 细胞的发现、 生物学特性、 与肿瘤干细胞之间的关系以及 SP 细胞的未来临床应用等。最后对 SP 细胞的发展进行了展望。     

Differential cytotoxic effects of mono-(2-ethylhexyl) phthalate on blastomere-derived embryonic stem cells and differentiating neurons

Potential applications of embryonic stem (ES) cells are not limited to regenerative medicine but can also include in vitro screening of various toxicants. In this study, we established mouse ES cell lines from isolated blastomeres of two-cell stage embryos and examined their potential use as an in vitro system for the study of developmental toxicity. Two ES cell lines were established from 69 blastomere-derived blastocysts (2.9%). The blastomere-derived ES (bm-ES) cells were treated with mono-(2-ethylhexyl) phthalate (MEHP) in an undifferentiated state or after directed differentiation into early neural cell types. We observed significantly decreased cell viability when undifferentiated bm-ES cells were exposed to a high dose of MEHP (1000 μM). The cytotoxic effects of MEHP were accompanied by increased DNA fragmentation, nuclear condensation, and activation of Caspase-3, which are biochemical and morphological features of apoptosis. Compared to undifferentiated bm-ES cells, considerably lower doses of MEHP (50 and 100 μM) were sufficient to induce cell death in early neurons differentiated from bm-ES cells. At the lower doses, the number of neural cells positive for the active form of Caspase-3 was greater than that for undifferentiated bm-ES cells. Thus, our data indicate that differentiating neurons are more sensitive to MEHP than undifferentiated ES cells, and that undifferentiated ES cells may have more efficient defense systems against cytotoxic stresses. These findings might contribute to the development of a new predictive screening method for assessment of hazards for developmental toxicity.     

来源于干细胞的树突细胞激活免疫细胞对同源白血病干细胞的杀伤作用

目的:探讨白血病干细胞(LSC)来源的树突细胞(DC)与细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)共同培养对自身LSC的杀伤作用.方法:提取慢性粒细胞白血病加速期(CML-AP)患者的骨髓单个核细胞(BMMC),再应用CD34+CD38CD44+标记BMMC,流式分选仪分选出LSC并扩增、诱导出DC.取同源的单个核细胞诱导出CIK.用流式细胞技术检测DC和CIK细胞免疫表型、DC的p-糖蛋白(P-gp)耐药蛋白表达.荧光原位杂交(FISH)技术检测BCR/ABL融合基因在LSC及DC中的表达,乳酸脱氢酶释放法测定效应细胞对靶细胞的杀伤效应.结果:CIK与DC共培养后,CD40、CD80、CD83及人类白细胞抗原(HLA-DR)的构成均高于共培养前;CD3、CD3CD8、CD3CD56的成熟表型表达率高于共培养前,差异有统计学意义(P＜ 0.05或P＜0.01).干细胞来源DC的P-gp表达阳性率为(60.61±12.38)％.3种效靶比对应的杀伤率差异有统计学意义(P＜0.01),随着效靶比的增加,细胞杀伤作用增强.结论:白血病干细胞来源DC功能正常,与CIK共培养对自身LSC有杀伤作用.     

胎盘间充质干细胞向神经细胞诱导的实验研究

目的间充质干细胞(MSCs)具有自我更新和多向分化能力的特点，尽管其主要来源骨髓间充质干细胞(BMSCs)已被认为是治疗多种疾病的良好细胞来源。但在严重感染或随着年龄的增长骨髓细胞数及增殖、分化能力均明显下降等情况下，就无法顺利获得足量可用于治疗的BMSC，有必要寻找MSC的新来源。方法消化胎盘组织、贴壁培养获得基质细胞；用流式细胞仪检测其细胞表面标志；比较叔丁对甲氧酚(butylated hydroxyanisole，BHA)、复方丹参注射液、β-巯基乙醇(BME)等对培养的基质细胞向神经细胞分化的作用；采用免疫细胞化学的方法对分化的细胞进行鉴定。结果胎盘组织中分离出的基质细胞与骨髓间充质干细胞有相似形态和细胞表面标志，并可诱导表达神经元和星型胶质细胞标志神经元特异性烯醇化酶(neuron specific enolasen，NSE)、神经微丝(neurofilament，NF)和胶质纤维酸性蛋白(glial fibrilament acidic protein，GFAP)。结论胎盘组织中存在能分化为神经元样细胞的间充质干细胞。胎盘间充质干细胞可能是一种可为临床治疗提供丰富新来源的间充质干细胞。     

干细胞研究进展

干细胞不仅存在于胚胎发育时期 ,而且在成体内也广泛分布于各种不同组织器官的特定部位。在胚胎时期干细胞的功能主要是参与机体的发育 ,成年后则对维持组织器官的新陈代谢有重要作用。随着胚胎干细胞 ,神经干细胞等方面研究的不断深入 ,有关干细胞的研究已日益成为一个全球性的热点。本文仅就其进展做一简要综述。     

转移因子片剂对免疫功能的调节作用

目的观察转移因子片对小鼠免疫功能的影响。方法采用NK细胞功能测定、巨噬细胞功能测定、T细胞亚群测定。结果转移因子100~500 mg/kg,经每日口服给药,能明显增强小鼠NK细胞和巨噬细胞功能,血液中CD3+细胞、CD4+细胞以及C4+/CD8+比值升高。结论转移因子片对动物免疫功能有增强作用。     

对肿瘤干细胞的认识和可调控的意义

恶性肿瘤严重地威胁着人类的健康，是危害人类生命的重要原因之一。尽管有关研究报告很多，遗憾的是其机制尚不清楚，至今尚无确切有效的抗癌、控癌措施。局部复发和远处转移一直是导致最终治疗失败的主要问题。WHO提出的新目标和理念——肿瘤属于可调控的慢性疾病。新的研究发现在肿瘤组织中有一类具有自我更新及分化潜能的细胞亚群，而且是肿瘤复发及转移的根源。这部分细胞被称马肿瘤干细胞。国内外相继从血液系统肿瘤及多种实体瘤中分离、鉴定了肿瘤干细胞。随着肿瘤干细胞学说的提出及确认，人们对肿瘤复发、转移机制和对策有了新的认识和期望，从而为恶性肿瘤治疗後的复发转移的预防提供了一个全新的途径。现综述如下。     

Stem cell-derived hepatocytes and their use in toxicology

Better prediction of safety risk and understanding of mechanism of action of drug candidates remain a major challenge in order to prevent late stage attrition. Continuous efforts are made to improve and develop new models, especially in some areas such as hepatotoxicity. Besides primary hepatocytes and transformed liver cell lines, stem cells either isolated from embryos or adult tissues or obtained by reprogramming somatic cells are emerging as a new potential source of unlimited numbers of hepatocytes. Presently, only hepatocyte-like cells expressing low levels of liver-specific markers, especially drug metabolizing and detoxifying enzymes, are usually obtained, making them still unsuitable as metabolically competent cells for toxicity studies. The only exceptions are some hepatoma cell lines, particularly the HepaRG cell line that can differentiate from a bipotent progenitor stage to attain the functional capacity of normal adult hepatocytes in primary culture without losing the indefinite growth property of transformed cells. Since the research field on stem cells is growing fast marked advances might be expected in the next future.