生脉注射液对人鼻咽癌CNE-2细胞抗拒株的放射增敏作用＊

目的 探讨生脉注射液对人鼻咽癌CNE-2细胞抗拒株及其裸鼠移植瘤的放射增敏作用以及对STAT3、p-STAT3蛋白表达的影响。方法 通过细胞毒性实验筛选生脉注射液的最佳浓度，克隆形成实验检测用药前后放射敏感性；建立人鼻咽癌裸鼠移植瘤模型，荷瘤鼠随机分为空白组，生脉注射液低、高剂量组，生脉注射液低、高剂量联合照射组，照射组和姜黄素联合照射对照组。计算肿瘤体积抑制率和抑瘤率。蛋白免疫印迹法检测基因表达。结果 生脉注射液给药后，CNE-2R细胞放射敏感性增加；与单纯照射组比较，高剂量联合照射组肿瘤体积抑制率及抑瘤率明显升高，其STAT3、p-STAT3表达亦显著下调。结论 生脉注射液对人鼻咽癌CNE-2细胞抗拒株CNE-2R及其裸鼠移植瘤具有放射增敏作用，其增敏作用可能与抑制STAT3表达与活化相关。     

生脉姜黄散对鼻咽癌放射抗拒株细胞移植瘤裸鼠肠道菌群的影响

现代药理研究表明,生脉散具有增强免疫力、改善血液循环等功效;姜黄具有抗炎、抗癌、抗氧化等多种作用。生脉散联合姜黄在中药抗肿瘤的研究中是一种崭新的研究方向。目前鼻咽癌的主要治疗手段是放射治疗,但众所周知放射治疗会引起多种副作用,同时也会改变肠道菌群的构成。研究表明,鼻咽癌放疗后机体的病机主要为正虚血瘀,生脉姜黄散体现了中医益气活血养阴的重要治法。该研究用鼻咽癌抗照射细胞株对裸鼠种植移植瘤,然后利用16s rDNA测序平台对服用生脉姜黄散或照射治疗裸鼠的肠道粪便样本进行宏基因测序,之后对肠道菌群数据结果进行分析,探讨生脉姜黄散对肿瘤移植裸鼠肠道菌群结构产生的影响。结果表明,生脉姜黄散联合照射治疗可增强肿瘤治疗的疗效,放射治疗会降低裸鼠肠道菌群的总数与多样性,同时也会改变菌群结构组成。生脉姜黄散可保护菌落的多样性,也能部分恢复因照射引起的菌落失调。该研究为生脉姜黄散作为鼻咽癌放射治疗的增敏辅助用药提供了研究思路。     

脉血康对荷MHCC97H人肝癌裸鼠皮下移植瘤VEGF表达的影响

目的:研究脉血康(水蛭素)对荷MHCC97H人肝癌裸鼠皮下移植瘤VEGF表达的影响。方法:将60只接种高转移MHCC97H人肝癌裸鼠随机分成6组,每组10只。(1)阳性对照组:隔日腹腔注射2mg/kg顺铂注射液;(2)模型对照组:每日灌胃给予蒸馏水,0.2mL/10g体重;(3)低剂量脉血康组:脉血康每日口服灌胃0.5g/kg;(4)中剂量脉血康组:脉血康每日口服灌胃1.0g/kg;(5)高剂量脉血康组:脉血康每日口服灌胃2.0g/kg;(6)联合给药组:脉血康每日口服灌胃1.0g/kg,并隔日腹腔注射2mg/kg顺铂注射液。连续21天。用药后每3天各组裸鼠称重,并用游标卡尺测量每只裸鼠移植瘤的瘤结节最大直径a和最小径b,计算瘤体积,以相对肿瘤增殖率T/C%作为疗效评价指标。末次给药24h后处死动物,称重,拍照;分离瘤体,称重,甲醛固定。运用免疫组化技术检测瘤体VEGF的表达变化。结果与模型对照组比较,脉血康给药组、顺铂注射液组、联合给药组裸鼠皮下移植瘤的瘤重明显减少,有显著的统计学差异(P<0.001);联合用药组与不同剂量脉血康给药组及阳性对照组的裸鼠皮下移植瘤的瘤重比较有显著差异(P<0.05)。脉血康给药各组、联合给药组裸鼠皮下移植瘤的VEGF表达水平均低于模型对照组,差异有显著性意义(P<0.01);阳性对照组与模型对照组比较无统计学差异(P>0.05)。结论:脉血康对荷MHCC97H肝癌裸鼠皮下移植瘤的生长有明显的抑制作用,与顺铂联合应用作用更强。其作用机制与下调VEGF基因表达有关。     

益气解毒颗粒协同顺铂对鼻咽癌移植瘤干预及调节Foxp3/ROR-γt平衡的作用

目的探讨益气解毒颗粒对鼻咽癌移植瘤微环境中调节性T细胞(Treg)主导的免疫耐受的影响,及其与顺铂联合应用的体内抗肿瘤效应。方法采用肿瘤细胞CNE2制备鼻咽癌移植瘤裸鼠模型,观察益气解毒颗粒单用或与顺铂联合使用在体内的抑瘤效应,检测转录因子叉头翼状螺旋转录因子(Foxp3)和维甲酸依赖性孤核受体γ(ROR-γt)蛋白表达水平和荷瘤裸鼠血清中IFN-γ、TGF-β、IL-17等的水平。结果益气解毒颗粒组和联合治疗组的荷瘤裸鼠血清中TGF-β和IL-17水平明显低于模型组,IFN-γ水平明显高于模型组和顺铂组,凋亡率明显高于模型组,Foxp3蛋白表达明显升高,ROR-γt蛋白表达明显下降,其中联合治疗组明显优于各药单用组(P0.01)。结论益气解毒颗粒能有效调节小鼠Treg/Th17的平衡,恢复Treg的功能,增强小鼠化疗期间T细胞的免疫功能,产生抑癌效应,联合顺铂可减轻化疗毒性。     

黄芪注射液对人鼻咽癌CNE2裸鼠移植瘤的抑制作用

目的探讨黄芪注射液对人鼻咽癌CNE2荷瘤裸鼠的抑瘤作用及其作用机制。方法建立人鼻咽癌CNE2裸鼠多植瘤模型,随机分为对照组,顺铂组,黄芪注射液高、中、低剂量组,分别ip生理盐水,顺铂,10.40、5.20、2.60 g/kg黄芪注射液,4周后处死CNE2荷瘤裸鼠。通过移植瘤生长曲线、终末瘤质量,计算黄芪注射液的抑瘤率;采用HE染色,于光镜下观察各组移植瘤组织细胞病理形态学变化;采用免疫组化法检测黄芪注射液对各组裸鼠移植瘤组织中凋亡相关蛋白p53、Bcl-2和Bax表达的影响。结果黄芪注射液高、中剂量组移植瘤体积明显低于对照组(P0.05),瘤质量明显低于对照组(P0.01),抑瘤率分别为39.90%、30.77%;黄芪注射液高、中剂量组移植瘤组织中p53、Bcl-2蛋白的表达低于对照组(P0.01);各组移植瘤组织中Bax蛋白表达均呈阴性。结论黄芪注射液对人鼻咽癌CNE2荷瘤裸鼠移植瘤具有抑制作用,其机制可能与诱导肿瘤细胞凋亡,降低肿瘤组织中p53和Bcl-2蛋白的表达有关。     

大黄素对人鼻咽癌裸鼠移植瘤的放射增敏作用研究

 目的 评价广西产何首乌中大黄素对人鼻咽癌裸鼠移植瘤的放射增敏作用。 方法 通过皮下注射肿瘤细胞的方法建立人鼻咽癌裸鼠移植瘤模型,荷瘤鼠随机分成7组：空白对照组、溶媒组、大黄素组、单纯放射治疗组、大黄素联合放射治疗组,其中大黄素组和联合治疗组按照药物高、低剂量各分为两个亚组。经处理后各组隔日测量移植瘤的最大径,计算肿瘤生长延缓天数,利用增敏系数评价大黄素的放射增敏作用, HE染色,观察瘤组织病理学特征,计算核分裂率。结果 单纯照射组肿瘤生长受到一定程度的抑制,和对照组相比,肿瘤生长延缓时间为4.28 d;高、低剂量大黄素联合放疗组较其他实验组肿瘤生长明显受到抑制,和单纯照射组相比,肿瘤生长延缓时间分别为6.90和6.77 d（P＜0.05）。高、低剂量大黄素对鼻咽癌裸鼠移植瘤放射治疗的增敏值分别为1.612和1.601。高、低两个剂量大黄素联合放射治疗组的核分裂率分别是（3.80±0.45）%和（3.43±0.34）%,与对照组比较差异有统计学意义（P＜0.05）。 结论 大黄素对人鼻咽癌裸鼠移植瘤具有放射增敏作用。     

加味生脉散对鼻咽癌裸鼠移植瘤放射增敏作用研究及机制探讨

目的探讨加味生脉散对鼻咽癌裸鼠移植瘤放疗增敏作用及相关机制。方法构建带绿色荧光蛋白的鼻咽癌细胞HONE1稳定株,并接种裸鼠成瘤,实验分为对照组、药物组、放疗组、药物+放疗组,通过测量肿瘤体积及计算抑瘤率,观察药物加味生脉散的放疗增敏作用;荧光定量PCR及Western-blot检测瘤组织MDR1基因的表达差异。结果与对照组相比,放疗组及药物+放疗组的肿瘤抑制率均明显升高(P<0.05),其中以药物+放疗组最明显(P<0.01);MDR1的mRNA及蛋白的表达水平在单纯放疗组与药物+放疗组之间差异明显(P<0.01)。结论加味生脉散对鼻咽癌的放疗具有增敏作用,其增敏机制可能与抑制MDR1基因的表达相关。     

增免抑瘤方联合顺铂对铂类耐药卵巢癌抑瘤率影响的实验研究

目的观察增免抑瘤方对顺铂耐药卵巢癌裸鼠皮下移植瘤生长的抑制作用,并探讨其可能的作用机制。方法采用顺铂耐药人卵巢癌细胞株COC1/DDP构建裸鼠皮下移植瘤模型,随机分为中药高、中、低剂量组,顺铂组,联合组(顺铂联合中药),对照组(生理盐水),连续给药3周,剥取瘤体计算瘤重及抑瘤率;定量RT-PCR及免疫组化测定Bcl相关X连锁蛋白(Bcl-associated x protein,Bax)、B细胞淋巴瘤/白血病基因-2(B-cell lymphoma/leukemia-2,Bcl-2)的表达;电镜观察瘤体细胞超微结构。结果联合组抑瘤率最高,为(59.26±6.86)%,与其他各组比较差异均有统计学意义(P<0.01)。RT-PCR结果显示:促凋亡基因Bax mRNA联合组表达最高,对照组表达最低(P<0.01)。抑凋亡基因Bcl-2mRNA对照组表达最高,中药高剂量组表达最低,联合组Bcl-2mRNA的表达低于顺铂组(P<0.01)。免疫组化结果显示:联合组Bax蛋白的表达最高,Bcl-2蛋白的表达最低,与其他各组比较差异均有统计学意义(P<0.01)。电镜下中药各剂量组与联合组均可见凋亡中、晚期的表现。结论增免抑瘤方辅助化疗可逆转耐药卵巢癌裸鼠对顺铂的耐药性,增强其抑瘤作用。其机制与上调Bax的表达,下调Bcl-2的表达,促进耐药卵巢癌细胞的凋亡有关。     

扶肺煎联合顺铂对Lewis肺癌移植瘤生长及VEGFA、VEGFR-2的影响

目的:观察扶肺煎对C57BL/6小鼠Lewis肺癌移植瘤的抑制作用,研究其对增殖细胞核抗原(PCNA)、血管内皮生长因子(VEGFA)及其受体(VEGFR-2)的影响。方法:70只雄性SPF级C57BL/6小鼠随机建立Lewis肺癌移植瘤模型,分别为空白对照组、模型对照组、扶肺煎低剂量组、扶肺煎中剂量组、扶肺煎高剂量组、顺铂组、扶肺煎中剂量联合顺铂组。每天观察动物一般情况及各组小鼠皮下结节情况并称重。第15天脱颈处死全部小鼠,完整剥离肿瘤组织并称重,计算各组抑瘤率及增效率,检测PCNA、VEGFA及VEGFR-2的表达。结果:扶肺煎联合顺铂组的抑瘤率最高,为65.81%。扶肺煎联合顺铂组增效率为107.91%,表明其对顺铂具有较好的增效作用。扶肺煎联合顺铂组PCNA阳性表达率低于其余各组,但差异无统计学意义(P0.05)。扶肺煎联合顺铂组VEGFA、VEGFR-2的表达量均小于其余各组。结论:扶肺煎联合化疗可降低C57BL/6小鼠Lewis肺癌移植瘤中PCNA的表达并抑制肿瘤生长,降低Lewis肺癌移植瘤中VEGFA、VEGFR-2的表达,起到抑制肿瘤血管生成及增敏增效的作用。     

姜黄素对直肠癌细胞放疗增敏作用的研究

目的:探讨姜黄素(curcumin)对人直肠癌细胞放射增敏作用。方法:体外实验:将HR8348细胞,分成四组:对照组(给予DMSO液);姜黄素组(给予2.5μM姜黄素);照射组(单纯X线照射);联合组(给予2.5μM姜黄素,联合X线照射)。分别采用MTT和流式细胞仪检测细胞的生长抑制情况和凋亡情况;体内实验:建立裸鼠移植肿瘤模型,单独及联合应用姜黄素和放射处理裸鼠移植瘤,通过观察肿瘤生长变化及瘤体凋亡情况并进行统计分析。结果:姜黄素对人直肠癌HR8348细胞增殖有明显的抑制作用,明显提高放射对裸鼠移植瘤的杀伤作用。结论:姜黄素对人直肠癌HR8348细胞有放射增敏作用,姜黄素在直肠癌治疗中可能成为一种有希望的放射增敏剂。     

加味生脉散对气虚型鼻咽癌大鼠的放射增敏作用及相关机制

目的:探讨加味生脉散对气虚型鼻咽癌大鼠放疗增敏作用及相关机制。方法:SD大鼠于玻璃水缸中游泳,每天10 min,共30 d。同时在大鼠腋部皮下注射二亚硝基哌嗪(DNP),剂量为0.5 mg/只/次,每3 d注射1次,共注射30次,于90 d内完成,构建鼻咽癌大鼠模型。实验分为对照组、药物组、放疗组、药物+放疗组,通过测量肿瘤体积及计算抑瘤率,观察药物加味生脉散的放疗增敏作用;荧光定量PCR及Western-blot检测瘤组织多药耐药基因-1(MDR1)基因的表达差异。结果:肿瘤质量,对照组(1 230.0±106.8)mg,放疗组为(447.2±121.9)mg,与对照组比较,P<0.05,抑瘤率53.25%;药物加放疗组为(259.9±64.7)mg,与放疗组比较,P<0.05,抑瘤率72.81%;相对表达倍数,药物组为1.21,放疗组为1.85,药物加放疗组为1.34。结论:加味生脉散对鼻咽癌的放疗具有增敏作用,其增敏机制可能与抑制MDR1基因的表达相关。     

消癌解毒方对H22荷瘤小鼠移植瘤的抗肿瘤作用机制

目的:通过消癌解毒方(XAJD)对H22荷瘤小鼠移植瘤肿瘤组织全基因组芯片的检测以及对相关蛋白的表达影响,探讨其抑制肿瘤的作用机制。方法:ICR小鼠随机分组,接种H22荷瘤小鼠腹水,移植瘤模型成功后,将模型小鼠随机分为空白组,XAJD低、中、高剂量组(10,30,90 g·kg~(-1)·d~(-1)),顺铂组(1 mg·kg~(-1)·d~(-1))。给药结束,动物处死并取各组动物瘤体组织,无菌生理盐水洗去血渍,称重,计算肿瘤抑制率,取部分新鲜瘤体组织进行全基因组表达谱芯片检测,部分瘤体组织用实时荧光定量PCR(Real-time PCR),蛋白免疫印迹法(Western blot)检测其相关mRNA及蛋白表达。结果:与空白组比较,消癌解毒方低、中、高剂量能够显著降低移植瘤瘤重(P0.05),消癌解毒方中剂量组与顺铂组效果优于消癌解毒方低、高剂量组(P0.01),抑瘤率分别达42.8%,58.6%;全基因组芯片检测分析发现,基质金属蛋白酶家族(matrix metalloproteinases,MMPs)和组织金属蛋白酶抑制剂(tissueinhibitor of metalloproteinase,TIMPs)相关蛋白在消癌解毒方不同剂量组中均发生了明显的改变。Real-time PCR,Western blot检测显示,与空白组比较,MMP-9 mRNA及蛋白在消癌解毒方低、中、高剂量组及顺铂组中表达均显著降低(P0.01),MMP~(-1)2 mRNA及蛋白在消癌解毒方中、高剂量组及顺铂组中表达均显著降低(P0.01),TIMP2 mRNA及蛋白在消癌解毒方中、高剂量组及顺铂组中表达均明显升高(P0.05)。结论:消癌解毒方能够抑制H22荷瘤小鼠移植瘤生长,可通过抑制MMPs相关蛋白的表达,降低肿瘤的转移和复发可能是其抗癌机制之一。     

莪术油对鼻咽癌细胞X-连锁凋亡抑制蛋白mRNA表达的影响

目的:研究莪术油对鼻咽癌细胞X-连锁凋亡抑制蛋白(X-linked inhibitor of apoptosis protein,XIAP)mRNA表达的影响及其作用机制。方法:体外培养鼻咽癌CNE-2细胞,MTT(噻唑蓝)法观察莪术油(400,300,200,100 mg·L-1)对CNE-2细胞的抑制作用,RT-PCR法检测莪术油对CNE-2细胞XIAPmRNA表达的影响。结果:MTT法结果显示,莪术油对CNE-2细胞的抑制率呈时间-剂量依赖性(P<0.01)。与对照组相比,莪术油139.41 mg·L-1组XIAPmRNA表达水平明显降低(P<0.01)。结论:莪术油能明显抑制鼻咽癌CNE-2细胞生长,其机制可能是通过抑制XIAP基因的表达。     

疏风解毒胶囊治疗EB病毒感染致裸鼠肿瘤模型的药效学探讨

目的:通过观察疏风解毒胶囊对EB病毒转染的人鼻咽癌细胞株CNE-2Z移植感染Balb/C裸小鼠致肿瘤模型的影响,评价疏风解毒胶囊体内抗EB病毒作用。方法:在Balb/C裸鼠右腋皮下接种鼻咽癌CNE-2Z细胞悬液,接种1周后,将移植瘤模型成功的裸鼠随机分为6组,分别为模型组、阿昔洛韦组、连花清瘟胶囊组、疏风解毒胶囊高、中、低剂量组(2.2,1.1,0.55 g·kg~(-1)·d~(-1)),每组7只,分组当天开始给药,每日1次,连续给药3周。给药当天测定裸鼠的体重,肿瘤体积,隔日测定1次,3周后称体重处死裸小鼠,取出肿瘤组织、脾脏和胸腺称质量,计算每组肿瘤体积、相对肿瘤体积、相对肿瘤增殖率、脾脏指数、胸腺指数。结果:与模型组比较,疏风解毒胶囊高、中、低剂量组均可在一定程度上降低Balb/C裸小鼠脾脏指数,升高其胸腺指数;疏风解毒胶囊高剂量组可显著降低给药8~20 d后裸鼠肿瘤体积(P0.05,P0.01);中剂量组可显著降低给药8~14,18 d后肿瘤体积(P0.05,P0.01),低剂量组可显著降低给药8,12 d后肿瘤体积(P0.05)。在相对肿瘤增值率方面疏风解毒胶囊表现出一定的抑制肿瘤增长的趋势。结论:疏风解毒胶囊对EB病毒转染的CNE-2Z细胞移植裸小鼠肿瘤模型具有抑制作用。     

黄芪-莪术联合顺铂诱导肝癌细胞凋亡及其对miR-122a,miR-221,miR-151表达的影响

目的:探讨黄芪-莪术联合顺铂(DDP)抗肝癌的作用机制。方法:构建人肝癌裸鼠原位移植瘤模型。成瘤后,将其随机分为模型组、顺铂组(DDP,2 mg·kg-1,ip),黄芪-莪术高、中、低剂量(H,M,L,12,6,3 g·kg-1·d-1,ig)组,黄芪-莪术高剂量+顺铂组(H+DDP),黄芪-莪术中剂量+顺铂组(M+DDP),黄芪-莪术低剂量+顺铂组(L+DDP),每组8只。采用Td Tmediated d UTP nick end labeling(TUNEL)法观察黄芪-莪术联合顺铂对人肝癌细胞Hep G2的原位诱导凋亡作用,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测其对凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)的影响,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)观察人肝癌裸鼠肿瘤组织中microRNA(miR)-122a,miR-221,miR-151的表达。结果:H,H+DDP,M+DDP,L+DDP组均有肿瘤细胞凋亡,镜下观察肿瘤细胞核内呈棕黄色,核高度凝聚,部分细胞脱落,与模型组比较有明显的凋亡现象发生(P0.05,P0.01),以H+DDP组诱导凋亡作用最为显著。与模型组比较,H,M,H+DDP,M+DDP,L+DDP组血清中Bcl-2含量均显著降低(P0.01),以H+DDP组降低最为显著。与DDP组比较,H,M,L,H+DDP,M+DDP,L+DDP均能显著上调miR-122a的表达(P0.01),H+DDP对miR-221,miR-151的表达有显著抑制作用(P0.01)。结论:黄芪-莪术能显著诱导人肝癌细胞Hep G2凋亡,且诱导凋亡作用与剂量有一定的正相关性,其机制可能与显著下调Bcl-2表达,上调miR-122a,下调miR-221,miR-151的表达有关,与DDP合用表现为协同增效作用。     

补中益气汤对裸鼠肺腺癌移植瘤PI3K/AKT信号通路作用的研究

目的: 探讨补中益气汤对裸鼠肺腺癌移植瘤生长抑制作用及对磷脂酰肌醇3 激酶(phosphatidylinositol 3 kinase,PI3K)/蛋白激酶 B(protein kinase B,AKT)信号通路的影响。 方法: 50只裸鼠随机分为①正常对照组,②荷瘤对照组,③顺铂组,④顺铂联合补中益气汤组,⑤补中益气汤组。分别给予相应干预后,处死小鼠,计算抑瘤率;应用免疫组化方法、实时定量 PCR(real time PCR,RT-PCR)检测移植瘤组织中PI3K,AKT的表达水平。 结果: 顺铂联合补中益气汤组对移植瘤的抑制率最强,与其他各组比较有显著差异(P<0.05),顺铂和补中益气汤协同作用的q值1.201;移植瘤中PI3K,AKT蛋白和mRNA基因的表达在顺铂联合补中益气汤组显著降低(P<0.05)。 结论: 补中益气汤联合顺铂对耐顺铂肿瘤有协同抑制作用;补中益气汤能通过干预PI3K、AKT基因和蛋白的表达而增加顺铂对耐顺铂肿瘤的敏感性。     

和厚朴酚联合青蒿素对CNE-2细胞周期阻滞的作用

目的:观察和厚朴酚(HNK)联合青蒿素(ART)对人鼻咽癌细胞(CNE-2)细胞周期的调控作用,探讨其可能的机制。方法:CNE-2细胞经胸腺嘧啶核苷(TdR,终浓度为2 mmol.L-1)处理16 h,2次PBS洗脱后用RMPI-1640培养基10 h,再次加入终浓度为2 mmol.L-1的TdR处理16 h,PBS洗脱后收集细胞用于下一步的实验研究。HNK(7.5 mg.L-1),ART(7.5 mg.L-1)单独及联合作用于已同步化的CNE-2细胞24 h,同时设立对照组,流式细胞仪检测细胞周期分布的改变;RT-PCR检测cyclin D1,cyclin E1,p27 mRNA表达。结果:CNE-2细胞经胸腺嘧啶核苷2次处理后,流式细胞仪检测显示,G1,S,G2期细胞比例分别为(72.64±5.01)%,(24.60±4.35)%,(0.00)%,表明细胞处于G1/S交界处。HNK+ART组、HNK组、ART组的G1期细胞比例分别为(90.78±9.49)%,(67.86±1.59)%,(66.77±2.25)%,提示HNK+ART组较HNK组或ART组显著地将CNE-2细胞阻滞在G1期(P<0.05)。RT-PCR检测显示HNK+ART组、HNK组、ART组的cyclin D1mRNA表达分别为(0.237±0.014),(0.328±0.002)及(0.368±0.007);cyclin E1 mRNA的表达各组依次是(0.445±0.027),(0.572±0.005)及(0.542±0.006);p27 mRNA的表达各组分别是(1.069±0.046),(0.543±0.022)及(0.388±0.004),与单药组比较,HNK+ART组显著下调cyclin D1,cyclin E1 mRNA的表达(P<0.05),显著上调p27 mRNA的表达(P<0.05)。结论:HNK+ART应用以协同方式诱导CNE-2细胞阻滞于G1期,这可能与通过下调cyclin D1及cyckin E1的mRNA表达及上调p27 mRNA表达有关。     

消癌解毒方联合顺铂通过调控组蛋白去甲基化酶抑制4T1荷瘤小鼠肿瘤生长

目的:观察消癌解毒方联合顺铂抑制4T1荷瘤小鼠肿瘤生长的作用及机制。方法:BALB/c小鼠皮下接种4T1乳腺癌细胞形成荷瘤模型,分别单独给予顺铂(2 mg·kg-1)、消癌解毒方(1×104mg·kg-1)及两者联合用药进行治疗,给药期间称量并记录小鼠体质量和瘤体积,15 d后脱颈处死,剥离并称量瘤块质量,计算抑瘤率,苏木素-伊红(HE)染色观察心、肝、脾、肾和瘤块的病理情况,原位末端转移酶标记技术(TUNEL)观察肿瘤细胞凋亡情况并统计凋亡率,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肿瘤组织中B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax),组蛋白去甲基化酶1(LSD1),组蛋白H3(Histone H3),组蛋白H3第4位赖氨酸二甲基化(Histone H3K4me2),组蛋白H3第9位赖氨酸二甲基化(Histone H3K9me2)的表达水平。结果:与模型组相比,顺铂给药组小鼠体质量均有下降,其中消癌解毒方+顺铂组较单用顺铂组体质量增加(P0.01);消癌解毒方+顺铂较单用顺铂更能缩小移植瘤体积,提高抑瘤率(P0.01);更明显提高了肿瘤细胞凋亡率(P0.05,P0.01);更明显下调肿瘤组织Bcl-2表达水平,上调Bax表达水平(P0.05,P0.01);各给药组均能下调LSD1蛋白的表达,增加组蛋白H3K4,H3K9的二甲基化,消癌解毒方+顺铂组作用最为明显(P0.05,P0.01)。结论:消癌解毒方+顺铂用药对于4T1荷瘤小鼠抑瘤作用明显,其机制可能与下调组蛋白去甲基化酶水平有关。     

癌痛平胶囊抑制肿瘤转移及其作用机制探讨

目的:观察癌痛平胶囊对H22荷瘤小鼠肿瘤生长转移的抑制作用,探讨其作用机制。方法:ICR小鼠接种H22肝癌细胞株,建立H22荷瘤小鼠模型。将H22荷瘤小鼠随机分为模型组、顺铂组、癌痛平高、低剂量组,模型组每日ig等容积生理盐水,癌痛平高、低剂量组每日ig癌痛平(36,18 g·kg~(-1)),顺铂组每日ip顺铂(2 mg·kg~(-1))。各组连续给药7 d,处死荷瘤小鼠,剥离瘤体称重,按公式计算抑瘤率。采用免疫组化检测肿瘤组织中血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达,使用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)以及免疫印迹法(Western blot)检测肿瘤组织中C-X-C趋化因子配体12(CXCL12)及C-X-C趋化因子受体4(CXCR4)基因以及蛋白表达的改变。结果:癌痛平高、低剂量显著抑制小鼠H22荷瘤小鼠肿瘤的生长,癌痛平高剂量显著降低肿瘤组织中VEGF蛋白表达,并抑制CXCL12和受体CXCR4的基因及蛋白表达(P0.01)。结论:癌痛平胶囊对H22荷瘤小鼠肿瘤生长转移具有一定的抑制作用,其作用机制可能是通过降低肿瘤组织VEGF蛋白表达以及干预CXCL12/CXCR4生物轴抑制肿瘤转移。     

活血化瘀法对子宫内膜异位症子宫内膜干细胞的影响

[目的]研究活血化瘀组方姜黄散对子宫内膜干细胞的影响。[方法]噻唑蓝(MTT)法明确姜黄散及孕三烯酮对人子宫内膜干细胞体外干预的最高无毒浓度及作用时效。对比孕三烯酮阳性对照组及不加药阴性对照组评价姜黄散对子宫内膜干细胞克隆形成、微球体形成能力的影响。将子宫内膜干细胞接种于裸鼠皮下形成异位病灶后予药物干预,对比孕三烯酮阳性对照组及不加药阴性对照组观察姜黄散高、中、低剂量组异位病灶体积及异位腺体数量的变化。[结果]姜黄散及孕三烯酮对子宫内膜干细胞干预的最高无毒浓度分别为20 mg/mL及10-6 mol/L,且其抑制作用随时间延长而加强。与阴性对照组比较,姜黄散及孕三烯酮可明显抑制子宫内膜干细胞的克隆形成及微球体形成能力。姜黄散高、中剂量及孕三烯酮可明显抑制裸鼠异位病的生长,异位病灶体积及异位腺体数量较给药前均明显减小。[结论]活血化瘀法具有抑制子宫内膜干细胞增殖的作用。