卵巢早衰的颗粒细胞凋亡机制研究进展

卵巢早衰发病率日益增高,已经成为严重危害女性身心健康的疾病,近年来对其病因的研究很多,目前认为,造成这种疾病的原因是多方面的,主要有基因缺陷、激素及其受体缺陷、代谢紊乱以及自身免疫失常。此外,一些人为的机械性损伤,也可以诱发卵巢早衰,但其确切机制仍未可知。众多研究显示无论是何原因引起卵巢早衰,都伴有颗粒细胞的凋亡,这也说明了颗粒细胞的凋亡与卵巢早衰有着直接的关系。因此,本文就当前关于卵巢早衰中颗粒细胞凋亡的研究进展加以综述,提出卵巢早衰的细胞凋亡机制,旨在为后续研究提供参考。     

miR-204-5p对卵巢早衰大鼠卵巢颗粒细胞凋亡的调控机制

【摘要】目的 探讨微小RNA（miR）-204-5p对卵巢早衰（POF）大鼠卵巢颗粒细胞凋亡的影响及调控机制。方法 体外分离大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）,将含有miR-204-5p基因反义寡核苷酸序列的重组慢病毒载体转入BMSCs,获得稳定转染LV-rno-ASO-miR-204-5p的BMSCs细胞。选取动情周期正常的75只SPF级雌性Wistar大鼠,随机分为对照组、POF组、BMSCs组、shRNA组、shRNA-BMSCs组,每组各15只。除对照组外,均采用腹腔注射顺铂法制备POF模型。shRNA组、BMSCs组及shRNA-BMSCs组分别双侧卵巢注射慢病毒载体、BMSCs细胞及稳定转染慢病毒载体的BMSCs细胞,对照组和POF组注射生理盐水。观察各组动情周期恢复情况,比较各组干预前、干预28 d后血清促卵泡生成素（FSH）、雌二醇（E2）水平,观察卵巢组织形态、卵泡颗粒细胞凋亡率,检测卵巢组织miR-204-5p mRNA及丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）、B细胞淋巴瘤-2基因（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）、半胱氨酸蛋白酶-3（Caspase-3）mRNA和蛋白表达。结果 干预后,POF组大鼠动情周期未恢复;BMSCs组、shRNA组及shRNA-BMSCs组动情周期均有所恢复,其中shRNA-BMSCs组动情周期恢复率均高于BMSCs组及shRNA组（P＜0.05）。病理染色显示,BMSCs组、shRNA组及shRNA-BMSCs组始基卵泡、初级卵泡、次级卵泡及窦卵泡数量均多于POF组,但仍少于对照组（P＜0.05）;shRNA-BMSCs组上述各级卵泡数量多于BMSCs组和shRNA组（P＜0.05）。BMSCs组、shRNA组及shRNA-BMSCs组血清FSH水平、卵巢颗粒细胞凋亡率、卵巢组织中miR-204-5p mRNA及MAPK、Bax、Caspase-3 mRNA和蛋白相对表达量均低于POF组,且shRNA-BMSCs组低于BMSCs组和shRNA组,但仍高于对照组（P＜0.05）;BMSCs组、shRNA组及shRNA-BMSCs组血清E2水平及卵巢组织Bcl-2 mRNA和蛋白相对表达量均高于POF组,且shRNA-BMSCs组高于BMSCs组和shRNA组,但仍低于对照组（P＜0.05）。shRNA组与BMSCs组比较,卵巢组织miR-204-5p mRNA相对表达量较低（P＜0.05）,各级卵泡数量、血清FSH、E2水平、卵巢颗粒细胞凋亡率及卵巢组织MAPK、Bcl-2、Bax、Caspase-3 mRNA和蛋白相对表达量差异均无统计学意义（P＞0.05）。结论 下调miR-204-5p表达可增强BMSCs对POF大鼠卵巢结构和功能的改善作用,抑制卵巢颗粒细胞凋亡,可能与下调MAPK、Bcl-2、Bax、Caspase-3基因和蛋白表达有关。     

miRNA在卵巢早衰颗粒细胞中的研究进展

miRNA是一类长度约为20～24个核苷酸的小RNA,在细胞内具有多种重要的调节作用.研究表明,miRNA在细胞分化、生物发育及疾病的发展过程中发挥着重要作用,在癌症、肿瘤等疾病中也均有表达.卵巢作为雌性动物的重要器官,miRNA对卵巢基本功能的影响也是多方面的,如类固醇生成、排卵及黄体发育等,其与靶基因之间的关系提示...     

滋阴活血法对卵巢早衰小鼠卵泡颗粒细胞凋亡的影响

【立论依据】 在中医滋阴活血理论的指导下,采用具有滋阴活血作用的补肾活血方对卵巢早衰小鼠进行研究,检测其卵泡颗粒细胞凋亡情况,阐明滋阴活血法对卵泡颗粒细胞凋亡影响的机制,为临床治疗卵巢早衰提供新的方法思路。 【设计思路】 (1)以雷公藤多甙片造成卵巢早衰为模型,随机将清洁级雌性小鼠分为空白组、模型组、西药物组、中药组。(2)给药:根据小鼠与人的体表面积进行换算后灌胃给药治疗15 d。(3)指标检测:摘取卵巢,子宫,胸腺组织称重计算脏器指数;病理形态学观察卵巢内正常卵泡和闭锁卵泡的形态变化;放免法检测E2、FSH、LH激素水平;RT-PCR法检测Fas和Fas-L的mRNA表达情况。 【实验内容】 研究滋阴活血法对卵巢早衰小鼠卵泡的作用;对卵巢早衰小鼠卵巢、子宫脏器指数的干预;对卵巢早衰小鼠E2、FSH、LH激素水平的调节;对卵巢早衰小鼠 Fas和Fas-L的mRNA表达的影响。 【材料】 清洁级雌性小鼠;药物:补肾活血方组药、补佳乐、雷公藤;灌胃针、离心机、清洁试验台、RNA提取试剂盒、PCR仪、移液器等。 【可行性】 (1)补肾活血方具有补肾、活血、软坚的功效,可改善肾虚血淤所致病理变化,具有调节下丘脑-垂体-卵巢-性腺轴,促进卵巢分泌E2,抑制卵巢卵泡细胞凋亡,增强机体免疫力等作用。(2)本组成员跟随老师进行课题研究,具有一定的科研基础和实验能力,并已学习过生化、免疫,组胚及病理学课程,掌握了与本项目密切相关的形态学、免疫组织、分子生物学技术。(3)所需试剂、仪器、材料,医学基础实验中心基本都有配备,这为研究提供了硬件的保障,同时具备SPF级实验中心。 【创新性】 (1)治法新用:该研究从滋补肝肾阴虚,养血活血着手研究凋亡机制,为临床治疗卵巢早衰提供新的思路。(2)Fas/Fas-L介导的凋亡新用。     

卵巢早衰患者颗粒细胞关键LncRNAs的生物信息学分析

目的 通过生物信息学分析筛选卵巢早衰(premature ovarian failure, POF)患者的差异表达长链非编码RNA(long non-coding RNA, LncRNAs),研究POF病理机制,预测潜在治疗靶点。方法 选取GEO数据库中与POF相关的基因芯片,利用GEO2R在线分析软件筛选颗粒细胞中差异表达LncRNAs。通过mircode数据库和miRNA靶基因预测网站预测靶基因,采用Cytoscape 3.7.2软件绘制基因交互作用网络模型。在DAVID数据库进行基因本体论(gene ontology, GO)和京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes, KEGG)富集分析。结果 共筛选出1 110个差异表达LncRNAs(P<0.01,|log₂FC|≥1.0,FC为差异倍数),其中上调基因905个,下调基因205个,其靶基因主要与金属离子跨膜转运蛋白活性、DNA与转录因子结合能力、蛋白质丝氨酸/苏氨酸激酶活性相关,并且主要富集于PI3K-Akt、MAPK、Rap1、Ra...     

颗粒细胞凋亡机制与多囊卵巢综合征

多囊卵巢综合征（PCOS）是引起育龄妇女不孕的主要原因，但其确切病因机制目前尚不清楚。近年来，对卵巢颗粒细胞凋亡的研究取得了很大的进展，故颗粒细胞凋亡在多囊卵巢综合征发病中的作用逐渐引起人们的重视。本文就多囊卵巢综合征与卵巢颗粒细胞凋亡的关系作一综述。     

颗粒细胞凋亡机制与多囊卵巢综合征

多囊卵巢综合征（PCOS）是引起育龄妇女不孕的主要原因,但其确切病因机制目前尚不清楚。近年来,对卵巢颗粒细胞凋亡的研究取得了很大的进展,故颗粒细胞凋亡在多囊卵巢综合征发病中的作用逐渐引起人们的重视。本文就多囊卵巢综合征与卵巢颗粒细胞凋亡的关系作一综述。     

细胞凋亡调控机制的研究进展

细胞的死亡同细胞的增生和分化一样,对机体发育和维持内环境稳定具有重要意义。凋亡（ａｐｏｐｔｏｓｉｓ）是有别于坏死（ｎｅｃｒｏｓｉｓ）的细胞生理性死亡。当细胞接受诱导因子（凋亡信号）刺激后,将信号传入细胞核,启动自身遗传机制,按一定的程序,形成级联式的...     

卵巢早衰病理机制最新研究进展

卵巢早衰是妇科常见病及疑难病,其发病率逐渐升高且呈年轻化趋势。作为女性的第二性器官,卵巢功能的过早衰竭严重危害全球女性的身心健康,是学者们研究与关注的焦点。目前认为卵巢早衰的发病原因是多方面的,其发病机理十分复杂,且尚未明确。就目前最新的研究发现与遗传因素、免疫因素、感染因素、医源性因素、代谢因素、精神心理因素、环境因素等因素有关。发病机制涉及基因突变,自身免疫性疾病,颗粒细胞及线粒体的异常等。该文对卵巢早衰的发病机制研究进展做一综述,为该病的预防及进一步研究提供参考。     

地贞颗粒对幼鼠卵泡颗粒细胞凋亡的影响

采秀25d雌性幼鼠皮下注射孕与血清促性腺激素（PMSG)15u制作颗粒细胞凋亡模型,通过原位末端标记法观察地贞颗粒和己烯雌酚（DES）对该调亡模型的影响。结果显示也贞颗粒给药后第3d和第5d时间点比模型组卵巢内凋亡的卵泡减少,而DES则几乎完全抑制颗粒凋亡的发生。提示地贞颗粒对卵泡颗粒细胞凋亡有轻度抑制作用。     

神经酰胺对大鼠离体培养颗粒细胞凋亡的影响

探讨神经酰胺与颗粒细胞凋亡的关系。方法以ＰＭＳＧ处理的雌性Ｗｉｓｔａｒ大鼠为模型,制备了颗粒细胞悬液。应用ＴＵＮＥＬ法及流式细胞术检测了神经酰胺对离体培养颗粒细胞凋亡的影响。结果体以培养的颗粒细胞存在自发性凋亡,神经酰胺处理的颗粒细胞凋亡率明显高于对照组;流式细胞术分析可见增强的凋亡峰。结论神经酰中能作为一种重要的信息分子参与大颗料细胞凋亡。     

镉对小鼠卵泡颗粒细胞凋亡的影响

目的：主要研究镉对卵泡颗粒细胞凋亡和DNA完整性的影响。方法通过向培养液中添加不同浓度的CdCl2使小鼠卵泡颗粒细胞处于Cd暴露的条件下,采用流式细胞术、 DNA Ladder和台盼蓝染色的方法检测细胞的凋亡和DNA完整性。结果低浓度(5μM)的CdCl2处理细胞24 h可引起小鼠细胞的大量死亡,高浓度(20μM和50μM) CdCl2处理颗粒细胞12 h即可引起细胞的大量死亡;流式细胞术结果显示, CdCl2处理颗粒细胞后,随着Cd浓度的增加,无论凋亡早期、凋亡后期和死细胞所占比例都会极显著的增加(P<0.01); Cd引起的细胞凋亡过程中伴随着DNA的片段化。结论5μM的镉即可引起小鼠颗粒细胞的凋亡,进而可能影响小鼠卵巢的正常正理功能。     

细胞凋亡及其基因调控的研究进展

细胞凋亡 (Apoptosis)或程序性细胞死亡(Programmed cell death,PCD)是有机体为保持自身组织稳定、调控自身细胞的增殖和死亡之间的平衡、由基因控制的细胞主动性死亡过程 ,具有特殊的形态学和生化特征 ,不导致明显的炎症反应[1 ] 。细胞凋亡是细胞在其生长、发育过程中具有十分重要作用的生理现象 ,其生物学意义是在发育中清除多余的细胞、发育不正常的细胞、已完成任务的细胞以及有害的细胞 ,参与免疫系统细胞的发育和克隆选择等 [2 ] 。近年来 ,国内外通过对细胞凋亡发生的分子生物学机理的研究 ,对其本质的认识不断深入 ,这一过程和细…     

兔血吸虫病肝细胞的凋亡及其调控

目的：研究血吸虫病兔肝细胞的凋亡及其调控，并探讨凋亡在血吸虫肝病发病机制中的意义。方法：以腹部敷贴法建立家兔血吸虫病模型。以感染尾蚴12周的兔20只为实验组，正常家兔5只为对照组。采用普通病理学，透射电镜，TNF－α、C－Fos和iNOS免疫组化染色及流式细胞术。结果：免疫组化：TNF－α、C－Fos和iNO强阳性反应均位于细胞浆内，阳性细胞呈弥漫性分布，以虫卵和虫卵肉芽肿周围多见，透射电镜可见典型的凋亡细胞及凋亡小体形成，流式细胞术元血吸虫病兔肝细胞凋亡百分数显著高于对照组（P＜0．01）。结论：血吸虫病兔肝细胞坏死外，同时还胡有肝细胞凋亡。TNF－α、C－Fos和iNOS参与血吸虫病时肝细胞凋亡的调控和作反传导信号。     

人类生精细胞凋亡的调控因素

细胞凋亡(apoptosis)是由多种因素调控的细胞程序性死亡,在生精细胞的发育中具有重要影响.现已证实,睾丸生精细胞退化是通过细胞凋亡实现的.在精子发生的各个阶段都存在生精细胞凋亡,但不同时期凋亡细胞数目有很大差异,精原细胞和精母细胞凋亡最多,而精子细胞凋亡很少发生.睾丸就是通过精原细胞不断增殖,同时过量的受到损伤的生精细胞不断凋亡,来控制精子细胞数目,维持精子发生的动态平衡.本文就睾丸生精细胞凋亡的调控因素作一综述.     

中药调控肿瘤细胞凋亡机制研究进展

细胞凋亡的概念是由英国学者Kerr于1972年首先提出，细胞凋亡又称细胞程序性死亡，是有核细胞在生理条件下，通过启动其自身遗传机制，主要通过内源性DNA内切酶的激活发生的自动死亡过程。现代医学研究证实，许多天然药物可以通过干扰肿瘤细胞生长、代谢、增殖等过程，最终诱导触发肿瘤细胞分化发生凋亡。中药诱导肿瘤细胞凋亡是中医药抗肿瘤的分子机制之一。阐明中药诱导肿瘤细胞凋亡的机制有助于医学临床和科研工作的深入，现将近年研究综述如下。     

氨甲酰胆碱对多巴胺诱导的小脑颗粒细胞凋亡的保护机制

[目的]研究多巴胺诱导小脑颗粒神经元凋亡的分子机制,以及胆碱受体激动剂氨甲酰胆碱对多巴胺诱导凋亡的作用。[方法]在培养的小脑颗粒神经元建立多巴胺凋亡模型。用相差显微镜观察形态学,NDA凝胶电 Hoechst 33258核染色分析神经元凋亡。细胞的存活率用二乙酸荧光素（FDA）染色法检测。采用Western blot分析细胞外信号调控的蛋白激酶（ERK）激活情况。[结果]多巴胺可诱导小脑颗粒神经元调亡,并可持续激活ERK,二者均可被氨甲酰胆碱和PD98059抑制。氨甲酰胆碱对神经元的保护作用及对ERK激活的抑制作用可被阿托品阻断。[结论]多巴胺在小脑颗粒神经元诱导凋亡可能是通过持续激活ERK介导的,氨甲酰胆碱通过激活M胆碱受体,继而抑制了ERK的激活,从而起到对神经元的保护作用。     

细胞凋亡机制研究进展

细胞凋亡机制的研究已经成为当代免疫学研究的一个热点,更为疾病的免疫诊断与免疫治疗提供了新的思路。本文简述了细胞凋亡机制中基因调控、相关蛋白及细胞凋亡生理和病理机制,通过对细胞凋亡的研究,为预防、治疗、诊断某些疾病提供新的理论依据及相应对策。     

急性脊髓损伤后的细胞凋亡与调控

1　神经细胞凋亡的研究细胞受损后主要有二种死亡方式 ,即坏死 (ｎｅｃｒｏｓｉｓ)和凋亡 (ａｐｏｐｔｏｓｉｓ)。二者在细胞形态、发生机制等方面均有很大差异。前者主要表现为细胞肿胀、破裂 ,胞浆酶外泻 ,从而产生不可逆性损伤。这是经典的细胞学概念 ,也是以往认为惟一的细胞死亡方式。而凋亡则表现为胞质浓缩 ,它是一种程序性死亡 ,这种细胞死亡方式广泛存在于多种细胞的生理和病理过程中[1] 。目前 ,对于脊髓神经损伤多数学者倾向于根据急性脊髓损伤所致的神经元死亡发生时间的不同分为二种形式 :一种为原发性神经元死亡 ,是创伤暴力…