基于iTRAQ技术探讨复方钩藤降压片干预自发性高血压大鼠心肌组织差异蛋白的研究

目的研究复方钩藤降压片干预自发性高血压大鼠(SHR)心肌组织蛋白质变化及高血压左心室肥厚潜在机制。方法将16只SHR分为2组后,治疗组予以复方钩藤降压片灌胃干预,对照组予以蒸馏水灌胃,干预12周后采取大鼠心肌组织蛋白质进行同位素标记相对和绝对定量(iTRAQ)检测分析。通过对富集Pathway分析,得到差异蛋白及通路,并将得到的差异蛋白利用STRING数据库绘制差异蛋白功能联系。结果差异蛋白富集Pathway分析提示存在11条通路。差异蛋白中上调蛋白6种,分别为:转胶蛋白、碳酸酐酶3、S期激酶相关蛋白1、C反应蛋白、纤维蛋白5、C-1-四氢叶酸合成酶;下调蛋白12种,分别为:谷胱甘肽S-转移酶、Ighg3蛋白、组氨酸三联核苷酸结合蛋白2、60S核糖体蛋白L4、40S核糖体蛋白S6、60S核糖体蛋白L13、14-3-3蛋白、LOC100911337蛋白、谷胱甘肽过氧化物酶1、丝氨酸羟甲基转移酶、蛋白激酶B、泛素-40S核糖体蛋白S27A。在string绘制的关系网中:60S核糖体蛋白L4、40S核糖体蛋白S6、60S核糖体蛋白L13、泛素-40S核糖体蛋白S27A之间关系最为密切。结论复方钩藤降压片对高血压左心室肥厚的干预主要与改善血供、优化能量代谢、抑制心肌细胞的异常生长、增加血管和心脏的纤维蛋白密切相关;高血压左心室肥厚的发生可能与核糖体蛋白有关。     

肺癌组织中Fhit蛋白和PCNA蛋白表达及意义

目的　探讨肺癌组织中Fhit蛋白和PCNA蛋白表达及其与临床病理因素的关系。方法　应用免疫组织化学S P法检测 6 2例肺癌组织中Fhit蛋白和PCNA蛋白表达。结果　肺癌组织中Fhit蛋白和PCNA蛋白表达阳性率分别为 5 3.2 %和6 4 .5 % ,PCNA蛋白表达阳性肺癌Fhit蛋白阳性率明显低于PCNA蛋白表达阴性肺癌 (P <0 .0 1)。Fhit蛋白和PCNA蛋白在肺癌中表达与肺癌的分化程度、淋巴结转移、3年生存期均密切相关 ,PCNA蛋白与肺癌病理类型亦有关。结论　Fhit蛋白和PC NA蛋白异常表达与肺癌发生、发展密切相关 ,二者相互抑制 ,呈明显负相关     

HSV-gB、gD糖蛋白重组串联抗原表位蛋白的表达及鉴定

目的 制备HSV-gB、gD蛋白串联表位重组蛋白,为单纯疱疹病毒(HSV)疫苗的研制提供新型抗原蛋白以及新的抗原制备方法.方法 应用生物信息学软件laser gene DNASTAR分析HSV1-gB、gD和HSV2-gB、gD蛋白的抗原表位.选取9个表位,设计并合成表位串联重组蛋白编码基因X,构建其原核细胞表达重组体,在大肠杆菌BL21(DE3)表达该重组表位蛋白X,Western blot法(抗His标签)鉴定重组蛋白.结果 构建了HSV-gB、gD蛋白串联表位重组蛋白X的原核表达体,在BL21菌中表达了X蛋白,Western blot法(抗His标签)鉴定了重组蛋白X.结论 建立了制备HSV-gB、gD蛋白重组抗原表位蛋白的方法,为HSV疫苗的研制提供了可能的新型抗原蛋白.     

14-3-3蛋白与细胞凋亡

14 3 3蛋白是Moore和Pere于 196 7年发现的 ,当时他们认为 14 3 3蛋白是脑所特有的一种酸性蛋白 ,并依据其在DEAE 纤维素色谱上的组分数以及在淀粉凝胶电泳中的迁移位置而命名为 14 3 3蛋白。但随后的大量研究表明14 3 3蛋白在所有的真核细胞中均有表达 ,是一个调节蛋白家族 ,能与许多功能不同的信号蛋白结合 ,例如蛋白激酶Raf 1、KSR 1、Bcr、Ca2 +/钙调蛋白激酶、PKC、蛋白磷酸酶cdc2 5c、促凋亡蛋白BAD、抗凋亡蛋白A2 0 、跨膜蛋白受体GA等。这就说明 14 3 3蛋白在信号传导、细胞周期调控、细胞凋亡等过程中具有极其重要的…     

去除血清中高、中丰度蛋白方法的优化

目的：通过比较和优化血清样品制备方法,建立简便、灵敏的去除血清中高、中丰度蛋白的方法。方法：运用盐析法、有机溶剂法和亲和层析柱法去除血清中高、中丰度蛋白,经蛋白浓度测定和SDS-PAGE电泳分析,比较3种方法对高、中丰度蛋白去除效果及小分子蛋白的保留和分布情况。结果：乙腈沉淀法能去除血清样品中90%左右的高、中丰度蛋白,同时可残留更多15 ku以下的小分子蛋白;盐析沉淀法和亲和层析柱法均能去除血清样品中大部分高、中丰度蛋白,但所得的15 ku以下的小分子蛋白少于乙腈沉淀法所得到的相应蛋白。结论：用1.2倍体积乙腈沉淀法处理血清样品可去除绝大部分高、中丰度蛋白,同时收获更多的15 ku以下的小分子量蛋白。     

转运蛋白在药物血脑脊液屏障转运中的重要作用

血脑脊液屏障上存在多种转运蛋白并有其重要作用。本文综述了P-糖蛋白、多药耐药相关蛋白、有机阴离子转运蛋白、有机阳离子转运蛋白、二肽、三肽转运蛋白、葡萄糖转运蛋白等转运蛋白在血脑脊液屏障上的位置、底物与作用。对这些转运蛋白的研究使人们能深入地解析药物在血脑脊液屏障上的动态,更有效地调控药物转运行为,指导脑靶向与非脑靶向药物的研发设计。     

血浆蛋白C蛋白S及其检测与临床应用

血浆蛋白C(PC)、蛋白S(PS)缺乏会使人体的凝血及纤溶平衡受影响,使凝血亢进,从而发生血栓性疾病。许多疾病也会影响血浆蛋白C和蛋白S的含量和活性,因此血浆蛋白C、蛋白S检测对疾病的诊断预防及观察预后有重要价值。本文对血浆蛋白C、蛋白S及其检测与临床应用作一综述。     

乙型肝炎病毒PreS1抗原的研究进展

HBV是部分双链的DNA病毒,病毒基因组约3.2 kb大小,结构紧密,含有S,C,P和X四个开放阅读框(Open reading frame,ORF),分别编码外膜蛋白、核壳蛋白、DNA多聚酶和X蛋白[1].HBV病毒吸附蛋白存在于病毒包膜的3个相关蛋白:大蛋白(LHBs)、中蛋白(MHBs)和主蛋白(SHBs),3种蛋白C端有相同的序列,主蛋白由S基因编码,226个氨基酸组成;中蛋白由S及pre-S2基因区编码,281个氨基酸组成;     

BET蛋白与脑认知功能关系的研究进展

溴结构域和超末端结构域(BET)蛋白能识别乙酰化组蛋白并与之结合,同时与染色质调节因子相互作用或招募转录起始复合物,从而启动基因转录。近几年,BET蛋白抑制剂的合成推进了BET蛋白相关表观遗传学研究。本文综述BET蛋白的结构和功能、BET蛋白抑制剂、BET蛋白在学习和记忆中的作用、BET蛋白在老年痴呆症中的作用以及BET蛋白在药物成瘾中的作用。     

清蛋白、前清蛋白和血清超敏C反应蛋白检测对普外科病人术后感染的诊断意义

目的 评价血清清蛋白、前清蛋白与超敏C反应蛋白在普外科手术后感染病人中的早期变化及意义。方法 选取术后发生感染的病人20例,就其手术前后血清清蛋白、前清蛋白和超敏C反应蛋白水平与20例未发生感染的对照组病人进行配对比较。结果 术后并发感染的病人血清清蛋白、前清蛋白以及超敏C反应蛋白手术前后的变化与对照组比较差异有显著性（t=2．33～4．59,P〈0．05）。结论 清蛋白、前清蛋白和超敏C反应蛋白对普外科手术后病人并发感染有一定的预测和诊断价值。     

HepG2细胞中PIG11相互作用蛋白质的初步分离与鉴定

目的探讨人肝细胞癌细胞系（HepG2）并初步鉴定候选肝癌抑癌蛋白肿瘤蛋白P53下游靶基因11号（PIG11）相互作用蛋白,确定PIG11的作用方式。方法课题组前期利用质粒pLXSN构建逆转录病毒载体,转染细胞后建立起PIG11高表达HepG2细胞株。将HepG2分为HepG2对照组,空载体HepG2组和PIG11高表达HepG2组分别培养,流式细胞术检测细胞凋亡。采用免疫共沉淀富集HepG2细胞中PIG11结合蛋白,切取PIG11结合蛋白条带,胶内酶解后进行电喷雾串联质谱得到肽序列标签,通过数据库查询蛋白。结果PIG11蛋白高表达组凋亡率显著高于对照组（P〈0.01）。串联质谱后数据库查询鉴定出11个蛋白,分别是热休克蛋白家族中的HSP60,KH型剪接调节蛋白（KSRP）、脑酸溶性蛋白BASP1、蛋白水解诱导因子（PIF/DCD）、Y染色体RNA结合蛋白、碳酸酐酶、白蛋白以及骨架蛋白中的波形蛋白、α、β-微管蛋白、肌动蛋白。结论PIG11蛋白高表达对HepG2具有诱导凋亡作用;初步鉴定出11个PIG11结合蛋白,为进一步阐明PIG11蛋白的作用机制提供线索。     

阳和汤对急性乳腺炎大鼠蛋白质组的影响

目的探究阳和汤对急性乳腺炎大鼠蛋白质组的影响,从而探索阳和汤治疗急性乳腺炎可能的途径。方法采用双向凝胶电泳(2-DE)对实验对照组、模型组、青霉素组和阳和汤组大鼠血清进行蛋白分离,经过图像分析识别差异表达蛋白质,由基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)得到差异表达蛋白的肽指纹图,用蛋白质数据库(SwissProt)搜索匹配的蛋白质。结果所获2-DE图谱分离效果较好,质谱分析共鉴定了12个差异蛋白质点,分别属于炎症相关蛋白、物质代谢相关蛋白和肿瘤相关蛋白,青霉素组的差异蛋白有三个上调,九个下调,阳和汤组的差异蛋白全部下调。结论阳和汤治疗急性乳腺炎可能与下调炎症相关蛋白、物质代谢相关蛋白和肿瘤相关蛋白有关。     

Ki67、bcl-2、bax蛋白在非小细胞肺癌中的表达及预后价值

目的评价增生细胞标志Ki67蛋白及凋亡调节因子bcl-2蛋白、bax蛋白在非小细胞肺癌中表达的临床意义和预后价值。方法用Ki67b、cl-2、bax抗体对51例非小细胞肺癌标本进行免疫组化染色,按阳性及阴性分组。结果Ki67蛋白阳性率为29.4%,Ki67蛋白表达在T分期中不同,在T2期表达强度最高(P=0.033),Ki67蛋白阳性者生存期较阴性者缩短(P=0.013);bcl-2蛋白阳性率为33.3%,bcl-2蛋白表达与临床病理特征无关,与生存期无关;bax蛋白阳性率为35.3%,bax蛋白表达在鳞、腺癌之间不同(P=0.040),bax蛋白表达与生存期无关。多因素COX回归分析显示,进入回归方程的为肺癌分期及Ki67蛋白。结论Ki67蛋白作为增生细胞的标志与预后相关,Ki67蛋白阳性者预后差。Ki67蛋白有可能成为判断非小细胞肺癌预后的一个有价值的分子标志。     

CD2相关蛋白与其他足细胞相关蛋白间互相作用的研究进展

足细胞足突融合消失和蛋白尿是肾小球疾病的共同特征,了解足细胞的生物学特性,对研究足细胞损伤机制、靶向治疗具有重要意义。裂孔隔膜作为足细胞重要组成部分之一,对维持肾小球滤过屏障结构及功能、限制蛋白滤过起关键作用。CD2相关蛋白(CD2AP)作为裂孔隔膜的代表性蛋白之一,与细胞骨架相关蛋白、其他裂孔隔膜蛋白、基底膜区蛋白、顶膜区蛋白和离子通道蛋白存在相互作用,共同影响足细胞形态学和动力学。本文围绕CD2AP与足细胞相关蛋白的相互作用进行综述,为探讨蛋白尿的发生机制提供参考。     

乙型肝炎病毒前S抗原,PHSAR检测的临床分析

现已明确HBV基因为环状双股DNA,长3.2 Kb,正股不完整,呈半环状,含6个开放读码框架(ORF),其中4个ORF是病毒蛋白的编码区,划分为S区(前S1基因、S2基因和S基因),C区(分前C基因和C基因),P区和X区,分别编码病毒囊膜蛋白(HBsAg),壳体蛋白、复制酶蛋白及X蛋白,其中囊膜蛋白(HBsAg)有前S1蛋白、前S2蛋白、S蛋白,中蛋白和大蛋白等5种成分.     

釉基质蛋白对人牙周膜细胞生物学影响的体外研究

目的:了解釉基质蛋白对人牙周膜细胞的增殖、矿化、蛋白合成及超微结构的影响。方法:组织块法原代培养人牙周膜细胞,茜素红染色进行细胞表型的鉴定;采用细胞增殖试剂盒及流式细胞仪检测釉基质蛋白对人牙周膜细胞增殖及细胞周期的影响;BCA蛋白定量试剂盒分析釉基质蛋白对牙周膜细胞蛋白合成的影响;并用透射电镜观察牙周膜细胞超微结构的改变;免疫组化染色观察釉基质蛋白作用下对牙周膜细胞骨涎蛋白和骨桥蛋白表达的影响。结果:釉基质蛋白可促进牙周膜细胞增殖,促进牙周膜细胞DNA的合成,使牙周膜细胞周期的G1期细胞所占百分比降低,而S期细胞所占百分比升高,并可提高牙周膜细胞蛋白总量,透射电镜观察可见经釉基质蛋白作用后的牙周膜细胞胞浆丰富,与蛋白合成相关细胞器粗面内质网及高尔基体发达,釉基质蛋白可促进牙周膜细胞矿化相关蛋白骨涎蛋白和骨桥蛋白的表达。结论:釉基质蛋白能促进牙周膜细胞增殖、蛋白合成及矿化相关蛋白骨涎蛋白和骨桥蛋白的表达,促进牙周组织的再生。     

釉基质蛋白对人牙周膜细胞生物学影响的体外研究

目的：了解釉基质蛋白对人牙周膜细胞的增殖、矿化、蛋白合成及超微结构的影响。方法：组织块法原代培养人牙周膜细胞,茜素红染色进行细胞表型的鉴定;采用细胞增殖试剂盒及流式细胞仪检测釉基质蛋白对人牙周膜细胞增殖及细胞周期的影响;BCA蛋白定量试剂盒分析釉基质蛋白对牙周膜细胞蛋白合成的影响;并用透射电镜观察牙周膜细胞超微结构的改变;免疫组化染色观察釉基质蛋白作用下对牙周膜细胞骨涎蛋白和骨桥蛋白表达的影响。结果：釉基质蛋白可促进牙周膜细胞增殖,促进牙周膜细胞DNA的合成,使牙周膜细胞周期的G1 期细胞所占百分比降低,而S期细胞所占百分比升高,并可提高牙周膜细胞蛋白总量,透射电镜观察可见经釉基质蛋白作用后的牙周膜细胞胞浆丰富,与蛋白合成相关细胞器粗面内质网及高尔基体发达,釉基质蛋白可促进牙周膜细胞矿化相关蛋白骨涎蛋白和骨桥蛋白的表达。结论：釉基质蛋白能促进牙周膜细胞增殖、蛋白合成及矿化相关蛋白骨涎蛋白和骨桥蛋白的表达,促进牙周组织的再生。     

TRAIL、bcl-2在卵巢癌组织中的表达及其相关性探讨

目的:探讨TRAIL和bcl-2在卵巢癌组织中的表达及相关性。方法:用免疫组化SP法检测10例正常卵巢,20例良性卵巢肿瘤,60例卵巢癌组织中TRAIL蛋白和bcl-2蛋白表达情况,并进行二者间相关性分析。结果:(1)正常卵巢组织、良性卵巢肿瘤、卵巢癌中TRAIL蛋白的表达率分别为90.0%、80.0%、38.3%;bcl-2蛋白的表达率分别为0%、20.0%、55.0%。两者间比较:在正常卵巢,良性卵巢肿瘤中TRAIL蛋白、bcl-2蛋白的表达无差异(P>0.05);在良性、恶性卵巢肿瘤中TRAIL蛋白、bcl-2蛋白的表达有差异(P<0.05)。(2)在卵巢癌中TRAIL蛋白表达与组织学类型、病理分级无关(P>0.05),与临床分期期别密切相关(P<0.05);bcl-2蛋白的表达与组织学类型无关(P>0.05),与病理分级、临床分期期别密切相关(P<0.05)。(3)TRAIL蛋白表达和bcl-2蛋白的表达呈负相关(P<0.05)。结论:TRAIL蛋白和bcl-2蛋白可能共同参与了卵巢癌的发生、发展过程。并且可能通过减少TRAIL蛋白表达,升高bcl-2蛋白表达,起到协同抑制肿瘤细胞凋亡作用,从而促进了卵巢癌的发生、发展。     

树舌多糖对HepA小鼠瘤细胞蛋白质表达影响的研究

目的探讨树舌多糖抗肿瘤的作用机制,寻找特异蛋白。方法将各组小鼠的眼血清蛋白、匀浆蛋白、膜糖蛋白分别做PAGE电泳,分析其蛋白组分的变化。结果树舌多糖作用后血清蛋白、匀浆蛋白、膜糖蛋白的蛋白组分都有变化。     

血清蛋白电泳和免疫球蛋白的联合检测对肝病的临床意义

目的探讨血清蛋白电泳和免疫球蛋白的联合检测在肝病诊断中的应用。方法将118例肝病患者和119例正常对照组人群进行血清蛋白电泳和免疫球蛋白的检测及对比分析。结果与对照组比较,慢性肝炎组清蛋白、α1-球蛋白、γ-球蛋白差异有统计学意义（p〈O05）,α1-球蛋白、β-球蛋白、IgG、IgA、IgM差异无统计学意义（P〉0．05）;肝硬化组清蛋白、α1-球蛋白、γ-球蛋白、IgG、IgA差异有统计学意义（p〈0．05）,α2-球蛋白、β-球蛋白、嚏M差异无统计学意义（P〉0.05）;肝癌组清蛋白、α1-球蛋白、γ-球蛋白、lgG、恒A差异有统计学意义（p〈0．05）,α2-球蛋白、β-球蛋白、IgM差异无统计学意义（P〉0．05）。结论血清蛋白电泳和免疫球蛋白联合检测,对于肝病的诊断、病情变化和治疗效果有重的临床意义。