艾灸对肝癌裸鼠移植瘤PCNA、CyclinD1、CDK4表达影响的实验研究

目的观察艾灸对肝癌裸鼠移植瘤增殖细胞核抗原(PCNA)、细胞周期蛋白D1(CyclinD1)和周期蛋白依赖性激酶4(CDK4)表达的影响,探讨艾灸抗肿瘤的可能机制。方法 16只裸鼠均接种HepG2细胞构建高转移肝癌小鼠移植瘤模型,随机分为模型组和艾灸组。接种后次日给予麦粒灸大椎穴干预,至14 d后结束治疗,取出肿瘤组织。采用免疫组化法检测肿瘤组织中PCNA蛋白的表达,PCR法检测CyclinD1、CDK4mRNA的表达。结果与模型组相比,艾灸组中PCNA蛋白、CyclinD1mRNA和CDK4mRNA表达均显著降低(P0.05)。结论艾灸对肝癌裸鼠移植瘤的生长有明显的抑制作用,其机制可能与下调肿瘤组织中PCNA、CyclinD1mRNA、CDK4mRNA的表达水平有关。     

三氧化二砷对胰腺癌 BXPC-3 细胞移植瘤的体内抑制作用

目的探讨三氧化二砷在体内对胰腺癌BXPC-3细胞移植瘤的抑制作用,并探讨其初步机制。方法建立胰腺癌裸鼠移植瘤模型,随机分为4组:模型组,低剂量、高剂量(2.5、5.0 mg/kg)三氧化二砷组和吉西他滨组,各组ip给药,作用2周后,检测实验前后裸鼠体质量变化,观察药物对肿瘤生长的影响,免疫组化检测肿瘤细胞增殖因子ki-67的表达,TUNEL法检测移植瘤组织的细胞凋亡。结果给药2周后,各组裸鼠体质量变化差异不显著,三氧化二砷和吉西他滨均可抑制裸鼠移植瘤的体积和质量,且三氧化二砷(5 mg/kg)组作用较强;免疫组化结果显示三氧化二砷可明显降低细胞增殖因子ki-67的阳性表达;TUNEL检测表明三氧化二砷可明显诱导移植瘤肿瘤细胞凋亡。结论三氧化二砷可抑制胰腺癌BXPC-3细胞在裸鼠体内的生长;作用机制可能为抑制肿瘤细胞增殖及促进肿瘤细胞凋亡。     

北豆根调控K-ras与DPC4蛋白表达的研究

目的:观察北豆根提取物蝙蝠葛酚性碱(PAMD)对胰腺癌(BXPC-3)荷瘤鼠肿瘤组织中k-ras与DPC4蛋白表达的调控作用,探讨其抗胰腺癌的相关机制。方法:蛋白印迹技术检测肿瘤组织中kras和DPC4的蛋白表达,探讨PAMD抗胰腺癌作用的相关靶点。结果:PAMD三个给药剂量组均能降低BXPC-3荷瘤鼠瘤组织中K-ras蛋白表达,增加DPC4蛋白表达,与模型对照组比较,差异具有统计学意义(P0.01)。结论:PAMD通过下调K-ras蛋白表达,上调DPC4蛋白表达,影响TGF-β信号传导通路,抑制BXPC-3肿瘤生长,从而达到对BXPC-3的治疗目的。     

三氧化二砷对胰腺癌BXPC-细胞移植瘤的体内抑制作用

目的探讨三氧化二砷在体内对胰腺癌BXPC-3细胞移植瘤的抑制作用, 并探讨其初步机制。方法建立胰腺癌裸鼠移植瘤模型, 随机分为4组:模型组, 低剂量、高剂量(2.5、5.0 mg/kg)三氧化二砷组和吉西他滨组, 各组ip给药, 作用2周后, 检测实验前后裸鼠体质量变化, 观察药物对肿瘤生长的影响, 免疫组化检测肿瘤细胞增殖因子ki-67的表达, TUNEL法检测移植瘤组织的细胞凋亡。结果给药2周后, 各组裸鼠体质量变化差异不显著, 三氧化二砷和吉西他滨均可抑制裸鼠移植瘤的体积和质量, 且三氧化二砷(5 mg/kg)组作用较强;免疫组化结果显示三氧化二砷可明显降低细胞增殖因子ki-67的阳性表达;TUNEL检测表明三氧化二砷可明显诱导移植瘤肿瘤细胞凋亡。结论三氧化二砷可抑制胰腺癌BXPC-3细胞在裸鼠体内的生长;作用机制可能为抑制肿瘤细胞增殖及促进肿瘤细胞凋亡。     

重楼皂苷Ⅶ对裸鼠胰腺癌的治疗作用及机制研究

【目的】 观察重楼皂苷Ⅶ对裸鼠胰腺癌的治疗作用及其机制。【方法】 以人胰腺癌细胞AsPC-1皮下注射裸鼠构建胰腺癌移植瘤模型。将胰腺癌移植瘤裸鼠随机分为5组,即对照组,重楼皂苷Ⅶ低、中、高剂量组和5-氟尿嘧啶组,对应给药治疗。给药结束后,测量移植瘤体积、质量;采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的d UTP缺口末端标记（TUNEL）法测定移植瘤组织细胞凋亡情况;蛋白免疫印迹法检测移植瘤组织Caspase-3、Bax和Bcl-2蛋白表达水平。【结果】 与对照组比较,重楼皂苷Ⅶ低、中、高剂量组和 5-氟尿嘧啶组移植瘤体积、质量显著降低,TUNEL 阳性表达细胞比例显著升高,移植瘤组织Caspase-3、Bax蛋白水平显著升高,Bcl-2蛋白水平显著降低（均P＜0.01）。【结论】 重楼皂苷Ⅶ可有效抑制胰腺癌裸鼠移植瘤的生长,其机制可能与抑制肿瘤细胞凋亡有关。     

大黄素联合吉西他滨抑制体内外胰腺癌生长及其机制研究

目的探讨大黄素联合吉西他滨对体内外胰腺癌生长的影响及其机制。方法采用吉西他滨(20μmol/L)、大黄素(40μmol/L)单独及联合作用胰腺癌细胞株SW1990后,CCK-8法检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡;Westernblot检测Bax及Bcl-2蛋白表达。建立人胰腺癌裸鼠皮下移植瘤模型,分别给予大黄素、吉西他滨单独及联合用药,监测移植瘤体积变化;免疫组化法检测移植瘤组织中Ki-67、Bax及Bcl-2表达。结果与吉西他滨组及大黄素组比较,联合用药组显著降低SW1990细胞存活率,提高细胞凋亡率(P<0.05);与对照组比较,大黄素组及联合用药组明显上调SW1990细胞中Bax蛋白表达水平,抑制Bcl-2蛋白表达(P<0.05)。与对照组比较,大黄素组及联合用药组可显著抑制裸鼠胰腺癌皮下移植瘤生长,提高Bax在肿瘤组织中阳性表达,明显降低Ki-67和Bcl-2的阳性表达(P<0.05),以联合用药组作用最佳(P<0.05)。结论大黄素可能通过上调Bax表达和下调Bcl-2表达增强吉西他滨对体内外胰腺癌的抑制作用。     

蝙蝠葛酚性碱对胰腺癌细胞株BXPC-3移植瘤DPC4 mRNA表达的影响

目的:探讨蝙蝠葛酚性碱(PAMD)对胰腺癌细胞株BXPC-3移植瘤DPC4mRNA表达的影响。方法:采用右腋皮下接种胰腺癌(BXPC-3)肿瘤细胞,经腹腔注射PAMD,连续用药21d。采用荧光定量PCR(Real-timePCR)技术检测肿瘤DPC4基因表达的情况,结果:PAMD高、中、低剂量均能上调BXPC-3荷瘤小鼠瘤组织中DPC4mRNA表达量,与模型对照组比较,差异具有统计学意义(P0.01),结论:PAMD对BXPC-3荷瘤小鼠具有明显的抑瘤作用。     

蝙蝠葛酚性碱对胰腺癌瘤组织中DPC4蛋白表达的影响

目的：观察蝙蝠葛酚性碱（PAMD）对胰腺癌（BXPC-3）荷瘤小鼠肿瘤组织中DPC4蛋白表达的影响。方法：采用蛋白印迹技术（W estern-blot）检测肿瘤DPC4蛋白表达的差异。结果：PAMD高、中、低剂量上调BXPC-3荷瘤小鼠瘤组织中DPC4蛋白表达量,与模型对照组比较,差异具有统计学意义（P〈0.01）;结论：PAMD对BXPC-3荷瘤小鼠具有明显的抑瘤作用,其抑瘤作用可能通过上调DPC4基因蛋白表达,影响TGF-β信号传导通路,从而抑制肿瘤生长。     

NF-κB在大黄素联合吉西他滨治疗裸鼠胰腺癌肝转移中的作用

目的：观察大黄素联合吉西他滨对裸鼠胰腺癌肝转移模型的影响及其可能机制。方法：建立裸鼠胰腺癌肝转移模型,随机（随机数字法）分为对照组、大黄素组、吉西他滨组和联合用药组（n=10）,观察各组荷瘤裸鼠肝转移瘤生长情况;免疫组织化学法检测肿瘤组织中Ki-67和CD-34的表达;Tunel法检测肿瘤组织细胞凋亡;凝胶电泳迁移率实验（EMSA）检测肿瘤细胞中NF-κB活性;Western blotting法检测肿瘤组织中Survivin、Caspase-3、VEGF和MMP-9的表达。结果：相对吉西他滨组,吉西他滨联合大黄素可显著抑制胰腺癌肝转移瘤生长;与吉西他滨组相比较,大黄素单独或联合吉西他滨可抑制体内胰腺癌肝转移瘤中Ki-67和CD34的阳性表达,并降低NF-κB活性以及Survivin、VEGF和MMP-9的表达水平,同时上调Caspase-3的表达。结论：大黄素可增强吉西他滨对体内外胰腺癌肝转移瘤的增殖抑制和诱导凋亡作用,该作用可能通过下调NF-κB及其调控蛋白而实现。     

蝙蝠葛酚性碱对BxPC-3荷瘤裸鼠细胞凋亡相关基因P53蛋白表达的影响

目的：观察蝙蝠葛酚性碱（PAMD）对胰腺癌（BXPC-3）荷瘤裸鼠肿瘤组织中P53蛋白表达的影响。方法：通过蛋白印迹技术（Western blotting）观察PAMD对胰腺癌细胞株BxPC-3皮下异位移植瘤细胞凋亡相关基因p53蛋白表达的影响。结果：PAMD能够显著降低胰腺癌细胞株BxPC-3裸鼠皮下异位移植瘤组织中p53蛋白表达量。结论：PAMD对胰腺癌细胞株BxPC-3裸鼠皮下异位移植瘤表现出明显抑制作用,能够有效的抑制肿瘤生长,其机理可能与PAMD能够诱导细胞凋亡及影响凋亡相关基因P53蛋白的表达有关。     

大黄素抑制胰腺癌裸鼠原位移植瘤的实验研究

目的:观察大黄素(Emodin)对胰腺癌裸鼠原位移植瘤生长、转移的抑制作用并探讨其机制。方法:建立胰腺癌裸鼠原位移植瘤模型(SOI),随机分为对照组、实验Ⅰ组、实验Ⅱ组等3组(n=10),第3周开始分别经灌胃给予溶媒(0.1%二甲基亚砜)0.2mL/只、大黄素20mg/kg、大黄素40mg/kg,每周3次,共两周。术后第8周处死裸鼠,测量原位肿瘤瘤重并计算抑瘤率;观察荷瘤裸鼠肿瘤转移情况;免疫组织化学法检测肿瘤组织的增殖指数(PI)、微血管密度(MVD)以及金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达。结果:与对照组相比,实验Ⅰ组肿瘤生长未受明显抑制,但转移明显被抑制;实验Ⅱ组肿瘤生长和转移均受显著抑制;实验Ⅰ、Ⅱ组肿瘤组织中PI、MVD及MMP-9的表达均明显降低。结论:大黄素具有抑制胰腺癌裸鼠原位移植瘤生长和转移的作用,这可能是通过抑制胰腺肿瘤MMP-9的表达而实现。     

人参皂苷Rg3对胰腺癌裸鼠皮下移植瘤新生血管的影响

目的探究人参皂苷Rg3对胰腺癌裸鼠皮下移植瘤新生血管形成的影响。方法裸鼠背侧近右后肢处sc胰腺癌SW-1900细胞建立胰腺癌皮下移植瘤模型,将荷瘤裸鼠随机分为对照组及人参皂苷Rg3低、高剂量(10、20 mg/kg)组。给药组ip人参皂苷Rg3,对照组ip0.9%氯化钠溶液,每2天1次,连续4周。给药结束3d后裸鼠脱颈椎处死,取瘤组织。采用免疫组化法检测各组裸鼠瘤组织中内皮细胞标记物CD31表达,计算微血管密度;采用qRT-PCR和Westernblotting法检测各组裸鼠瘤组织中血管内皮钙黏素(vascularendothelialcadherin,VE-cadherin)、络氨酸激酶受体A2(erythropoietin-producing hepatocellular receptor A2,EphA2)m RNA和蛋白表达水平。结果与对照组比较,人参皂苷Rg3组胰腺癌裸鼠皮下移植瘤质量显著降低(P<0.05),微血管密度显著降低(P<0.05),VE-cadherin、EphA2m RNA和蛋白表达水平均显著降低(P<0.05)。结论人参皂苷Rg3可能通过调控VE-cadherin、EphA2m RNA和蛋白表达,从而抑制胰腺癌裸鼠皮下移植瘤新生血管形成。     

表没食子儿茶素没食子酸酯对裸鼠MGC-803细胞移植瘤抑制作用及机制研究

目的:探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对人胃癌MGC-803细胞异种接种的裸鼠肿瘤的抑制作用及其可能的机制。方法:对人胃癌MGC-803细胞异种接种成功的裸鼠腹腔注射不同剂量的EGCG,每天观察裸鼠的一般状态,处死后称重法测定肿瘤抑制率;HE染色观察肿瘤组织内细胞变化;RT-PCR测定Caspase-3 mRNA表达水平;免疫组化法测定Bcl-2、Bax表达;Western blot检测Smo、Gli-1蛋白表达。结果:与模型组相比EGCG(5、10、20mg/kg)对裸鼠肿瘤的抑制率分别为20.4%、21.2%和48.7%;与模型组相比,不同剂量的EGCG不同程度上调Caspase-3 mRNA表达和Bax表达,下调Bcl-2表达,抑制Smo、Gli-1蛋白表达。结论:EGCG可能通过Hedgehog信号抑制人胃癌MGC-803细胞接种的裸鼠移植瘤生长,诱导其凋亡。     

傣百解提取物对人肺癌A549裸鼠移植瘤的影响

目的:探讨傣百解乙酸乙酯提取物(ethyl acetate fraction,EFA)诱导人肺癌A549裸鼠移植瘤生长的抑制作用及作用机制。方法:建立人肺癌裸鼠移植瘤模型,随机分为模型组,EFA高、中、低剂量(200,100,50 mg·kg-1)组,环磷酰胺组和消癌平组,每组6只。给药3周后剥离瘤组织,比较各组肿瘤质量,计算抑制率;末端脱氧核苷酸转移酶介导的d UTP缺口末端标记测定法(TUNEL)检测各组移植瘤组织中的细胞凋亡情况;免疫组化法(immunhistochemical staining,IHC)检测瘤组织中p53,B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白的表达。结果:与模型组比较,EFA高、中、低剂量组对肿瘤组织具有明显的抑制作用(P0.05,P0.01)。TUNEL法检测结果显示EFA给药处理后,与模型组比较,肿瘤细胞凋亡明显增多。免疫组化结果显示,与模型组比较,各给药组移植瘤p53和Bax蛋白表达明显升高,而Bcl-2表达降低。结论:EFA对人肺癌A549裸鼠移植瘤具有明显的抑制作用,其机制可能与上调p53和Bax蛋白的表达,降低Bcl-2蛋白的表达,诱导肺癌细胞凋亡相关。     

芒果多酚对人乳腺癌细胞MCF10DCIS. com裸鼠移植瘤的抑制作用及其对mTOR通路的影响

目的:研究芒果多酚对人乳腺癌细胞MCF10DCIS.com裸鼠移植瘤的抑制作用及其与mTOR通路的相关性。方法:30只裸鼠随机均分为3组,即模型对照组、芒果多酚组、邻苯三酚组,每组10只。建立人乳腺癌细胞MCF10DCIS.com裸鼠移植瘤模型,各组灌胃给予相应药物,连续4周。测定各组裸鼠肿瘤体积的变化,实时荧光定量PCR测定各组裸鼠瘤组织mTOR(哺乳动物雷帕毒素蛋白)基因表达,蛋白免疫印迹法(Western blot)测定各组裸鼠瘤组织mTOR通路蛋白的表达情况。结果:给药4周后芒果多酚组与邻苯三酚组的肿瘤体积均较模型对照组下降70%以上,芒果多酚组与邻苯三酚组瘤组织mTOR基因的相对拷贝数分别为0.57±0.07,0.49±0.11,相较于模型对照组均有显著统计学意义(P0.01),2组瘤组织mTOR、p-mTOR蛋白的表达相较于模型对照组也具有显著统计学意义(P0.01)。结论:芒果多酚对人乳腺癌细胞MCF10DCIS.com裸鼠移植瘤具有抑制作用,其作用机制与mTOR通路的抑制相关。     

黄芪注射液对人鼻咽癌CNE2裸鼠移植瘤的抑制作用

目的探讨黄芪注射液对人鼻咽癌CNE2荷瘤裸鼠的抑瘤作用及其作用机制。方法建立人鼻咽癌CNE2裸鼠多植瘤模型,随机分为对照组,顺铂组,黄芪注射液高、中、低剂量组,分别ip生理盐水,顺铂,10.40、5.20、2.60 g/kg黄芪注射液,4周后处死CNE2荷瘤裸鼠。通过移植瘤生长曲线、终末瘤质量,计算黄芪注射液的抑瘤率;采用HE染色,于光镜下观察各组移植瘤组织细胞病理形态学变化;采用免疫组化法检测黄芪注射液对各组裸鼠移植瘤组织中凋亡相关蛋白p53、Bcl-2和Bax表达的影响。结果黄芪注射液高、中剂量组移植瘤体积明显低于对照组(P0.05),瘤质量明显低于对照组(P0.01),抑瘤率分别为39.90%、30.77%;黄芪注射液高、中剂量组移植瘤组织中p53、Bcl-2蛋白的表达低于对照组(P0.01);各组移植瘤组织中Bax蛋白表达均呈阴性。结论黄芪注射液对人鼻咽癌CNE2荷瘤裸鼠移植瘤具有抑制作用,其机制可能与诱导肿瘤细胞凋亡,降低肿瘤组织中p53和Bcl-2蛋白的表达有关。     

矢车菊素-3-葡萄糖苷抑制体内外卵巢癌生长的作用

目的:探讨矢车菊素-3-葡萄糖苷对体内外卵巢癌生长的影响及其机制。方法:矢车菊素-3-葡萄糖苷作用人卵巢癌细胞株HO-8910PM后,CCK-8法检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡;Western blotting检测卵巢癌细胞中Mucin-4蛋白表达;建立起裸鼠卵巢癌皮下移植瘤模型,观察矢车菊素-3-葡萄糖苷对裸鼠卵巢癌皮下移植瘤生长的影响;免疫组织化学法检测肿瘤组织中Ki-67和Mucin-4的阳性表达。结果:与对照组相比较,矢车菊素-3-葡萄糖苷可显著抑制体外卵巢癌HO-8910PM细胞生长,并明显诱导细胞凋亡;可显著下调卵巢癌细胞中Mucin-4的表达。矢车菊素-3-葡萄糖苷可显著抑制裸鼠卵巢癌皮下移植瘤生长;可明显降低卵巢癌肿瘤组织中Ki-67和Mucin-4的阳性表达。结论:矢车菊素-3-葡萄糖苷可显著抑制体内外卵巢癌生长,该作用可能通过抑制Mucin-4蛋白表达而实现。     

红花组分HSYA对人胃腺癌BGC-823移植瘤裸鼠VEGF蛋白、KDR与缺氧诱导因子表达的影响

目的:研究红花组分羟基红花黄色素A(HSYA)对人胃腺癌皮下移植瘤裸鼠血管内皮生长因子(VEGF)蛋白、含激酶插入区受体(KDR)和缺氧诱导因子(HIF-1α)mRNA与蛋白表达的影响。方法:采用BALB/C nu/nu裸小鼠接种人胃腺癌细胞株BGC-823于右前肢腋部皮下建立裸鼠人癌移植瘤模型,随机分为模型组、对照组、HSYA高、低剂量组(0.056g/L、0.028g/L),观察抑瘤作用,酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测瘤组织VEGF与HIF-1α蛋白以及血清VEGF蛋白表达;蛋白印迹(Western blotting)法测定瘤组织KDR磷酸化蛋白的表达;实时荧光定量PCR(RTFQ-PCR)法检测瘤组织KDR及HIF-1αmRNA表达。结果:HSYA低剂量组抑瘤明显,该组瘤组织及血清VEGF蛋白表达降低,瘤组织KDR磷酸化蛋白表达减弱,与模型组比较差异明显(P0.05,P0.01);HIF-1α蛋白表达较模型组瘤组织明显减少(P0.01)。KDR mRNA表达与模型组相比减弱,差异有统计学意义(P0.05)。结论:一定浓度的HSYA抑制肿瘤生长的可能机制与抑制VEGF、HIF-1α蛋白的表达,减弱KDR蛋白磷酸化及其基因表达,从而抑制内皮细胞活化阻碍肿瘤血管新生以及降低肿瘤缺氧微环境对血管生成的诱导有关。     

人参皂苷免疫纳米对裸鼠人胃癌NUGC-4组织中血管内皮生长因子D表达的影响

目的:观察人参皂苷免疫纳米(VRIN)对裸鼠人胃癌NUGC-4组织中血管内皮生长因子D(VEGF-D)表达的影响,探讨VRIN防治胃癌淋巴转移的作用机制。方法:24只裸鼠建立NUGC-4人胃癌原位移植模型,并随机分为生理盐水组、5-氟尿嘧啶(5-Fu)组及VRIN组,每组8只,分别给予生理盐水、5-Fu和VRIN干预后,采用免疫组织化学和Real time-PCR方法检测瘤组织VEGF-D蛋白及mRNA的表达。结果:与生理盐水组比较,VRIN对胃癌NUGC-4细胞裸鼠淋巴结转移有明显抑制作用,对肿瘤组织中VEGF-D蛋白和mRNA水平的表达有明显下调作用。结论:VRIN可抑制人胃癌细胞祼鼠移植瘤淋巴结转移,调控淋巴管生长因子VEGF-D蛋白和mRNA的表达是VRIN防治胃癌淋巴转移的可能机制之一。     

消痰散结方对荷瘤裸鼠胃癌组织中成纤维细胞活化蛋白表达的影响

目的：观察消痰散结方对MKN-45原位移植瘤裸鼠胃癌组织中成纤维细胞活化蛋白（fibroblast activation protein,FAP）表达的影响,探讨消痰散结方防止胃癌复发转移的作用机制。方法：建立人胃癌MKN-45裸鼠原位移植瘤模型,将40只模型鼠随机分为模型组、生理盐水组、中药组及化疗组,每组10只。观察各组荷瘤鼠肿瘤生长情况及抑瘤率;观察各组荷瘤鼠胃癌组织FAP蛋白及mRNA表达。结果：消痰散结方可明显抑制裸鼠人胃癌MKN-45原位移植瘤的生长,下调胃癌组织中FAP蛋白及mRNA的表达。结论：消痰散结方可以下调FAP蛋白及mRNA的表达,可能是其抗胃癌复发转移的机制之一。