长链非编码RNA GIHCG对非小细胞肺癌恶性表型的影响

目的探讨长链非编码RNA GIHCG(lncRNA GIHCG)对非小细胞肺癌(NSCLC)恶性表型的影响。 方法使用qRT-PCR法分别检测50例NSCLC的肿瘤组织及其癌旁组织中lncRNA GIHCG及正常人支气管上皮细胞系E16HB,NSCLC细胞系A549、H1299、H1650、H2087中lncRNA GIHCG的表达。分别使用小干扰RNA(siRNA-1、siRNA-2)及对照转染A549和H1299细胞,实验设siRNA-1转染组、siRNA-2转染组、阴性对照组和空白对照组。各组转染48 h后采用CCK-8实验检测细胞增殖活性,Transwell实验检测细胞侵袭能力,流式细胞术检测各组细胞周期变化。 结果qRT-PCR结果显示,lncRNA GIHCG在肺癌组织中的表达水平明显高于癌旁组织,同时非小细胞肺癌细胞系A549、H1299、H1650、H2087中lncRNA GIHCG的表达均高于16HBE细胞,差异有统计学意义(P<0.05)。转染48 h后,与空白对照组和阴性对照相比,siRNA-1组和siRNA-2组细胞存活率明显下降,穿膜细胞数明显减少,G0/G1期细胞比例明显增加,S期细胞减少,差异均有统计学意义,而阴性对照组和空白对照组上述指标差异均无统计学意义。 结论lncRNA GIHCG高表达于NSCLC组织及细胞系中,沉默lncRNA GIHCG表达可明显抑制NSCLC恶性生物学表型。     

lncRNA ADPGK-AS1通过调控miR-217表达对非小细胞肺癌细胞增殖和凋亡的影响

目的研究lncRNA ADPGK-AS1和miR-217在非小细胞肺癌中的表达及其对非小细胞肺癌A549细胞增殖和凋亡的影响。方法以癌旁组织为对照,qRT-PCR检测lncRNA ADPGK-AS1和miR-217在116例非小细胞肺癌组织中的表达水平,双荧光素酶报告系统验证ADPGK-AS1和miR-217的调控关系,在A549细胞中转染si-ADPGK-AS1和miR-217以抑制lncRNA ADPGK-AS1和过表达miR-217,MTT法和流式细胞术检测A549细胞增殖和凋亡,Western blot检测细胞中CyclinD1、p21、Bax和Bcl-2的蛋白表达水平。结果与癌旁组织相比,在116例非小细胞肺癌组织中lncRNA ADPGK-AS1的含量显著升高(P0.05),miR-217的含量则显著下降(P0.05);lncRNA ADPGK-AS1靶向负调控miR-217的表达;抑制ADPGK-AS1表达和过表达miR-217均可抑制非小细胞肺癌A549细胞增殖并促进细胞凋亡,使细胞中CyclinD1和Bcl-2含量降低(P0.05),p21和Bax含量升高(P0.05);干扰miR-217表达逆转了抑制ADPGK-AS1表达对A549细胞增殖、凋亡的作用。结论 LncRNA ADPGK-AS1可能通过靶向miR-217促进非小细胞肺癌A549细胞增殖,抑制细胞凋亡。LncRNA ADPGK-AS1可能是非小细胞肺癌的潜在分子靶点。     

非小细胞肺癌组织中长链非编码RNA-THOR的表达意义及生物学作用

目的探讨非小细胞肺癌(non-small-cell lung cancer, NSCLC)癌组织和癌旁正常组织中睾丸相关高度保守的致癌长链非编码RNA(testis-associated highly-conserved oncogenic long non-coding RNA,THOR)的表达及其与NSCLC临床病理特征关系;并初步探讨其作用和机制。方法选取79例诊断确认的NSCLC患者癌组织和其对应的癌旁正常组织(距离肿瘤组织5cm),采用实时荧光PCR方法,比较THOR在二者中的表达差异情况,并通过肿瘤直径、组织学类型、TMN分期、分化程度等临床病理特征因素分析THOR表达量与患者预后的相关性。瞬时转染siRNA沉默A549细胞中THOR的表达,通过CCK-8法检测对细胞增殖的影响,Western blot法检测,对细胞周期蛋白cyclin D1及凋亡相关蛋白Bcl2、BAX、cleaved-caspase-3的影响。结果实时荧光RT-PCR结果显示NSCLC癌组织中的THOR表达量显著高于对应的癌旁正常组织,差异具有统计学意义(P0.05)。THOR的表达量与肿瘤直径、TMN分期及分化程度因素有相关性(P0.05)。THOR高表达的NSCLC患者生存率低于THOR低表达的NSCLC患者。THOR表沉默后,A549细胞增殖受到抑制,cyclin D1及Bcl2表达降低,BAX、cleaved-caspase-3蛋白表达增多。结论 THOR在NSCLC癌组织中的高表达,与NSCLC发生、发展及临床病理特征关系密切;并促进A549细胞增殖,并拮抗细胞凋亡,其可能的机制与调控周期蛋白cyclin D1表达有关。     

沉默lncRNA TPT1-AS1对非小细胞肺癌生物学行为的影响及机制研究

目的研究长链非编码RNA(lncRNA)TPT1-AS1在非小细胞肺癌组织中的表达及对沉默lncRNA TPT1-AS1非小细胞肺癌生物学行为的影响及机制。方法检测非小细胞肺癌组织和癌旁组织lncRNA TPT1-AS1表达情况,做细胞培养及lncRNA TPT1-AS1转染,分为空白组、过表达组、沉默组,过表达组转染si-TPT1-AS1-NC质粒,沉默组转染si-TPT1-AS1质粒,空白组细胞不做任何处理,转染24h后鉴定转染效率。检测各组细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭及PTEN-PI3K-AKT信号通路蛋白表达情况。结果与癌旁组织相比,癌组织TPT1-AS1 mRNA表达量升高(P0.05)。与空白组相比,过表达组TPT1-AS1 mRNA表达量升高,沉默组TPT1-AS1 mRNA表达量降低(P0.05),说明转染成功。与过表达组相比,沉默组各时间点细胞增殖率、细胞迁移数、侵袭数、p-PI3K、p-AKT、MMP-2、MMP-9、Bcl-2蛋白表达量降低,凋亡率、PTEN、Bax蛋白表达量升高(P0.05)。结论 lncRNA TPT1-AS1在非小细胞肺癌组织高表达,沉默lncRNA TPT1-AS1可抑制肺癌细胞增殖、迁移、侵袭,促进凋亡,其机制可能与调控PTEN-PI3K-AKT信号通路相关。     

着丝粒蛋白F在非小细胞肺癌组织中的表达及其对A549细胞生物学行为的影响研究

背景非小细胞肺癌(NSCLC)占肺癌的85%左右,由于易错失最佳手术切除时机,且放化疗效果不佳,导致生存率偏低。而着丝粒蛋白F(CENPF)是在多种癌症中高表达的分子,探讨其对肺癌细胞生物学行为的影响,将有助于NSCLC的靶向治疗。目的探讨CENPF在NSCLC组织中的表达及其对A549细胞生物学行为的影响。方法收集2018年10月—2019年10月于西安医学院第一附属医院行外科切除手术的26例NSCLC患者的癌组织、癌旁组织标本。采用Western blotting法检测NSCLC组织、癌旁组织中CENPF表达水平。取生长良好的对数期A549细胞,将其分为对照组、阴性对照组、CENPF抑制组,其中对照组A549细胞不进行转染处理,阴性对照组、CENPF抑制组A549细胞使用Lipofectamine 2000转染试剂分别转染阴性对照(NC)-干扰性小核糖核酸(si RNA)、CENPF-si RNA。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(q PCR)法检测三组A549细胞中CENPF m RNA表达水平,细胞计数试剂盒8(CCK-8)法检测A549细胞增殖情况[吸光度(OD)值],流式细胞仪检测A549细胞凋亡情况、A549细胞周期,Western blotting法检测A549细胞中CENPF、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、B淋巴细胞瘤-2基因相关X蛋白(Bax)表达水平。结果 NSCLC组织中CENPF表达水平高于癌旁组织(P <0.05)。CENPF抑制组A549细胞中CENPF m RNA表达水平低于对照组、阴性对照组(P<0.05)。CENPF抑制组A549细胞OD值低于对照组、阴性对照组(P<0.05)。CENPF抑制组A549细胞凋亡率高于对照组、阴性对照组(P <0.05)。CENPF抑制组G0/G1期A549细胞所占比例高于对照组、阴性对照组,S期、G2/M期A549细胞所占比例低于对照组、阴性对照组(P <0.05)。CENPF抑制组A549细胞中CENPF、cyclin D1表达水平低于对照组、阴性对照组,Bax表达水平高于对照组、阴性对照组(P <0.05)。结论 CENPF在NSCLC组织中表达升高,其可通过影响cyclin D1、Bax表达水平来影响A549细胞周期进展及增殖、凋亡过程;下调其表达可将A549细胞周期阻滞于G0/G1期,抑制细胞增殖并诱导其凋亡。     

β-arrestin1在非小细胞肺癌中的表达及其对肺癌细胞增殖的影响

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)细胞系和组织中β-arrestin1的表达及β-arrestin1对肺癌细胞增殖能力的影响。方法收集该院经手术治疗的30例NSCLC患者的癌组织标本(NSCLC组)和肺良性病变边缘正常肺组织标本(对照组),培养NSCLC细胞系(SPC-A-1、H460、H520、H1975)和人正常肺上皮细胞系16HBE,分别提取NSCLC组、对照组及细胞系总RNA,逆转录后,实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)用于检测β-arrestin1 mRNA的表达,蛋白印迹法(Western印迹)和免疫组化(IHC)分别检测细胞系和组织中的β-arrestin1蛋白的表达水平。MTT实验检测分别转染sh-β-arrestin1质粒和对照质粒sh-control到SPC-A-1细胞后对NSCLC细胞SPC-A-1增殖能力的影响。结果β-arrestin1 mRNA和蛋白表达水平在NSCLC组织和细胞系中分别高于对照组和16HBE细胞(P<0.05)。转染sh-β-arrestin1质粒后,β-arrestin1 mRNA和蛋白表达水平均显著下调,且在MTT实验中可显著抑制ASPC-A-1的增殖能力(P<0.05)。结论β-arrestin1在NSCLC组织和细胞系中呈高表达,且可以抑制肺癌细胞的增殖。     

长链非编码RNA ZNF667-AS1在非小细胞肺癌组织中表达上调

目的:探讨非小细胞肺癌（NSCLC）组织中长链非编码RNA（lncRNA） 锌指蛋白667反义RNA1（ZNF667-AS1）的表达水平。方法： 97例NSCLC患者被纳入本研究，术中留取新鲜的癌组织及对应癌旁组织，采用实时定量聚合酶链式反应（PCR）法检测lncRNA ZNF667-AS1和血管内皮生长因子（VEGF）的表达，分析lncRNA ZNF667-AS1的表达与NSCLC患者临床病理特征的关系，绘制受试者工作特征（ROC）曲线，评估lncRNA ZNF667-AS1用于诊断NSCLC的价值，分析癌组织中VEGF的表达与lncRNA ZNF667-AS1表达的相关性。结果：PCR检测结果显示，97例NSCLC患者癌组织中lncRNA ZNF667-AS1的平均相对表达量明显高于癌旁组织（P<0.05）。不同性别、年龄、肿瘤直径及病理组织类型的NSCLC患者癌组织中lncRNA ZNF667-AS1相对表达量比较，差异无统计学意义（P均＞0.05），但不同组织分化程度、临床分期、浸润程度及有无淋巴结转移的患者癌组织中lncRNA ZNF667-AS1相对表达量比较，差异有统计学意义（P均<0.05）。实时荧光定量PCR检测结果显示，NSCLC癌组织中VEGF的相对表达量明显高于癌旁组织（P<0.01），NSCLC癌组织中lncRNA ZNF667-AS1的相对表达量与VEGF的表达呈正相关（P<0.05）。由ROC曲线可知，lncRNA ZNF667-AS1诊断NSCLC的AUC为0.792（95%CI：0.683-0.911，P﹤0.05），特异性为81.23%，敏感度为86.12%。结论： lncRNA ZNF667-AS1在NSCLC组织中表达上调，其可能作为一种促癌因子参与NSCLC的发生发展过程。     

MiR-32对非小细胞肺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及机制

目的探讨miR-32靶向CCNE2调控非小细胞肺癌(NSCLC)细胞的增殖、迁移和侵袭的机制。方法实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)检测30例NSCLC患者癌组织及其匹配癌旁组织和支气管上皮细胞株16-HBE及NSCLC细胞株A549、H460和H1299中miR-32 mRNA表达水平;选择A549和H1299细胞为研究对象,将细胞随机分8组:NC组(转染miR-NC)、miR-32组(转染miR-32 mimics)、NC inhibitor组(转染miR-32-NC)、miR-32 inhibitor组(转染miR-32 inhibitor)、si-NC组(转染对照干扰RNA)、si-CCNE2组(转染CCNE2干扰RNA)、miR-32+vector(共转染miR-32 mimics和pcDNA3.1)、miR-32+CCNE2组(共转染miR-32 mimics和pcDNA3.1-CCNE2),转染按照Lipofectamine^TM2000试剂进行。qRT-PCR检测转染效果,qRT-PCR和Western印迹分别检测CCNE2 mRNA和蛋白...     

非小细胞肺癌组织中TP酶激活蛋白SH3功能结合蛋白2的表达及临床意义

目的 检测非小细胞肺癌(NSCLC)组织和细胞中TP酶激活蛋白SH3功能结合蛋白2(G3BP2)的表达情况，分析G3BP2对NSCLC细胞增殖、侵袭和凋亡的影响。方法 收集NSCLC患者120例，腺癌47例，鳞状细胞癌73例。免疫组织化学检测腺癌、鳞状细胞癌组织中G3BP2的表达情况，分析G3BP2表达与患者临床病理特征的关系。蛋白免疫印迹实验和qRT-PCR检测SPC-A-1、16HBE细胞中G3BP2的表达。对NCI-H226、SPC-A-1细胞转染si-NC、si-G3BP2质粒，检测敲低G3BP2对细胞增殖、侵袭和凋亡的影响。结果 腺癌组织和鳞状细胞癌组织中G3BP2的阳性表达率无统计学差异(P>0.05),G3BP2阳性与TNM分期、淋巴结转移有关(P<0.05)。NCI-H226和SPC-A-1细胞中G3BP2蛋白及mRNA的表达高于16HBE细胞。敲低G3BP2可明显抑制NCI-H226、SPC-A-1细胞的增殖和侵袭并增强细胞凋亡。结论 G3BP2在NSCLC组织中的阳性表达与TNM分期、淋巴结转移有关，敲低G3BP2的表达可显著抑制NSCLC的进展。     

长链非编码RNA EXOC7在非小细胞肺癌中的表达及临床意义分析

目的分析长链非编码RNA(lncRNA)EXOC7在非小细胞肺癌中的表达及临床意义。方法本研究纳入2015年1月~2018年5月收治的75例非小细胞肺癌患者,采用实时定量反转录聚合酶链反应(qRT-PCR)方法检测lncRNA EXOC7在非小细胞肺癌组织及对应癌旁组织中的表达,比较癌及癌旁组织中lncRNA EXOC7的表达差异性,并分析癌组织中lncRNA EXOC7的表达与患者临床病理特征及预后的关系。结果非小细胞肺癌组织中lncRNA EXOC7的相对表达水平(7.88±1.04)明显高于癌旁组织(1.33±0.79),差异具有统计学意义(P<0.001)。不同性别、年龄、病理类型、组织分化程度的非小细胞肺癌患者组织中lncRNA EXOC7的表达无明显差异性(P>0.05),但不同TNM分期、淋巴结转移状况与非小细胞肺癌患者组织中lncRNA EXOC7的表达存在显著差异性(P<0.05)。lncRNA EXOC7高表达组无进展生存期[(10.09±1.93)个月]明显短于低表达组[(19.77±2.16)个月],差异有统计学意义(P<0.05)。lncRNA EXOC7高表达组总生存期[(14.82±2.05)个月]明显短于低表达组[(26.18±2.87)个月],差异有统计学意义(P<0.05)。结论lncRNA EXOC7在非小细胞肺癌组织中表达上调,其可能作为一种促癌因子参与非小细胞肺癌的发生及发展过程,并与患者的不良预后有关。     

lncRNA相关因子对食管癌细胞增殖和侵袭的影响

目的研究lncRNA相关因子在食管癌细胞中对其增殖和侵袭生物学行为的调控,为食管癌的诊断和治疗提供依据。方法收集食管癌组织和癌旁组织样品各46份,分别提取RNA,采用RT-PCR检测MEG 3和linc02471,分析两者在食管癌组织和癌旁组织中表达的差异性。分别建立空载组和过表达组并进行细胞增殖试验,设计siRNA对MEG 3和linc02471进行抑制试验。采用Transwell小室对食管癌细胞中过载组、抑制组和空白组进行增殖活性和侵袭活性检测。结果 MEG 3和linc02471食道癌组织的相对表达量为(0.41±0.02)和(0.49±0.03),MEG 3和linc02471癌旁组织的相对表达量为(1.31±0.12)和(1.27±0.14)。MEG 3和linc02471在食道癌组织的表达水平低于对应的癌旁组织。抑制组MEG 3和linc02471相对表达量为(0.61±0.04)和(0.57±0.03),空白组MEG 3和linc02471相对表达量为(1.02±0.09)和(0.96±0.09),抑制组MEG 3和linc02471表达水平低于空白组。对基于MEG 3和linc02471设计的siRNA能抑制MEG 3和linc02471表达。MEG 3和linc02471的低表达时,食道癌细胞增殖活性上升。增殖活性和侵袭活性试验显示,MEG 3和linc02471过表达组食管癌细胞侵袭活性降低至原有活性的0.6~0.8倍,抑制组食管癌细胞侵袭活性提升至原有活性的1.5~2倍。结论 MEG 3和linc02471的过表达能够抑制食管癌细胞,可为肿瘤的诊断和治疗提供依据。     

微RNA-29家族降解PTEN mRNA促进非小细胞肺癌细胞存活与淋巴结侵袭

目的:探索微RNA(microRNA,miRNA/miR)-29家族对淋巴结侵袭性非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞增殖、侵袭的影响及潜在的分子机制.方法:TCGA数据库分析磷酸酶和张力蛋白同源基因(phosphatase and tension homology de...     

鸟嘌呤核苷酸抑制因子2基因表达与肝癌细胞迁移和侵袭能力的关系

目的:探讨鸟嘌呤核苷酸抑制因子2(RhoGDI2)对肝癌细胞迁移和侵袭能力的影响。方法:选取肝癌细胞株HCCLM3细胞,随机分为对照组、空白转染组和shRNA转染组,其中空白转染组转染空白质粒,shRNA转染组转染RhoGDI2-shRNA,采用MTT法检测各组细胞增殖,Transwell试验检测各组细胞迁移及侵袭能力,qRT-PCR检测各组细胞RhoGDI2 mRNA表达,Western blot检测各组细胞MMP-9、pAKT和VEGF表达。结果:shRNA转染组细胞RhoGDI2 mRNA相对表达量为(0.201±0.082),明显低于对照组和空白转染组(P<0.05);shRNA转染组细胞培养6 h、12 h和24 h时OD值分别为(0.312±0.110)、(0.562±0.107)和(0.700±0.110),明显低于对照组和空白转染组(P<0.05);shRNA转染组细胞迁移率和穿膜细胞数分别为(0.310±0.030)%和(9.28±1.11)个,明显低于对照组和空白转染组(P<0.05);shRNA转染组细胞MMP-9、pAKT和VEGF相对表达量分别为(0.762±0.100)、(0.201±0.092)和(0.501±0.101),明显低于对照组和空白转染组(P<0.05)。结论:下调RhoGDI2表达,可抑制肝癌细胞增殖、迁移及侵袭能力,值得进一步研究。     

METTL14在非小细胞肺癌中的表达以及预后意义

目的探讨METTL14在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达以及与预后之间的相关性。方法收集我院2015年1月-2016年7月收治并行手术切除术的64例NSCLC患者癌变组织(研究组)及相应的癌旁正常组织(对照组),采用实时荧光定量(qRT-PCR)检测组织中METTL14 mRNA的表达,westernblot检测METTL14蛋白表达。比较两组间METTL14的表达与临床病理特征之间的关系,绘制Kaplan-Meier生存曲线,采用多因素Cox回归模型分析独立预后因素。结果METTL14 mRNA在研究组与对照组中的相对表达量分别为(3.03±1.02)、(1.01±0.04),METTL14蛋白在研究组与对照组中的相对表达量分别为(0.21±0.05)、(0.13±0.03),METTL14 mRNA与蛋白在NSCLC癌变组织中的表达较癌旁正常组织高(P均<0.05);TNMⅢ+Ⅳ级、合并淋巴转移的NSCLC患者METTL14高表达的比例较高(P均<0.05),METTL14高、低表达与患者的年龄、性别、病理类型以及吸烟史无关(P均>0.05),METTL14高、低表达的NSCLC患者中位生存时间分别为23.5、34.5个月,总生存率分别为15.63%、46.88%,METTL14低表达的NSCLC患者预后优于METTL14高表达患者(P均<0.05)。Cox回归模型分析发现METTL14高表达、TNMⅢ+Ⅳ级是影响NSCLC患者生存的独立预后因素(P均<0.05)。结论METTL14在NSCLC组织中高表达,且与患者TNM分级、淋巴转移相关,可能参与了NSCLC的发生发展,提示NSCLC患者预后不良。     

非小细胞肺癌中IGF1、IGFBP2表达与预后的相关性分析

目的探讨非小细胞肺癌组织胰岛素样生长因子1(IGF1)、胰岛素样生长因子结合蛋白2(IGFBP2),蛋白表达与患者临床病理特征及预后的关系。方法将226例确诊的非小细胞肺癌患者癌组织为非小细胞肺癌组;选取其癌旁正常组织为癌旁对照组。检测癌组织及癌旁正常组织IGF1、IGFBP2蛋白表达水平;分析非小细胞肺癌患者癌组织IGF1与IGFBP2蛋白表达相关性及其与预后的关系;并分析影响非小细胞肺癌患者预后的因素。结果非小细胞肺癌组IGF1、IGFBP2蛋白高表达率高于癌旁对照组(P<0.05)。非小细胞肺癌患者癌组织IGF1、IGFBP2蛋白表达与肿瘤大小、淋巴结转移、组织分化程度、TNM分期有关(P<0.05)。非小细胞肺癌患者癌组织IGF1与IGFBP2蛋白表达呈正相关(r=0.472,P<0.05)。IGF1、IGFBP2高表达患者五年生存率(33.33%、29.41%)低于低表达患者(69.23%、73.33%)(P均<0.05)。IGF1高表达、IGFBP2高表达、TNMⅢ～Ⅳ期是影响非小细胞肺癌患者死亡的独立危险因素(P<0.05)。结论 IGF1、...