妊娠期高血压疾病患者胎盘细胞凋亡与caspase-3和bcl-2蛋白表达的关系

目的研究妊娠期高血压疾病(HDP)胎盘细胞凋亡以及与caspase-3蛋白和bcl-2蛋白的关系,进一步探讨HDP的可能发病机制。方法流式细胞术(FCM)和western blot法检测胎盘组织(正常胎盘、妊娠期高血压、轻度子痫前期、重度子痫前期各15例)细胞的凋亡率及caspase-3蛋白和bcl-2蛋白表达。结果 FCM发现,随着HDP病情加重,胎盘细胞凋亡率增大,组间比较差异有统计学意义(P<0.05),同时western blot发现与正常对照组比较,caspase-3蛋白随HDP的加重表达逐渐升高(P<0.05),而bcl-2蛋白随HDP的加重表达逐渐降低(P<0.05)。结论 HDP患者胎盘细胞凋亡率明显增高,caspase-3蛋白表达增高,bcl-2蛋白表达降低,caspase-3蛋白和bcl-2蛋白表达失衡可能与HDP发生有关。     

细胞因子与胎儿宫内发育受限胎盘凋亡相关性研究

目的探讨胎儿宫内生长受限(FGR)中细胞因子对胎盘细胞凋亡的调节。方法 20例FGR组和25例足月正常体重儿(对照组),采用放射免疫分析法测定脐血中表皮生长因子(EGF),肿瘤坏死因子a(TNF—α)浓度。末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)法检测胎盘细胞凋亡指数(AI)。结果与对照组比较,FGR组脐血EGF浓度明显降低(P<0.01),TNF—α明显升高(P<0.05),胎盘AI明显升高(P<0.01)。FGR组中脐血EGF浓度与胎盘细胞AI呈负相关(P<0.05),TNF—α与AI呈正相关(P<0.05)。在正常对照组中EGF、TNF—α与AI无相关性(P>0.05)。结论FGR脐血中EGF水平降低,TNF—a升高,可能引起胎盘凋亡细胞增加,抑制胎儿生长。     

水通道蛋白3、9在特发性羊水过多产妇胎盘和胎膜中的表达变化及意义

目的 探讨水通道蛋白(AQP)3、9在特发性羊水过多产妇胎盘和胎膜中的表达、分布及其在特发性羊水过多发病巾的作用.方法 2006年6月至2008年3月,选择在温州医学院附属第二医院产科住院并分娩的21例特发性羊水过多的足月产妇为研究组,同期分娩的30例羊水量正常的足月产妇为对照组.采用实时荧光定量PCR技术,检测两组产妇胎盘、胎膜中AQP3、9 mRNA的表达及分布,采用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白.过氧化物酶(SP)连接法枪测两组产妇胎盘、胎膜中AQP3、9蛋白的表达及分布.结果 (1)两组产妇羊膜、绒毛膜、胎盘中均可检测到AQP3、9 mRNA的表达.AQP3、9主要表达于羊膜上皮细胞、绒毛膜滋养细胞、胎盘滋养细胞.(2)研究组羊膜上皮细胞AQP3、9 mRNA的表达分别为对照组的5.00倍和3.25倍,而研究组绒毛膜滋养细胞AQP3、9 mRNA的表达分别为对照组的2.03倍和2.08倍,分别比较,差异均有统计学意义(P<0.01);但是研究组胎盘滋养细胞AQP3、9 mRNA的表达均明显低于对照组,差异也有统计学意义(P<0.01).(3)AQP3、9蛋白在研究组羊膜上皮细胞的表达强度为7.5±2.0、11.1±1.8,对照组为5.3 ±1.6、5.6±2.3,两组比较,差异有统计学意义(P<0.05);AQP3、9蛋白在研究组绒毛膜滋养细胞的表达强度为7.5±2.0、10.0±1.6,对照组为5.4±2.2、5.6±2.1,分别比较,差异也有统计学意义(P<0.05),但是AQP3、9蛋白在胎盘滋养细胞的表达强度(3.5±1.4、4.0 ±2.5)较对照组(5.6±1.3、7.1±2.9)明显下调(P<0.05).结论 AQP3、9在特发性羊水过多产妇胎盘和胎膜中的表达变化可能为羊水增加后的代偿性反应,其调节机制尚待进一步研究.     

低蛋白饮食、尼古丁皮下注射和自然选择形成的胎儿生长受限大鼠模型胎盘细胞凋亡研究

目的探讨低蛋白饮食喂养、尼古丁皮下注射及自然选择3种方法形成的胎儿生长受限(FGR)大鼠模型胎盘细胞凋亡情况及所致大鼠FGR可能的致病机制。方法 2018年6月至2019年1月于南方医科大学南方医院动物实验中心将26只Wistar雌鼠随机分为非干预组(n=14)、低蛋白饮食组(n=6)和尼古丁注射组(n=6)。非干预组大鼠正常饲养,低蛋白饮食组及尼古丁注射组分别采用相应干预手段建立FGR模型。非干预组共获子鼠132只,有12只出生体重低于同组平均体重2个标准差的FGR弱仔,收集弱仔胎盘作为研究组1(自然选择组);低蛋白饮食组共获子鼠67只,其中FGR弱仔20只,随机选择18只弱仔胎盘作为研究组2(低蛋白饮食组)。尼古丁注射组共获子鼠60只,其中FGR弱仔21只,随机选择18只弱仔胎盘作为研究组3(尼古丁注射组)。在非干预组随机选择42只适龄幼仔胎盘作为正常对照组。采用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)染色检测各组胎盘细胞凋亡率,逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR)检测细胞凋亡因子(Bax、Bcl-2、p53、Fas和Fas-L)mRNA表达水平,免疫组织化学染色检测蛋白表达水平。结果低蛋白饮食和尼古丁皮下注射均成功建立FGR大鼠模型,其FGR发生率明显高于非干预组(正常对照组)(29.89%,35%vs. 9.09%,P0.05)。自然选择组和尼古丁注射组胎盘细胞凋亡率均显著高于正常对照组[(66.120±14.611)%,(73.046±13.666)%vs.(28.740±27.184)%,P0.01];低蛋白饮食组胎盘细胞凋亡率稍高于正常对照组,差异无统计学意义。与正常对照组相比,研究组1中Bcl-2、Fas-L表达水平显著降低[mRNA表达水平:Bcl-2(0.257±0.043)vs.(1.000±0.260),P0.01;Fas-L(0.285±0.065)vs.(1.000±0.196),P0.01;蛋白表达水平:Bcl-2 34.60 vs. 54.63,P0.01;Fas-L 31.93 vs.64.65,P0.01];研究组2中Bcl-2、Fas-L表达水平显著降低[m RNA表达水平:Bcl-2(0.261±0.029)vs.(1.000±0.260),P0.01;Fas-L(0.423±0.032)vs.(1.000±0.196),P0.01;蛋白表达水平:Bcl-2 40.05 vs. 54.63,P0.01;Fas-L 32.45 vs. 64.65,P0.01];p53表达水平显著升高[m RNA表达水平:(1.433±0.151)vs.(1.000±0.242),P0.01;蛋白表达水平:48.00 vs. 29.10,P0.01];研究组3中Bax、p53、Fas表达水平显著升高[mRNA水平:Bax(1.438±0.177)vs.(1.000±0.113),P0.01;p53(2.176±0.356)vs.(1.000±0.0.242),P0.01;Fas(1.335±0.076)vs.(1.000±0.090),P0.01;蛋白表达水平:Bax 52.10 vs. 36.45,P0.05;p53 52.90 vs. 29.10,P0.01;Fas 49.03 vs.30.35,P0.05];Bcl-2、Fas-L表达水平显著降低[mRNA水平:Bcl-2(0.213±0.024)vs.(1.000±0.0.260,P0.01);Fas-L(0.503±0.100)vs.(1.000±0.0.196),P0.01;蛋白表达水平:Bcl-2 32.73 vs. 54.63,P0.01;Fas-L 32.98 vs.64.65,P0.01]。结论 3种因素所致大鼠FGR胎盘细胞凋亡率均显著升高,说明胎盘细胞凋亡与FGR形成存在关系。低蛋白饮食、尼古丁及自然因素所致FGR大鼠胎盘细胞凋亡途径、凋亡相关因子各不相同,说明不同因素诱发FGR的机制也不完全一致。     

邻苯二甲酸二(2-乙基己)酯对原代培养的人早孕绒毛细胞滋养细胞凋亡的影响

目的 探讨邻苯二甲酸二(2-乙基己)酯(DEHP)对原代培养的人早孕绒毛细胞滋养细胞凋亡及凋亡相关基因Bcl-2和bax表达的影响.方法 用浓度为0、25、50、100 μmol/L的DEHP作用于原代培养的人早孕绒毛细胞滋养细胞24 h,逆转录(RT)PCR法检测滋养细胞凋亡相关基因Bcl-2和bax的mRNA表达水平;蛋白印迹法检测Bcl-2和bax的蛋白表达水平;原位末端脱氧核苷酸转移酶标记(TUNEL)法和双染流式细胞术检测细胞滋养细胞凋亡情况.结果 (1)Bcl-2表达水平:当DEHP浓度为0、25、50、100 μmol/L时,Bcl-2 mRNA表达水平分别为1.00±0.05、1.03±0.04、1.04±0.03、1.04±±0.04,分别比较,差异均无统计学意义(P>0.05);Bcl-2蛋白表达水平分别为0.11±0.02、0.11±0.04、0.12±0.02、0.12±0.03,分别比较,差异也无统计学意义(P>0.05).(2)bax表达水平:当DEHP浓度为50、100 μmol/L时,bax mRNA表达水平分别为0.96±0.04、1.02±0.04,与DEHP浓度为0 μmol/L时(0.81±0.05)比较,差异有统计学意义(P<0.05),bax蛋白表达水平分别为0.63±0.04、0.81±0.04,与DEHP浓度为0 μmol/L时(0.23±0.05)比较,差异也有统计学意义(P<0.05).(3)细胞凋亡率:浓度为50、100 μmol/L的DEHP作用24 h后,双染流式细胞术检测细胞滋养细胞凋亡率分别为(18.8±2.6)%和(20.3±2.0)%,与DEHP浓度为0 μmol/L时[(10.6±1.4)%]比较,差异有统计学意义(P<0.05);TUNEL法检测细胞滋养细胞凋亡率为(18.1±4.6)%和(19.5±1.2)%,与DEHP浓度为0 μmol/L时[(11.2±3.1)%]比较,差异也有统计学意义(P<0.05).结论 DEHP可通过增加细胞凋亡相关基因bax的表达,促进细胞滋养细胞凋亡,但对Bcl-2的表达无明显影响.     

达那唑海藻酸钠微球用于豚鼠子宫肌瘤动脉栓塞术后细胞凋亡的研究

目的 研究达那唑海藻酸钠微球(DKMG)用于子宫肌瘤动脉栓塞术后细胞凋亡的特点.方法 2005年6月至11月于北京协和医院实验动物中心,对24只豚鼠采用雌孕激素负荷法建立子宫肌瘤模型,雌孕激素负荷16周后,随机分为3组:即DKMG栓塞组(DKMG组,8只)、海藻酸钠微球(KMG)栓塞组(KMG组,8只)和未进行子宫动脉栓塞组(对照组,8只).豚鼠双侧子宫动脉栓塞术在麻醉下开腹直视下进行.于子宫动脉栓塞术4周后,用TUNEL法检测肌瘤细胞凋亡情况,同时用免疫组织化学方法检测肌瘤组织中Bcl-2蛋白的表达.结果 DKMG组、KMG组和对照组TUNEL法凋亡细胞比率分别为:(44.6±11.9)%,(33.7±7.3)%和(22.8±9.7)%.DK-MG和KMG组间凋亡细胞比率比较,差异有统计学意义(P<0.05),DKMG组、KMG组和对照组Bcl-2免疫组化染色H评分值分别为:2.7±0.7,2.1±0.3和1.3±0.6.3组间H评分值比较,差异有统计学意义(P<0.05).结论 达那唑海藻酸钠微球用于子宫肌瘤动脉栓塞术可造成细胞凋亡增加,其机制为微球中达那唑药物的局部释放,增加了子宫平滑肌细胞的凋亡比率.     

胎盘组织中血凝素样氧化低密度脂蛋白受体1和凋亡相关基因的表达与子痫前期发病的关系

目的 探讨胎盘组织中血凝素样氧化低密度脂蛋白受体1(LOX-1)和凋亡相关基因easpase-3、Bax及bcl-2的表达及其与子痫前期发病的关系.方法 选择2005年6月-2006年12月在中国医科大学附属盛京医院产科住院的子痫前期患者30例(子痫前期组),以同期正常孕妇40例为对照组.采用免疫组化、RT.PCR技术和蛋白印迹(western-blot)法检测两组孕妇不同孕周胎盘组织中LOX-1和caspase-3、Bax及bel-2的表达.结果 (1)子痫前期组20周+1～24周、24周+1～28周、28周+1-32周、32周+1～36周、36周+1～40周孕妇胎盘组织中LOX-1蛋白表达水平分别为20.1±1.8、25.6±1.3、32.8±1.6、34.3±1.5、39.9±1.2,对照组分别为11.2±0.6、18.5±1.6、26.1±1.8、28.3±1.6、32.3±1.6,两组分别比较,差异均有统计学意义(P<0.05);子痫前期组孕妇胎盘组织中easpase-3蛋白表达水平分别为12.3±0.9、16.3 4-0.9、24.4±0.8、28.3±0.5、36.3±1.1,对照组分别为8.5±1.0、12.3±1.1、17.4±1.2、20.4±0.5、24.2±1.3,两组比较,差异均有统计学意义(P<0.05).(2)子痫前期组不同孕周孕妇胎盘组织中LOX-1、easpase-3及Bax mRNA和蛋白的表达水平明显高于对照组,两组比较,差异有统计学意义(P<0.05);bel-2 mRNA和蛋白的表达趋势与Bax表达结果相反.结论 LOX-1和caspase-3、Bax在子痫前期患者胎盘组织中表达上调,bcl-2表达下调,-与子痫前期发病有关.     

蛋白酶体抑制剂MG132逆转子宫颈癌细胞HCE1多细胞球体对顺铂耐药的研究

目的 构建宫颈鳞癌细胞系HCE1的多细胞球体模型,研究蛋白酶体抑制剂MG132对其顺铂天然耐药的影响,探讨MG132是否可以逆转HCE1多细胞球体的天然耐药及其可能的机制.方法 (1)采用液体重叠法和旋转法建立HCE1多细胞球体模型;(2)用MG132、顺铂分别干预HCE1单层细胞及多细胞球体,分为MG132组、顺铂组、MG132+顺铂组、对照组,锥虫蓝拒染法检测细胞抑制率,流式细胞仪检测细胞周期及凋亡率;(3)用蛋白印迹法和免疫组化方法分别检测HCE1单层细胞及药物干预前后多细胞球体中核因子kB(NF-kB)和B细胞淋巴瘤/白血病2蛋白(bcl-2)的表达.结果 (1)成功建立了HCE1多细胞球体模型.(2)HCE1单层细胞和多细胞球体的细胞抑制率:MG132组分别为(11.67±2.34)%和(10.78±1.17)%,两者比较,差异无统计学意义(P>0.05);MG132+顺铂组分别为(92.67±2.52)%和(91.33±2.18)%,两者比较,差异也无统计学意义(P>0.05);顺铂组分别为(45.01±7.44)%和(9.45±5.98)%,两者比较,差异有统计学意义(P<0.05).(3)HCE1单层细胞和多细胞球体的凋亡率:MG132组两者凋亡率分别为8.14%和5.97%,MG132+顺铂组两者凋亡率分别为99.01%和95.22%;顺铂组两者凋亡率分别为33.61%和0.88%.(4)NF-kB的相对表达量和bcl-2的高表达率:HCE1多细胞球体对照组分别为0.67、60%,顺铂组分别为0.85、83%,MG132组分别为0.39、20%,MG132+顺铂组分别为0.47、33%.结论 (1)HCE1多细胞球体模型对顺铂可产生天然耐药,是体外研究宫颈癌对顺铂耐药的良好模型.(2)MG132对HCE1多细胞球体有抑制增殖、诱导凋亡的作用,可部分逆转HCE1多细胞球体对顺铂的天然耐药性,其机制可能与NF-kB、bcl-2表达下调有关.     

胎鼠心肌细胞凋亡调控基因bcl-2和bax的表达及意义

目的:探讨孕鼠肝内胆汁淤积症时胎鼠心肌细胞凋亡及调控基因bcl-2和bax的表达及意义.方法:应用雌孕激素建立妊娠期肝内胆汁淤积症大鼠模型,光镜观察胎鼠心脏的病理改变.采用原位末端标记法(TUNEL)和免疫组织化学方法检测妊娠第21天时胎鼠心肌细胞凋亡及调控基因bcl-2和bax的表达.结果:①肝内胆汁淤积症组(胆淤组)胎鼠心脏光镜下见心肌组织中心肌细胞空泡变性、水肿.②胆淤组胎鼠心肌细胞凋亡指数为39.79%4±2.3421%,对照组为19.29%±2.4624%,两组比较,差异有非常显著性,P＜0.01.③胆淤组胎鼠心肌细胞bcl-2基因的表达明显低于对照组,差异有非常显著性,P＜0.01;胆淤组和对照组胎鼠心肌细胞bax基因的表达比较,差异无显著性,P＞0.05.结论:孕鼠肝内胆汁淤积症时出现胎鼠心肌细胞凋亡,bcl-2基因表达下调可能参与调控胎鼠心肌细胞凋亡.     

子痫前期孕产妇胎盘组织中过氧化氢对人类白细胞相关抗原G表达的影响

目的 探讨子痫前期孕产妇胎盘组织中氧化应激产物过氧化氢(H2O2)对胎盘滋养细胞中的人类白细胞相关抗原G(HLA-G)表达的影响.方法 选择2008年10月-2009年10月南京医科大学第一附属医院住院的产妇40例,其中子痫前期组20例,健康妊娠组20例.采用比色法检测两组产妇胎盘组织中H2O2水平;采用蛋白印迹法检测两组产妇胎盘组织中HLA-G蛋白的表达水平;并对胎盘组织中H2O2水平与HLA-G蛋白表达水平进行相关性分析.人绒毛膜癌细胞株JEG-3细胞培养24 h后贴壁完全,分为两组,干预组加入浓度为175 μmol/L的H2O2,对照组不加H2O2,两组细胞培养24及48 h后,采用蛋白印迹法和细胞免疫荧光法检测JEG-3细胞中HLA-G蛋白表达水平和强度的变化.结果 (1)子痫前期组产妇胎盘组织中H2O2水平为(105±13)nmol·mg-1·prot-1,健康妊娠组产妇胎盘组织中H2O2水平为(62±18)nmol·mg-1·prot-1,子痫前期组较健康妊娠组明显升高,且差异有统计学意义(P<0.05).(2)子痫前期组产妇胎盘组织中HLA-G蛋白表达水平为0.20±0.08,健康妊娠组为1.67±0.65,子痫前期组比健康妊娠组下降了88%,两组比较,差异有统计学意义(P<0.05).(3)两组产妇胎盘组织中H2O2水平与HLA-G蛋白表达水平呈显著负相关(r=-0.895,P=0.000).(4)H2O2干预JEG-3细胞24 h后,JEG-3细胞中HLA-G蛋白表达水平为1.95±0.25,干预48 h后为0.65±0.08;与未干预细胞中的3.21±0.33比较,分别下降了39%和80%,干预24、48 h分别与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05);干预48 h与干预24 h比较,HLA-G蛋白表达水平下降了67%,两者比较,差异有统计学意义(P<0.05).H2O2干预JEG-3细胞48 h后荧光显微镜下显示,干预组细胞中HLA-G表达强度明显弱于对照组.结论 子痫前期产妇胎盘滋养细胞中的高水平H2O2能下调胎盘滋养细胞中HLA-G蛋白的表达,从而参与子痫前期的发病.     

妊娠肝内胆汁淤积症患者胎盘细胞凋亡及调控基因的研究

目的　通过观察妊娠肝内胆汁淤积症 (ICP)患者胎盘细胞凋亡调控基因p5 3、bax和bcl 2在胎盘中的表达 ,探讨细胞凋亡基因在胎盘细胞凋亡中的作用。方法　采用原位末端标记法(TUNEL)和免疫组织化学方法对 3 1例ICP患者 (ICP组 )的胎盘组织中p5 3、bax和bcl 2基因表达及调亡指数进行检测 ,并以 3 1例正常妊娠妇女的胎盘组织作对照 (对照组 )。结果　 (1)ICP组胎盘组织中细胞滋养细胞、合体滋养细胞、蜕膜细胞及间质细胞中细胞凋亡指数分别为 (49 1± 9 1) %、(46 6±9 8) %、(3 5 1± 9 5 ) %、(3 8 7± 9 7) % ,明显高于对照组的 (2 2 5± 6 2 ) %、(2 1 6± 5 2 ) %、(17 9±6 2 ) %、(17 0± 4 7) %。两组比较 ,差异有极显著性 (P <0 0 1)。 (2 )而调控基因p5 3的表达 ,ICP组明显高于对照组 ,两组比较 ,差异有极显著性 (P <0 0 1) ;bax的表达在两组滋养细胞中比较 ,差异无显著性 (P >0 0 5 )。但在合体滋养细胞、蜕膜细胞及间质细胞中 ,ICP组明显高于对照组 ,两组比较 ,差异有极显著性 (P <0 0 1) ;bcl 2的表达在ICP组胎盘组织细胞滋养细胞、合体滋养细胞、蜕膜细胞及间质细胞中 ,均明显低于对照组 (P <0 0 1)。 (3 )p5 3、bax和bcl 2在ICP组合体滋养细胞中的表达分别是 (75 9± 8 2 ) %、(65     

胎盘细胞凋亡与胎儿生长受限关系的研究

目的　探讨胎盘细胞调亡与胎儿生长受限 (FGR)发生的关系。方法　应用透射电镜和DNA缺口末端标记法检测 18例FGR患者 (FGR组 )及 14例正常妊娠妇女 (正常妊娠组 )的胎盘细胞凋亡情况。同时观察两组的胎盘重量及新生儿平均出生体重。结果　FGR组胎盘凋亡细胞核比率为12 1‰ ,电镜下凋亡细胞核呈明显致密状 ,染色质结块 ,胎盘平均重量为 (2 3 6± 2 4)g ,新生儿平均出生体重为 (2 0 71± 42 8)g;正常妊娠组胎盘凋亡细胞核比率为 7 3‰ ,胎盘平均重量为 (3 5 4± 63 )g ,新生儿平均出生体重为 (3 411± 5 88)g。FGR组胎盘凋亡细胞核比率明显高于正常妊娠组 (P <0 0 5 )。结论　胎盘细胞凋亡增加与FGR的发生有关     

p53、bcl-2和bax基因表达与IUGR胎盘细胞凋亡的相关性研究

目的：研究胎儿宫内发育迟缓（ｉｎｔｒａｕｔｅｒｉｎｅ　ｇｒｏｗｔｈ　ｒｅｔａｒｄａｔｉｏｎ,ＩＵＧＲ)患者的胎盘细胞凋亡,以ｐ５３、ｂｃｌ－２和ｂａｘ相关性。方法：收集ＩＵＧＲ ２０份和正常足月分娩１２例的胎盘组织,应用原位末端标记(TUNEL)法检测其胎盘组织中的细胞凋亡,免疫组化法（ＩＨＣＡ）检测胎盘组织中ｐ５３、ｂｃｌ－２和ｂａｘ基因表达。结果：①正常和ＩＵＧＲ胎盘组织中均可见凋亡细胞,但ＩＵＧＲ胎盘中细胞凋亡指数（ａｐｏｐｔｏｓｉｓ　ｉｎｄｅｘ,ＡＩ）为１６．７～６８．３１,明显高于正常胎盘中的９．２～３０．４／高倍视野（平均２０．６７／高倍视野）,差异有显著性（Ｐ＜０．０５）;②ＩＵＧＲ ２０例胎盘组织中均有ｂａｘ过表达（４０％～９０％),高于正常组织（１０％～４０％）,差异有显著性（Ｐ＜０．０５）;③正常及ＩＵＧＲ胎盘组织中均未见ｂｃｌ－２表达;④ｐ５３在ＩＵＧＲ胎盘组织中的表达为５０％～８０％,而在正常组织中为５５％～８０％（Ｐ＞０．０５）;⑤ＩＵＧＲ２０例胎盘组织中细胞ＡＩ与ｂａｘ的表达呈正相关,与ｐ５３表达无关,ｂａｘ与ｐ５３之间无相关性。结论：①正常孕妇和ＩＵＧＲ患者胎盘组织中均有细胞凋亡,但ＩＵＧ     

低分子肝素对胎儿生长受限患者胎盘超微结构及血管内皮生长因子表达的影响

目的探讨低分子肝素对胎儿生长受限（fetalgrowthrestriction,FGR）胎盘组织超微结构及血管内皮生长因子（vascularendothelialgrowthfactor,VEGF）的表达及低分子肝素治疗FGR的机理。方法选择2010年5月至2011年12月北京大学第三医院妇产科收治的资料完整的FGR患者88例,分为肝素治疗组（47例）、常规治疗组（29例）和对照组（12例）,采用透射电镜方法观察各组胎盘的超微结构的变化及免疫组织化学SP法检测胎盘组织中VEGF的表达。结果①肝素治疗组胎盘合体滋养细胞表面有大量排列整齐的微绒毛,细胞质内含丰富的粗面内质网和线粒体,细胞核形态规则,核染色质致密且分布均匀,绒毛间质内有少量胶原纤维,毛细血管扩张。②肝素治疗组滋养细胞、绒毛间质细胞和血管内皮细胞VEGF蛋白表达水平（111．5±5．9、160．2±7．8和161．9±5．4）与对照组（147．8±5．3、181．4±5．1和187．1±7．5）比较,差异有统计学意义（P〈0．01）。常规治疗组绒毛间质细胞VEGF蛋白表达水平（168．7±7．1）与对照组（181．4±5．1）比较,差异有统计学意义（P〈O．05）。结论低分子肝素可改善胎盘组织的超微结构,增强胎盘VEGF蛋白的表达,促进胎盘微血管的通透性,治疗FGR。     

妊娠高血压综合征患者胎盘滋养细胞凋亡基因表达谱的研究

目的　采用基因芯片技术筛查妊娠高血压综合征 (妊高征 )患者胎盘滋养细胞凋亡基因的差异表达 ,探讨细胞凋亡与妊高征发病的关系。方法　妊高征患者 2 0例为妊高征组 ,正常孕妇 10例为对照组。采用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记 (TUNEL)方法检测两组孕妇胎盘组织滋养细胞凋亡情况。同时采用上海博星公司生产的基因芯片进行凋亡基因表达谱的筛查。判断基因差异表达的标准 :(1)cy5 (妊高征组 ) /cy3(对照组 )的自然对数绝对值 >0 6 9,cy3与cy5的信号相差 2倍以上。 (2 )cy3或cy5、cy3和cy5的信号值其中之一必须 >80 0。 结果　 (1)TUNEL检测显示 ,每 10 0 0 0 μm2 绒毛面积中滋养细胞凋亡数 ,妊高征组为 1 5 84个 ,对照组为 0 0 32个 ,两组比较 ,差异有极显著性 (P <0 0 1)。 (2 )基因芯片筛查有差异表达的凋亡基因 10个 ,占基因芯片筛查凋亡基因总数的 5 %。妊高征组胎盘组织中的凋亡基因表达均明显下调 ,即cy5 /cy3比值 <1。其中包括具有明显抗凋亡作用的SFRP2 、IAP2 、DHCY2 4及ATPIA1基因。结论　妊高征患者胎盘滋养细胞存在显著的凋亡现象 ,具有抗凋亡作用的基因表达明显下调 ,将可能导致胎盘滋养细胞凋亡 ,从而导致妊高征发病。     

重度妊娠高血压综合征患者胎盘组织细胞凋亡及其调控基因 …

目的　研究细胞凋亡及其调控基因在重度妊娠高血压综合征 (妊高征 )发生、发展中的作用。方法　对 40例正常晚孕妇女 (对照组 )和 40例重度妊高征患者 (观察组 )的胎盘组织进行分析。用DNA缺口原位末端标记 (TUNEL)技术检测细胞凋亡 ;免疫组织化学方法检测促进和抑制凋亡基因 (bax/bcl 2 )的表达。结果　对照组胎盘细胞滋养细胞、合体滋养细胞中凋亡指数分别为 ( 1.1±0 .9) %、( 41.8± 1.5 ) % ;bax阳性率分别为 ( 1.0± 0 .9) %、( 2 8.9± 9.7) % ;bcl 2阳性率分别为 ( 2 .2±0 .8) %、( 2 2 .9± 0 .7) % ,总bax/bcl 2为 0 .7～ 1.7。观察组胎盘细胞滋养细胞、合体滋养细胞的凋亡指数分别为 ( 4.3± 1.2 ) %、( 45 .3± 1.4) % ;bax阳性率分别是 ( 2 .2± 0 .8) %、( 42 .5± 11.7) % ;bcl 2阳性率分别是 ( 3 .2± 0 .8) %、( 2 3 .3± 7.8) % ;总bax/bcl 2为 1.0～ 3.2。即 :对照组胎盘中有一定量的细胞凋亡、bax、bcl 2表达 ,bax/bcl 2表达间呈平衡趋势 ;观察组中细胞凋亡明显增高 (P <0 .0 1) ,bax表达也明显增强 (P <0 .0 1) ,bcl 2表达仅呈增高趋势 ,但差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ,bax/bcl 2比值明显增高(P <0 .0 1)。结论　细胞凋亡及其调节基因的表达间具有一致性 ;细胞凋亡、bax/bcl 2表达     

蛤蚧乙醇提取液对大鼠卵巢颗粒细胞凋亡的影响

目的:研究蛤蚧乙醇提取液对大鼠卵巢颗粒细胞凋亡的影响.方法:3月龄和6月龄Wistar雌性大鼠各20只,每个月龄组随机分为实验组和对照组,每组各10只.实验组以蛤蚧乙醇提取液2 g(原药)/kg·d灌胃,对照组以体积相当的0.9%氯化钠液灌胃,15日后取各组大鼠卵巢经脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)和碘化丙啶(PI)染色、磷脂结合蛋白V/碘化丙啶(AnnexinV/PI)双染经流式细胞术(FCM)检测颗粒细胞凋亡及其周期分布情况.结果:TUNEL检测颗粒细胞凋亡数3月龄和6月龄实验组分别是34±7个和53±11个,对照组分别为48±9个和76±17个,差异有高度统计学意义(P<0.01);PI检测的颗粒细胞凋亡率3月龄和6月龄实验组分别为(6.06±2.01)%和(12.16±3.26)%,对照组分别为(8.23±2.13)%和(23.69±6.28)%,差异有统计学意义(P<0.05),但是细胞周期的分布差异却无统计学意义(P>0.05);Annexin V/PI检测的颗粒细胞早期凋亡率3月龄和6月龄实验组分别为(6.71±3.11)%和(23.74±6.28)%,对照组分别为(19.05±5.78)%和(36.55±8.35)%,差异有高度统计学意义(P<0.01).3月龄和6月龄实验组大鼠卵巢颗粒细胞凋亡均明显少于对照组(P<0.01或P<0.05).结论:蛤蚧乙醇提取液能有效抑制大鼠卵巢颗粒细胞的凋亡,从而改善大鼠卵巢功能,并可能由此延缓大鼠卵巢的衰老.     

妊娠不同时期铅暴露对大鼠胎盘细胞凋亡的影响

目的 观察妊娠不同时期铅暴露对大鼠胎盘细胞凋亡的影响。方法 研究共分为4组,每组27只Wistar大鼠,雌性18只,雄性9只。雌雄2:1合笼,以发现雌鼠阴栓次日为妊娠第0天。妊娠期全程铅暴露组大鼠妊娠期全程（妊娠1～20 d）饮服o.025％醋酸铅溶液染毒,妊娠甲.期铅暴露组大鼠妊娠早期（妊娠1～10 d）饮服0.025％醋酸铅溶液染毒,妊娠晚期铅暴露组大鼠妊娠晚期（妊娠11～20 d）饮服0.025％醋酸铅溶液染毒,对照组大鼠妊娠期全程饮服蒸馏水。原子吸收光谱法测定妊娠末期（妊娠19～21 d）血铅水平;Hoechst染色法和脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记技术检测胎盘细胞凋亡并计算凋亡指数。各组间比较采用单因素方差分析,两两比较采用q检验。 结果妊娠末期血铅水平在妊娠期全程铅暴露组[(1.74±0.19) μmol/L]、妊娠早期铅暴露组[（1.27±0.26） μmol/L.]、妊娠晚期铅暴露组[（0.60±0.11）μmol/L]和对照组[(0.04±0.01) μmol/L]依次降低,差异均有统计学意义（F=12.10,P＜0.01）。Hoechst染色法显示,铅暴露组胎盘滋养层凋亡细胞核浓染,部分核内可见致密块状荧光颗粒,对照组凋亡细胞呈散在分布。脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记技术检测显示,铅暴露组大鼠胎盘滋养层凋亡细胞核呈棕黄色,部分核中有棕黄色颗粒。凋亡细胞核较正常增大,呈椭圆形或不规则形,核内染色质聚集于边缘处。2种凋亡检测方法均显示各铅暴露组胎舷细胞凋亡指数均高于对照组,且妊娠期全程铅暴露组高于妊娠早期和妊娠晚期铅暴露组（P均＜0.05）。 结论 妊娠期铅暴露大鼠血铅水平升高,促进胎盘细胞凋亡的发生。     

阿司匹林对卵巢癌SKOV3细胞凋亡的影响及其作用机制研究

目的:探讨阿司匹林对卵巢癌细胞凋亡的影响以及对凋亡相关基因bcl-2/bax mRNA的作用。方法:用四甲基偶氮唑蓝(MTT)快速比色法分析阿司匹林对卵巢癌细胞株SKOV3生长的抑制作用,用流式细胞术分析方法定量检测细胞凋亡及细胞周期的变化。用RT-PCR法检测凋亡相关基因bcl-2/bax mRNA的表达。结果:阿司匹林对SK-OV3细胞的增殖有明显的抑制作用,并呈量效和时效的关系;1、5、10mmol/L3个浓度的阿司匹林处理细胞48h后,细胞凋亡率呈剂量依赖性增加,而且G0/G1期细胞比例下降,G2/M期细胞比例升高,细胞被阻滞在G2/M期,细胞周期也发生明显改变;阿司匹林可抑制卵巢癌细胞的bcl-2mRNA表达,而上调bax mRNA的表达。结论:阿司匹林能抑制卵巢癌SKOV3细胞增殖,诱导其凋亡。此作用可能与阿司匹林抑制细胞bcl-2mRNA的表达和上调bax mRNA表达有关。     

The evaluation of selected indices of apoptosis in placentas from pregnancies complicated by fetal growth restriction

BACKGROUND: Fetal growth restriction is related to a high rate of prematurity and mortality. In cases of unknown origin utero-placental circulation changes are the main factor which is due to the changes in blood vessels. The understanding of the mechanism may help in further prevention of FGR. MATERIAL AND METHODS: The expression of bcl-2 and bax in normal pregnancies and complicated by FGR were compared. The study was conducted in 2005-2006 at The Medical University of Lodz--HRP Unit and The Kopernik Hospital--Lodz. Bcl-2 and bax were estimated using an immunohistochemical method. Bcl-2 was estimated in trophoblast, bax in decidua and trophoblast. RESULTS: In a study group the mean value of bcl-2 in trophoblast was 37.04 +/- 10.51, in a control group the mean value was 65.74 +/- 6.97. The estimation of bax was done in trophoblast and decidua separately. In the group of FGR mean value of bax expression in trophoblast was 45.35 +/- 10.5. In decidua the mean bax expression value was 24.11 +/- 7.3. In controls in trophoblast the mean value was 12.53 +/- 7.54, in decidua the mean expression of bax was 6.63 +/- 2.24. CONCLUSION: 1. Apoptosis in trophoblast is lower in normal pregnancy than in FGR. 2. Increased expression of pro-apoptotic proteins in placenta might be one of the reason for FGR development.